胶乳增强免疫比浊法测定胃蛋白酶原Ⅱ的不精密度和线性观察

目的对胶乳增强免疫比浊法测定胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)进行初步方法学评价,为临床应用提供依据。方法依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP5-A及EP10-A2文件提供的方法,对胶乳增强免疫比浊法测定PGⅡ进行初步的评价。结果 PGⅡ的低值样本批内变异系数(CV)为2.05%、批间CV为1.60%、日间CV为3.92%、总CV为4.70%;高值样本批内CV为1.70%、批间CV为1.21%、日间CV为3.79%、总CV为4.32%。当PGⅡ浓度分别为9.6、24.7、39.8μg/L时,相对偏倚分别为-0.18、-0.47、-0.39μg/L,总不精密度分别为4.98%、2.39%、2.71%。测试间的携带污染差异无统计学意义(P>0.05)。线性回归方程为Y=0.975 7X-0.016 8,决定系数(R2)=0.998 7。结论胶乳增强免疫比浊法测定PGⅡ的精密度符合EP5-A文件标准,具有良好的重复性。线性、偏倚、总不精密度及抗交叉污染能力均达到EP10-A2文件标准,符合临床应用要求,适用于实验室常规测定。

胶乳增强免疫比浊法测定糖化血红蛋白的方法学评价

目的应用美国，旌床实验室标准化委员会的标准化评价方案对胶乳增强免疫比浊法测定HbAlc进行方法学评价。方法依据标准化文件要求，分析胶乳增强免疫比浊法测定HbAlc的精密度、线性范围、回收率和干扰因素，并考察其与高效液相色谱法的相关性。结果该法总变异系数为3．19％（低值），3．53％（中值）和4．11％（高值）。平均回收率100．2％，在4．4％～13．5％范围内线性良好。胆红素在884μmol／L，三酰甘油在13．5mmol／L时对测定存在干扰。试剂和样本在低温保存时可稳定10天。该法与HPLC法结果明显相关，r=0．994，但整体略高于HPLC法的结果。结论胶乳增强免疫比浊法测定HbAlc方法符合NCCLS标准要求，适应临床需要。临床实验室在建立或引进新的检验项目时需要进行系统的方法学评价以验证检测的有效性和完整性。

微粒子酶免疫分析法和胶乳增强免疫比浊法测定β_2-微球蛋白的评价

对微粒子酶免疫分析法和胶乳增强免疫比浊法测定血清和尿液β2-微球蛋白(β2-MG)结果偏差进行评估。按照美国国家实验室标准委员会(NCCLS)EP9-A文件,以微粒子酶免疫分析法为实验方法,胶乳增强免疫比浊法为比较方法进行对比及偏差评估,将测定数据进行相关分析,并对两种分析系统之间的预期偏差进行评估。结果发现,除高浓度(>10mg/L)尿液样本外,其余各浓度的血清和尿液β2-MG用两种方法的测定结果的偏差均在可接受的范围。在使用性能较好的全自动生化分析仪和相配套试剂的前提下,微粒子酶免疫分析法和胶乳增强免疫比浊法对血清和尿液β2-MG的测定结果基本一致。

胶乳增强免疫比浊法定量测定血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的方法学评价及临床应用

目的对胶乳增强免疫比浊法（LEIA）定量测定血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）进行方法学评价并探讨其初步的临床应用。方法应用美国临床实验室标准化协会（CLSI）的标准化评价方案评价LEIA测定血浆NGAL的不精密度、回收率、线性范围、抗干扰性、稳定性等指标。同时测定86例2型糖尿病（T2DM）患者（其中包括41例糖尿病肾病（DN）患者）、40名体检健康者（正常对照组）的血浆NGAL水平。结果LEIA测定血浆NGAL低、高水平的批内变异系数（CV）分别为3.76%、1.79%;日间CV分别为6.62%、3.45%。平均回收率为97.3%~104.6%;在0~5 000μg/L内线性良好,线性范围内偏差〈8%。与进口同类试剂盒（粒子增强免疫比浊法）具有高度相关性（R2=0.996 6）,两种检测方法在200和700μg/L处的偏倚分别为3.66和11.79μg/L,均满足厂家规定的要求。总胆红素≤600μg/L、血红蛋白≤10 g/L、维生素C≤0.6 g/L、甘油三酯≤15 mmol/L时对LEIA测定血浆NGAL均无明显干扰;试剂在仪器2~8℃的条件下放置,至少可保存稳定35 d;20名健康体检者血浆NGAL水平均处于厂家声明的参考区间内。正常对照组、T2DM组和DN组血浆NGAL水平呈逐步增高趋势,各组间差异均有统计学意义（P均〈0.01）。血浆NGAL与血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cys C）、肌酐（Cr）呈正相关（相关系数分别为0.58、0.43,P均〈0.01）。结论 LEIA测定血浆NGAL具有较高的灵敏度和精密度,所测结果准确可靠,能直接在自动生化分析仪上使用,操作简便、快速,适用于大批量测定。

