基于Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白表达探讨大蒜素对膀胱癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的作用

目的 探讨大蒜素对膀胱癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的作用及其机制。方法 以膀胱癌细胞BIU-87为研究对象,以不同浓度(50、75、100 mg/L)大蒜素作用于细胞,测定细胞的增殖能力、凋亡能力、迁移能力及侵袭能力;测定细胞内B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、裂解的半胱天冬酶(Cleaved-Caspase)-3蛋白表达水平。结果 不同浓度大蒜素对细胞增殖均有抑制作用,且随着时间和浓度的增长而显著增长(P<0.05)。与空白组相比,不同浓度大蒜素组细胞凋亡率明显较高,且随着浓度的增高而明显增高;侵袭细胞数量明显较低,且随着浓度的增高而明显降低;细胞迁移能力明显较弱,且随着浓度的增高而明显减弱;Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白表达明显较高,且随着浓度的升高而明显升高(均P<0.05)。结论 大蒜素可以抑制膀胱癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭,其机制可能有调控Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白表达有关。

基于半胱天冬酶-3调节的抗肿瘤药物研究进展

肿瘤细胞的一个重要特征是由于细胞凋亡通路受阻而导致无限增殖[1]。细胞凋亡中关键分子的异常表达和功能改变与肿瘤的发生发展密切相关。目前,通过控制凋亡通路中关键蛋白或酶类的表达及功能,诱导肿瘤细胞凋亡,已成为肿瘤治疗中颇具吸引力的靶点[2]。

凉血化瘀方抗肝细胞凋亡效应及对半胱天冬酶-3mRNA表达的影响

目的 研究半胱天冬酶-3(caspase-3)mRNA在内毒素肝损伤中的表达与肝细胞凋亡的关系,以及凉血化瘀方对其的影响。方法 腹腔注射内毒素脂多糖(Lipoplysaccharide,LPS)于D-氨基半乳糖(D-galactosamine, GalN)致敏的小鼠,造成暴发性肝衰竭(Fulminant Hepatic Failure, FHF)模型,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量分析caspase-3 mRNA表达,脱氧核苷酸转移酶介导的缺口原位末端标记技术(TUNEL法)、HE染色及透射电镜观察肝细胞凋亡情况,同时观察药物的影响作用。结果 造模3h肝组织caspase-3 mRNA明显表达,治疗组83%,模型组141%,6h二组表达水平接近。凋亡阳性细胞在6h表达最强,二组比较治疗组则明显减少(P<0.01)。结论 内毒素肝损伤中caspase-3 mRNA表达与肝细胞凋亡程度有相关关系,凉血化瘀方能延缓内毒素肝损伤肝细胞caspase-3 mRNA表达和抑制其凋亡效应。

瑞芬太尼对大鼠全脑缺血再灌注后神经元凋亡和半胱天冬酶-3表达的影响

目的观察瑞芬太尼对大鼠全脑缺血再灌注损伤后海马神经细胞凋亡和半胱天冬酶(Caspase)-3表达的影响。方法80只大鼠随机分为假手术(sham)、NS、REM2、REM6和REM20组,每组16只。NS、REM2、REM6和REM20组分别于缺血再灌注前静脉滴注0.9%氯化钠溶液及瑞芬太尼2、6、20μg.kg-1.min-1。采用双侧颈总动脉阻断+低血压法建立大鼠短暂性全脑缺血模型。于全脑缺血前30 min由靶控微量注射泵经股静脉注射瑞芬太尼,并于双侧颈总动脉阻断前及开放后10 min进行动脉血血气分析。再灌注后24 h,每组各取8只大鼠,取其新鲜海马组织,采用实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组Caspase-3 mRNA的表达。再灌注后72 h,取剩余大鼠,灌注取脑,制作脑组织切片,采用苏木精-伊红(H-E)染色和原位末端标记法(TUNEL法)观察各组大鼠海马退变的神经元数和凋亡细胞数,采用免疫组织化学法检测各组Caspase-3蛋白的表达。结果①H-E染色结果:sham组偶可见退变的锥体细胞,缺血再灌注72 h后,NS组及各瑞芬太尼预处理组海马退变的神经元数较sham组显著增加(P值均<0.05),REM6及REM20组海马退变的神经元数较NS组显著减少(P值均<0.05)。②TUNEL法检测结果:sham组未见TUNEL阳性细胞,缺血再灌注72 h后,NS组及各瑞芬太尼预处理组海马CAl区的凋亡锥体细胞数较sham组显著增加(P值均<0.05),REM6和REM20组海马CAl区的凋亡锥体细胞数较NS组显著降低(P值均<0.05)。③免疫组织化学法检测结果:sham组可见少量Caspase-3免疫阳性细胞,缺血再灌注72 h后,NS组及各瑞芬太尼预处理组海马区Caspase-3蛋白的免疫阳性细胞数较sham组显著增多(P值均<0.05),各瑞芬太尼预处理组Caspase-3蛋白的免疫阳性细胞数显著低于NS组(P值均<0.05),REM6和REM20组Caspase-3蛋白的免疫阳性细胞数显著低于REM2组(P值均<0.05)。④实时RT-PCR结果:sham组大鼠海马组织中Caspase-3 mRNA呈低水平表达,缺血再灌注24 h后,NS组及各瑞芬太尼处理组Caspase-3 mRNA的表达水平较sham组显著升高(P值均<0.05),REM6组Caspase-3 mRNA的表达较NS组显著降低(P<0.05)。结论瑞芬太尼预处理(以6μg.kg-1.min-1为佳)对全脑缺血再灌注后的神经元损伤具有一定的保护作用,其机制可能与抑制神经元凋亡及下调Caspase-3基因有关。

