用ELISA评价胶体金测试卡检测乙型肝炎病毒血清标志物两对半的性能

目的用酶联免疫吸附法(ELISA)评价胶体金测试卡检测乙肝两对半的性能。方法选用ELISA检测乙肝表面抗原(HbsAg)阴性100例,阳性者200例,用胶体金测试卡和ELISA分别检测乙肝两对半对比结果和检测用时。结果胶体金测试卡单个标本的检测时间为25min,而ELISA的为1h。100例HbsAg阴性标本除2例HbcAb ELISA检测阳性而胶体金测试卡检测阴性外,其他结果均相同。200例HbsAg阳性标本中,胶体金测试卡法检测6例HbsAg阴性,符合率97.0%;9例HBeAb检测阴性,符合率92.9%;7例HbcAb检测阴性,符合率96.5%。结论胶体金测试卡与ELISA相比,不需要特殊设备,易于观察结果,快速检测单个标本,操作简便,特异性较高,能满足急诊的需要。

胶体金测试卡与ELISA法检测HBV的对比分析

目的探讨胶体金测试卡与酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测乙型肝炎病毒(HBV)的效果,为临床选择一种经济、快速、准确、敏感检测HBV的新方法。方法分别用胶体金测试卡与ELISA法检测616份血清标本,并对测定结果分别进行比较分析。结果用胶体金测试卡与ELISA法检测乙肝HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc,除HbsAg差异无统计学意义外(P>0.05),其余差异均有统计学意义(均P<0.05)。2种方法检测结果HBV5项指标的符合率分别为99.4%、95.3%、98.7%、98.1%、99.0%。以ELISA法为标准验证胶体金测试卡,则胶体金测试卡的灵敏度分别为97.6%、92.4%、88.1%、87.8%、100.0%,特异性分别为100.0%、98.1%、100.0%、100.0%、98.7%。结论胶体金测试卡具有简便、快速、可单份操作的优点,适用于急诊检验和基层检验的需要。但此法与ELISA法相比,其敏感性低,不能单独用于HBV5项定性检测,因此还必须与ELISA法并用。

新型冠状病毒中和抗体胶体金测试卡检测不同人群中和抗体的可行性分析

目的:比较2种不同原理制备的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)中和抗体胶体金测试卡与SARS-CoV-2假病毒中和实验的相关性,评估半定量的中和抗体胶体金测试卡用于不同人群的SARS-CoV-2中和抗体检测的可行性。方法:分别采用厂家A胶体金测试卡(双抗原夹心法)、厂家B胶体金测试卡(竞争阻断法)和SARS-CoV-2假病毒中和法进行检测,比较这2种胶体金方法与中和实验的相关性和敏感度;在确定了测试卡厂家后,检测新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情暴发前制备的静注人免疫球蛋白及特异性免疫球蛋白,考察其特异性;对ELISA高稀释倍数新冠疫苗免疫后血浆进行原倍和稀释品检测,判断是否有hook效应;检测不同ELISA稀释倍数档位的单份免疫后血浆,判断阳性率,观察色度变化;将ELISA低稀释倍数血浆按照比色卡筛选120NT_(50)和300NT_(50)这2个档位血浆,制备混浆,比较胶体金测试卡与ELISA和中和抗体的相关性。结果:厂家A和厂家B对英国国家生物制品标准化和质量控制研究所(NIBSC)第1代国际标准品20/136(抗SARS-CoV-2人免疫球蛋白国际标准品)的检测限分别为0.6125和5 IU·mL^(-1);对不同档位的混浆(新冠病毒疫苗免疫后血浆及COVID-19康复者恢复期血浆)的检测结果与中和抗体效价相关性好,检测ELISA高稀释倍数(10000以上)新冠病毒疫苗免疫后血浆未出现hook效应;不同ELISA稀释倍数的单份血浆的阳性率在稀释倍数160以上达到100%,但是色度深浅不一,在稀释倍数640以上色度均一性较高,且色度随着ELISA稀释倍数增高整体逐渐变深。按照比色卡色度筛选的Ppool 120NT_(50)和Ppool 300NT_(50)与中和抗体效价接近。结论:采用双抗原夹心法的厂家A中和抗体测试卡检测COVID-19康复者恢复期血浆和新冠病毒疫苗免疫后血浆的结果与假病毒中和实验效价的相关性优于采用竞争抑制法的厂家B产品及间接ELISA,且检测线的色度深浅与中和抗体水平正相关,可半定量检测用于不同人群的中和抗体筛查。

