胶体金免疫层析法快速检测动物源食品中的诺氟沙星

胶体金免疫层析法具有高特异性、高灵敏度、高重复性等特点,能够准确地检测出样品中的目标物,在快速检测领域具有广泛应用。本研究将胶体金免疫层析法用于快速检测动物源食品(猪肉、鸡肉、鱼肉、虾肉、鸡蛋)中的诺氟沙星(Norfloxacin,NOR)残留,对方法进行验证,相对准确度为97.0%。方法的检出限为2μg/kg,检测性能强。在上述5种不同基质样品中,NOR胶体金快速检测方法的灵敏度为99%、特异度为98%、假阳性率为2%、假阴性率为1%。该方法简单快速、灵敏准确,适于复杂基质中NOR的快速精准检测。

吡虫啉和啶虫脒胶体金免疫层析法试纸条性能评估及应用效果探究

目的研究吡虫啉和啶虫脒胶体金免疫层析法试纸条在不同基质中残留量检测的应用效果。方法实验考察了市场上主要流通的5种不同品牌的胶体金免疫层析法试纸条在蔬菜、水果和茶鲜叶基质中的检出限、灵敏度、交叉反应率、特异性、假阳性和假阴性率。结果各品牌胶体金试纸条在3种不同类型基质(白菜、苹果和茶鲜叶)中,检出限浓度水平有假阴性出现,其余浓度水平灵敏度较好;特异性和交叉反应性,结果均为阴性;假阳性率和假阴性率考察中,假阳性率为0%,但有假阴性情况出现。结论胶体金免疫层析法在检测吡虫啉、啶虫脒农药残留时具有简便快捷的特点,在蔬菜、水果基质的检测中,判定结果较为准确可靠;在茶叶基质中,由于基质效应的影响,出现假阴性的机率较高。

酶联免疫吸附法与胶体金免疫层析法对人类免疫缺陷病毒抗体的检测价值分析

目的探析酶联免疫吸附法(ELISA)与胶体金免疫层析法(GICA)对人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体的检测价值。方法选取2020年8月至2021年8月于枣庄市立医院接受HIV抗体检测的320例疑似艾滋病(AIDS)患者作为研究对象,均实施ELISA及GICA检测。以实验室病理结果为金标准,比较两种检测方法HIV阳性病例检出情况及诊断准确度、灵敏度、特异度。结果实验室病例组织活检结果显示,阴性285例,阳性35例;GICA检测阴性298例,阳性22例,与实验室病理组织活检结果相比,假阳性5例,假阴性18例;ELISA检测阴性282例,阳性38例,与实验室病例组组活检结果相比,假阳性4例,假阴性1例。ELISA诊断准确度为98.44%、灵敏度为97.14%,高于GICA的92.81%、48.57%,差异有统计学意义(P<0.05),两组特异度比较差异无统计学意义。结论与GICA相比,ELISA检测HIV抗体的准确度、灵敏度较高,因此,可将ELISA作为检测HIV抗体的主要方法。

胶体金免疫层析法高通量测定动物肌肉组织中多兽药残留

[目的]本文旨在建立一种胶体金免疫层析技术高通量测定猪肉、鸡肉组织中8种磺胺类、3种四环素类、2种喹诺酮类和甲氧苄啶药物残留的方法。[方法]动物肌肉组织中磺胺类、四环素类、喹诺酮类和甲氧苄啶经磷酸缓冲液提取,并经含Tween 20的磷酸缓冲液稀释后,与胶体金标记的单克隆抗体结合,抑制抗体与硝酸纤维素膜检测线(T线)上的抗原结合,从而导致T线颜色变化。通过比较T线和质控线(C线)颜色深浅,对试样中多兽药残留进行定性判定。[结果]本试验优化了pH值、抗体添加量、抗原包被量、Tween 20添加量和冻干保护剂种类等关键因素,磺胺类、四环素类、喹诺酮类和甲氧苄啶等药物的检出限分别为50、100、50、35μg·kg^(-1),灵敏度≥97%,假阳性率≤2%,假阴性率≤3%,且与现有标准方法检测结果一致。[结论]该方法操作简便,灵敏度和准确度高,检测时间短且稳定性好,可用于动物肌肉组织中多兽药残留的高通量快速检测。

