胱硫醚-γ-裂解酶产生的H_(2)S在小鼠脑缺血/再灌注损伤中的作用及与RhoA-ROCK_(2)信号通路的关系

目的探讨胱硫醚-γ-裂解酶产生的H_(2)S在脑缺血/再灌注(cerebral ischemia/reperfusion,I/R)损伤中的作用及与RhoA-ROCK_(2)信号通路的关系。方法采用双侧颈总动脉结扎制备小鼠脑缺血/再灌注损伤模型,激光散斑法检测脑血流量,HE染色法观察脑海马组织病理学变化,检测LDH、NSE、RhoA和ROCK_(2)活性及H_(2)S含量和ROCK_(2)蛋白表达。结果H_(2)S合酶CSE底物L-Cys(300 mg·kg^(-1))可明显促进脑I/R小鼠脑血流量的恢复,改善海马组织的病理损伤,抑制血清中LDH活性和脑组织中NSE、RhoA及ROCK_(2)活性的升高,并抑制血清H_(2)S含量的降低和脑组织中ROCK_(2)蛋白表达的增多。但L-Cys上述作用可被CSE合酶抑制剂PPG(50 mg·kg^(-1))明显地减弱;H_(2)S供体NaHS(4.8 mg·kg^(-1))也有与L-Cys相同的上述作用。结论CSE产生的H_(2)S对小鼠脑I/R损伤有保护作用,其作用可能与抑制RhoA-ROCK信号通路及增加脑血流量有关。

硫化氢对内皮素-1致心房肌细胞肥大的保护作用

目的探讨硫化氢对内皮素-1(endothelin-1,ET-1)致心房肌细胞的保护作用,为未来房颤的药物治疗指导新思路。方法选取出生1~3 d的乳鼠,分离心房及心室肌细胞,通过化学酶消化法提取心房肌细胞,心房肌细胞培养3 d后经免疫细胞化学染色法鉴定,而后随机分为4组加入相应的药物:A组:对照组;B组:ET-1组(10-4~10-7mol/L);C组:ET-1+Na HS(ET-1:10-8mol/L,Na HS:10-4~10-7mol/L);D组:ET-1+ETRA(ET-1:10-8mol/L,ET-1受体拮抗剂:10-5~10-7mol/L)。PCR方法检测各组中CSE、Connexin40和Ca MKⅡmRNA的表达情况。结果经免疫细胞化学染色鉴定90%以上的心房肌细胞经α-肌动蛋白染色阳性。经PCR方法检测,与对照组比较,在B组中Connexin40和Ca MKⅡmRNA表达量显著增加(P<0.05),CSE mRNA表达量下降(P<0.05),尤其是ET-1浓度为10-8mol/L时(P<0.05);而在C组和D组中,Connexin40和Ca MKⅡmRNA表达量显著下降(P<0.05),而CSE mRNA表达量增加(P<0.05),尤其是浓度为10-6mol/L时(P<0.05)。结论ET-1可导致心房肌细胞肥大。H2S对ET-1所致的心房肌细胞肥大起到保护作用。