实验动物血清胶冻样成因分析及消除方法探索

动物血清是常用的实验材料,血清质量往往决定实验数据的准确性和科学性。动物血清制备常出现一些异常情况,如血清析出,但呈胶冻样血清。胶冻样血清对血清学检测过程和数据造成很大影响,严重干扰实验结果。减少血清胶冻样的形成,对涉及血清学检测的实验都具有重要意义。本文基于血液凝固机制,重点分析实验动物血清胶冻样的成因,并探索消除血清胶冻样的系列方法,减少血清胶冻样的形成,对于血清学检测具有重要的意义。

胶冻样类芽孢杆菌对水稻纹枯病病害的防治及田间测产研究

[目的]明确胶冻样类芽孢杆菌Paenibacillus kribbensis(PS04菌株)对水稻纹枯病的防效以及对水稻的增产效果。[方法]利用PS04发酵液对水稻纹枯病菌进行平板抑制试验、离体防效试验、经模拟雨水不同时间冲洗后的防效试验、大田测产试验,确定PS04发酵液对水稻纹枯病的防治效果,确定最佳使用浓度,明确田间应用效果。[结果]平板抑制试验中,当PS04发酵液浓度为2.0%时对水稻纹枯病抑制率为84.16%。离体叶片试验中,PS04原液对水稻纹枯病的防效达71.63%。在大田应用试验中,PS04发酵液可显著抑制水稻纹枯病病害的发生并提高水稻产量性状。[结论]胶冻样类芽孢杆菌PS04能够有效抑制水稻纹枯病并在大田应用中能够显著提高水稻产量,具有良好的微生物源农药开发前景。

胶冻样芽孢杆菌与生物质炭复配及对番茄产量和品质的影响

以提高胶冻样芽孢杆菌在土壤中的存活率、减缓其衰亡速率,延长存活时间,提高其对土壤难溶性钾的解钾效率为目的,利用不同种类的秸秆生物质炭与胶冻样芽孢杆菌进行复配筛选。通过室内培养试验发现,中性小麦秸秆炭可作为胶冻样芽孢杆菌较理想的载体。当土壤培养35天后,土壤速效钾含量在施用炭基解钾菌肥条件下较空白提高了28.53%,较小麦秸秆炭和纯菌液处理分别提高了20.75%、13.41%。纯菌液处理土壤中胶冻样芽孢杆菌的菌落数从1.1×10~9个/g土降为9.0×10~5个/g土,而炭基解钾菌肥处理则为1.4×10~7个/g土。田间施用炭基解钾菌肥能够提高番茄植株和果实中的全钾含量;提高番茄产量和品质,显著提高番茄Vc含量,降低硝酸盐含量。因此,中性小麦秸秆炭与胶冻样芽孢杆菌的复配能够提高菌剂的存活率,有效促进土壤中矿物态钾的释放。

胶冻样类芽孢杆菌CX-9菌株肥料制剂的研制及在烟草上的应用

为研究胶冻样类芽孢杆菌CX-9菌株肥料制剂对烟草品质的改善和产量的提高,通过自行分离的胶冻样类芽孢杆菌CX-9菌株的发酵、发酵液离心和后处理,研制出含菌量高达50.0×108/g的肥料制剂,并利用该肥料制剂在贵州烟草上进行了减少烟草专用肥的接种实验.研究结果表明:每公顷施用该肥料制剂30kg,能促进烟株生长发育,提高烟叶产量、产值、均价、上等烟叶率和中上等烟叶率,改善烟叶内在化学品质,大大提高烟叶质量等级,同时底施该肥料制剂,还可减少20%的基肥施用,降低成本投入,增加烟农的收益.因此,该胶冻样类芽孢杆菌CX-9菌株在烤烟生产上具有一定的应用价值.

巨大/胶冻样类芽孢杆菌对印度芥菜修复Cd污染土壤的影响

采用盆栽试验方法,研究了接种巨大芽孢杆菌和胶冻样类芽孢杆菌的混合发酵液对印度芥菜修复Cd污染土壤的影响。结果表明,接种混合菌发酵液可显著增加印度芥菜的生物量,接种20d、接种量为50ml时,总生物量较对照组增加了50.44%;在接种30d时,50ml混合菌发酵液处理的印度芥菜地上部P、K的含量显著高于对照组,分别增加了48.84%和74.90%,同时接种50ml混合菌发酵液可显著提高根际和非根际土壤中有效态Cd含量,使其较对照分别增加了39.29%和32.52%。接种混合菌发酵液可促进印度芥菜对土壤Cd的吸收,接种40d接种量为50ml时Cd吸收总量较对照组显著增加了60.36%。综上所述,接种混合菌发酵液50ml时,可促进印度芥菜的生长,增加土壤有效态Cd含量,从而提高了印度芥菜对Cd污染土壤的修复效率。

