胶体金免疫层析定性检测试剂的质量控制与评价

目的:探讨胶体金免疫层析定性检测试剂质量控制技术关键要求,为生产企业、检验机构质量控制及评价提供参考,有效地促进该类体外诊断试剂质量水平的提高。方法:结合胶体金免疫层析定性检测试剂质量标准要求及分类管理,对该类试剂质量的关键性能要素进行剖析,提出相应建议,提高试剂质量。结果与结论:质量控制与评价是贯穿产品全流程的核心要素,膜条宽度、液体移行速度、阴性符合率、阳性符合率、检出限、重复性是胶体金免疫层析定性检测试剂质量控制及评价的关键性能指标,对于试剂的质量至关重要。相关生产研发企业要合理设计性能要求,完善质量管理体系;检验机构要根据产品性能要点做好质量评价;监管部门要根据行业需要和监管需要,加快标准制修订工作,加强上市后监管;从生产、检验及监管各环节对这些关键性能指标进行控制,提高试剂的质量标准,从而满足临床和监管的需求。

胶体金免疫层析法同步快速测定畜禽肉中3种兽药残留

该文旨在建立一种胶体金免疫层析技术同步测定猪肉和鸡肉组织中呋喃唑酮代谢物、呋喃西林代谢物、氯霉素药物残留的方法。动物肌肉组织中呋喃唑酮代谢物、呋喃西林代谢物、氯霉素经酸化、衍生化及乙酸乙酯提取,并经含吐温-20的Tris-HCl缓冲液稀释后,与胶体金标记的单克隆抗体结合,抑制抗体和硝酸纤维素膜检测线(T线)上的抗原结合,从而导致T线颜色变化。通过比较T线和质控线(C线)颜色深浅,对试样中多兽药残留进行定性判定。试验优化了pH值、抗体添加量、抗原包被量、吐温-20添加量、衍生化试剂浓度和冻干保护剂种类等关键因素,并对检测卡的灵敏度、特异性和稳定性进行检测。结果显示,所建立的免疫层析方法可在35 min内检出猪肉和鸡肉中呋喃西林代谢物、呋喃唑酮代谢物和氯霉素药物,检出限分别为0.5、0.5、0.1μg/kg,灵敏度≥98%,假阳性率≤2%,假阴性率≤2%,稳定性可达到1年,且与现有标准方法检测结果一致。该方法操作简便、特异性强、灵敏度和准确度高,检测时间短且稳定性好,可用于动物肌肉组织中多兽药残留的高通量快速检测。

胶体金免疫渗滤技术检测棘球蚴病抗体试剂盒的研究

应用胶体金免疫渗滤技术检测已确诊的棘球蚴病患者血清抗体 ,从 6 5例患者中检出阳性 5 3例 ,阴性 12例 ,阳性符合率为 81.5 % ,敏感性为 84.4% ;用该技术对 10 7例非棘球蚴病对照血清检测 ,特异性达 93 .0 % ,诊断效率达 78.5 %。认为胶体金免疫渗滤技术为一种较好的棘球蚴病抗体检测方法。

胶体金免疫层析产品快速测定水产品中的氯霉素残留

分析比较了3种测定水产品中氯霉素残留的商品化胶体金快速检测产品,其灵敏度、精密度、符合性和稳定性均能满足目前对氯霉素监控的限量要求。胶体金免疫产品操作简单、结果准确、重复性好,适合水产品中氯霉素残留的现场筛选。

水样中左旋18-甲基炔诺酮的胶体金免疫层析试剂条的研制

研制了一种检测水样中左旋18-甲基炔诺酮(LNG)含量的胶体金免疫层析试剂条。基于包被抗原和检测物对金标抗体的竞争反应,通过可目测的胶体金标记物而得到直观的检测结果。试剂条对LNG的检测,灵敏度为10 ng.m l-1,在10m in内显示结果;与己烯雌酚、雌三醇、17(-雌二醇、17β-雌二醇、雌酮、甲泼尼龙、泼尼松龙和克伦特罗无交叉反应;加标水样分别用试剂条和ELISA检测,结果一致;在8周内检测效果无明显改变。所制备的试剂条具有灵敏、快速、特异、稳定性好的特点,适合现场快速检测。

