半胱天冬酶3靶向分子影像探针在肿瘤细胞凋亡监测中的应用进展

细胞凋亡与恶性肿瘤的发生、发展密切相关。因此,早期动态监测细胞凋亡对恶性肿瘤治疗效果评估以及指导后续治疗具有重要意义。分子影像是一种新兴的无创显像技术,能够可视化单个分子或特定细胞亚群,从而反映活体状态下分子水平变化。半胱天冬酶3(Caspase-3)是细胞凋亡的半胱天冬酶级联反应过程中至关重要的死亡执行蛋白酶,能够启动细胞内蛋白的特异性降解,从而诱导细胞凋亡。设计靶向Caspase-3的分子影像探针,能够实时监测治疗过程中肿瘤部位Caspase-3表达,精准评估治疗效果,从而为个体化治疗提供可靠依据。根据与Caspase-3不同的作用方式,Caspase-3分子影像探针主要分为Caspase-3抑制剂类和Caspase-3多肽底物类分子影像探针。这两类探针对Caspase-3均具有良好的靶向特异性和选择性,已成功应用于实时显像小鼠或人体治疗早期的肿瘤细胞凋亡。但这些探针仍有一定不足,如灵敏度低、组织背景高、代谢速度快等,尚需进一步优化。

依托咪酯对视神经损伤成年大鼠视网膜神经节细胞的保护作用及对半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、脑源性神经营养因子蛋白表达的影响

目的:探讨依托咪酯对视神经损伤成年大鼠视网膜神经节细胞的保护作用及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达的影响。方法:选择成年雄性SD大鼠40只,随机选8只为正常照组,其余32只采用动脉夹夹持法损伤视神经建立视神经损伤模型并分组,即模型组(视神经损伤大鼠),依托咪酯低、中、高剂量组(依托咪酯腹腔注射),剂量分别为2、4、6 mg/kg。分析比较干预后各组大鼠眼压变化。并行HE染色观察视网膜组织结构,比较各组大鼠视网膜神经节细胞(RCGs)存活数目及存活率,Western blot法检测视网膜组织中Caspase-3、BDNF蛋白表达。结果:模型组、依托咪酯各组眼压高于正常组,依托咪酯各组末次给药后眼压降低,且呈剂量依赖性(均P<0.05)。模型组大鼠视网膜水肿增厚,以神经纤维层最为明显,且有空泡,RGC细胞肿胀,内、外核层细胞数量减少,排列紊乱。依托咪酯各组视网膜病理损伤均有改善,高剂量组好于中剂量组,中剂量组好于低剂量组。与正常组比较,模型组大鼠RCGs存活数目减少(P<0.05),与模型组比较,依托咪酯各组RCGs存活数目增多(P<0.05)。依托咪酯高剂量组RCGs存活数目、相对存活率高于中、低剂量组(均P<0.05)。正常组大鼠视网膜组织中BDNF蛋白表达高于模型组,Caspase-3低于模型组,依托咪酯各组视网膜组织中BDNF升高,Caspase-3下降,均呈剂量依赖性(均P<0.05)。结论:Caspase-3蛋白在大鼠视神经损伤中表达升高,BDNF蛋白表达降低,依托咪酯干预能够促进视网膜RGCs存活,对视神经损伤具有保护作用。

基于Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白表达探讨大蒜素对膀胱癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的作用

目的 探讨大蒜素对膀胱癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的作用及其机制。方法 以膀胱癌细胞BIU-87为研究对象,以不同浓度(50、75、100 mg/L)大蒜素作用于细胞,测定细胞的增殖能力、凋亡能力、迁移能力及侵袭能力;测定细胞内B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、裂解的半胱天冬酶(Cleaved-Caspase)-3蛋白表达水平。结果 不同浓度大蒜素对细胞增殖均有抑制作用,且随着时间和浓度的增长而显著增长(P<0.05)。与空白组相比,不同浓度大蒜素组细胞凋亡率明显较高,且随着浓度的增高而明显增高;侵袭细胞数量明显较低,且随着浓度的增高而明显降低;细胞迁移能力明显较弱,且随着浓度的增高而明显减弱;Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白表达明显较高,且随着浓度的升高而明显升高(均P<0.05)。结论 大蒜素可以抑制膀胱癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭,其机制可能有调控Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白表达有关。