巨大芽孢杆菌与胶冻样类芽孢杆菌对土壤镉的活化效果研究

采用短期和长期培养试验方法,研究巨大芽孢杆菌和胶冻样类芽孢杆菌对土壤Cd有效性及pH的影响。结果表明,两种菌对土壤Cd均有活化作用。短期试验结果表明,胶冻样类芽孢杆菌种子液的活化效果优于巨大芽孢杆菌,最多可使DTPA提取态Cd增加16.2%,巨大芽孢杆菌发酵液的活化效果较显著,可使DTPA提取态Cd增加14.2%,且DTPA提取态Cd含量与上清液pH呈显著负相关关系;长期培养试验结果表明,巨大芽孢杆菌种子液可使DTPA提取态Cd增加11.4%,其发酵液增加了19.6%的DTPA提取态Cd,但胶冻样类芽孢杆菌对土壤Cd有效性无显著影响,且土壤pH与DTPA提取态Cd含量无相关关系。

响应面法优化胶冻样芽孢杆菌发酵条件的研究

为了优化响应面法对胶冻样芽孢杆菌的发酵条件。在单因素的基础上选择酵母膏、糖蜜以及pH为自变量,芽孢杆菌的芽孢数为响应值,根据Box-Behnken实验设计原理进行响应面法分析,确定了胶冻样芽孢杆菌发酵条件的最佳组成为:酵母膏0.53%,糖蜜2.18%,pH7.91,在此条件下最大理论芽孢数为1.853×108个/mL。经过3次平行实验验证,实际芽孢数为1.813×108个/mL。该试验值与预测值很接近。

新型胶冻样芽孢杆菌及其突变株的诱变选育

以胶冻样芽孢杆菌菌株(ACCC10012)为出发菌株,经紫外线诱变处理,获得两株胶冻样芽孢杆菌高产菌株UV09K,UV16K,其解K能力较出发菌株分别提高1282.35%,1909.80%。同时通过酸碱和温度处理,获得了一株抗性变异株PHt10K,该菌株能承受pH=4～10,t 50 的不良环境,而且解P解K能力较出发菌株提高35.97%,23.53%。

胶冻样芽孢杆菌培养条件及发酵工艺的优化

通过单因子及正交试验，对一株胶冻样芽孢杆菌的培养基组成（碳、氮、生长因子、无机盐）及工艺条件（温度、起始pH值、装液量）进行了研究。结果表明，比较理想的配方是：糖蜜2％、豆粕粉0．5％、MgSO4·7H2O0．1％、K2HPO4 0．05％、CaCO30．1％；起始pH值7．5，培养温度36℃，装液量30ml／250ml锥形瓶。在此基础上利用70L发酵罐进行发酵，培养周期33h，芽孢量可以达到9．58×10^8cfu／ml，高于国家规定的液体菌肥5×10^8cfu／ml标准，解决了原配方不产芽孢的难题，培养周期缩短了一半。

胶冻样类芽孢杆菌对不同施肥处理的马铃薯产量和品质的影响

以‘克新1号’马铃薯为试验材料,试验设置低、中、高3个施肥量处理,在复合肥和有机肥的基础上,每个处理中固体胶冻样类芽孢杆菌微生物菌剂设置4个不同的梯度处理,在马铃薯块茎膨大期冲施定量的液体胶冻样类芽孢杆菌微生物菌剂,探究增施胶冻样类芽孢杆菌微生物菌剂对马铃薯生长指标、产量、品质及经济效益等的影响,旨在找出适合蒲县当地的科学施肥方法,为其马铃薯的高产优质生产提供理论和生产实践依据。结果表明,适量增施微生物菌剂有利于提高马铃薯产量、品质和经济效益等指标,但高浓度的微生物菌剂却抑制马铃薯的生长,在本试验中以低肥量处理下的T2组效果最佳,其株高、出苗率、维生素C含量、产量及净利润比常规施肥组分别提高了6.83%、5.31%、92.11%、27.0%和16.94%,还原糖含量降低了18.42%,是高产优质马铃薯的科学施肥配方及标准化生产技术方案。

胶冻样芽孢杆菌AMCC 100087对棉花的促生效应

对胶冻样芽孢杆菌(AMMCC 100087)防治棉花苗期病害与促进棉花生长和提高棉田肥力效果进行了田间试验。结果表明:胶冻样芽孢杆菌对防治棉花炭疽病有一定的效果;底施7.5kg.hm-2的用量防病促生综合效果最好,子棉较对照增产17.28%,可使土壤中速效钾含量提高34.94%,且明显提高土壤速效磷和水溶性钙的含量。

