蚕豆（Vicia faba L．）叶肉细胞中ABA的胶体金免疫电镜定位

利用胶体金免疫电镜定位技术对蚕豆叶肉细胞中ＡＢＡ定位的研究表明，在以ＡＢＡ抗体处理的切片中，叶绿体有大量的金颗粒标记，细胞质和细胞核也有金颗粒标记，但液泡和细胞壁中没有金颗粒标记。免疫染色前用胰蛋白酶处理可显著增强金颗粒标记密度，而不用ＥＤＣ固定或以免疫前兔血清处理的切片中几乎没有金颗粒标记。本实验为蚕豆叶肉细胞中ＡＢＡ的分布提供了直接的证据并说明了该技术是研究ＡＢＡ定位的一种可靠的方法。

葡萄种子细胞中脱落酸的胶体金免疫电镜定位

用胶体金免疫电镜技术，对脱落酸（ABA）在葡萄种子细胞超微结构水平上的分市进行了研究。按葡萄种子细胞液泡中是否含有电子密度大的染色物质，可将其分为含酚和无酚2个主要类型。在含酚细胞中电子密度大的染色物质呈多种状态存在，先是均匀而稀疏地分布在液池中，然后逐渐凝聚成块状，最后浓缩成一薄层并均匀分布在液泡膜内侧。无酚细胞中金颗粒主要标记在细胞核和细胞质，特别是细胞核有大量金颗粒标记，细胞壁有少量金颗粒标记，液泡中没有发现金颗粒标记。和无酷细胞相似，在含酚细胞中金颗粒主要标记在细胞核和细胞质，特别是细胞核金颗粒密度很大，细胞壁有极少金颗粒标记。引人注目的是液泡中聚集态的染色物质上也发现金颗粒标记，但稀疏而均匀分布的染色物质上几乎找不到金颗粒标记，当染色物质最终浓缩成薄层状态时则发现有大量的金颗粒标记。无论用免疫前兑血清染色的对照切片还是材料，不被EDC固定的对照切片中都很难找到金颗粒标记，说明该ABA免疫胶体金电镜定位结果是特异、可靠的。

采用免疫胶体金标记结合负染色电镜技术对体外组装的中间纤维定性

将免疫胶体金标记与电镜负染色技术相结合，清晰显示体外组装的波形纤维具有１０ｎｍ中间纤维结构特征，抗波形纤维蛋白－金颗粒特异地标记在波形纤维上。用抗波形纤维蛋白－金颗粒对体外组装的微管进行标记则呈阴性反应。实验结果表明将免疫胶体金标记与电镜负染色技术相结合可以同时显示体外组装的细胞骨架纤维的精细结构和蛋白属性。

绿豆上胚轴细胞中BR的胶体金免疫电镜定位

利用葡萄球菌A蛋白与胶体金连接的复合物为探针的免疫电镜定位技术对绿豆上胚轴细胞中BR定位的结果表明，在用抗BR抗体处理的超薄切片中，叶绿体、核仁和液泡内有大量的金颗粒标记，细胞膜和淀粉粒也有金颗粒标记，但细胞壁中没有观察到金颗粒。在不用EDC固定的切片中，金颗粒标记密度非常低，而在用正常兔血清处理的切片中，所有细胞器内几乎没有金颗粒.该实验为绿豆上胚轴细胞中BR的分布提供了直接的证据。

免疫电镜胶体金标记技术应用中关键环节的处理

目的探讨免疫电镜胶体金技术在应用中某些关键技术环节的处理。方法应用免疫电镜胶体金技术对大肠癌GST-Pi(胎盘型谷胱苷肽S转移酶)和金黄地鼠胚胎神经管NGF(神经生长因子)和bFGF(碱性成纤维细胞因子)进行定位观察。结果 大肠粘膜细胞和神经上皮细胞结构清晰,金颗粒呈团状、点灶状分布,特异性强,无非特异性散在金颗粒。结论免疫电镜金标记技术应用中某些关键性技术环节的处理是获得理想免疫金染色切片的保证。

胶体金标记法在免疫细胞化学电镜的应用

免疫细胞化学系将细胞或组织中特异的抗原抗体反应以组织化学的方法显示出来,显示荧光反应的称为荧光抗体法,显色反应的如酶标抗体法和综合各种标记抗体法基础上产生的非标记抗体过氧化物酶—抗过氧化物酶法(unlabelled antibody peroxidase-antiperoxidase method)简称PAP法。免疫组织化学电镜(简称免疫电镜)即将免疫细胞化学应用到电镜水平。在八十年代的免疫细胞化学电镜领域内.

包埋后胶体金染色对人肝细胞β-葡萄糖醛酸酶的免疫电镜标记技术

胶体金免疫电镜技术是近几年发展的新技术，本文参照国外方法，将该技术加以改进后用于人体肝细胞的研究。

戊二醛浓度对免疫电镜胶体金标记密度影响的定量分析

经４％多聚甲醛＋０或０５％戊二醛固定（１小时）大豆子叶细胞，大部分细胞器和蛋白体发生较大程度的变形，甚至解体。随着固定剂中戊二醛浓度升高至１５、２５％，细胞超微结构保存效果提高，蛋白体内反映７Ｓ蛋白质存在的胶体金颗粒密度分别为１９７和１１４个／μｍ２。

微波在免疫电镜胶体金技术中的应用

微波在免疫电镜胶体金技术中的应用姜秀英，赖晃文，刘旭明，邹赛英关键词胶体金标记，微波，免疫电镜中国图书分类号Ｒ４４６．８当微波照射免疫胶体金标记切片时，切片上的抗原抗体极性分子随微波周期以每秒２４亿５千万次的速度进行快速振动，这种快速振动产生的摩擦热...