胶乳增强免疫比浊法检测糖化血红蛋白的性能评价

目的对应用胶乳增强免疫比浊法在日立7600-020全自动生化分析仪上检测糖化血红蛋白（Hb A1c）的性能进行评价。方法应用胶乳增强免疫比浊法在日立7600-020全自动生化分析仪上检测Hb A1c,对其精密度、空白检测限、线性、携带污染率进行评价,并与BIO-RAD（D-10N）高效液相色谱法（HPLC）检测Hb A1c进行相关性分析,同时对参考区间进行验证。结果日立7600-020全自动生化分析仪上检测Hb A1c的低高水平的CV%批内分别为1.6%、0.5%;CV%批间分别为2.6%、1.3%;CV%总分别为3.5%、2.6%。检测限为0.1%。在2.0%~17.6%范围内线性良好（Y=1.0046X-0.0619,R2=0.9996）。携带污染率为1.03%,样本间交叉污染小。日立7600-020分析仪与BIO-RAD（D-10N）分析仪检测Hb A1c的结果呈明显相关（Y=1.0064X-0.0769,R2=0.9942）,95%置信区间为（-0.41~0.52）且百分偏倚的绝对值均小于6%。20名健康人群的Hb A1c测定结果为4.0%~5.5%,在厂家提供的参考区间内。结论应用胶乳增强免疫比浊法在日立7600-020全自动生化分析仪上检测Hb A1c的性能良好,可供临床使用。

胶乳增强免疫比浊法测定心型脂肪酸结合蛋白的方法学评价

目的对胶乳增强免疫比浊法定量测定血清心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的方法进行临床实验评价。方法分析胶乳增强免疫比浊法测定H-FABP的精密度、线性范围、前带反应、回收率和干扰因素,并考察其与酶联免疫吸附法的相关性。结果胶乳增强免疫比浊法测定血清H-FABP批内精密度的高值与低值变异系数分别为0.54%、1.56%;批间精密度的高值与低值变异系数分别为0.58%、1.8%,回收率为96.2%~99.3%。线性测定良好,可检测范围为2.5 ng/m L^160 ng/m L,标准品曲线回归方程为Y=1.02X+0.31,标准品检测相关性R2≥0.995。跟国外同类试剂相比较,曲线回归方程为Y=0.97X+0.13,检测相关性R2=0.998。实验组血清H-FABP检测结果为(78.3±10.4)ng/m L,与对照组相比差异有统计学意义。结论胶乳增强免疫比浊法测定血清H-FABP快速、准确、可靠,适用于临床急性心肌梗死的早期诊断。

胶乳增强免疫比浊法测定肌红蛋白

目的:通过对肌红蛋白(Myo)试剂盒的化学性能测定,评价了Myo测定方法的可靠性。方法:用胶乳增强免疫比浊的方法,在OLYMPUS和COBAS MIRA全自动生化分析仪上对Myo的精密度、线性、稳定性、回收试验、灵敏度、抗干扰性等指标进行评价,并进行了临床评价。结果:本方法性能评价表明,Myo批内变异系数分别为1.83%和4.56%,批间变异系数分别为2.52%和5.38%。线性γ2=0.9984。回收97%～101%。灵敏度0.0037ng/ml。37℃稳定性,放置5d后与4℃比较,相对误差<10%,人血清白蛋白、甘油三酯、γ球蛋白分别为两种浓度时测定,干扰均<10%,严重溶血和黄疸造成负干扰。与德国Disys试剂盒比较有良好的相关性。临床评价预期值100例非相关人血清测定,95%单侧57ng/ml,敏感性96.1%,特异性93.0%,临床符合率94.7%。结论:本方法所测结果准确可靠,且操作简便、快速,直接在自动生化分析仪上使用,值得推广。