尿HCG测定中放射免疫分析与胶体金层析法的比较

采用胶体金免疫层析测定(GICA)和放射免疫分析法(RIA)对148份育龄妇女随机尿HCG浓度进行测定并对两分析方法进行比较。结果表明:GICA试条对随机尿HCG的检测范围为120～427 570 U/L,灵敏度为120IU/L,当尿HCG浓度大于427570IU/L时,该试条出现带现象;RIA的灵敏度为25IU/L,没有带现象。胶体金免疫层析试条具有操作简单、快速等优点,与放射免疫法相比,存在灵敏度低、带现象和不能定量等问题,在临床应用中应加以注意。

胶体金免疫层析法测定尿HCG的评价

目的对胶体金免疫层析测定试条检测随机尿HC-G的结果进行分析与评价。方法采用胶体金免疫层析测定法和放射免疫分析法对120份育龄妇女随机尿HCG进行测定。结果胶体金免疫层析试条对随机尿HCG的检测范围为120.0～427570mIU/ml,灵敏度为120.0mIU/ml,当尿HCG浓度大于427,570mIU/ml时,该试条出现带现象,与尿中LH无交叉反应。结论胶体金免疫层析试条具有操作简单、快速等优点,与放射免疫法相比,存在灵敏度低和带现象问题,在日常应用中应加以注意。

不同品牌胶体金免疫层析法试剂检测原料乳中氟苯尼考的研究

氟苯尼考(Florfenicol),又名氟甲砜霉素,是一种新的兽医专用氯霉素类广谱抗菌药,具有吸收性好、体内分布广、广谱抗菌、安全高效等特点,且对敏感菌所导致的畜禽细菌性疾病有显著的治疗效果,故其作为氯霉素的替代物被广泛用于治疗畜禽及水产品的细菌性疾病。

囊虫IgG胶体金诊断试剂盒(层析法)的研制和考核

目的 在国内外率先开发成功用于囊虫病诊断的IgG金标层析法 (一步法 )诊断试剂盒。方法 采用独特制备猪囊尾蚴囊液抗原的方法 ;先进制备胶金试剂盒工艺并以比利时提供的囊虫IgG试剂盒 (ELISA)做参照。 结果 产品经中国药品生物制品检定所检定合格。对试剂盒的特异性、敏感性进行了临床考核。其敏感性为 93 .2 3 % ,特异性为 97.3 7% ,该试剂盒检测包虫血清的交叉反应率为 4 5 .0 0 % ,与血吸虫、肝吸虫、肺吸虫等寄生虫病人血清无交叉反应。结论 该试剂盒敏感性、特异性良好 ,操作简单、快速 ,结果判读容易 ,特别适用于基层和现场应用。

检测丁丙诺啡的胶体金标记单克隆抗体免疫试剂盒研制

目的采用免疫竞争法原理,建立一种简便快速检测丁丙诺啡的方法。方法将20nm胶体金颗粒标记的抗丁丙诺啡单克隆抗体,均匀浸在吸水玻璃纤维上,将丁丙诺啡-BSA和纯化后的羊抗鼠IgG多克隆抗体在硝酸纤维薄膜分别划1mm宽的检测线(T线)和质控线(C线),制成丁丙诺啡胶体金标记单克隆抗体免疫层析检测条,并组装成检测板。结果以GC/MS为标准对照,100例样品检测结果显示,本检测板的准确率为99.0%。丁丙诺啡胶体金标记单克隆抗体免疫层析检测板在对45种药(毒)物的测试中,仅识别丁丙诺啡及其主要代谢产物。结论丁丙诺啡胶体金标记单克隆抗体免疫层析检测板在5min内可检出样品中的丁丙诺啡及其代谢物,检测丁丙诺啡的阈值为100ng/mL。