免疫胶体金及其在植物激素定位中的应用

植物激素对于调节植物的各种生长发育过程和环境的应答具有十分重要的作用。国内外关于植物激素的生物学效应已有了大量的研究,但对于它们在植物体内的分布和转运却报道很少,究其原因主要是缺乏准确和灵敏的定位手段。新近发展起来的免疫胶体金技术为植物激素的原位分析提供了有效手段。本文介绍了免疫胶体金技术原理和发展历程,综述了其在植物激素定位研究上的应用,并对存在的问题和进一步的发展进行了讨论。

阿尔采默病患者皮肤α-微管蛋白的免疫细胞化学与胶体金免疫电镜观察

目的观察阿尔采默病(AD)患者皮肤基底细胞α微管蛋白的变化。方法取患者背部皮肤,用免疫细胞化学和胶体金免疫电镜技术观察,并进行定量分析。结果免疫细胞化学染色显示,对照组皮肤免疫阳性染色主要位于表皮层基底细胞的胞质内,棘细胞层和颗粒层可见少量的阳性细胞;AD组基底细胞内着色深,棘细胞层和颗粒层亦有表达,但数量少。胶体金标记结果显示,对照组基底细胞可见较丰富的微管,标记的胶体金散在于胞质。AD组微管较对照组减少;标记的金颗粒数量较对照组明显增多。定量结果显示,AD组α微管蛋白免疫细胞化学染色的AOD值(1. 165±0. 079)、VIOD值(186. 000±15. 853)均较对照组(0. 814±0. 152, 96. 020±14. 755)明显增高(P<0. 01);α微管蛋白胶体金标记颗粒数目AD组(20. 74±3. 99)亦较对照组(15. 50±3. 41)增多明显(P<0. 01)。结论AD患者皮肤基底细胞内微管数量的减少,结构破坏,对皮肤组织的观察可能间接反映神经组织的改变。

贴壁培养细胞胶体金免疫电镜标本制备技术的改进

介绍一种贴壁培养细胞胶体金免疫电镜标本制备方法,本法适用于观察各种因素对细胞表面抗原性质影响的免疫电镜研究。

电镜免疫金标记在大肠癌细胞GST-Pi定位中的应用

目的 探讨免疫电镜胶体金技术在大肠癌细胞GST -Pi定位中的应用及某些关键技术环节的处理。方法 应用免疫电镜胶体金技术对 6例大肠癌及 3例正常大肠粘膜细胞进行GST -Pi的定位观察。结果 大肠粘膜细胞结构清晰 ,金颗粒呈团状、点灶状分布 ,特异性强 ,无非特异性散在金颗粒。结论 免疫电镜金标记技术是大肠癌细胞GST -Pi超微结构定位的有效方法。对某些关键性技术环节的处理是获得理想免疫金染色切片的保证。

肾组织免疫电镜胶体金技术

肾单位微灌注和节段肾小管细胞培养是直观、深入地研究肾单位生理功能及代谢调节的重要实验手段。建立这二大技术的基础是迅速、准确、完整的肾小球和肾小管微分离(microdissection)。本文在此就我们工作中的体会结合文献作一介绍。

光敏细胞质不育小麦花药发育过程中ABA免疫电镜定位

运用胶体金免疫电镜定位方法研究了不同光周期条件下光敏细胞质不育小麦花药发育过程中 ABA的分布 .短日照条件下 ,花粉母细胞细胞质基质及小液泡内有金颗粒分布 ;单核至二核花粉时期花粉内金颗粒逐渐增多 ,二核至成熟花粉时期花粉内金颗粒逐渐减少 ,不同发育时期的花粉内金颗粒的分布位置有变化 .绒毡层或降解中的绒毡层细胞内有较多金颗粒分布 .长日照条件下花粉败育 ,不同发育时期的花粉内金颗粒分布数量均比同时期的可育花粉内明显增多 .单核期以前败育的花粉 ,解体的花粉细胞质及细胞核内有较多金颗粒分布 ;后期败育的花粉 ,花粉母细胞至二核花粉时期花粉 (母细胞 )内金颗粒有不断增加的趋势 ,二核期以后 ,花粉逐渐液泡化 ,解体的花粉细胞质及逐渐增大的中央液泡内有大量的金颗粒分布 .绒毡层细胞内金颗粒有逐渐减少的趋势 .文中对 ABA在雄蕊、花粉发育过程中的作用、由光周期诱导的 ABA含量增加在雄性不育中的作用进行了讨论 .

家蚕质多角体病毒RDRP的免疫电镜定位研究

以原核表达BmCPV RDRP重组蛋白为抗原制备的兔抗血清为一抗,直径15nm山羊抗兔IgG 胶体金为二抗。应用3%多聚甲醛 0 1%戊二醛混和固定液、K4M低温包埋剂和紫外光聚合制备的样品进行免疫电镜观察,结果感染BmCPV(C)病蚕的中肠柱状细胞中,游离和病毒多角体中BmCPV的病毒粒子均能结合胶体金颗粒,平均标记率为25%左右,认为BmCPV(C) RDRP基因编码的蛋白应为BmCPV病毒的结构蛋白,位于病毒的衣壳上。其中一抗的使用浓度为1∶200,二抗的使用浓度为1∶40,可以获得较好的免疫标记效果和较少的非特异性标记。