胶乳增强免疫比浊法在甲胎蛋白测定的方法学评价

目的对胶乳增强免疫比浊法（LEIA法）测定甲胎蛋白（AFP）水平，并进行方法学评价。方法用LEIA法测定178例血清的AFP水平，同时采用化学发光免疫分析仪法（CLIA法）对AFP水平进行测定。结果LEIA法测定AFP的灵敏度为0．65ng／mL，低、中、高水平的批内CV分别为0．98％、0．92％、0．89％；批间CV分别为1．63％、1．53％、1．45％。回收率96．3％～102．9％。结论LEIA法是测定AFP较好的方法，适合普及推广。

胶乳增强免疫比浊法定量测定肌钙蛋白Ⅰ的影响因素探讨

目的探讨胶乳增强免疫比浊定量测定血清肌钙蛋白I(cTnI)的影响因素。方法对胶乳增强免疫比浊法定量测定cTnI进行三酰甘油、抗凝剂、类风湿因子(RF)阳性的干扰性试验。结果血脂、抗凝剂、RF阳性对胶乳增强免疫比浊定量测定cTnI有一定影响。结论胶乳增强免疫比浊定量测定cTnI受抗凝剂等因素影响,在实验室检测和临床诊断中应引起重视。

胶乳增强免疫比浊法测定KL-6的方法学评价

目的对胶乳增强免疫比浊法(LEIA)检测唾液酸化糖链抗原(KL-6)进行方法学评价,判断其能否满足临床要求。方法在贝克曼库尔特AU5421全自动生化分析仪上利用LEIA法检测血清KL-6,参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)的标准化评价方案评价LEIA法检测血清KL-6的精密度、回收率、线性范围、抗干扰性、稳定性等指标。结果 LEIA法检测血清KL-6在(50~5000)U/ml范围内线性良好(y=0.9923 x-0.0776,r^2=0.9981),线性范围内偏差<10%;高、低浓度样本批内不精密度评价变异系数CV分别为2.60%、2.63%,日间不精密度评价变异系数CV分别为3.13%、4.07%;平均回收率为100.4%;总胆红素≤200mg/l、血红蛋白≤6g/L、脂肪乳≤5%,对该法无明显干扰;试剂在仪器内(2~8)℃的条件下放置,至少可保存稳定29d;与化学发光法比较,回归方程为y=0.9581 x+14.3206,r^2=0.9989,两法高度相关(P<0.01)。结论在全自动生化分析仪上利用LEIA法测定KL-6操作简便、快速,检测结果准确可靠、重复好、线形范围较宽,与化学发光法比较有良好的相关性,符合临床实验室要求。

胶乳增强免疫比浊法检测抗环瓜氨酸肽抗体试剂盒的制备及性能评价

目的:胶乳增强免疫比浊法检测抗环瓜氨酸肽抗体试剂盒的制备及性能评价。方法:对反应体系中的主要成分定标,校准品溯源,质控品定值,参考区间确定,并对试剂准确度、精密度、稳定性、干扰物实验等相关性能指标进行评价,检测临床标本评价研制的试剂盒效能。结果:羧基微球粒径采用108 nm,羧基微球与环瓜氨酸肽抗原比例为3∶1,交联时间为60分钟,BSA封闭时间为60分钟,这时方法学灵敏度最佳。标准品溯源至北京九强生物技术股份有限公司试剂盒,两者线性回归y=1.010x-0.420(r=0.981)。质控品定值分别为20.0 U/mL±4.0 U/mL,50.0 U/mL±10.0 U/mL。参考范围95%可信区间为<35 U/mL。在2℃~8℃环境下,产品校准品贮存12个月和质控品开封16天后检测结果变化不显著。干扰物胆红素≤200 mg/L、甘油三酯≤3 g/L、血红蛋白≤2.5 g/L时,对三批试剂结果均无显著干扰。对照试剂和考核试剂检测临床标本,线性回归y=0.9607x-0.3451(r=0.9763),偏倚分析在允许误差范围内,说明考核试剂完全达到临床检测要求。结论:制备的胶乳增强免疫比浊法检测抗环瓜氨酸肽抗体试剂盒符合临床诊断要求。

