胶体金免疫层析快速检测技术及其在水产养殖业中的应用前景

建立快速、准确、简便易行的病害早期快速检测技术,是从事动物疫病防控研究工作者和产业界人士的迫切愿望。自从开辟免疫分析技术以来,越来越多更灵敏、更便捷的免疫分析方法被开发出来,以胶体金免疫层析法为基础建立起来的快速检测试纸,被认为是当前最快捷、高敏感的一种免疫学检测技术。该项技术真正实现了快速简易检测靶目标,并已在畜牧业中得到普及应用,成为当前畜禽病害早期防控的最有效方法之一。本文就该项技术在畜牧兽医领域的研究进展、应用现状、发展前景进行了介绍、分析和讨论,旨在为水产养殖动物病害的早期诊断提供借鉴,以期获得一种适用于水产动物病害的、专用的快速检测新技术和新产品。

牛奶中新霉素残留胶体金免疫层析快速检测技术的研制

建立了一种快速、简单的检测牛奶中新霉素残留量的胶体金免疫层析法,将抗新霉素单克隆抗体-胶体金标记物冻干于微孔板中,将新霉素人工抗原和羊抗鼠抗抗体分别包被在醋酸纤维素膜上作为检测线（T线）和质控线（C线）,T线的新霉素人工抗原与待测牛奶样品中的新霉素竞争结合新霉素单克隆抗体-胶体金标记物,通过T线和C线的显色情况读出结果。试纸条对牛奶样品的检测限为200μg/L,牛奶样品无需稀释,可直接检测,检测时间只需3~5min,与磺胺类、四环素类、氯霉素类等药物均无交叉反应,检测结果重复性好,可作为现场快速筛查牛奶中新霉素残留的有效手段。

烟草黑胫病菌胶体金免疫层析快速检测技术的建立与评价

以烟草黑胫病为研究对象旨在开发一种快速、简单、灵敏的胶体金免疫层析快速检测技术。制备了一种抗烟草黑胫病菌单克隆抗体,并将其应用于胶体金免疫层析试纸研制;在5~10 min就可以检测到病原菌,检测极限为0.1μg/mL抗原。烟草黑胫病菌胶体金免疫层析快速检测技术与常规PCR技术相比,胶体金速测卡检出率略低于常规PCR检测。

基于胶体金免疫层析技术同步快速检测奶茶中的三种毒品成分

该研究基于胶体金免疫层析技术,建立了一种快速灵敏检测奶茶中甲基苯丙胺(methamphetamine,MET)、氯胺酮(ketamine,KET)和可卡因(cocaine,COC)这3种毒品成分的方法。通过优化人工抗原包被浓度、胶体金-单克隆抗体偶联物浓度、免疫反应时间等关键因素,实现奶茶中3种毒品成分的联合检测。结果显示,该方法对MET、KET和COC标准品的检测限分别为1.60、1.59、1.39 ng/mL。该方法可用于奶茶中3种毒品成分的测定,样品平均添加回收率为90%~109%,相对标准偏差<5%。该文建立的多靶标胶体金免疫层析方法具有简单、快速、灵敏、特异等优点,为现场鉴别奶茶中非法添加的MET、KET和COC提供了新思路。

胶体金免疫层析技术在食品快速检测中的应用

胶体金免疫层析技术在食品快速检测中展现出显著优势。该技术通过利用胶体金与抗原或抗体的特异性结合,实现对食品中多种有害物质如药物残留、病原微生物、生物毒素及违禁物质的快速检测。本文对胶体金免疫层析技术进行概述,在此基础上对该技术在食品快速检测中的实际应用进行分析,以期为相关检测人员提供支持。