胶体金免疫层析法在韭菜农药残留检测中的应用研究

为验证胶体金免疫层析技术在韭菜农残检测中的可靠性和适用性,选用3种不同的农残胶体金免疫层析快速检测产品(胶体金农残快检试剂)检测韭菜中腐霉利、吡虫啉、啶虫脒、多菌灵、克百威、三唑磷等6种农药残留,并将其与色谱质谱串联法进行比较,对其灵敏度、假阳性率及假阴性率进行验证评价。结果表明,在0.5 LOD的农药添加水平下,3种胶体金农残快检试剂对实验室空白样品的检测结果均为阴性;但当添加水平达到LOD或MLR时,其检测结果均为阳性,证明胶体金农残快检试剂灵敏度较高,且符合国家标准食品中农药最大残留限量要求;实验室加标试验和实际样品比对试验结果显示,胶体金农残快检技术与色谱质谱联用法的检测结果均无显著性差异(χ^(2)<3.84),其假阴性率和假阳性率均为0。故胶体金免疫层析法可在韭菜的农残快速检测中应用。

酶联免疫法与胶体金层析法对HIV抗体检测结果的比较

目的评估酶联免疫法与胶体金层析法对HIV抗体的检测性能。方法2021—2022年对3423份血液样本同时用酶联免疫法和胶体金层析法检测,以免疫印迹法为金标准确证结果。结果酶联免疫法检出有反应样本5份,胶体金层析法检出有反应样本9份,经免疫印迹实验确证阳性4份。酶联免疫法假阳性1份,假阳性率0.03%;胶体金层析法假阳性5份,假阳性率0.15%,2种方法差异无统计学意义(χ^(2)=2.64,P=0.26)。2种方法检测HIV抗体的灵敏度均为100%,酶联免疫法的特异度(99.97%)略高于胶体金层析法(99.85%),Kappa值均≥0.6,检测一致性较好。结论酶联免疫法和胶体金层析法均可用于HIV抗体检测,酶联免疫法的假阳性率更低,胶体金层析法操作更为简便,可结合实际需要选择合适的方式进行HIV筛查。

胶体金免疫层析法快速检测动物肌肉组织中喹乙醇代谢物

目的优化胶体金免疫层析法快速检测动物肌肉组织中喹乙醇代谢物。方法样品中的喹乙醇残留标志物3-甲基喹噁啉-2-羧酸经盐酸水解、乙腈提取、磷酸缓冲盐溶液复溶,用于胶体金试纸条的检测。依据GB 31650-2019《食品安全国家标准食品中兽药最大残留限量》拟定检出限,筛选符合要求的快速检测产品,根据《市场监管总局关于规范食品快速检测使用的意见》(国市监食检规〔2023〕1号)对快速检测产品进行评价,初步确定该方法的性能指标和交叉反应率要求,并与液相色谱-质谱法进行一致性分析。结果该方法适用于猪、鸡、鱼和虾肌肉组织的检测,猪肉的检出限为4μg/kg,鸡肉、鱼肉、虾肉的检出限为0.5μg/kg,方法灵敏度≥95%、特异性≥95%、假阴性率≤5%、假阳性率≤5%;卡巴氧代谢物喹噁啉-2-羧酸的交叉反应率≤8.0%,喹乙醇、卡巴氧、乙酰甲喹、乙酰甲喹代谢物2-(1-羟乙基)-3-甲基喹噁啉-1,4-二氧化物的交叉反应率<0.1%。该方法测定结果与液相色谱-质谱法一致。结论该方法前处理简单、快速准确,适用于喹乙醇残留物的快速筛查与确证,为喹乙醇残留物快速检测的研发与监测提供综合性的技术手段。

有机磷农药胶体金免疫层析竞争法快速检测方法的建立

目的建立检测蔬果及饮用水等样本中的氧乐果、辛硫磷、敌百虫、对硫磷等有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法并研制检测试纸条。方法N-羟基琥珀酰亚法合成有机磷人工抗原;制备乙酰胆碱酯酶抗原及纯化及其抗血清制备、纯化与标记;优化试纸条工作参数,并进行性能测试。结果抗血清效价在1∶32~1∶64之间,蛋白含量约为2 mg/mL。纯化后的多克隆抗体在相对分子质量(M r)25000和55000处出现目的条带,纯度较好;试纸条反应时间在5~10 min,样本检测限为200 ng/mL,特异性及准确性良好,试纸条有效期为6个月。结论建立了简便快速检测多种有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法,适合大量样本的现场初筛。