过氧化氢诱导乳鼠心肌细胞凋亡及半胱天冬酶-3抑制剂的作用

目的 观察外源性羟自由基对心肌细胞凋亡的诱导作用 ,并探讨其可能的信号转导通路 .方法 1利用培养的第 2代心肌细胞 ,随机分成 4组 ,在终浓度为 10 - 4 mol· L- 1 ,10 - 3 mol· L- 1 的过氧化氢 [一组加半胱天冬酶 - 3(caspase- 3)的抑制剂 (DEVD- FMK) 10 μmol· L- 1 ]无血清条件下培养2 4h.观察各组心肌细胞存活率 ,TU NEL 法检测凋亡 ,透射电镜观察细胞超微结构 ,流式细胞仪检测细胞的凋亡率 .结果 1外源性羟自由基对心肌细胞生长具有明显抑制作用 .2低浓度过氧化氢 (10 0 μmol· L- 1 )可诱导培养的心肌细胞发生凋亡 ,心肌细胞呈现特征性超微结构变化 ,TU NEL检测呈现黄绿色荧光 ,流式细胞仪 PI染色法呈现典型的亚二倍体峰 .高浓度时则主要致使心肌细胞坏死 .3caspase- 3抑制剂(DEVD- FMK)可阻断外源性 OH-对心肌细胞生长的抑制作用 ,降低心肌细胞的凋亡率 .结论 低浓度羟自由基能诱导心肌细胞凋亡 ,其信号转导通路包括 caspase-

小鼠短暂前脑缺血海马中半胱天冬酶-3酶原表达的变化

通过测定脑缺血再灌注时海马中半胱天冬酶-3酶原(procaspase-3)的表达变化,从细胞凋亡的角度探讨脑缺血再灌注损伤的分子生物学机制及procaspase-3的活化机制.将C57BL/6N小鼠随机分为假手术组(正常对照组)、缺血再灌注组(I/R组),后者夹闭双侧颈总动脉20 min后再通血流,建立前脑缺血再灌注模型,分别于再灌注6 h、12 h、24 h和48 h取海马.采用蛋白免疫印迹(Western blotting)方法检测海马中procaspase-3的表达变化.结果显示,12 h I/R及24 h I/R组海马中总procaspase-3水平与假手术组相比有明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05);24 h I/R组海马中去磷酸化水平与假手术组相比有明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05);而各组procaspase-3磷酸化水平与假手术组相比差异无统计学意义.结果提示,脑缺血再灌注损伤诱发procaspase-3表达增加;其中procaspase-3去磷酸化水平高明显,提示脑缺血再灌注损伤可能诱发procaspase-3去磷酸化,继而促进procaspase-3转化为活性形式.