胶体金免疫层析法快速检测动物肌肉组织中喹乙醇代谢物

目的优化胶体金免疫层析法快速检测动物肌肉组织中喹乙醇代谢物。方法样品中的喹乙醇残留标志物3-甲基喹噁啉-2-羧酸经盐酸水解、乙腈提取、磷酸缓冲盐溶液复溶,用于胶体金试纸条的检测。依据GB 31650-2019《食品安全国家标准食品中兽药最大残留限量》拟定检出限,筛选符合要求的快速检测产品,根据《市场监管总局关于规范食品快速检测使用的意见》(国市监食检规〔2023〕1号)对快速检测产品进行评价,初步确定该方法的性能指标和交叉反应率要求,并与液相色谱-质谱法进行一致性分析。结果该方法适用于猪、鸡、鱼和虾肌肉组织的检测,猪肉的检出限为4μg/kg,鸡肉、鱼肉、虾肉的检出限为0.5μg/kg,方法灵敏度≥95%、特异性≥95%、假阴性率≤5%、假阳性率≤5%;卡巴氧代谢物喹噁啉-2-羧酸的交叉反应率≤8.0%,喹乙醇、卡巴氧、乙酰甲喹、乙酰甲喹代谢物2-(1-羟乙基)-3-甲基喹噁啉-1,4-二氧化物的交叉反应率<0.1%。该方法测定结果与液相色谱-质谱法一致。结论该方法前处理简单、快速准确,适用于喹乙醇残留物的快速筛查与确证,为喹乙醇残留物快速检测的研发与监测提供综合性的技术手段。

同时快速检测蔬菜中百菌清和多菌灵的胶体金免疫层析法

该研究制备分别特异性识别百菌清、多菌灵的两种单克隆抗体,并建立一种同时快速检测蔬菜中百菌清和多菌灵的胶体金免疫层析法。在最适工作条件下,所建立的方法对百菌清、多菌灵的检测限分别为0.08 ng/mL和1.95 ng/mL,线性范围分别为0.08~10.00 ng/mL和1.95~250.00 ng/mL。黄瓜、番茄、包菜3种样品加标回收率为79.2%~112.1%(百菌清)和63.3%~97.5%(多菌灵),变异系数均低于18.9%,试纸条所需检测时间为20 min,可应用于蔬菜中百菌清、多菌灵残留的现场高通量快速筛查。

污染粮油食品的主要真菌毒素及胶体金免疫层析技术在快速检测中的应用

污染粮油食品的真菌毒素主要有黄曲霉毒素、T-2毒素、玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇和伏马菌素B1。胶体金免疫层析技术是20世纪90年代初建立的一种简易、快速的免疫学检测技术,现已广泛应用于残留检测、生物医学等许多领域。本文介绍了污染粮油食品的主要真菌毒素及胶体金免疫层析技术在粮油食品真菌毒素快速检测中的应用,并对其发展前景进行了展望。

胶体金免疫层析技术快速检测蜂蜜中5-羟甲基糠醛

建立快速检测蜂蜜中有毒物质5-羟甲基糠醛(HMF)的胶体金免疫层析试纸条。文中采用免疫竞争法,将制备的胶体金颗粒与抗HMF单克隆抗体结合成抗HMF-金标复合物标记在胶体金结合垫上,并将HMF-载体蛋白包被在硝酸纤维素膜上作为检验线(T线),其与待测蜂蜜中HMF竞争结合胶体金标记的抗HMF单克隆抗体,并能以颜色直观显示检测的定性结果。结果显示:若蜂蜜液中HMF的含量<40 mg/kg,则过量的胶体金标记物与T线上HMF-载体蛋白特异性结合形成紫红色条带,即阴性;若蜂蜜液HMF含量≥40 mg/kg,不能产生紫红色条带,即阳性。该方法是对分光光度法及HPLC法测定蜂蜜中HMF含量的补充,并且该法灵敏度高,操作简便快速等优点。

基于知识图谱分析胶体金免疫层析技术在食品检测领域中的研究进展

目的:全面深度透视胶体金免疫层析技术在我国食品检测领域的研究现状和发展趋势。方法:在中国知网搜索整理了近20年胶体金免疫层析技术在我国食品检测领域中的研究论文215篇,运用文献计量学理论,采用COOC软件进行可视化分析。通过发文年代、发文期刊、发文机构、作者、关键词几个维度,利用词云、共现网络、树形图、突现图等知识图谱,分析胶体金免疫层析技术在我国食品检测领域的研究进展。结果:根据发文年代划分了胶体金免疫层析技术在我国食品检测领域中的发展进程,通过共现网络提炼出当前头部研究机构和研究团队,对关键词进行发掘,综述了胶体金免疫层析技术检测目标物、产品等信息,并预测了今后发展的热点。结论:运用文献计量学方法,构建可视化的知识图谱,能更直观地归纳出该领域发展的特点及未来发展趋势,为该领域的研究者和使用者提供决策依据和参考借鉴。

胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用

随着食品安全问题的日益严重,传统的检测方法已难以满足快速、高灵敏度和高特异性的检测需求,胶体金免疫层析技术因其操作简便、检测快速而受到广泛关注。该技术主要是利用胶体金标记的抗体进行定性或半定量检测,能够在较短时间内实现食品中污染物、过敏原及添加剂的检测。基于此,文章简要分析了胶体金免疫层析技术的原理和特点,并从胶体金的制备方法出发,提出了胶体金免疫层析技术在食品检测中的具体应用措施。

胶体金免疫层析技术在真菌毒素快速检测中的应用

胶体金免疫层析技术具有快速、简便、特异、敏感等特点,弥补了真菌毒素传统检测方法的不足,适用于真菌毒素快速现场筛选。本文主要介绍了胶体金免疫层析技术的原理及其在真菌毒素快速检测中的应用及发展前景。

胶体金免疫层析法快速检测山药中的咪鲜胺

目的建立胶体金免疫层析法快速检测咪山药基质中的鲜胺残留量的方法。方法优化前处理过程中提取剂的pH和用量,将胶体金免疫层析快速检测方法应用于山药基质,验证方法的检出限、特异性、假阴性率和假阳性率,并通过液相色谱-串联质谱法确认方法的准确性。结果胶体金免疫层析法快速检测山药中咪鲜胺的检出限为0.3 mg/kg,假阳性率为2%,假阴性率为0;与咪鲜胺-脱氨基咪唑、咪鲜胺锰盐和咪鲜胺-脱咪唑甲酰胺基的交叉反应率分别为200%、100%、100%,可同时检测咪鲜胺及含有2,4,6-三氯苯酚部分的代谢物,实际样本的检测结果与液相色谱-串联质谱法的符合率为88.2%。结论本方法操作简便,检测速度快,准确性高,可应用于基层行政、农产品交易市场或餐饮配送公司快速检测实验室,从源头上保障食品安全。

胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用

胶体金免疫层析技术具有操作简单、价格低廉、特异性和灵敏度较高、肉眼易判断、检测时间短等特点,非常适合用于食品安全现场快速检测。本文从动物源性食品及植物源性食品两方面,对利用胶体金免疫层析技术进行食品安全基层监管以及食品企业原料现场快速检测应用研究进行了综述,并对胶体金免疫层析技术应用发展进行了展望。

水产品中氯霉素残留胶体金免疫层析法快速检测技术

氯霉素是一种广谱抗生素，抗菌效果好且价格低廉，曾广泛应用于预防和治疗水产、畜牧等动物疾病。但是，随着研究的深入，发现氯霉素存在严重毒副作用，可在动物性食品中残留并通过食物链在人体内富集，可引起再生障碍性贫血、粒状白细胞缺乏症、新生儿灰色综合症等疾病，而且低浓度药物残留会诱发致病菌的耐药性，严重危害人类健康。

胶体金免疫层析技术及其在食品安全快速检测中的应用

胶体金免疫层析技术(Gold immunochromatogra-phy assay,GICA)是一种将胶体金标记技术、免疫检测技术和层析分析技术等多种方法有机结合在一起的固相标记免疫检测技术。该技术具有简单、快速、准确和无污染等优点,自1971年Faulk W P和Taylor G M首次建立,便因其众多优点被广泛应用于医学检测、食品安全及动物疫病诊断等各领域。本文详述了胶体金免疫层析技术的发展及其在食品安全快速检测中的应用。