胶体金免疫层析法同步快速测定畜禽肉中3种兽药残留

该文旨在建立一种胶体金免疫层析技术同步测定猪肉和鸡肉组织中呋喃唑酮代谢物、呋喃西林代谢物、氯霉素药物残留的方法。动物肌肉组织中呋喃唑酮代谢物、呋喃西林代谢物、氯霉素经酸化、衍生化及乙酸乙酯提取,并经含吐温-20的Tris-HCl缓冲液稀释后,与胶体金标记的单克隆抗体结合,抑制抗体和硝酸纤维素膜检测线(T线)上的抗原结合,从而导致T线颜色变化。通过比较T线和质控线(C线)颜色深浅,对试样中多兽药残留进行定性判定。试验优化了pH值、抗体添加量、抗原包被量、吐温-20添加量、衍生化试剂浓度和冻干保护剂种类等关键因素,并对检测卡的灵敏度、特异性和稳定性进行检测。结果显示,所建立的免疫层析方法可在35 min内检出猪肉和鸡肉中呋喃西林代谢物、呋喃唑酮代谢物和氯霉素药物,检出限分别为0.5、0.5、0.1μg/kg,灵敏度≥98%,假阳性率≤2%,假阴性率≤2%,稳定性可达到1年,且与现有标准方法检测结果一致。该方法操作简便、特异性强、灵敏度和准确度高,检测时间短且稳定性好,可用于动物肌肉组织中多兽药残留的高通量快速检测。

胶体金免疫层析法检测猕猴桃中氯吡脲残留的应用研究

以陕西省周至县猕猴桃8个主产镇的猕猴桃为研究对象,采用胶体金免疫层析法对猕猴桃中氯吡脲农药残留进行快速检测,将胶体金免疫层析法快速检测呈阳性的样品用三重四极杆液相色谱质谱联用仪检测来验证方法的可靠性。使用1 g皮作为样品进行前处理,得出的阳性率高,假阳性率也高,而使用果皮和果肉1∶9匀浆后称取1 g作为样品,得到的阳性率较低,假阳性率也大大降低。研究结果表明,使用果皮和果肉1∶9匀浆后称取1 g作为样品的胶体金免疫层析法快速检测结果与液相色谱质谱联用法检测结果更匹配,对胶体金快速检测猕猴桃中氯吡脲农药残留前处理过程的具体实施具有指导意义。

胶体金免疫层析法检测皮肤癣菌的临床适用性评估

目的评估与直接镜检相比,胶体金免疫层析法诊断皮肤癣菌感染的临床适用性。方法收集346例由门诊医生怀疑皮肤癣菌感染的皮屑或甲屑标本,将其分为3份,分别行直接镜检和免疫层析抗原检测,两种方法结果不一致者行PCR。比较两种方法诊断结果的一致率和不一致率。结果抗原检测和直接镜检的阳性检出率分别为76.59%、69.36%。346例临床样本中,293例抗原检测与直接镜检结果一致,一致率为84.7%;53例两种方法检测结果不一致,不一致率为15.3%。不一致的临床样本中46份行PCR进一步鉴定,分别有39例和7例与抗原检测和直接镜检结果相同。即皮肤癣菌抗原检测与PCR校正后的直接镜检结果一致(阳性或阴性)的标本数为332份,一致率为96.0%,不一致率为4.0%。结论免疫层析法是简单、可靠的真菌检测方法,灵敏度比直接镜检高,有着很好的临床实用价值。