胶乳增强免疫比浊法测定肌钙蛋白Ⅰ

目的:通过对肌钙蛋白I(cTnI)试剂盒的化学性能测定,评价了cTnI测定方法的可靠性。方法:用胶乳增强免疫比浊的方法,在OLYMPUS和COBAS MIRA全自动生化分析仪上对cTnI的精密度、线性、稳定性、回收试验、灵敏度、抗干扰性等指标进行评价,并进行了临床评价。结果:本方法性能评价表明,cTnI批内变异系数分别为4.0%和1.4%,批间变异系数分别为4.7%和2.0%。线性良好,γ2 1.0000,回收100%～104%,灵敏度0.1 ng/ml,37℃稳定性放置5 d后与4℃比较,相对误差<10%,人血清白蛋白、甘油三酯、γ球蛋白均干扰<10%,严重溶血和黄疸造成负干扰,抗凝剂EDTA-K2有负干扰,其余抗凝剂及VC无干扰。临床评价预期值149例非相关人样本测定,99%单侧1.7 ng/ml,敏感性86%,特异性99%,临床符合率96%。临床评价预期值100例非相关人血清测定,95%单侧57 ng/ml,敏感性96.1%,特异性93.0%,临床符合率94.7%。结论:本方法所测结果准确可靠,且操作简便、快速,直接在自动生化分析仪上使用,值得推广。

均相酶免疫法与胶乳增强免疫比浊法检测甘胆酸的方法学比较

目的对均相酶免疫法和胶乳增强免疫比浊法检测甘胆酸(CG)进行方法学比对,为临床实验室选择合适的检测方法提供参考。方法对2种方法的阳性率、试剂盒批内精密度、线性范围分别进行比较,再分别用2种方法检测248例临床标本,对结果进行统计分析。结果均相酶免疫法和胶乳增强免疫比浊法检测CG的阳性率分别为53.23%和51.21%,阳性符合率为97.58%;批内精密度实验中高值血清变异系数(CV)分别为1.13%和2.65%,低值血清CV分别为3.52%和7.51%;线性评价试验中,均相酶免疫法线性回归方程为Y=1.068 2X+0.421 6,相关系数(r)=0.995 7;胶乳增强免疫比浊法线性回归方程为Y=1.016 1X+0.875 2,r=0.997 7。2种方法临床标本检测结果回归方程Y=1.156X+0.543,决定系数(R2)=0.98。结论 2种检测方法具有良好的一致性,其测定结果准确、稳定、可靠,能满足临床检测需求;但均相酶免疫法检测稳定性显著优于胶乳增强免疫比浊法。

胶体金与胶乳增强免疫比浊法测定心肌肌钙蛋白Ⅰ的比较

目的用北京九强公司的胶体金法与胶乳增强免疫比浊法定量测定我院60例血清肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponinⅠ,cTnⅠ)水平。方法结合临床最后诊断,评价两种测定方法的分析性能。比较胶体金法与胶乳增强免疫比浊法测定cTnⅠ总符合率、灵敏度、特异性、误诊率和漏诊率。结果胶体金法与胶乳增强免疫比浊法与临床诊断总符合率好,灵敏度高,特异性强,误诊率和漏诊率低。两种检测方法测定结果之间差异无统计学意义,P>0.05。结论胶乳增强免疫比浊法定量测定cTnⅠ方法简便、快速,具有较高的灵敏度和精密度,可用全自动分析仪进行测试,适用于大批量及临床常规使用。胶体金法方便快速,适合临床科室床旁检测。

聚乙烯基萘纳米微球制备及在胶乳增强免疫比浊法检测中的应用

目的:采用乳液聚合法制备聚乙烯基萘(PVN)纳米微球,将其用作β2微球蛋白(β2-M)胶乳增强免疫比浊(LETIA)检测试剂的新型载体。方法:以乙烯基萘(VN)为聚合单体,十二烷基硫酸钠(SDS)为乳化剂,碳酸盐缓冲液为水相,制备PVN纳米微球,并对微球的理化性能进行表征。以物理吸附的方式分别将β2-M的抗体连接到PVN及聚苯乙烯微球表面,制备得到用于β2-M检测的两种LETIA试剂,并在生化分析仪上对试剂的性能进行评价。结果:制备的PVN纳米微球具有均一的粒径分布。利用自制的以PVN纳米微球为载体的LETIA免疫检测试剂在一定范围内有较好线性,同时与自制的以同等粒径PS纳米微球为载体的LETIA检测试剂相比具有更高灵敏度。结论:PVN纳米微球作为LETIA检测试剂的载体具有很好应用前景。

