胶原-磺化羧甲基壳聚糖人工真皮支架修复Ⅲ度烧伤创面时组织TGF-β1表达与细胞凋亡的研究

目的 探讨胶原-磺化羧甲基壳聚糖人工真皮支架修复Ⅲ度烧伤创面时生物合成替代和细胞凋亡的机制,为临床应用提供理论依据.方法 将胶原-磺化羧甲基壳聚糖/硅橡胶双层人工皮肤支架移植于10头猪Ⅲ度烧伤清创后创面,对植入后1、2、3周的创面及植入后2周创面加植表皮后2周的修复情况进行观察.同时,通过免疫组织化学、TUNEL、天狼猩红染色方法,对不同时间的创面组织中转化生长因子p 1（TGF-p 1）的表达水平、细胞凋亡发生情况以及支架自身胶原替代情况进行观测.以不植入人工真皮支架的同期烧伤创面作为对照.结果 （1）实验组植入人工真皮支架后2～3周,创面颜色逐渐红润,并变光滑,而对照创面表面粗糙;（2）实验组TGF-β 1表达水平在人工真皮支架植入后1～2周持续增高且高于对照组,3～4周持续下降且低于对照组.对照组1～3周的创面持续升高,4周下降;（3）实验组植入后2～4周凋亡细胞持续增多且数量显著高于相应对照组,对照组3～4周时凋亡细胞持续增多;（4）人工真皮支架植入后1周,自身胶原已开始合成,植入后3周基本完成支架自身胶原替代.结论 胶原-磺化羧甲基壳聚糖人工真皮支架在创面修复中有明显作用,其修复创面的机制与自然的肉芽或瘢痕修复不同,在创面修复重建中有良好的应用前景.

Lando（R）双层人工皮对猪皮肤全层缺损创面血管化的影响

目的 动态观察Lando^（R）双层人工皮（以下简称双层人工皮）应用于猪皮肤全层缺损创面血管化.方法 实验以8头一级藏猪为动物模型,体质量为30 ～ 35 kg,雌雄不限,在每头猪背部正中线两侧分别切取3个边长5 cm深达肌肉筋膜的正方形全层皮肤缺损创面,采用同体自身对照,右侧创面行双层人工皮移植术（实验组）,左侧创面以凡士林油纱覆盖（对照组）.分别于术后第3、7、14、21天按随机数字表随机处死猪,行创面大体观察,同时取材行苏木素-伊红（HE）染色、Masson三色染色后光镜下观察创面修复细胞、炎性反应、胶原纤维排列及支架降解情况,免疫组织化学法检测标本中CD31的表达并计数新生血管数目.结果 实验组创面较对照组干燥,感染发生率较低,肉芽组织生长较平整.光镜下见实验组较对照组组织充血水肿和炎性反应轻微,肉芽组织化速度快,于14d左右支架血管化已基本完成.随时间的延长,修复细胞逐渐减少,胶原纤维排列更为规整且粗大,支架有降解趋势.免疫组织化学结果显示,CD31表达阳性的新生血管数目两组于术后第3天无明显表达,于第7天开始升高,实验组于术后第14天达到高峰,对照组于第21天达到最高.实验组于术后第7、14天高于对照组,于21 d低于对照组,组间差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 双层人工皮在创面愈合过程中可快速诱导血管生成,有利于新生真皮组织的重塑,从而改善创面愈合条件,为后续联合移植自体超薄皮片奠定基础.

不同材料人工真皮支架修复猪Ⅲ度烧伤创面比较

目的比较胶原壳聚糖真皮支架、胶原磺化羧甲基壳聚糖真皮支架及脱细胞基质真皮支架移植于Ⅲ度烧伤创面后，真皮支架的血管化及支架上表皮移植修复创面情况。方法将3种不同真皮支架各移植于6头猪（共18头猪）Ⅲ度烧伤清创后创面，在植入后1、2、3周对真皮支架血管化、创面、支架上表皮移植愈合和修复情况进行观察，同时用免疫组织化学方法，对CD34阳性信号（新生血管数目）进行检测。以无支架植入的Ⅲ度烧伤清创后创面为对照。结果胶原磺化羧甲基壳聚糖真皮支架植入后2周支架血管化已基本完成，而胶原壳聚糖和脱细胞基质真皮支架至少需要3周。3种不同材料支架垂直于创面的新生微血管均比无支架对照创面多；不同材料支架组与对照组2周创面比1周创面、3周创面比2周创面CD34的表达均明显增多，胶原磺化羧甲基壳聚糖真皮支架组植入后1、2、3周CD34阳性信号均明显高于相对应的其他3组；胶原磺化羧甲基壳聚糖真皮支架植入后1周，创面植表皮，移植表皮存活良好，而胶原壳聚糖和脱细胞基质真皮支架植入需要2周，其表面移植的表皮细胞才能成活。结论3种材料的支架均可修复Ⅲ度烧伤创面，而以胶原磺化羧甲基壳聚糖真皮支架的血管化程度最好。