葛根素对慢性心肌纤维化大鼠心脏功能和结缔组织生长因子的影响

目的研究葛根素对慢性心肌纤维化大鼠的心脏功能和心肌结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的影响。方法采用异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)5mg/kg·d×10d皮下注射制作大鼠慢性心肌纤维化模型,分早期和后期给予葛根素(100mg/kg·d)腹腔注射分别56d和46d。对48只雄性SD大鼠进行随机分组:造模组(M组)16只;对照组(C组)8只;早期干预组(Pa组)12只;后期治疗组(Pp组)12只。实验8周末对大鼠进行超声心动图检测左室射血分数(left ventricle ejection frac-tion,LVEF)及缩短分数(fractional shortening,FS),计算左心指数,进行VG(VanGieson)染色测算胶原容积积分(collagen volume fraction,CVF),RT-PCR检测CTGF mRNA水平。结果Pa组和Pp组的左心指数、CVF和CTGF均较M组明显减少(P<0.01),LVEF和FS则较M组明显增加(P<0.01);Pa组的左心指数和CTGF较Pp组明显减少(P<0.05),而CVF减少更为显著(P<0.01);Pa组的LVEF、FS则明显增加(P<0.01),其中Pa组的LVEF与C组无显著差异(P=0.075)。结论葛根素可抑制ISO诱导的心肌CTGF过表达,减少胶原沉积,从而改善心脏功能。

过氧化物酶体增殖物激活型受体γ在心肌间质纤维化中的作用及其机制

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ)不同表达与大鼠心肌间质纤维化之间关系以及其在心肌间质纤维化进程中的作用和机制。方法雄性SD大鼠48只随机分成4组:(1)对照组(C组)16只,采用0.05%ISO[5mg/(kg·d)×10d]皮下注射制作大鼠心肌纤维化模型;(2)早期干预组(Pa组)12只,造模同时给予PPARγ激动剂罗格列酮100mg/(kg·d),腹腔注射56d;(3)晚期干预组(Pp组)12只,造模10d后同样应用罗格列酮46d;(4)空白组(B组)8只。建模后观测各组左心室质量指数、心肌PPARγ mRNA水平、左室心肌组织羟脯氨酸浓度、胶原容积积分(collagen volume fraction,CVF)并检测PPARγ、TGF-β、CTGF、MMP9表达。结果在观测指标左心室质量指数、CVF、心肌组织羟脯氨酸浓度和PPARγ、TGF-β、CTGF、MMP9表达上,Pa组、Pp组和C组均较B组明显增加(P<0.05),Pa组和Pp组均较C组明显减少(P<0.05),Pa组减少更明显。结论 PPARγ可能在心肌间质纤维化进程中发挥重要作用,可能是促进心肌胶原合成的重要信号分子。PPARγ活化可减少TGF-β、CTGF、MMP9表达和胶原沉积,从而减缓ISO诱导的心肌纤维化,早期干预效果更明显,此作用机制可能通过抑制TGF-β、CTGF的过度表达来实现。

葛根素对异丙肾上腺素诱导的心肌纤维化和心肌结缔组织生长因子表达的影响

目的:研究葛根素对异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的大鼠心肌纤维化和心肌结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的影响。方法:雄性SD大鼠随机分成4组:①造模组(M组)16只,采用0.05%ISO(5mg·kg-1.d-1×10d)皮下注射制作大鼠心肌纤维化模型;②早期干预组(Pa组)12只,造模同时给予葛根素(100mg·kg-1.d-1)腹腔注射56d;③后期治疗组(Pp组)12只,造模10d后给予葛根素腹腔注射46d;④对照组(C组)8只。对各组计算左心室质量指数,检测左室心肌组织中羟脯氨酸浓度,进行VG染色、免疫组化染色,测算胶原容积积分(collagen volume fraction,CVF)和CTGF蛋白含量,RT-PCR检测CTGF mRNA水平。结果:Pa组、Pp组和M组的左心室质量指数、CVF、心肌组织羟脯氨酸浓度和CTGF均较C组明显增加(P<0.01);Pa组和Pp组的左心重量指数、CVF、心肌组织羟脯氨酸浓度和CTGF均较M组明显减少(P<0.01),Pa组减少更明显。结论:葛根素减少胶原沉积,从而减轻和延缓ISO诱导的心肌纤维化,早期干预效果更明显,这种作用机制可能是通过抑制CTGF的过度表达来实现。

脐血间充质干细胞移植对盐敏感性高血压大鼠心肌纤维化及细胞凋亡的影响

目的探讨脐血间充质干细胞(UCMSCs)移植对盐敏感性高血压大鼠心肌纤维化和心肌细胞凋亡的影响。方法 60只Dahl大鼠,采用皮下注射辣椒辣素构建盐敏感性高血压实验动物模型,按随机数字表法随机分为正盐组、高盐组及UCMSCs移植组,每组20只。正盐组给予0.3%氯化钠饮食,高盐组给予8%氯化钠饮食,UCMSCs移植组予8%氯化钠饮食。8周之后,UCMSCs移植组大鼠尾静脉注射UCMSCs 1 ml(3×106个/ml PKH-26标记的UCMSCs),连续治疗3 d。实验2周末对大鼠进行超声心动图检测左室射血分数(LVEF)及左室短轴缩短率(FS),计算左心指数。HE染色观察心肌细胞形态,进行Van Gieson(VG)染色应用计算机图像分析系统测算胶原容积积分(CVF);荧光显微镜观察PKH-26标记的UCMSCs在心肌组织中分布情况,TUNEL法检测各组大鼠心肌细胞凋亡情况。结果 (1)正盐组大鼠的心肌细胞排列有序,心肌间质无炎症细胞浸润及纤维化瘢痕形成;高盐组心肌细胞排列紊乱,巨噬细胞浸润明显增多同时伴有明显的纤维化重构;与高盐组相比较,UCMSCs移植组尽管有炎性细胞浸润但心肌细胞排列有序,且无纤维化瘢痕组织形成,心肌的纤维化重构较轻。(2)与正盐组相比,高盐组大鼠的LVEF和FS显著降低(P均<0.05),其左心指数明显上升(P<0.05)。与高盐组相比,UCMSCs移植干预之后大鼠的LVEF和FS明显的提高(P均<0.05),而左心指数降低(P<0.05)。(3)心脏CVF正盐组最低,UCMSCs移植组次之,而高盐组最高,各组组间差异有统计学意义(P<0.05)。(4)仅在UCMSCs移植组的实验大鼠心肌组织中可见较多的PKH-26标记的UCMSCs。(5)正盐组、高盐组、UCMSCs移植组心肌细胞凋亡率分别为0、(28.2±6.3)%、(12.7±2.6)%,与高盐组比较,UCMSCs移植组大鼠心肌细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。结论UCMSCs移植能减轻盐敏感性高血压大鼠心脏纤维化,减少胶原沉积,减少心肌细胞凋亡,改善大鼠心脏功能。