胶乳增强免疫比浊法测定降钙素原方法学评价及临床意义

目的：对降钙素原（PCT）胶乳增强免疫比浊检测试剂盒进行性能评估并且探讨在脓毒症评估中的应用价值。方法采用胶乳增强免疫比浊试剂测定 PCT，根据美国临床实验室标准化协会（CLSI）的标准化评价方案对方法进行精密度、回收率、线性、抗干扰等评价及临床应用。结果在0.5μg／L 和2.0μg／L 这2个医学诊断水平，此方法批内和日间变异系数分别为CV＜5.0％和 CV＜2.0％，平均回收率为100.6％。检测线性范围为0.05～60μg／L，判断依据为 r2＝0.996。试剂在开口1个月和37℃水浴8 d 保存过程中，测值偏差小于10％。跟 Roche PCT 试剂（化学发光法）相比具有高度的相关性。抗干扰性强，总胆红素小于或等于600μmol／L，血红蛋白小于或等于400 mg／dL，三酰甘油小于或等于1000 mg／dL，类风湿因子小于或等于200 IU／mL 对试剂盒的测定均无影响。实验组血清 PCT 检测结果为（14.783±5.654）μg／L，与健康对照组（0.237±0.107）μg／L 比较差异有统计学意义（P ＜0.05）。结论胶乳增强免疫比浊法测定血清 PCT 快速、准确、稳定、可靠、适用于临床脓毒症诊断。

胶乳增强免疫比浊法检测血清25-羟维生素D的性能验证

目的 验证一种新上市的总25-羟维生素D[25(OH)D]检测试剂的方法 学性能.方法 性能验证使用苏州博源公司生产的总25-羟维生素D检测试剂,验证该试剂的正确度、精密度、线性、最大稀释倍数、分析灵敏度,方法 学验证采用罗氏诊断的试剂作为参比试剂,对临床样品进行评价.结果 总25-羟维生素D不同浓度水平血清样品:低值(19.36 ng/mL)、中值(54.51 ng/mL)、高值(97.80 ng/mL)的加标回收率分别为106.2%、102.3%、99.8%;低值、高值血清样品的批内精密度和总精密度分别为2.87%、1.42%和3.60%、2.09%,小于厂商声明的1/4TEa(6.25%)和1/3TEa(8.33%);线性范围为8.0~152.0 ng/mL;分析灵敏度符合厂商声明标准(2.9 ng/mL).方法 学比对收集健康体检者及患者血清样品(n=110),分别使用苏州博源(试验方法 ,Y)与罗氏诊断(参比方法 ,X)的总25-羟维生素D试剂进行检测,Deming回归方程为Y=-2.5853+1.0410X,相关系数r=0.951,Bland-Altman图中95.5%(105/110)的点落在95%一致性界限内.结论 苏州博源总25-羟维生素D的正确度、精密度、线性范围、最大稀释倍数、分析灵敏度和参考区间满足性能验证要求,样品比对结果 与罗氏诊断试剂具有一致性,可满足临床应用要求.

胶乳增强免疫比浊法检测降钙素原的方法评价

目的评价胶乳增强免疫比浊法（LEITA）测定血清降钙素原（PCT）水平的临床应用价值。方法依据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）指南对LEITA测定PCT进行精密度（RSD）、线性范围及干扰试验验证,并与电化学发光免疫分析法（ECLI）进行比较。结果 LEITA测定PCT批内RSD〈7.33%,批间RSD〈9.26%;血清PCT在0.01~79.80μg/L范围内检测线性良好（y=0.9331x-0.3093,r=0.9997）。LEITA与ECLI具有较好相关性（r=0.9995,P〈0.01）。结论 LEITA测定PCT能满足临床检验要求。