SARS-Co V-2抗原检测用样品盘的建立及其在胶体金测试卡研发和质量评估中的应用

目的建立严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARS-CoV-2)抗原检测用样品盘,并应用于SARS-CoV-2抗原胶体金测试卡的研发及质量评估。方法以12种非SARS-CoV-2灭活疫苗原液及黏蛋白作为阴性样品盘,重组SARS-CoV-2 N蛋白、2批SARS-CoV-2灭活疫苗原液(B1、B2)及1批灭活SARS-CoV-2培养液(S1)作为阳性样品盘,二者结合建立SARS-CoV-2抗原检测用样品盘。采用B1对4个厂家(A、B、C、D)的胶体金测试卡进行阳性评估,并对厂家A胶体金测试卡的研发进行全程检测。通过阴性样品盘评价5个厂家(A、C、E、F、G)胶体金测试卡的特异性,阳性样品盘(B2、S1和重组N蛋白)评价其灵敏度。采用市售SARS-CoV-2核酸检测试剂盒检测灭活SARS-CoV-2培养物S1,并与厂家A的胶体金测试卡进行对比。结果通过阳性评估,确定N蛋白为检测SARS-CoV-2抗原的主要位点。厂家A研发的胶体金测试卡对B1的灵敏度达1:2×10^(3)。5个厂家的胶体金测试卡对非SARS-CoV-2灭活疫苗原液无交叉反应,表明特异性均良好。厂家A的胶体金测试卡对B2的灵敏达1:10^(6),对S1的灵敏度达1:2×10^(7);厂家E、F、G的胶体金测试卡对B2的灵敏度达1:10^(3)以上,对S1的灵敏度达1:10^(4)~1:10^(5);厂家C的胶体金测试卡对B2的灵敏度达1:10^(4),对S1的灵敏度达1:10^(6)。厂家A的胶体金测试卡对重组N蛋白的灵敏度为100 pg/mL,其他4家均为10 pg/mL。市售核酸检测试剂盒对S1的灵敏度为1:10^(7),与厂家A的胶体金测试卡(1:2×10^(7))相当。结论成功建立了SARS-CoV-2抗原检测用样本盘,其具有良好的特异性及灵敏性,可用于SARS-CoV-2抗原胶体金测试卡的研发及质量评估。

包被抗原种类对抗新型冠状病毒抗体胶体金测试卡检测质量的影响

目的考察包被不同种类的胶体金标记(金标)抗原对抗新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)抗体快速检测测试卡检测质量的影响。方法采用抗2019-nCoV抗体样本盘检测厂家L包被有不同金标抗原的胶体金测试卡,比较产品的灵敏度、特异度、准确度和正确指数,暂时以准确度>95%、正确指数>0.85为合格标准。结果厂家L的6个批次分别包被有重组2019-nCoV的刺突(spike,S)+核衣壳(nucleocapsid,N)蛋白(L002)、受体结合域(receptor-binding domain,RBD)+N蛋白(L003)、N蛋白(L004)、RBD蛋白(L006)、S蛋白(L007)、N+S蛋白(L008)的测试卡,检测IgG的准确度/正确指数分别为98.38%/0.966、97.30%/0.946、97.84%/0.954、90.82%/0.873、97.86%/0.958、95.72%/0.919;检测IgM的准确度/正确指数分别为90.51%/0.736、95.57%/0.890、73.10%/0.298、68.37%/0.331、83.96%/0.533、87.17%/0.658。结论所有金标抗原包被的测试卡检测IgG均合格,只有RBD与N蛋白组合的包被金标抗原测试卡检测IgM合格,通过优化包被的金标抗原种类可提高测试卡检测IgM的质量。

粮食中真菌毒素检测中胶体金快速测试卡的运用分析

食品安全直接关系到人民群众的身体健康,也影响社会经济的发展。加强对粮食作物中的真菌毒素检验,合理应用胶体金快速测试卡,具有快速、便捷的特征测试结果更为灵敏,判断结果更为直观,深受人们的重视。基于此,文章主要对粮食中真菌毒素检测中胶体金快速测试卡进行了简单的论述分析。