CSTB基因启动子区十二核苷酸重复序列d[CGCGGGGCGGGG]n形成串联G-四链体的研究

DNA串联重复序列扩展是引起多种神经性疾病的一个重要因素。对重复序列形成的高级结构研究可为相关疾病的发病机制和治疗策略提供重要的理论基础。位于半胱氨酸蛋白酶抑制剂B(cystatin B,CSTB)基因启动子区的一段十二核苷酸重复序列d[CGCGGGGCGGGG]n的扩展是导致其表达异常,进而引起神经退行性疾病进行性肌阵挛癫痫(progressive myoclonus epilepsy,EPM1)的主要原因。但对其可能机制及高级结构的研究尚未见报道。本研究采用圆二色光谱法(circular dichroism spectroscopy,CD)和核磁共振波谱法(nuclear magnetic resonance spectroscopy,NMR),对含有多个重复单元的d[CGCGGGGCGGGG]n(n=2,4)形成的高级结构进行了解析。结果发现,含有2个重复单元的d[CGCGGGGCGGGG]2序列,可在1价阳离子K+诱导下,形成稳定的平行链G-四链体结构。而含4个重复单元的d[CGCGGGGCGGGG]4序列,可在分子内形成串联G-四链体堆叠排列。说明含多个重复单元的十二核苷酸重复序列,可形成分子内串联堆叠G-四链体高级结构。这些结果为十二核苷酸重复序列扩展,导致CSTB基因表达异常的分子机制提供了一种可能的合理假说,并为后续寻找小分子配体识别十二核苷酸串联重复扩展序列,进而调控CSTB基因表达的EPM1治疗策略提供了理论基础。

猪Cathepsin B基因和Cystatin B基因mRNA表达的发育性变化及组织差异

【目的】研究猪肉嫩度性状候选基因-组织蛋白酶B(cathepsin B,CTSB)和半胱氨酸蛋白酶抑制素B(cystatin B,CSTB)在体内不同组织、不同发育阶段的表达变化规律,为研究嫩度性状的遗传调控机理提供依据。【方法】采用荧光探针RT-PCR,定量分析CTSB和CSTB mRNA在两个品种猪的多个组织、多个发育时间点的表达量。【结果】RT-PCR结果表明,CTSB和CSTB mRNA表达量最高的组织为肾脏,心肌和骨骼肌中表达丰度低,股四头肌CSTB mRNA表达量极显著高于背最长肌。CTSB mRNA表达量在0～5月龄长白猪和梅山猪背最长肌中表现出先升高后降低的变化趋势,梅山猪峰值出现较早,并在4月龄后再次出现急剧上升。CSTB mRNA表达量在梅山猪中表现出生初期较高,随后逐渐降低的表达模式,长白猪的表达模式则为出生后表达量急剧升高,2月龄达到峰值,随后逐渐降低。2品种猪背最长肌组织CTSB和CSTB mRNA表达量表现出显著正相关。【结论】CTSB和CSTB mRNA表达量受到组织、发育阶段和品种影响,2基因mRNA表达量呈显著正相关。

达格列净对Ⅱ型心肾综合征患者心肾功能及短期预后的影响

目的 观察在常规治疗基础上,加用达格列净对Ⅱ型心肾综合征(cardiorenal syndrome, CRS)患者的血清肌酐(serum creatinine, SCr)、血胱抑素C(cystatin C, Cys-C)、可溶性生长激素表达基因2蛋白(growth stimulation expressed gene 2, sST2)和N末端B型利钠肽原(n-terminal pro b-type natriuretic peptide, NT-proBNP)的影响。方法 选取Ⅱ型CRS患者94例,随机分为对照组48例(常规治疗)和观察组46例(常规治疗的基础上加用达格列净10 mg),在基线与治疗24周后检测心肾功能指标,并观察短期预后以及不良反应。结果 与对照组比较,观察组患者的SCr、Cys-C、sST2和NT-proBNP值均明显降低(P<0.05),观察组主要不良心血管事件发生率更低(P<0.05)。结论 在常规治疗基础上加用达格列净10 mg可显著降低Ⅱ型CRS患者的SCr、Cys-C、sST2和NT-proBNP水平及改善短期预后,且sST2可用来判断Ⅱ型CRS患者心肾功能,有助于指导诊疗。