应用胶体金免疫层析技术快速检测杜克雷嗜血杆菌方法的建立

目的建立快速检测杜克雷嗜血杆菌的胶体金免疫层析试验(GICA)系统。方法采用胶体金颗粒标记抗rHgbA-IgG抗体,制备出免疫胶体金;采用双抗体夹心模式建立适用于杜克雷嗜血杆菌检测的胶体金免疫层析技术;以ELISA试验作为平行对照,对其检测的灵敏度及特异性进行评价。结果以该方法检测杜克雷嗜血杆菌、流感嗜血杆菌以及其他7种生殖器溃疡相关细菌,杜克雷嗜血杆菌显示强阳性,其余8种均为阴性,无交叉反应发生,GICA与ELISA实验结果相符合;GICA和ELISA检测灵敏度分别为:纯化抗原实验GICA为6.25ng/mL,ELISA为1.56ng/mL;细菌学实验GICA为2×106cfu/mL,ELISA为2×105cfu/mL;模拟样本检测实验GICA为1×107cfu/mL,ELISA为1×106cfu/mL。GICA能在15min内完成检测,稳定性良好。结论建立的检测杜克雷嗜血杆菌的GICA系统能够特异、快速检测杜克雷嗜血杆菌。该检测系统的灵敏度还不能满足所有临床标本的需要,有待于进一步研究。

胶体金免疫层析技术同时检测芹菜中的4种农药

胶体金免疫层析技术同时检测芹菜中毒死蜱、氯氟氰菊酯、克百威和氟虫氰4种农药,具有操作简单、价格低廉、易于推广等特点。本试验考察了胶体金免疫层析试纸条的准确度、灵敏度及特异性等参数,结果显示,胶体金免疫层析技术检测芹菜中农药残留具有针对性强、准确性高、灵敏度适中、特异性良好的特点,是提高基层农产品质量安全相关机构监管能力的重要技术手段。

免疫层析技术在食物过敏原快速检测中的应用进展

食物过敏是重要的公共卫生问题之一,严重威胁着过敏人群的健康,为保障过敏人群食品安全,针对食物过敏原开展检测方法研究尤为必要。近年来,针对食物过敏原的快速检测技术发展迅速,其中,免疫层析技术因其具有检测效率高、成本低、特异性强等优点,在快速检测中得到广泛应用。该文简述了主要食物过敏原及免疫层析技术的检测原理,对食物中植物源性食物过敏原(花生、大豆、小麦和树生坚果过敏原)和动物源性食物过敏原(牛奶、鸡蛋、甲壳类和鱼类过敏原)的免疫层析检测方法进行系统总结,并对其发展方向进行展望。

基于金纳米球的肠炎沙门菌SERS免疫层析快速检测技术

为实现肠炎沙门菌的快速定量分析,采用Tris辅助柠檬酸钠还原法制备新型胶体金并利用Au-S配位作用在纳米金球表面修饰一层4-巯基苯甲酸(4-MBA)拉曼信号分子,然后以此为标记材料建立肠炎沙门菌表面增强拉曼(surface-enhancement of Raman scattering,SERS)免疫层析检测技术,并对其灵敏度、特异性和重复性进行考察。结果表明:建立的SERS免疫层析技术对肠炎沙门菌的可视化最低检测限(LOD)为10^(6) CFU/mL,而通过拉曼信号检测时LOD为10^(5) CFU/mL,灵敏度比裸眼观察提高了10倍。在10^(5)~10^(8) CFU/mL的浓度范围可根据标准曲线y=30.23×exp(-x/-147)-215.83(R^(2)=0.995)对肠炎沙门菌进行定量分析。该SERS免疫层析技术与鼠伤寒沙门菌、鸡白痢沙门菌、甲型副伤寒沙门菌等多种血清型沙门菌和大肠杆菌、副溶血弧菌等常见病原无交叉反应,特异性良好。同一批次的不同试纸条和不同批次的试纸条对相同样品的检测结果基本一致,重复性良好。以粪便和鸡蛋壳为基质的加标试验回收率在94.7%~104.9%之间,回收率良好。结果表明,基于金纳米颗粒的肠炎沙门菌SERS免疫层析快速检测技术灵敏度较高,特异性强,重复性好,能弥补传统胶体金试纸条无法定量的不足,可用于肠炎沙门菌的快速定量检测。