胶原水解物抗骨质疏松疗效功能的研究

解决骨质疏松导致的骨微观结构被破坏、骨密度下降的问题是目前全球老龄化背景下的一个研究热点。为了缓解骨质疏松,本研究使用来自细胞外基质的胶原水解物促进成骨和成血管,进而缓解骨质疏松。通过细胞活性分析,发现胶原水解物可以同时促进成骨细胞MC3T3-E1和内皮细胞EA.hy926的增殖,分别可达到141%、116%(P<0.05),通过碱性磷酸酶和茜素红S染色,发现胶原水解物能促进成骨细胞分化和矿化。建立了去势小鼠骨质疏松模型,micro CT表征发现胶原水解物能较为显著的抑制骨质疏松引起的骨小梁结构破坏,从而缓解骨质疏松症状。本研究表明胶原水解物在促进成骨、抑制骨质疏松等领域具有较大的应用潜力。

利用氧化钙从含铬革屑中提取胶原水解物的研究(Ⅰ)

对采用CaO从含铬革屑中提取胶原水解物的条件进行了研究。通过比较不同CaO用量、反应时间和反应温度对胶原水解物提取率、灰分含量的影响,并对胶原水解物的铬含量进行了检测,确定了CaO从含铬革屑中提取胶原水解产物的最佳条件为:CaO用量6%(按含铬革屑质量计),反应温度61℃,反应时间1h。

酶法制备脱铬革屑胶原水解物分子量的测定

采用凝胶过滤色谱法测定了不同酶解条件下所得脱铬革屑胶原水解产物的分子量及其分布。试验结果表明 :在本试验条件下 ,碱性蛋白酶用量对胶原水解产物分子量的变化影响不大 ;在酶的最适反应pH值下 。

比色法检测乳中掺加的动物胶原水解蛋白

采用比色法快速定量检测乳中掺加的动物胶原水解蛋白。首先通过比色方法测得羟脯氨酸的质量浓度,由测得的羟脯氨酸换算得出乳中掺加的动物胶原水解蛋白的量。此法快速、简便、重复性好、回收率高。

碱性蛋白酶水解脱铬革屑制备胶原水解物的研究

研究了用碱性蛋白酶水解脱铬革屑制备胶原水解产物时 ,影响胶原水解产物收获率的各种因素。最佳水解条件为 :酶用量 0 1 6% (v/w) ,反应 pH值 9 5 ,反应温度 65℃ ,反应时间 40min ,水—渣比为 5∶1。在此条件下 ,胶原水解产物的收获率为 66 2 % ,铬含量仅为 4 2 0mg/kg,并对胶原水解产物的理化性质进行了测定。

碱法制备脱铬革屑胶原水解物分子量的测定

采用凝胶过滤色谱法测定了不同水解条件下 ,碱法制备胶原水解产物的分子量及分子量分布。试验结果表明 :采用凝胶过滤法测定碱法制备脱铬革屑胶原水解产物的分子量是可行的。随着 Ca O用量的增加 ,反应温度的升高以及反应时间的延长 ,胶原水解物的分子量呈下降趋势。通过控制碱法的不同水解条件 ,可获得分子量在一定范围内的胶原蛋白水解物 ,以适合不同的用途。

高效液相色谱法检测牛乳中掺加的胶原水解蛋白

本研究的目的是建立采用高效液相色谱测定牛乳中掺加胶原水解蛋白的方法：其基本原理是通过高效液相色谱法测得羟脯氨酸的含量，由测得的羟脯氨酸含量换算得出乳中掺加的胶原水解蛋白的量。以symmetry—C18（150mm×3．9mm，i．d．5μm）为色谱柱，2，4-二硝基氟苯为衍生试剂，梯度洗脱。流动相A：浓度为0．05mol／LG酸钠缓冲溶液（pH=6．5，含10mL／L四氢呋喃），流动相B：乙腈-水（体积比1：1）。羟脯氨酸质量浓度在2～10mg／L的范围内与峰面积之间具有良好的线性关系，回收率为93．47％～101．20％．检出限为2．5mg／L。测定结果的相对标准偏差为1．62％．

测定皮胶原水解产物分子量的方法研究

应用体积排阻色谱(SEC)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、高效液相与电喷雾质谱联用(HPLC/ESI-MS)这三种蛋白质分子量分析测试技术,来表征胶原水解产物的分子量,以寻求较好的胶原水解产物分子量的测试方法;同时为建立水解反应条件的控制与水解产物分子量之间的关系提供一定的依据。