基于胶体金免疫层析试剂卡的水果中三唑磷残留检测方法优化

通过研究样品用量、提取剂用量及稀释方法、分层方式及时间、孵育时间、反应时间等条件,优化检测水果中三唑磷残留的胶体金免疫层析试剂卡方法,并在13种水果基质中进行验证。结果表明,在保证原有检出限(15μg/kg)不变的情况下,简化了操作步骤,省去了离心机的使用,缩短了单个样品的检测时长,并在13种水果中验证有较好的实用性。优化后的三唑磷胶体金免疫层析试剂卡检测方法更加简便、快捷,可应用于水果中三唑磷的基层现场快速检测。

牛奶中万古霉素残留的胶体金免疫层析法测定试验

万古霉素（vancomycin,VCM）,是一种多肽类抗生素,对革兰阳性菌有很强的抗菌作用[1],因而被广泛用于家禽、猪、牛等饲料添加剂和兽药。但含有万古霉素残留的动物源性食品在被人体食用后,可能引起一些不良反应,如过敏、耳毒性、肾毒性等[2],还会在体内蓄积,造成耐药细菌的产生,而且治疗疾病时药物剂量的增大严重危害着人体健康。

霍乱弧菌系列胶体金标记免疫层析快速检测试剂条的应用

今年，我们试用了江苏省疾控中心推广使用的霍乱弧菌系列胶体金标记免疫层析快速检测试剂条(下称金标法)，并与国标法进行了分析比较，报告如下。

胶体金免疫层析法测定水产品中孔雀石绿药物残留的方法探索

1．材料与方法 1．1原理 样品中的孔雀石绿、隐色孔雀石绿经有机试剂提取，吸附剂净化，正己烷除脂后．加入氧化剂将隐色孔雀石绿氧化成为孔雀石绿，经浓缩复溶后，孔雀石绿与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制了抗体和微孔膜检测线（俄）上抗原的结合，

免疫胶体金试剂盒检测碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌的临床性能评价

目的探讨商品化免疫胶体金试剂盒检测临床碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacterales,CRE)产碳青霉烯酶的价值,以期及早预防和控制CRE的流行和暴发。方法收集2016年1月至2020年12月广东省2家三甲医院临床分离的88株非重复CRE,其中广东省中医院64株,中山大学附属第一医院24株。采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测5种常见的碳青霉烯酶基因(blaKPC、blaNDM、blaIMP-4、blaVIM和blaOXA-48),并用Sanger法测序验证。采用改良碳青霉烯灭活试验(modified carbapenem in activation method,mCIM)联合EDTA碳青霉烯灭活试验(EDTA-modified carbapenem in activation method,eCIM)筛选碳青霉烯酶。根据基因型,采用4种免疫胶体金试剂盒(KPC、NDM、IMP-4和VIM酶试剂盒)检测碳青霉烯酶,进一步对碳青霉烯酶表型试验和PCR进行统计学比较和分析。结果88株CRE中,30株携带blaKPC,24株携带blaNDM,9株携带blaIMP-4,5株携带blaVIM,20株未携带碳青霉烯酶基因。mCIM试验灵敏度和特异度分别为97.1%(66/68)和100.0%(20/20),2株分别携带blaNDM和blaIMP-4阴沟肠杆菌为假阴性。mCIM联合eCIM检出36株产金属β-内酰胺酶,与基因型相符。免疫胶体金试剂盒的总体灵敏度和特异度分别为98.5%(67/68)和100.0%(20/20)。KPC、NDM和VIM酶胶体金试剂盒的灵敏度和特异度均为100.0%。仅1株携带blaIMP-4的阴沟肠杆菌在IMP-4酶试剂盒检测中为假阴性,推测与IMP-4酶低表达量有关。Fisher精确检验显示,免疫胶体金试剂盒与mCIM联合eCIM差异无统计学意义(P<0.001)。结论免疫胶体金试剂盒(尤其是KPC和NDM酶试剂盒)在肠杆菌中灵敏度高、特异度强,简便、快速且经济有效,有望成为临床和实验室快速检测碳青霉烯酶的新方法。