早期激素性股骨头缺血性坏死模型的建立及半胱天冬酶3活性测定

背景:有研究表明骨细胞凋亡与激素性股骨头缺血性坏死的发病机制密切相关,而活化的半胱天冬酶3可作用于其他半胱天冬酶家族成员,使蛋白酶级联反应放大,最终导致细胞凋亡。但半胱天冬酶3参与的骨细胞凋亡与早期激素性股骨头缺血性坏死的相关研究则罕见报道。目的:采用大剂量激素联合强迫兔直立负重的方法建立早期激素性股骨头缺血性坏死模型并测定骨细胞半胱天冬酶3活性。方法:将4月龄新西兰大白兔随机分成模型组和对照组。模型组每周3次臀肌注射地塞米松,每日强迫兔直立1h,对照组注射等量生理盐水。分别于3,6,9和12周处死动物,取其双侧股骨头,光镜及电镜下观察组织病理学改变,应用对-硝基酰苯胺比色法测定骨细胞半胱天冬酶3活性。结果与结论:给药3周后,模型组光镜下可见脂肪细胞肥大和增多,骨髓间充质干细胞及造血干细胞数量相对减少;给药6周后,模型组空骨陷凹率均大于对照组(P<0.05);给药9周后,模型组出现骨小梁变细、断裂,电镜下见模型组部分骨细胞体积缩小,染色质浓集,核固缩和碎裂等凋亡特征。给药6周后,模型组骨细胞半胱天冬酶3活性高于对照组(P<0.05)。实验以此推论采用大剂量激素联合强迫兔直立负重可以诱导建立早期激素性股骨头缺血性坏死模型,半胱天冬酶3参与的骨细胞凋亡可能与早期激素性股骨头缺血性坏死发病过程有关。

瑞芬太尼对大鼠全脑缺血再灌注后神经元凋亡和半胱天冬酶-3表达的影响

目的观察瑞芬太尼对大鼠全脑缺血再灌注损伤后海马神经细胞凋亡和半胱天冬酶(Caspase)-3表达的影响。方法80只大鼠随机分为假手术(sham)、NS、REM2、REM6和REM20组,每组16只。NS、REM2、REM6和REM20组分别于缺血再灌注前静脉滴注0.9%氯化钠溶液及瑞芬太尼2、6、20μg.kg-1.min-1。采用双侧颈总动脉阻断+低血压法建立大鼠短暂性全脑缺血模型。于全脑缺血前30 min由靶控微量注射泵经股静脉注射瑞芬太尼,并于双侧颈总动脉阻断前及开放后10 min进行动脉血血气分析。再灌注后24 h,每组各取8只大鼠,取其新鲜海马组织,采用实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组Caspase-3 mRNA的表达。再灌注后72 h,取剩余大鼠,灌注取脑,制作脑组织切片,采用苏木精-伊红(H-E)染色和原位末端标记法(TUNEL法)观察各组大鼠海马退变的神经元数和凋亡细胞数,采用免疫组织化学法检测各组Caspase-3蛋白的表达。结果①H-E染色结果:sham组偶可见退变的锥体细胞,缺血再灌注72 h后,NS组及各瑞芬太尼预处理组海马退变的神经元数较sham组显著增加(P值均<0.05),REM6及REM20组海马退变的神经元数较NS组显著减少(P值均<0.05)。②TUNEL法检测结果:sham组未见TUNEL阳性细胞,缺血再灌注72 h后,NS组及各瑞芬太尼预处理组海马CAl区的凋亡锥体细胞数较sham组显著增加(P值均<0.05),REM6和REM20组海马CAl区的凋亡锥体细胞数较NS组显著降低(P值均<0.05)。③免疫组织化学法检测结果:sham组可见少量Caspase-3免疫阳性细胞,缺血再灌注72 h后,NS组及各瑞芬太尼预处理组海马区Caspase-3蛋白的免疫阳性细胞数较sham组显著增多(P值均<0.05),各瑞芬太尼预处理组Caspase-3蛋白的免疫阳性细胞数显著低于NS组(P值均<0.05),REM6和REM20组Caspase-3蛋白的免疫阳性细胞数显著低于REM2组(P值均<0.05)。④实时RT-PCR结果:sham组大鼠海马组织中Caspase-3 mRNA呈低水平表达,缺血再灌注24 h后,NS组及各瑞芬太尼处理组Caspase-3 mRNA的表达水平较sham组显著升高(P值均<0.05),REM6组Caspase-3 mRNA的表达较NS组显著降低(P<0.05)。结论瑞芬太尼预处理(以6μg.kg-1.min-1为佳)对全脑缺血再灌注后的神经元损伤具有一定的保护作用,其机制可能与抑制神经元凋亡及下调Caspase-3基因有关。

