胶原/硫酸肝素支架联合神经干细胞促进脊髓损伤后运动功能的恢复

背景:近些年来,胶原/硫酸肝素支架作为神经组织工程支架已被用于周围神经、脊髓和脑损伤的修复中。目的:观察胶原/硫酸肝素支架联合神经干细胞移植对脊髓损伤后运动功能恢复的影响。方法:将SD乳鼠神经干细胞接种于胶原/硫酸肝素支架上培养7 d,构建细胞-支架复合物。将60只成年雌性SD大鼠(购自成都达硕生物科技有限公司)随机分为4组,每组15只:假手术组仅切除T10椎板,模型组切除T10处1.5 mm脊髓建立脊髓损伤模型,支架组建立脊髓损伤模型后植入胶原/硫酸肝素支架,细胞-支架组建立脊髓损伤模型后植入细胞-支架复合物。术后1,2,3,4,6,8周进行BBB评分与斜板实验,观察大鼠肢体功能恢复;术后8周检测大鼠双后肢运动诱发电位,观察运动功能恢复情况;术后8周对脊髓损伤处进行核磁扫描,获得弥散张量成像图像,观察神经纤维再生情况。实验获得成都医学院第一附属医院伦理委员会批准。结果与结论:①术后2,3,4,6,8周,细胞-支架组的BBB评分、斜板实验角度均高于模型组、支架组(P<0.05,P<0.01);②细胞-支架组大鼠双侧后肢的运动诱发电位振幅高于模型组、支架组(P<0.05,P<0.01),潜伏期短于模型组、支架组(P<0.05,P<0.01);③弥散张量成像显示,假手术组神经纤维完整,模型组病变部位周围神经纤维缺乏不同方向的连续性,支架组、细胞-支架组可见较多数量的神经纤维穿过损伤区域,并且细胞-支架组穿过损伤区域的神经纤维数量更多;④结果表明,胶原/硫酸肝素支架联合神经干细胞可促进大鼠脊髓损伤处神经纤维的再生,改善大鼠双侧后肢运动功能。

负载脑源性神经营养因子胶原/肝素硫酸支架促进颅脑创伤大鼠神经运动功能的恢复

背景:研究表明胶原和硫酸肝素交联后可有效固定生长因子,显著改善脊髓损伤大鼠的神经运动功能恢复。目的:观察负载脑源性生长因子胶原/硫酸肝素支架移植修复颅脑创伤的效果。方法:制作胶原支架、胶原/硫酸肝素支架与负载脑源性神经营养因子的胶原/硫酸肝素支架,检测胶原支架、胶原/硫酸肝素支架的孔隙率、吸水率、压缩模量和压缩应力;检测载脑源性生长因子胶原/硫酸肝素支架的体外缓释性能;检测胶原/硫酸肝素支架与负载脑源性神经营养因子的胶原/硫酸肝素支架的细胞毒性与细胞相容性。将48只SD大鼠随机分4组干预:对照组开骨窗后缝合,空腔组仅制作颅脑创伤空腔模型,支架组、生长因子支架组颅脑创伤后空腔处分别植入胶原/硫酸肝素支架、负载脑源性神经营养因子的胶原/硫酸肝素支架,术后分别进行改良神经功能缺损评分、水迷宫测试与脑损伤形态学观察。动物实验获得武警特色医学中心伦理委员会批准。结果与结论:①胶原/硫酸肝素支架的孔隙率、压缩模量和压缩应力高于胶原支架(P<0.05),吸水率低于胶原支架(P<0.05);②胶原/硫酸肝素支架无细胞毒性,负载脑源性神经营养因子后更加有利于脑微血管内皮细胞的增殖;脑微血管内皮细胞在负载脑源性神经营养因子支架微孔内生长良好,分布均匀;③形态学观察显示,两支架组损伤灶处可见大量新生神经细胞及神经纤维,其中以生长因子支架组的新生神经细胞数量及神经纤维密度更高;④生长因子支架组大鼠的逃逸潜伏期短于空腔组、支架组(P<0.01,P<0.05),象限停留时间和平台穿越次数高于支架组、空腔组(P<0.01,P<0.05);⑤生长因子支架组术后3-7周的改良神经功能缺损评分低于支架组、空腔组(P<0.05,P<0.01);⑥结果表明,负载脑源性神经营养因子胶原/硫酸肝素支架移植可以促进大鼠颅脑创伤后神经运动功能的恢复。