氨基树脂改性胶原水解物制备蛋白填料

以含铬革屑中提取的胶原水解物为原料,并用三聚氰胺树脂对其进行改性,对改性条件进行了研究。找到的最优改性条件为三聚氰胺树脂:胶原水解物=1∶1,改性时间为1h。并通过对原料和改性产物进行红外分析、DSC分析、氨基含量分析和羟甲基含量分析,证实了三聚氰胺树脂和胶原水解物之间发生了化学结合,使得三聚氰胺树脂接枝到胶原水解物上,制备得到了改性蛋白填料。应用试验证明,蛋白填料具有良好的增厚性能。

胶原水解物的接枝改性及其乳液特点研究

以甲基丙烯酸甲酯(MMA)和丙烯酸丁酯(BA)复合单体在过硫酸铵(APS)的引发下,改性皮胶原水解物,合成了接枝改性后的蛋白乳液。考察了引发剂(APS)浓度,蛋白与单体的质量比和丙烯酸酯单体配比对产物的接枝率(G%),接枝效率(E%),乳液平均粒度和Zeta电位的影响,测定了乳液黏度、稀释稳定性和pH值等参数。确定了乳液在各反应条件下的特点,有利于后期的交联固化处理,制备胶粘剂;用傅里叶红外光谱仪证明了丙烯酸酯成功接枝到了蛋白骨架上;TGA分析表明,纯的接枝产物具有明显的抗水性。

胶原水解产物的分离研究

本文介绍了分离蛋白质常用的方法步骤 ,概述了胶原蛋白水解产物分离研究的情况 ,介绍了本实验室对酶水解胶原蛋白混合物分离的研究结果。

胶原水解物与丙烯酸的接枝共聚物的应用—引发体系的影响研究

采用4类不同引发体系,如过硫酸铵(APS)、过硫酸铵/亚硫酸氢钠(APS/SBs)、Fenton试剂(H2O2/Fe2+)、硝酸铈铵(CAN),引发胶原水解物与丙烯酸类单体接枝共聚,制备CH-g-AAs系列共聚物,并对它们进行应用效果研究。红外光谱证明,4类引发体系均能使胶原水解物与丙烯酸类单体发生接枝反应。与另外3类引发体系相比,CAN的引发效果更好,接枝率和接枝效率分别达到143.85%和68.35%。CH-g-AAs-1(APS引发)和CH-g-AAs-3(APS/SBs引发)的黏度高于CH-g-AAs-2(H2O2/Fe2+引发)和CH-g-AAs-4(CAN引发)的黏度。应用试验表明:水解胶原-丙烯酸树脂共聚物可减轻传统丙烯酸树脂复鞣时,皮革产生的"浅色效应"。考察填充后皮革的增厚效果和物理力学性能发现:CH-g-AAs-1和CH-g-AAs-3的应用效果要优于CH-g-AAs-2和CH-g-AAs-4。

热处理对聚乙烯醇/胶原水解物复合膜性能的影响

以戊二醛为交联剂,丙三醇为增塑剂,采用溶液共混法制备了聚乙烯醇/胶原水解物复合膜(PVA/CH复合膜),考察了热处理对复合膜溶胀和溶解性能的影响。结果表明:热处理减小了复合膜的平衡溶胀度,可能是在热处理过程中引入了新的交联点。热处理时间越长,其平衡溶胀度越低。在水溶液中,PVA/CH复合膜会发生部分溶解而失重,在溶解的初始阶段主要是小分子增塑剂(丙三醇)向水相的扩散,而热处理能够抑制溶解与扩散的发生。

利用氧化钙从含铬革屑中提取胶原水解物的研究(Ⅱ)

利用CaO从含铬革屑中提取胶原水解物。研究了不同反应条件对胶原水解物分子质量的影响,并对反应条件为CaO用量6%(按含铬革屑质量计)、反应温度61℃、反应时间1h时所提取的胶原水解产物,进行了红外及DSC等分析。结果表明:胶原水解物与Ⅰ型胶原相比,三股螺旋结构解开,构象改变,从有序结构变为一种无序状态。

铬革屑提取胶原水解物的灰色关联分析

在弱碱性条件下，从含铬革屑中提取胶原水解物。用灰色关联法分析各因素对产物得率和色泽的影响程度和主次关系，发现产物得率与温度具有很好的关联性，而水解剂用量和反应时间与产品色泽的关联度最大，酶用量对得率和质量的关联度相对较小。各因素对得率的影响次序为：温度〉液比〉时间〉水解剂用量〉酶用量；对产品色泽的影响次序为：时间=水解剂用量〉温度一液比〉酶用量。最佳工艺参数为：温度62℃，时间6h左右，液比为8。12，水解剂用量8％～10％，蛋白酶用量0～0．1％。