凉血化瘀方抗肝细胞凋亡效应及对半胱天冬酶-3mRNA表达的影响

目的 研究半胱天冬酶-3(caspase-3)mRNA在内毒素肝损伤中的表达与肝细胞凋亡的关系,以及凉血化瘀方对其的影响。方法 腹腔注射内毒素脂多糖(Lipoplysaccharide,LPS)于D-氨基半乳糖(D-galactosamine, GalN)致敏的小鼠,造成暴发性肝衰竭(Fulminant Hepatic Failure, FHF)模型,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量分析caspase-3 mRNA表达,脱氧核苷酸转移酶介导的缺口原位末端标记技术(TUNEL法)、HE染色及透射电镜观察肝细胞凋亡情况,同时观察药物的影响作用。结果 造模3h肝组织caspase-3 mRNA明显表达,治疗组83%,模型组141%,6h二组表达水平接近。凋亡阳性细胞在6h表达最强,二组比较治疗组则明显减少(P<0.01)。结论 内毒素肝损伤中caspase-3 mRNA表达与肝细胞凋亡程度有相关关系,凉血化瘀方能延缓内毒素肝损伤肝细胞caspase-3 mRNA表达和抑制其凋亡效应。

基于半胱天冬酶-3调节的抗肿瘤药物研究进展

肿瘤细胞的一个重要特征是由于细胞凋亡通路受阻而导致无限增殖[1]。细胞凋亡中关键分子的异常表达和功能改变与肿瘤的发生发展密切相关。目前,通过控制凋亡通路中关键蛋白或酶类的表达及功能,诱导肿瘤细胞凋亡,已成为肿瘤治疗中颇具吸引力的靶点[2]。

过氧化氢诱导乳鼠心肌细胞凋亡及半胱天冬酶-3抑制剂的作用

目的 观察外源性羟自由基对心肌细胞凋亡的诱导作用 ,并探讨其可能的信号转导通路 .方法 1利用培养的第 2代心肌细胞 ,随机分成 4组 ,在终浓度为 10 - 4 mol· L- 1 ,10 - 3 mol· L- 1 的过氧化氢 [一组加半胱天冬酶 - 3(caspase- 3)的抑制剂 (DEVD- FMK) 10 μmol· L- 1 ]无血清条件下培养2 4h.观察各组心肌细胞存活率 ,TU NEL 法检测凋亡 ,透射电镜观察细胞超微结构 ,流式细胞仪检测细胞的凋亡率 .结果 1外源性羟自由基对心肌细胞生长具有明显抑制作用 .2低浓度过氧化氢 (10 0 μmol· L- 1 )可诱导培养的心肌细胞发生凋亡 ,心肌细胞呈现特征性超微结构变化 ,TU NEL检测呈现黄绿色荧光 ,流式细胞仪 PI染色法呈现典型的亚二倍体峰 .高浓度时则主要致使心肌细胞坏死 .3caspase- 3抑制剂(DEVD- FMK)可阻断外源性 OH-对心肌细胞生长的抑制作用 ,降低心肌细胞的凋亡率 .结论 低浓度羟自由基能诱导心肌细胞凋亡 ,其信号转导通路包括 caspase-

鸡免疫器官中半胱天冬酶-3、Bcl-2的表达与细胞凋亡的关系

用流式细胞法测定了 30日龄AA肉鸡的胸腺、法氏囊和脾脏细胞中半胱天冬酶 3(caspase 3)、Bcl 2蛋白的表达及细胞周期和细胞凋亡率。结果 :胸腺、法氏囊、脾脏中G0 /G1 期细胞比例分别是 :96 44%、68 0 9%、92 97% ;G2 /M期细胞比例是 :0 80 %、1 0 4 %、2 36 % ;S期细胞分别为 :2 77%、30 52 %、4 67% ,表明细胞增殖活性的增殖指数 (PI)是 :3 56、31 92、7 0 3。胸腺、法氏囊、脾脏细胞凋亡率分别为 :3 99%、0 32 %、0 2 2 % ;caspase 3表达的阳性细胞率是 :1 4 2 4 %、8 60 %、5 49% ,与细胞凋亡率呈方向一致的变化 ;Bcl 2蛋白表达阳性细胞率依次是 :2 0 59%、30 2 4 %、31 32 % ,与细胞凋亡率呈反向变化。上述结果表明 :鸡免疫器官细胞凋亡是依赖caspase 3介导的细胞凋亡 ,caspase 3和Bcl