鸡免疫器官中半胱天冬酶-3、Bcl-2的表达与细胞凋亡的关系

用流式细胞法测定了 30日龄AA肉鸡的胸腺、法氏囊和脾脏细胞中半胱天冬酶 3(caspase 3)、Bcl 2蛋白的表达及细胞周期和细胞凋亡率。结果 :胸腺、法氏囊、脾脏中G0 /G1 期细胞比例分别是 :96 44%、68 0 9%、92 97% ;G2 /M期细胞比例是 :0 80 %、1 0 4 %、2 36 % ;S期细胞分别为 :2 77%、30 52 %、4 67% ,表明细胞增殖活性的增殖指数 (PI)是 :3 56、31 92、7 0 3。胸腺、法氏囊、脾脏细胞凋亡率分别为 :3 99%、0 32 %、0 2 2 % ;caspase 3表达的阳性细胞率是 :1 4 2 4 %、8 60 %、5 49% ,与细胞凋亡率呈方向一致的变化 ;Bcl 2蛋白表达阳性细胞率依次是 :2 0 59%、30 2 4 %、31 32 % ,与细胞凋亡率呈反向变化。上述结果表明 :鸡免疫器官细胞凋亡是依赖caspase 3介导的细胞凋亡 ,caspase 3和Bcl

存活素与半胱天冬酶-3在脑缺血大鼠脑组织中的表达

目的研究脑缺血大鼠存活素(survivin)和半胱天冬酶(caspase)-3表达的程度,为脑缺血早期的防治提供实验依据。方法大鼠(180～220 g)共15只,分为缺血模型组、对照组和盐水组各5只。采用PV-6000两步法免疫组织化学染色,采用图像分析软件在光学显微镜下放大200倍数出每张照片阳性细胞数量,取其计数平均值。结果缺血模型组survivin和caspase-3阳性表达较盐水组和对照组有显著差异(P<0.01)。在同组不同部位阳性表达中,survivin在大脑皮层和基底节缺血区阳性细胞表达较海马区有显著差异(P<0.05)。但caspase-3免疫染色呈弱阳性表达,且大脑皮层缺血区阳性细胞数显著高于基底节和海马区(P<0.05)。血管内呈阳性反应。结论 survivin的早期阳性表达可增加缺血区细胞凋亡可逆性,其阳性表达程度越高,caspase-3表达程度越低,说明survivin蛋白表达上调,而caspase-3表达下调。推测survivin在脑缺血时可能是通过抑制caspase-3达到抗凋亡作用。

西洛他唑对全脑缺血大鼠海马磷酸化蛋白激酶B及半胱氨酸天冬酶-3表达的影响

目的研究西洛他唑对全脑缺血大鼠海马磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)及半胱氨酸天冬酶-3(caspase-3)的影响。方法用四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型。将112只(模型成功率为75(,死亡后补充动物)约300g的健康成年SD大鼠随机分为3组:假手术组(n=16)、缺血模型对照组(n=48)及治疗组(n=48)。治疗组于缺血前6h和2h各灌胃给予1次西洛他唑,以后每隔24h在相应时间点给药,其它各组灌胃给予等量二甲基亚砜。缺血模型对照组和治疗组于缺血10min再灌注0h、1h、12h、24h、72h、7d后断头取脑,免疫组织化学方法分析再灌注后不同时间点海马CA1区p-Akt和再灌注后caspase-3表达水平的变化。结果全脑缺血后0h、1h,治疗组海马CA1区p-Akt平均光密度值明显高于模型组(P<0.01;P<0.05)。缺血后24h、72h、7d,治疗组海马CA1区caspase-3平均阳性细胞数明显低于模型组(P<0.05)。结论西洛他唑可以降低大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区caspase-3表达水平,并可抑制再灌注后p-Akt水平的急剧降低。

高压氧对大鼠短暂全脑缺血半胱天冬酶-3的影响

为探讨高压氧 (HBO)对脑缺血半胱天冬酶 3 (简称caspase 3 )活性的影响 ,将 2 0 0～ 2 5 0 gSD大鼠分为缺血再灌注组 (I/R组 )、高压氧 (HBO)处理组及假手术组 ,以Pulsinelli等报道的四动脉阻断法建立脑缺血再灌注动物模型 ,缺血 2 0min,分别于再灌注 6、2 4、4 8及 96h取顶叶皮质匀浆 ,用显色法测定caspase 3活性。结果显示 :再灌注 6h ,HBO组及I/R组同假手术组相比 ,caspase 3活性无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,但HBO显著高于I/R组 (P <0 .0 5 ) ;2 4h时间点HBO组及I/R组均高于假手术组 (P <0 .0 5 ) ,但前 2组之间无显著差异 ;4 8及 96h时间点HBO及I/R组虽高于假手术组 ,但差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ,且此 2组间亦无显著差异 ,说明此时caspase 3已基本降至正常。提示全脑短暂性缺血再灌注后caspase 3被激活 ,缺血早期用HBO处理可促进其活化 。