胶体金免疫层析法与酶联免疫吸附试验在梅毒螺旋体特异性抗体检测中的应用分析

目的探究梅毒螺旋体特异性抗体检测中胶体金免疫层析法(GICA)与酶联免疫吸附试验(ELISA)的应用价值。方法选取2020年7月至2022年9月我院收治的80例疑似梅毒感染患者,均接受GICA、ELISA、TPPA检查。以TPPA结果为“金标准”,分析GICA、ELISA检查结果;分析GICA、ELISA诊断价值,并计算一致性进行;另对比GICA、ELISA检测满意度。结果相比于ELISA检测,GICA检测诊断灵敏度、准确度及阴性预测值均较高(P<0.05)。一致性检验,GICA诊断一致性尚可(kappa值=0.771,P=0.000),ELISA诊断一致性不佳(kappa值=0.385,P=0.000)。相比于ELISA检测,GICA检测满意度较高(P<0.05)。结论GICA与ELISA均可在梅毒螺旋体特异性抗体中进行检测,但GICA检测应用价值更高,一致性较强,且患者满意度较高,可将其作为首选检测方法。

应用胶体金免疫层析法快速检测甜椒中5种农药残留

采用胶体金免疫层析技术(Colloidal Gold Immunochromatographic,GICA)检测甜椒中的毒死蜱、克百威、氟虫腈、灭多威、啶虫脒5种农药,并对其检测结果的准确性、特异性进行测定和评价,采用液质联用仪(UPLC-MS/MS)进行确证。实际样本的胶体金免疫层析法检测结果与液相色谱-质谱联用法检测结果基本一致。胶体金免疫层析法具有灵敏度高、成本低、速度快、操作简单等优点,适合推广使用。

胶体金免疫层析法快速检测山药中的咪鲜胺

目的建立胶体金免疫层析法快速检测咪山药基质中的鲜胺残留量的方法。方法优化前处理过程中提取剂的pH和用量,将胶体金免疫层析快速检测方法应用于山药基质,验证方法的检出限、特异性、假阴性率和假阳性率,并通过液相色谱-串联质谱法确认方法的准确性。结果胶体金免疫层析法快速检测山药中咪鲜胺的检出限为0.3 mg/kg,假阳性率为2%,假阴性率为0;与咪鲜胺-脱氨基咪唑、咪鲜胺锰盐和咪鲜胺-脱咪唑甲酰胺基的交叉反应率分别为200%、100%、100%,可同时检测咪鲜胺及含有2,4,6-三氯苯酚部分的代谢物,实际样本的检测结果与液相色谱-串联质谱法的符合率为88.2%。结论本方法操作简便,检测速度快,准确性高,可应用于基层行政、农产品交易市场或餐饮配送公司快速检测实验室,从源头上保障食品安全。

胶体金免疫层析法检测叶菜中联苯菊酯残留的应用

本文采用胶体金免疫层析法检测叶菜基质中联苯菊酯农药残留量,测试了检测灵敏度、特异性,并优化了检测过程的样品重量、提取液用量及稀释方法、固液分层方式及时间、孵育时间、反应时间等前处理方法条件。结果表明,胶体金法检测叶菜中联苯菊酯的检出限为4.0 mg/kg,与6种拟除虫菊酯类农药均无交叉反应。本文简化了操作步骤,采用静置的分层方式替代原有的离心操作,降低对场地、设备、器具的要求,为后续开发使用低精度量器进行前处理操作的产品提供技术基础。

不同品牌胶体金免疫层析试纸条/卡检测牛羊布鲁氏菌病的效果分析

为比较不同品牌胶体金免疫层析试纸条/卡(简称试纸条/卡)检测牛羊布鲁氏菌病的效果,利用抗体布鲁氏菌阴阳性血清,对6种品牌试纸条/卡的准确性及灵敏度进行观察比较;同时按不同试纸条/卡操作方法对经虎红平板凝集试验(RBPT)初筛和竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)复核的临床牛羊血清样品进行检测比较。结果显示:不同试纸条/卡对布鲁氏菌企业标准阴阳性血清检出率均为100%,其中2种试纸条/卡敏感性高,对不同稀释倍数阳性血清均可检出;试纸条/卡对临床阴性血清均100%检出,但对临床阳性血清样品的检测结果差异较大,其中对羊阳性血清样品的检出率为5.88%~70.59%,对牛阳性血清样品为50.0%~100.0%。结果表明,不同品牌试纸条/卡在布病检测时存在一定差异。建议使用试纸条/卡进行布鲁氏菌病初筛后,应结合国家相关布病诊断技术进行复检,以确保检测结果的准确性。