小鼠短暂前脑缺血海马中半胱天冬酶-3酶原表达的变化

通过测定脑缺血再灌注时海马中半胱天冬酶-3酶原(procaspase-3)的表达变化,从细胞凋亡的角度探讨脑缺血再灌注损伤的分子生物学机制及procaspase-3的活化机制.将C57BL/6N小鼠随机分为假手术组(正常对照组)、缺血再灌注组(I/R组),后者夹闭双侧颈总动脉20 min后再通血流,建立前脑缺血再灌注模型,分别于再灌注6 h、12 h、24 h和48 h取海马.采用蛋白免疫印迹(Western blotting)方法检测海马中procaspase-3的表达变化.结果显示,12 h I/R及24 h I/R组海马中总procaspase-3水平与假手术组相比有明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05);24 h I/R组海马中去磷酸化水平与假手术组相比有明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05);而各组procaspase-3磷酸化水平与假手术组相比差异无统计学意义.结果提示,脑缺血再灌注损伤诱发procaspase-3表达增加;其中procaspase-3去磷酸化水平高明显,提示脑缺血再灌注损伤可能诱发procaspase-3去磷酸化,继而促进procaspase-3转化为活性形式.

存活素与半胱天冬酶-3在脑缺血大鼠脑组织中的表达

目的研究脑缺血大鼠存活素(survivin)和半胱天冬酶(caspase)-3表达的程度,为脑缺血早期的防治提供实验依据。方法大鼠(180～220 g)共15只,分为缺血模型组、对照组和盐水组各5只。采用PV-6000两步法免疫组织化学染色,采用图像分析软件在光学显微镜下放大200倍数出每张照片阳性细胞数量,取其计数平均值。结果缺血模型组survivin和caspase-3阳性表达较盐水组和对照组有显著差异(P<0.01)。在同组不同部位阳性表达中,survivin在大脑皮层和基底节缺血区阳性细胞表达较海马区有显著差异(P<0.05)。但caspase-3免疫染色呈弱阳性表达,且大脑皮层缺血区阳性细胞数显著高于基底节和海马区(P<0.05)。血管内呈阳性反应。结论 survivin的早期阳性表达可增加缺血区细胞凋亡可逆性,其阳性表达程度越高,caspase-3表达程度越低,说明survivin蛋白表达上调,而caspase-3表达下调。推测survivin在脑缺血时可能是通过抑制caspase-3达到抗凋亡作用。

苦瓜蛋白对柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠半胱天冬酶3活性及凋亡的抑制作用

为研究苦瓜蛋白对凋亡的关键酶半胱天冬酶 3及凋亡的调节作用 ,用已经建立起来的方法从苦瓜果肉中提取苦瓜蛋白。将BALB/C小鼠分为 4组 :病毒对照组、正常对照组、药物对照组和药物治疗组 ,分别在第 0天、第 3天、第 7天和第 14天各处死 5只小鼠 ,第 2 1天全部处死动物 ,心肌组织半胱天冬酶 3活性测定按照CAL BIOCHEM公司的试剂说明书进行 ,并稍加改正 ,凋亡鉴定按照Oncogene公司的TdT DNA裂解片断末端原位标记试剂说明书进行。结果发现 ,①病毒对照组第 7天开始出现半胱天冬酶 3活性 (0 .6 3± 0 .2 1pmol/min ,n =5 ) ,第 14天的活性 (10 .9± 1.5pmol/min ,n =5 )显著高于第 7天 ,第 2 1天的活性 (12 .6± 1.3pmol/min ,n =5 )又高于第 14天。②药物治疗组 ,只有一个第 2 1天的标本有半胱天冬酶 3活性 (0 .4 1pmol/min) ,其它两组均未检测到此酶的活性。③DNA裂解片断末端原位标记法发现 ,病毒对照组在第 7天心肌中有少数细胞凋亡 ,第 14天、第 2 1天凋亡细胞明显增多 ,在非病变区域可发现单个凋亡的心肌细胞。治疗组未发现凋亡细胞 ,其它两组也未发现凋亡细胞。结果提示 ,CVB3病毒性心肌炎中发现有明显的凋亡现象 ,凋亡和半胱天冬酶 3发现于第 7天 ,且随着时间增加而逐渐加重(增强 ) ;苦瓜蛋白可显?