垂体腺苷酸环化酶激活肽对脑缺氧缺血新生大鼠胱冬酶-3和X-连锁凋亡抑制蛋白表达的影响

目的观察垂体腺苷酸环化酶激活肽（pituitary adenylate cyclase activating peptide，PACAP）对脑缺氧缺血（hypoxic—ischemic brain damage，HIBD）新生大鼠胱冬酶-3和X-连锁凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP）的影响，探讨其脑保护作用和有效剂量。方法60只新生大鼠随机分为假手术组、生理盐水对照组以及PACAP大剂量组（10^-8mol）、中等剂量组（10^-9mol）和小剂量组（10^-12mol），建立HIBD动物模型。应用实时荧光定量聚合酶链反应法检测新生大鼠HIBD后24h损伤侧脑组织的胱冬酶-3mRNA和XIAP mRNA表达情况，应用分光光度法检测胱冬酶-3活性。结果在HIBD后24h，生理盐水对照组胱冬酶-3mRNA表达和酶活性以及XIAP mRNA表达均显著高于假手术组（P均〈0．01）；PACAP各剂量组胱冬酶-3 mRNA表达和酶活性均显著低于生理盐水对照组（P均〈0．01），而XIAP mRNA表达均显著高于生理盐水对照组（P均〈0．01）。结论PACAP能上调XIAP mRNA表达，抑制胱冬酶-3mRNA表达和酶活性，对新生大鼠HIBD具有保护作用，而且在大剂量、中等剂量和小剂量时均有效。

新生大鼠脑缺氧缺血后半胱天冬酶-3激活与DNA损伤的关系

目的 :探讨未成熟脑在缺氧缺血 (H1)后海马神经细胞半胱天冬酶 3的激活与DNA损伤之间的关系。方法 :采用 7日龄新生大鼠脑缺氧缺血模型 ,观察HI后不同时间点脑组织海马CA1、CA3区半胱天冬酶 3活性亚单位p17阳性细胞及检测DNA双链断裂的寡核苷酸探针 (HPP)标记阳性细胞的分布。结果 :HI后 3h在海马CAl、CA3区即可检测到p17及HPP阳性细胞 ,并随HI时间延长而增加。在CAl区阳性细胞计数 2 4h达到峰值 ,而在CA3区 72h仍有较多阳性细胞 ,p17和HPP标记的阳性细胞在各时间点具有相同的变化规律。双重染色证实 ,p17和HPP在海马神经元中同时表达。结论 :未成熟脑HI后海马区半胱天冬酶 3被激活并伴随DNA双链的断裂 。

高压氧对短暂前脑缺血小鼠海马半胱天冬酶-3表达的影响

旨在通过测定缺血再灌注时半胱天冬酶 3(caspase 3)的表达以及高压氧对表达的影响 ,从细胞凋亡的角度探讨高压氧治疗脑缺血的分子生物学机制。将C5 7BL/ 6N小鼠分为假手术组 (正常对照组 )、缺血再灌注组 (I/R组 )及缺血再灌注加高压氧治疗组 (HBO组 ) ,后 2组夹闭双侧颈总动脉 2 0min后再通血流 ,建立脑缺血再灌注模型 ,分别于再灌注 6h、12h、2 4h和 4 8h取海马。采用半定量反转录 PCR及蛋白免疫印迹 (WesternBlotting)方法分别检测caspase 3在转录水平(mRNA)及翻译水平的表达变化。结果 :各I/R组及HBO组海马中caspase 3mRNA及酶原表达水平与假手术组相比均有明显升高 ,且差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;各I/R组与相应时相点HBO组caspase 3mRNA及酶原表达水平相比差异均无统计学意义 (P >0 .0 5 )。提示 :脑缺血再灌注损伤诱发caspase 3转录水平增加 ,而且这是引起其酶原增加的主要原因 ;caspase 3介导的细胞凋亡参与了缺血再灌注损伤 ;本实验中所采用的HBO治疗方案对caspase 3转录及酶原水平无明显作用。