胶体金免疫层析法应用于快速检测CRE的碳青霉烯酶

目的评估胶体金免疫层析法(GICA)快速检测耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)的碳青霉烯酶的临床应用价值。方法对2016年3月至2021年11月柳州地区非重复的CRE临床分离株54株,采用碳青霉烯酶表型实验初步筛查,多重实时定量PCR复核。上述方法无法明确耐药基因的菌株,采用WGS进行检测,同时GICA快速检测CRE的碳青霉烯酶类型。以多重实时定量PCR为参考方法,评估GICA快速检测CRE的碳青霉烯酶的准确性。结果本次收集的CRE菌株为54株,主要是大肠埃希菌(27株,50.0%)、肺炎克雷伯菌(14株,25.9%)。碳青霉烯酶表型实验结果显示单产金属酶的CRE有50株(92.6%),单产丝氨酸酶的CRE有2株(3.7%),同时产金属酶与丝氨酸酶的CRE有2株(3.7%)。GICA结果与多重实时定量PCR的检测结果一致,显示54株CRE中有50株(92.6%)NDM阳性,2株(3.7%)KPC阳性,1株(1.9%)NDM+KPC阳性,1株(1.9%)NDM+OXA⁃48阳性。GICA在快速检测CRE碳青霉烯酶类型与多重荧光定量PCR的结果一致性为100%。GICA对NDM、KPC及OXA⁃48阳性菌株酶型检测的准确性均为100%。结论GICA在检测CRE碳青霉烯酶中具有快速简便及准确度高的优点,助力临床精准治疗CRE感染具有重要的应用价值。

酶联免疫吸附法、胶体金免疫层析法在人类免疫缺陷病毒检测中的应用价值

目的:分析酶联免疫吸附法(ELISA)、胶体金免疫层析法在人类免疫缺陷病毒(HIV)检测中的应用价值。方法:选取2022年5月—2024年5月于南京市高淳区疾病预防控制中心门诊进行HIV检测的受试者950例作为研究对象,抽取受试者静脉血,采用ELISA和胶体金免疫层析法检测HIV。以免疫印迹试验结果为“金标准”,比较ELISA、胶体金免疫层析法检测HIV的效能。结果:950例患者免疫印迹试验结果为HIV阳性10例,阴性940例。ELISA检测HIV的准确率、灵敏度、特异度、阳性预测值均高于胶体金免疫层析法(P<0.05)。结论:与胶体金免疫层析法相比,ELISA在HIV检测中的应用价值更高,可用于临床HIV感染筛查。

胶体金免疫层析速测卡与液质联用法检测豇豆中农药残留

胶体金免疫层析速测卡测定农药残留具有针对性强、操作简便、能够半定量等优点。本文通过胶体金免疫层析速测卡与液质联用法检测豇豆中的阿维菌素、噻虫嗪、噻虫胺、灭多威、克百威、啶虫脒和氟虫腈7种农药并进行对比分析,对胶体金免疫层析速测卡准确性和灵敏度进行确证。结果表明,胶体金免疫层析速测卡检测豇豆与液质联用法定量检测结果基本一致,准确性和灵敏度较好。

胶体金免疫层析法测定生乳中抗生素含量的不确定度

[目的]研究胶体金免疫层析法测定生乳中抗生素——氯霉素、氟喹诺酮类含量读数结果的不确定度评定。[方法]氯霉素含量测定采用“易瑞乳中氯霉素单检快速检测试纸条”、氟喹诺酮类含量测定采用“易瑞乳中氟喹诺酮类抗生素快速检测试纸条”,通过分析不确定度来源,构建数学模型,分析、评定模型每一部分,合成相对标准不确定度,并进一步扩展,得出生乳中抗生素——氯霉素、氟喹诺酮类含量的扩展不确定度。[结果]均取置信度为95%时,得到生乳中抗生素含量读数结果分别为:X(氯霉素)=3.20±0.059 6,取k=2,扩展不确定度U=0.059 6、X(氟喹诺酮类)=3.00±0.059 4,取k=2,扩展不确定度U=0.059 4。[结论]试验过程的不确定度主要来源于样品重复性、取样量、试纸读数仪、结果计算引入不确定度。该方法可为免疫分析法(胶体金免疫层析法)测定生乳中抗生素含量的不确定度评定提供参考。