西洛他唑对全脑缺血大鼠海马磷酸化蛋白激酶B及半胱氨酸天冬酶-3表达的影响

目的研究西洛他唑对全脑缺血大鼠海马磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)及半胱氨酸天冬酶-3(caspase-3)的影响。方法用四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型。将112只(模型成功率为75(,死亡后补充动物)约300g的健康成年SD大鼠随机分为3组:假手术组(n=16)、缺血模型对照组(n=48)及治疗组(n=48)。治疗组于缺血前6h和2h各灌胃给予1次西洛他唑,以后每隔24h在相应时间点给药,其它各组灌胃给予等量二甲基亚砜。缺血模型对照组和治疗组于缺血10min再灌注0h、1h、12h、24h、72h、7d后断头取脑,免疫组织化学方法分析再灌注后不同时间点海马CA1区p-Akt和再灌注后caspase-3表达水平的变化。结果全脑缺血后0h、1h,治疗组海马CA1区p-Akt平均光密度值明显高于模型组(P<0.01;P<0.05)。缺血后24h、72h、7d,治疗组海马CA1区caspase-3平均阳性细胞数明显低于模型组(P<0.05)。结论西洛他唑可以降低大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区caspase-3表达水平,并可抑制再灌注后p-Akt水平的急剧降低。

高压氧对大鼠短暂全脑缺血半胱天冬酶-3的影响

为探讨高压氧 (HBO)对脑缺血半胱天冬酶 3 (简称caspase 3 )活性的影响 ,将 2 0 0～ 2 5 0 gSD大鼠分为缺血再灌注组 (I/R组 )、高压氧 (HBO)处理组及假手术组 ,以Pulsinelli等报道的四动脉阻断法建立脑缺血再灌注动物模型 ,缺血 2 0min,分别于再灌注 6、2 4、4 8及 96h取顶叶皮质匀浆 ,用显色法测定caspase 3活性。结果显示 :再灌注 6h ,HBO组及I/R组同假手术组相比 ,caspase 3活性无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,但HBO显著高于I/R组 (P <0 .0 5 ) ;2 4h时间点HBO组及I/R组均高于假手术组 (P <0 .0 5 ) ,但前 2组之间无显著差异 ;4 8及 96h时间点HBO及I/R组虽高于假手术组 ,但差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ,且此 2组间亦无显著差异 ,说明此时caspase 3已基本降至正常。提示全脑短暂性缺血再灌注后caspase 3被激活 ,缺血早期用HBO处理可促进其活化 。

3种中药对脓毒症大鼠脾脏半胱天冬酶3表达影响的对比研究

目的研究脓毒症大鼠脾脏半胱天冬酶(caspase)3表达变化以及3种中药对脓毒症大鼠脾脏caspase 3表达影响的对比。方法采用盲肠结扎穿孔(CLP)的方法造成脓毒症模型,造模成功后分成5组,造模后3、24、72 h腹腔静脉取血;采用免疫组化的方法检测脾脏淋巴细胞caspase 3阳性细胞的表达。结果脓毒症大鼠的脾淋巴细胞caspase 3表达是明显升高的,代表脾脏淋巴细胞凋亡增加,3种中药均能明显降低脾淋巴细胞caspase3表达。结论3种中药能减低脓毒症淋巴细胞凋亡,调节机体免疫。

新生大鼠脑缺氧缺血后半胱天冬酶-3激活与DNA损伤的关系

目的 :探讨未成熟脑在缺氧缺血 (H1)后海马神经细胞半胱天冬酶 3的激活与DNA损伤之间的关系。方法 :采用 7日龄新生大鼠脑缺氧缺血模型 ,观察HI后不同时间点脑组织海马CA1、CA3区半胱天冬酶 3活性亚单位p17阳性细胞及检测DNA双链断裂的寡核苷酸探针 (HPP)标记阳性细胞的分布。结果 :HI后 3h在海马CAl、CA3区即可检测到p17及HPP阳性细胞 ,并随HI时间延长而增加。在CAl区阳性细胞计数 2 4h达到峰值 ,而在CA3区 72h仍有较多阳性细胞 ,p17和HPP标记的阳性细胞在各时间点具有相同的变化规律。双重染色证实 ,p17和HPP在海马神经元中同时表达。结论 :未成熟脑HI后海马区半胱天冬酶 3被激活并伴随DNA双链的断裂 。