半胱天冬酶-3、Bcl-2在扁平苔藓皮损中的表达

目的:探讨半胱天冬酶(caspase)-3和Bcl-2在扁平苔藓(LP)中的表达及意义。方法:应用免疫组化SP法对30例LP患者皮损和10名正常对照者皮肤中半胱天冬酶-3和Bcl-2的表达进行检测。结果:半胱天冬酶-3在LP皮损表皮中表达明显增强,Bcl-2在LP皮损表皮、真皮淋巴细胞浸润带的表达均明显增强;正常对照者皮肤基底细胞中半胱天冬酶-3表达仅为20%,Bcl-2偶见表达。结论:半胱天冬酶-3和Bcl-2在皮肤LP发生和发展中起一定作用。

钬激光照射后人T-24膀胱癌细胞株中半胱天冬酶-3蛋白的表达及其意义

目的观察钬激光照射后人T-24膀胱癌细胞株中半胱天冬酶(Caspase)-3蛋白的表达,探讨其在T-24细胞发生凋亡中的作用。方法取对数生长期人T-24膀胱癌细胞株,分对照组与实验组,试验组以800 mJ钬激光直接照射而对照组仅以指示光照射不激发激光能量,照射后48h分别在光镜下观察细胞形态学的改变,免疫细胞化学染色检测半胱天冬酶-3蛋白在T-24细胞中的表达。结果800 mJ钬激光照射后实验组细胞形态呈现出凋亡改变,半胱天冬酶-3蛋白呈现阳性表达。结论钬激光照射人T-24膀胱痛细胞株,可诱发肿瘤细胞凋亡,半胱天冬酶-3蛋白在诱导T-24细胞凋亡中可能发挥重要作用。

针刺干预对VaD大鼠Caspase-3通路相关蛋白的影响

目的 观察针刺对血管性痴呆(vascular dementia,Va D)大鼠学习记忆能力及半胱天冬酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase)-3通路相关蛋白的影响及其机制研究,探索针刺防治Va D的新靶点。方法 健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和针刺组,模型组和针刺组大鼠制备Va D模型,针刺组选取百会和双侧肾俞、丰隆进行针刺干预2周,假手术组和模型组不予其他干预。观察各组大鼠的行为学、海马CA1区形态学改变,检测B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Caspase-3、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax) m RNA及蛋白的表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.01),穿越平台次数显著减少(P<0.01),大鼠海马组织内Bax、Caspase-3 m RNA及蛋白的表达明显增加(P<0.01),Bcl-2 m RNA及蛋白的表达明显下降(P<0.01)。与模型组比较,针刺组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),穿越平台次数明显增加(P<0.01),大鼠海马区Bax、Caspase-3 m RNA及蛋白表达明显下降(P<0.01),Bcl-2 m RNA及蛋白水平明显增加(P<0.01)。结论 针刺能提高Va D大鼠的学习记忆能力,其机制可能与调节Caspase-3通路相关蛋白表达、抑制神经元凋亡相关。

桥本甲状腺炎中TRAIL、caspase-3的表达与甲状腺过氧化物酶抗体的相关性研究

目的分析肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor related apoptos isinducing ligand，TRAIL）、半胱天冬酶-3（caspase-3）在桥本甲状腺炎（Hashimoto thyroiditis，HT）中的表达情况，以及与甲状腺过氧化物酶抗体（Thyroid peroxidase antibody TPOAb）的相关性研究。方法采用链霉抗生物素蛋白一过氧化物酶法检测51例桥本甲状腺炎（Hashimoto thyroiditis，HT）患者的甲状腺标本的TRAIL、caspase-3的表达情况，同时检测血清TPOAb．并以32份正常甲状腺标本作为对照，比较2组的差异。结果（DHT的甲状腺滤泡上皮细胞中TRAIL、caspase-3的表达阳性率分别为882％、96．1％，高于正常对照的21．8％、12．5％。（P〈O．05）②HT患者血清的TPOAb的阳性检出率分别是90．2％，明显高于正常对照组12．5％。（P〈0．05）③将HT的甲状腺滤泡上皮细胞中TRAIL、casPase-3的表达程度分级，与TPOAb滴度高低进行相关性分析，发现二者无相关关系。结论HT患者中，TRAIL及caspase-3可能共同参与甲状腺滤泡细胞的破坏，参与HT的发病及病理发展过程。HT患者中血清TPOAb能否检出比其滴度高低更有意义。