胶冻样芽孢杆菌对赤霞珠葡萄光合作用及果实品质的影响

以5年生酿酒葡萄赤霞珠为试验材料,通过测定叶片光合特性以及成熟期果实品质,研究胶冻样芽孢杆菌对赤霞珠葡萄光合作用及果实品质的影响.结果表明:不同剂量胶冻样芽孢杆菌处理对葡萄叶片光合特性和果实品质均有显著影响,其中胶冻样芽孢杆菌1.0 kg/667 m^2处理提高叶片光合特性效果显著,而0.5 kg/667 m2处理改善果实品质的效果最为明显.胶冻样芽孢杆菌0.5 kg/667 m^2处理后葡萄果实中可溶性总糖、还原糖、蔗糖、总酚含量分别较对照增加18.51%、21.31%、27.11%、120.35%.因此,施用胶冻样芽孢杆菌0.5~1.0 kg/667 m^2能有效提高赤霞珠葡萄的光合特性,增强果实品质.

花生接种胶冻样类芽孢杆菌对土壤微生物群落、氨化细菌、固氮菌及产量的影响

针对花生连作对花生生长和产量的不利影响,通过田间小区试验,研究了花生接种胶冻样类芽孢杆菌后土壤中的细菌、放线菌和真菌,尤其是根际氨化细菌和固氮菌的的数量变化,同时分析了胶冻样类芽孢杆菌对花生生育性状及产量的影响。结果表明:土壤中细菌、放线菌、真菌的数量随着花生生育期的延长,呈下降趋势;随着胶冻样类芽孢杆菌接种数量的增加,在花生不同生育期土壤中细菌和放线菌的数量有不同程度的提高,而真菌数量下降;未接种胶冻样类芽孢杆菌的花生在苗期和开花期无法检出氨化细菌和固氮菌,施用胶冻样类芽孢杆菌400 g/亩(1亩=667 m^(2))的处理在整个花生生育期都可检出;花生的株高、侧枝长度及产量均呈现随胶冻样类芽孢杆菌施用量的增加而递增的趋势,说明接种胶冻样类芽孢杆菌后不仅可减少施肥量,而且可提高花生产量,增产增收效益明显。

胶冻样类芽孢杆菌菌粉的研制及功能菌株的存活性研究

针对应用较为广泛且增产效果稳定的胶冻样类芽孢杆菌在实际生产过程中存在的发酵有效活菌数低、液体制剂运输不便及保存周期短等问题,筛选出耐高渗透压胶冻样类芽孢杆菌HB-02菌株,并利用该菌株芽孢耐高压、耐高温等特点,采用喷雾干燥方法研制出胶冻样类芽孢杆菌菌粉。试验研究了该菌株发酵液的喷雾干燥处理工艺,结果在入料流量0.75t/h、通风量20m^3/min、进风温度150℃条件下,3批次喷雾干燥菌粉平均含菌量达到265.1×10^8cfu/g,收率达到81.3%,成功研制出高含量胶冻样类芽孢杆菌HB-02菌株菌粉。通过该胶冻样类芽孢杆菌在不同复合微生物肥料中的存活性研究,结果表明在w(N+P2O5+K2O)达到30%、室温保存120d的情况下,胶冻样类芽孢杆菌在复合微生物肥料中的存活率为89.8%,为该菌株与化肥的有机结合以生产复合微生物肥料提供了理论依据。

烟株根围土壤中胶冻样芽孢杆菌解钾能力研究

【目的】为在洛阳烟株根围土壤中获得对矿石具有较强解钾能力的胶冻样芽孢杆菌,提高土壤中植物可利用游离钾的含量。【方法】采用平板菌落特征观察、革兰氏染色观察、生理生化检测与16S rDNA序列分析等试验方法,鉴定出烟株根围土壤中的胶冻样芽孢杆菌,并通过四苯硼酸钠沉淀法比较了该菌株与标准菌株的解钾能力。【结果】从河南省嵩县、汝阳、洛宁3个县烟草不同生育期的烟田根围土壤样品分离出9株与标准菌株菌落特征完全一致的圆形、白色透明、边缘整齐且光滑凸起的单菌落。其中菌株005、008的生理生化性状与标准菌株基本一致,均为兼性厌氧性细菌,与过氧化氢酶反应,还可使淀粉水解、糖醇发酵、硝酸盐还原,在V-P测定与M.R测定结果中均显示阳性,在石蕊牛乳试验反应中均可以产生酸反应,不能使明胶液化,能利用柠檬酸盐。菌株005(登录号:MN227334)和菌株008(登录号:MN227337)的16S rDNA序列与GenBank(登录号:EU048557)序列同源性高达99%,将其鉴定为胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)。解钾试验结果表明,菌株005、008和标准菌株23575沉淀质量依次为0.140、0.136与0.166 g,差异达0.05显著水平,均大于空白组的沉淀质量0.040 g。【结论】洛阳烟株根围土壤中含有圆形、白色透明、可使淀粉水解、糖醇发酵、硝酸盐还原,并具有较强解钾能力的兼性厌氧性胶冻样芽孢杆菌。

