胶体几丁质诱导红曲霉产几丁质酶的研究

本文采用胶体几丁质为底物,研究了红曲霉液态发酵产几丁质酶.研究结果表明:胶体几丁质的添加能有效诱导红曲霉合成几丁质酶.在培养基中添加0.8%(W/V)胶体几丁质的同时,添加0.4%(W/V)葡萄糖,有利于红曲霉的生长以及几丁质酶的合成,发酵48h几丁质酶活力达到最高的0.3504U/mL.

双酶协同降解胶体几丁质及其作用机制

建立一种几丁质酶(chitinase,ChiA)和β-N-乙酰基己糖胺酶HJ5N协同催化体系,可实现一步反应降解胶体几丁质制备N-乙酰氨基葡萄糖(N-acetylglucosamine,GlcNAc),探讨不同因素对双酶协同催化体系的影响和双酶协同作用机制。结果表明,双酶协同催化体系的最适反应温度为30℃,最适反应pH值为6,ChiA与HJ5N添加比(加酶量(U)计)为2∶1。在最优反应条件下以90 g/L虾壳几丁质(胶体几丁质30.3 g/L)为底物时,GlcNAc产量为17.55 mg/mL,收率达到58%。ChiA与HJ5N的协同作用机制主要表现在HJ5N可保证中间产物几丁二糖(GlcNAc)_(2)快速被转化为GlcNAc,有效解除(GlcNAc)_(2)对ChiA的抑制作用,从而实现双酶协同高效催化降解胶体几丁质制备GlcNAc。这为酶法降解胶体几丁质制备GlcNAc的工业应用提供了一种有效策略。

具几丁质降解活性雪灵芝内生菌的筛选与鉴定

昆虫是危害农林作物的主要害虫,利用微生物防治有害昆虫是减少农林作物损失的有效途径之一。植物内生菌是生防菌的重要来源。以家蚕蛹外皮几丁质为筛选培养基主要成分,从西藏垫状雪灵芝(Arenaria pulvinata Edgew.)内生菌中筛选产高活性几丁质酶的菌株。透明圈法与DNS法酶活性测定相结合,筛选出一株降解几丁质能力较强、酶活性较高的菌株ZLB-158,根据形态学特征与16S rRNA基因序列鉴定,初步将该菌株归属为侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)。该菌株在蚕蛹胶体几丁质平皿上培养48 h形成的降解圈与菌落直径比为2.6,初始发酵条件下酶活力为0.404 U/mL。ZLB-158菌株产几丁质酶活性较高,在昆虫害虫防治方面具有潜在应用价值。

芽胞杆菌菌株产几丁质酶发酵条件的研究

从采自大连地区 2 4份土样中分离筛选到一株产几丁质酶活性较高的芽胞杆菌 (Bacillussp )B 4 1,该菌株产几丁质酶最适的发酵条件为 :碳源为胶体几丁质 ,氮源为酵母浸汁 ,pH7 2 ,温度 4 2℃ ,振荡培养 4天。

淡紫拟青霉MD1几丁质酶活性测定

应用胶体几丁质平板透明圈法和DNS法测定了淡紫拟青霉MD1的几丁质酶活性,首次获得淡紫拟青霉在胶体几丁质平板上的透明圈,DNS法测定MD1几丁质酶活性结果表明,粗酶液无论是否有几丁质诱导,MD1菌株的几丁质酶活力均在第7 d最高,而且几丁质诱导的粗酶液酶活明显比同期未经几丁质诱导的粗酶液酶活高。

一种简便易行的几丁质酶纯化法

传统的纯化微生物产几丁质酶的方法步骤繁琐、不易控制、得率较低。经过实验探索得出一种较简单、快速、并可批量处理的几丁质酶纯化法。将含有几丁质酶的发酵上清液与胶体几丁质混合后离心,几丁质酶随胶体几丁质沉降而与其他成分分离,用蒸馏水洗涤沉淀,再用蒸馏水重悬,放入30℃恒温箱温育72 h,胶体几丁质被完全水解,从而得到纯几丁质酶。此纯化方法条件温和,可保证纯化后的酶保持其生物活性。SDS-PAGE检测及比色法对其纯度检测表明几丁质酶纯化回收率达到88.53%。

更正声明

由于作者疏忽,本刊2022年18卷第2期第42页袁源等“地衣芽孢杆菌几丁质酶在枯草芽孢杆菌中的重组表达及其制备氨基寡糖的研究”一文结果2.2中的最后一句,“以胶体几丁质为底物测定BLCHIA纯酶液的比活为3.68 U∙mg^(−1)”应为“以胶体几丁质为底物测定BLCHIA纯酶液的比活为0.92 U∙mg^(−1)”。

不同方法复壮球孢白僵菌

基于球孢白僵菌继代培养8代后菌株退化严重,LT50由第0代57.26 h上升为107.33 h,采用3种不同的方法对其进行复壮试验。结果表明,连续复壮四代后,感染家蚕复壮法平均毒力提升率最好,其LT50为49.53 h,回复毒力已高于第0代出发菌;其次为胶体几丁质培养基,复壮后LT50为65.80 h,每次复壮的提升率适中且稳定;复壮蚕蛹粉培养基复壮后LT50为71.02 h,连续复壮培养对毒力平均提升率最低而且有较大的波动。综合考虑利用胶体几丁质培养基对退化菌株具有较好的回复效果和很好的稳定性。