染锰大鼠生精细胞凋亡中caspase-3 mRNA、凋亡蛋白酶活化因子-1及多聚ADP核糖聚合酶的表达变化

目的:研究染锰诱导的大鼠生精细胞凋亡过程中,天冬氨酸特异性半胱氨酸酶-3(caspase-3)mRNA和凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)、多聚ADP核糖聚合酶(PARP)的表达及其关系,探讨它们在生精细胞凋亡过程中的作用。方法:雄性SD大鼠,设立空白对照组、低剂量(15 mg/kg MnCl_2)和高剂量(30 mg/kg MnCl_2)组。实验组分别染锰4周和6周,空白对照组给予等容生理盐水,给药途径均为腹腔注射,TUNEL法检测生精细胞凋亡,原位杂交法和免疫组织化学法检测生精细胞caspase-3 mRNA、Apaf-1和PARP的表达。结果:与空白对照组比较,各染锰组生精细胞凋亡指数(AI)和caspase-3mRNA阳性细胞率均显著升高,Apaf-1和PARP阳性细胞率均显著降低。染锰剂量相同,6周与4周组比较,以及染锰时间相同,高剂量组与低剂量组比较,生精细胞AI和caspase-3 mRNA阳性细胞率均显著升高,Apaf-1和PARP阳性细胞率均显著降低。各组大鼠生精细胞AI与caspase-3 mRNA阳性细胞率呈正相关,与Apaf-1和PARP阳性细胞率呈负相关。结论:锰可影响大鼠生精细胞caspase-3 mRNA表达,促进Apaf-1和PARP分解,导致生精细胞凋亡,产生生殖毒性效应。

脂肪组织来源的神经干细胞移植对大鼠局灶性脑缺血细胞凋亡及Caspase-3蛋白表达的影响

目的探讨人脂肪组织来源的神经干细胞移植对大鼠局灶性脑缺血细胞凋亡及Caspase-3蛋白表达的影响。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)2 h再灌注模型。60只健康雄性SD大鼠随机分为4组:正常组(6只),假手术组(6只),缺血对照组(24只)和移植治疗组(24只)。后两组又分为缺血2 h再灌7、14、21和28 d组(各6只)。体外培养脂肪基质细胞,诱导分化为神经干细胞。造模成功后24h,移植治疗组经尾静脉移植人脂肪组织来源的神经干细胞悬液(细胞浓度为2×106/mL),缺血对照组经尾静脉注射生理盐水,假手术组不做任何处理。TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化SABC法检测Caspase-3表达。结果与缺血对照组比较,移植治疗组各时间点(7、14、21和28 d)的细胞凋亡数均明显减少(均P<0.01),Caspase-3蛋白表达均明显减少(均P<0.01)。结论脂肪组织来源的神经干细胞可能通过下调Caspase-3蛋白表达,减少局灶性脑缺血细胞凋亡,对脑缺血再灌注损伤后的神经细胞起保护作用。

扇贝多肽抑制紫外线A波诱导的HaCaT细胞凋亡依赖p38 MAPK通路和caspase-3

目的从p38促细胞分裂剂激活性蛋白激酶(p38MAPK)通路和半胱天冬酶-3(caspase-3)的角度,研究扇贝多肽(poly-peptidefromChlamysfarreri,PCF)抑制紫外线A波(UVA)引起的HaCaT细胞凋亡的分子机制。方法实验分为6组:对照组、UVA模型组、UVA+5.68mmol.L-1维生素C阳性对照组、UVA+5.69mmol.L-1PCF组、UVA+2.84mmol.L-1PCF组、UVA+1.42mmol.L-1PCF组。以正交实验设计确立UVA诱导HaCaT细胞凋亡模型;琼脂糖凝胶电泳分析PCF、p38MAPK抑制剂(SB203580)及caspase-3特异性抑制剂(Ac-DEVD-CHO)对细胞凋亡的影响;蛋白质印迹法检测p38MAPK及磷酸化p38MAPK表达;流式细胞术检测caspase-3的活性。结果PCF能明显抑制UVA引起的HaCaT细胞凋亡;SB203580和Ac-DEVD-CHO对UVA诱导的HaCaT细胞凋亡有抑制作用;1.425.69mmol.L-1内的PCF可剂量依赖性抑制UVA引起的p38MAPK磷酸化及caspase-3的活化。结论PCF可抑制UVA诱导的HaCaT细胞凋亡,其作用机制与抑制p38MAPK通路和caspase-3活性有关。