噻虫嗪对胶冻样类芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的拮抗作用

[目的]研究杀虫剂噻虫嗪对微生物菌剂主要功能菌株——胶冻样类芽孢杆菌(Patuibacillus mucilaginous,YH-001)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,YH-002)和地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis,YH-003)的拮抗作用。[方法]采用平板对峙法和梯度稀释法对以上3种主要功能菌株的拮抗作用进行研究。[结果]噻虫嗪浓度为0.005%、0.050%、0.100%、0.200%时对胶冻样类芽孢杆菌(YH-001)的抑制率分别达到10%、10%、60%和100%,噻虫嗪浓度在0.1%、0.2%、0.3%、0.4%浓度时对地衣芽孢杆菌(YH-003)的抑制率分别达到2.13%、10.59%、20.21%、30.85%,而噻虫嗪浓度在0.1%、0.2%、0.3%、0.4%浓度时对枯草芽孢杆菌(YH-002)抑制作用一般。[结论]杀虫剂噻虫嗪对微生物菌剂具有一定的抑制作用,为实际生产提供理论依据。

胶冻样类芽孢杆菌PS04产抗真菌物质培养条件的优化

以胶冻样类芽孢杆菌（Paenibacillus kribbensis）PS04为试验材料，运用传统的单次单因子法，筛选得到适合胶冻样类芽孢杆菌PS04生防菌株生长及其拮抗物质产生的最佳碳源为蔗糖，最佳氮源为NaNO3,并在逐因子试验的基础上进行正交试验，得到该培养基各组分的最佳含量：蔗糖3％，NaNO30．15％，KzHPO40．1％。在确定适合该菌株的培养基组分基础上，对其培养条件进行优化试验，结果表明在初始pH7～8、温度30℃、转速180r／min、100mL／1000mL摇瓶培养84h时，菌株生长及抑菌活性均达到最大值。

一株胶冻样芽孢杆菌培养条件的优化及其解钾活性

[目的]优化该胶冻样芽孢杆菌培养条件及测定其解钾活性。[方法]用火焰光度计法测定胶冻样芽孢杆菌的解钾量;通过大白菜的田间试验验证解钾功能;通过培养基成分及培养条件的优化,获得最佳培养基和培养条件。[结果]用火焰光度计法测定胶冻样芽孢杆菌的解钾量为121.3 mg/L,其解钾率为12.06%;将其应用到喜钾作物大白菜上,通过大白菜的田间试验,与K_(0)(空白对照)组相比大白菜产量增加了15.5%,与只加硫酸钾的K_(1)相比,产量差异不大;通过培养基成分及培养条件的优化,获得最佳培养基配比为蔗糖1.0%、酵母浸粉0.1%、硫酸镁0.02%、磷酸氢二钾0.05%,最适培养条件为温度30℃、pH 7.0、转速200 r/min,发酵结果有效活菌数达到17.5×10^(8)CFU/mL,芽孢率≥95%,解钾率提高到23.02%。[结论]该胶冻样芽孢杆菌可以将土壤中不可直接被作物吸收利用的钾素分解为作物可以直接利用的速效钾形态。

解钾胶冻样芽孢杆菌的液态发酵培养基及条件优化

以提高胶冻样芽孢杆菌液体发酵活菌数为目的,通过单因素试验及正交试验,对其液态发酵培养基成分如碳源种类、氮源种类等,及发酵条件如发酵温度、pH进行优化研究,采用稀释涂平板法计算目的菌活菌数.试验结果表明:确定较优发酵培养基配方为糖蜜12 g?L-1,K2HPO40.8 g?L-1,MgSO40.3 g?L-1,豆粕2.0 g?L-1,酵母浸粉0.2 g?L-1,MgCl20.2 g?L-1;发酵温度37℃,发酵pH 7.0~8.0,摇瓶发酵培养44~46 h,活菌数达到7.0×108cfu?mL-1;在此基础上用50 L发酵罐进行中试发酵,培养36 h即可收集菌体,活菌数达到1.85×109cfu?mL-1.

动物血清胶冻样的成因与消除方法探讨

动物血清是血液凝固后析出的淡黄色透明液体。血清是不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要包括水、白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白、甘油三酯、总胆固醇、谷丙转氨酶、尿素氮、肌酐、葡萄糖、多肽、脂肪、生长因子、激素、无机物等物质组成。