高压氧对短暂前脑缺血小鼠海马半胱天冬酶-3表达的影响

旨在通过测定缺血再灌注时半胱天冬酶 3(caspase 3)的表达以及高压氧对表达的影响 ,从细胞凋亡的角度探讨高压氧治疗脑缺血的分子生物学机制。将C5 7BL/ 6N小鼠分为假手术组 (正常对照组 )、缺血再灌注组 (I/R组 )及缺血再灌注加高压氧治疗组 (HBO组 ) ,后 2组夹闭双侧颈总动脉 2 0min后再通血流 ,建立脑缺血再灌注模型 ,分别于再灌注 6h、12h、2 4h和 4 8h取海马。采用半定量反转录 PCR及蛋白免疫印迹 (WesternBlotting)方法分别检测caspase 3在转录水平(mRNA)及翻译水平的表达变化。结果 :各I/R组及HBO组海马中caspase 3mRNA及酶原表达水平与假手术组相比均有明显升高 ,且差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;各I/R组与相应时相点HBO组caspase 3mRNA及酶原表达水平相比差异均无统计学意义 (P >0 .0 5 )。提示 :脑缺血再灌注损伤诱发caspase 3转录水平增加 ,而且这是引起其酶原增加的主要原因 ;caspase 3介导的细胞凋亡参与了缺血再灌注损伤 ;本实验中所采用的HBO治疗方案对caspase 3转录及酶原水平无明显作用。

半胱天冬酶-3、Bcl-2在扁平苔藓皮损中的表达

目的:探讨半胱天冬酶(caspase)-3和Bcl-2在扁平苔藓(LP)中的表达及意义。方法:应用免疫组化SP法对30例LP患者皮损和10名正常对照者皮肤中半胱天冬酶-3和Bcl-2的表达进行检测。结果:半胱天冬酶-3在LP皮损表皮中表达明显增强,Bcl-2在LP皮损表皮、真皮淋巴细胞浸润带的表达均明显增强;正常对照者皮肤基底细胞中半胱天冬酶-3表达仅为20%,Bcl-2偶见表达。结论:半胱天冬酶-3和Bcl-2在皮肤LP发生和发展中起一定作用。

钬激光照射后人T-24膀胱癌细胞株中半胱天冬酶-3蛋白的表达及其意义

目的观察钬激光照射后人T-24膀胱癌细胞株中半胱天冬酶(Caspase)-3蛋白的表达,探讨其在T-24细胞发生凋亡中的作用。方法取对数生长期人T-24膀胱癌细胞株,分对照组与实验组,试验组以800 mJ钬激光直接照射而对照组仅以指示光照射不激发激光能量,照射后48h分别在光镜下观察细胞形态学的改变,免疫细胞化学染色检测半胱天冬酶-3蛋白在T-24细胞中的表达。结果800 mJ钬激光照射后实验组细胞形态呈现出凋亡改变,半胱天冬酶-3蛋白呈现阳性表达。结论钬激光照射人T-24膀胱痛细胞株,可诱发肿瘤细胞凋亡,半胱天冬酶-3蛋白在诱导T-24细胞凋亡中可能发挥重要作用。

半胱氨酸天冬氨酸酶3在遗传性视网膜变性中的表达(英文)

目的 观察半胱氨酸天冬氨酸酶3（caspase 3）mRNA在RCS大鼠视网膜中的表达,分析caspase 3特异抑制剂 Ac-DEVD-CHO对视细胞凋亡的影响。方法 应用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）检测RCS大鼠出生后不同时间视网膜中caspase3 mRNA的表达。应用TUNEL方法检测玻璃体内注射Ac-DEVD-CHO后视细胞凋亡的改变。结果RCS大鼠出生后14天至60天视网膜 caspase 3 mRNA均有表达,25天水平明显升高,达到高峰。SD大鼠视网膜15至60天的表达量无明显差异,与RCS大鼠14天水平接近。caspase 3特异抑制剂 Ac-DEVD-CHO能显著抑制视细胞凋亡。结论 caspase 3可能在 RCS大鼠视网膜变性视细胞凋亡中起关键作用。