胱蛋白酶抑制剂相关的附睾精子发生基因在不同发育阶段小鼠睾丸和附睾中的表达

目的 :研究胱蛋白酶抑制剂相关的附睾精子发生 (Cres)基因在生后不同发育阶段小鼠睾丸及附睾中的表达规律。 方法 :采用半定量RT PCR方法检测CresmRNA在生后 14、2 0、2 2、2 8、35、4 9、70、4 0 0d小鼠睾丸及附睾中的表达变化。 结果 :Cres基因在 14d小鼠睾丸和附睾中呈低水平表达 ,随着小鼠的生长发育 ,CresmRNA的表达量逐渐升高。在 70d小鼠睾丸和 4 0 0d小鼠附睾中 ,CresmRNA的表达量达到峰值。 结论 :Cres基因在生后不同发育阶段小鼠睾丸及附睾中呈现明显的规律性表达 ,可能参与精子发生、成熟过程的调控。

胱蛋白酶抑制剂相关的附睾精子发生基因在小鼠睾丸和附睾中的表达

目的:研究胱蛋白酶抑制剂相关的附睾精子发生(cystatin-related epididymalspermatogenic, Cres)基因在生后不同发育阶段小鼠睾丸及附睾中的表达规律。方法:采用实时荧光定量PCR及间接免疫荧光技术检测Cres mRNA及其蛋白在生后14 d、20 d、22 d、28 d、35 d、49 d、70 d及400 d小鼠睾丸及附睾中的表达变化。结果:在小鼠睾丸中,Cres mRNA在青春期前低水平表达,此后逐渐升高,成年期达到峰值,老年期有所下降;Cres蛋白主要定位于延长精子细胞,免疫染色强度主要取决于生精细胞的发育阶段,而与小鼠的发育阶段无关。在小鼠附睾中,Cres mRNA在青春期前表达量较低,此后逐渐升高,老年期达到峰值;Cres蛋白定位于附睾头部近端上皮细胞及头部中段管腔液和部分上皮细胞中,附睾头部远端及体、尾部均未检测到Cres蛋白。结论:Cres基因在小鼠睾丸和附睾中的表达呈现明显的年龄变化趋势,且其在睾丸和附睾中分别具有阶段特异性表达和区域特异性表达的特点,提示Cres基因可能参与精子发生、成熟过程的调控。这为今后生殖药理学与生殖毒理学的分子水平研究提供了新的线索。

胱蛋白酶抑制剂相关的附睾精子发生基因的调节和功能

CRES(cystatin relatedepididymalspermatogenic,胱蛋白酶抑制剂相关的附睾精子发生 )蛋白是胱蛋白酶抑制剂(cystatin)超家族中家族 2的一个亚类。然而 ,与cystatinC的广泛性表达不同 ,Cres基因只在分裂后的生殖细胞、附睾头部近端和腺垂体促性腺激素细胞中表达。cystatin对C1半胱氨酸蛋白酶抑制作用的发挥必须有 3个共有位点的参与 ,而CRES蛋白缺少其中的 2个位点。因此 ,CERS在生殖系统和神经内分泌系统中的功能也许是独特的和组织特异性的。本文概述了以下方面的研究 :①Cres基因启动子及其转录调节蛋白相关的可能对Cres的组织特异性表达有重要作用的DNA结合位点。②CRES蛋白的生物学功能。Norethern印迹法、凝胶转移分析和瞬时转染实验均表明 ,附睾和促性腺激素细胞中主要表达C EBP家族中的C EBPβ(CCAAT 增强子结合蛋白 ) ,且C EBPβ对于Cres基因在这两个组织中的高表达是必不可少的。另外 ,构建了表达氯霉素乙酰基转移酶 (CAT)报告基因的转基因小鼠 ,CAT报告基因由Cres基因 5′端 1 6kb的启动子所调控。分析显示 ,CATmRNA仅在生殖细胞中表达 ,说明Cres 5′端 1 6kb的侧翼区含有调控CAT在睾丸中表达的DNA序列 ,而缺乏指导CAT在附睾中表达的序列 ,或者此1 6kb的DNA片段存在Cres的负调节成分。最后 ,

胱蛋白酶抑制剂超家族成员CRES的研究进展

胱蛋白酶抑制剂相关的附睾精子发生(cystain-related epididymal spermatogenic,CRES)蛋白是胱蛋白酶抑制剂(cystatin)家族中的一个亚类,在结构上与cystatin家族具有一定的同源性,但缺少胱氨酸蛋白酶抑制活性必需的保守序列,主要在睾丸及附睾中表达。探究CRES亚类的表达调控及其生物学功能将有助于阐明精子发生与成熟的分子机制,为解决精子成熟异常引起的不孕症提供分子基础,也为开发一些阻断精子成熟的男性避孕药物提供新的设计思路。

实验性精索静脉曲张对青春期大鼠睾丸、附睾中CRES蛋白表达的影响

目的：研究青春期大鼠实验性左侧精索静脉曲张（ELV）对睾丸和附睾中胱蛋白酶抑制剂相关的附睾精子发生（CRES）蛋白表达的影响，探索精索静脉曲张导致不育的机制。方法：建立青春期雄性SD大鼠ELV模型，采用免疫组化及蛋白印迹方法检测CRES蛋白在ELV2周组（n=8）、4周组（n=8）及其相应的对照组（n均=5）大鼠睾丸和附睾头、体、尾中的表达变化。结果：免疫组化显示，CRES蛋白在ELV实验组和对照组大鼠睾丸和附睾中均有表达。在睾丸中，CRES蛋白主要定位于圆形和长形精子细胞的胞质、精子的顶体以及残余体中，其表达与生精周期密切相关，I～Ⅲ和Ⅸ～XⅣ期表达最强，Ⅶ～Ⅷ期表达次之，Ⅳ～Ⅵ期表达减弱。在附睾中，CRES蛋白主要表达于从附睾起始段到尾部的上皮主细胞的胞质中，且以体、尾部表达最强，头部次之，管腔分泌物也呈阳性表达。实验组比对照组CRES蛋白表达增强。Western印迹显示：实验组和对照组大鼠睾丸和附睾在相对分子质量（Mr）为19000和14000处均可见CRES蛋白条带，其中以M．19000处表达更为明显。实验组CRES蛋白的表达比对照组明显增强。对免疫组化和Western印迹结果进行灰度值和积分吸光度值（IA）测定，并经统计学分析显示：ELV2周组和4周组比其相对应的对照组表达增强且差异有显著性（P〈0．05或P〈0．01），而ELV各组问未见CRES蛋白表达有明显差异（P〉0．05）。结论：CRES蛋白在大鼠睾丸和附睾中均有表达，睾丸中表达呈现生精周期特异性和细胞特异性，附睾中表达呈现附睾上皮区段和细胞特异性；CRES蛋白在青春期ELV大鼠睾丸和附睾中的表达比对照组明显增强。这些结果提示CRES蛋白在精子发生和精子成熟过程中可能起着重要的作用，并且可能与ELV引起的不育或生育力低下有关。

听力丧失或与长期肾功能减退有关

近日，美国的一项研究证实，年龄相关性听力障碍可能与肾功能下降有关，或是肾功能降低的后果。该研究纳入863例参试者。结果显示，在调整年龄和性别后，血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C浓度与年龄相关性听力障碍的发生风险增加相关（RR=1．20）。