酶制剂用于含铬革屑提取胶原水解物的研究

研究了AS1.398中性蛋白酶、2709碱性蛋白酶、工业胰酶从经碱处理的含铬革屑中提取胶原水解物各因素的影响,如酶用量、pH和温度对胶原水解物提取率的影响,分别找出了3种酶提取胶原水解物的最适条件,测定了最适条件下所提取胶原水解物的蛋白含量、铬含量和灰分含量,并对3种酶的适用性进行了比较。结果表明:3种酶在各自的最适条件下所提取的胶原水解物蛋白含量、铬含量和灰分含量相近;AS1.398中性蛋白酶和工业胰酶较适合用于含铬革屑的胶原水解产物提取,其最高胶原水解物提取率分别为24.40%、25.07%。

枯草杆菌AS1.398蛋白酶中胶原水解酶的研究

枯草杆菌AS1.398蛋白酶制剂广泛用于制革工业中的脱毛和软化。本研究采用铬皮粉亲和层析等方法分离纯化了其中的胶原水解酶,比活力达到380U/mg。初步确定其分子量<10000,等电点<3.5,最佳反应条件为pH10,T=50℃,Zn^(2+)为必需离子,可被EDTA完全抑制,对胶原的水解作用显著地表现为纤维组织的溶解,对变性胶原的水解速度为天然胶原的10倍以上。

乳制品中动物胶原水解蛋白测定方法研究

目的:本文建立乳制品中皮革水解蛋白含量的测定方法。方法:采用比色法定量检测乳制品中添加的动物胶原水解蛋白,先测得羟脯氨酸的质量浓度,再由测得的羟脯氨酸换算出乳制品中添加的动物胶原水解蛋白的含量。结果:比色法测定乳制品中添加的动物胶原水解蛋白,回归方程y=6.628x-0.1237,r=0.9994,回收率均值为109.2%,RSD为4.0%。结论:该方法操作简便、快速、重现性好,适用于乳制品中添加的动物胶原水解蛋白含量的测定。

胶原水解产物生物功能性的研究进展

胶原是动物体内含量最丰富的蛋白质,其特有的三股螺旋结构以及氨基酸序列使得胶原及其水解产物具有生物相容性、生物功能性等诸多优点,可以广泛地应用于生物医学、组织工程、食品保健等领域。本文结合国内外最新研究成果,综述了胶原水解产物的生物功能性,包括抗菌性能、抗氧化性和降血压等。指出我国胶原相关产业的发展除了生产传统的组织工程和医药材料之外,还应该根据其特性,拓展其应用范围,开发出各种具有生物功能性的食品和保健品。

饮用含胶原水解物的功能性发酵奶可改进血浆中胶原特有氨基酸的浓度

临床研究已经表明,胶原水解物(CH)能够保护关节免受伤害、增强关节和减轻像骨关节炎那样造成的痛苦。CH集合了多种氨基酸和活性肽,它可以很方便地吸收进入血液和分布在组织中。虽然已经研究过各种载体的作用与影响,但是添加于新鲜发酵奶产品(FMP)的CH特有的氨基酸的吸收还没有研究过。本研究的首要目的是单纯地服用FMP后CH的4种有代表性的氨基酸(甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸和羟赖氨酸)的血液浓度,与单纯地服用纯净胶原水解物的这4种有代表性的氨基酸的血液浓度进行比较。之所以选择这4种有代表性的氨基酸是因为它们可以作为CH吸收率和生物可利用性的标志。在实验中,选择15名男性健康者作为研究对象,随机地、交叉地进行2个周期的研究。被研究者在至少5天内各随机地服用产品1(100mLFMP中含10gCH)(记为"P1")和产品2(100mL水中溶解10gCH)(记为P2)。服用以后,被研究者接受血液氨基酸浓度和尿羟脯氨酸浓度的检测。在服用FMP后,这4种氨基酸的最大浓度(Cmax)的平均值大于单纯服用添加物(p<0.05)。这一效果与提高了脯氨酸的Cmax有关。结论是,因为其物理-化学特性,发酵过程和制备时的极度均质化,此奶制品改善了从CH吸收的氨基酸(即脯氨酸)的血液浓度。本研究设想,含CH的FMP起到了改善胶原特殊氨基酸血液可利用性。因此,FMP产品可能具有控制关节疾病的作用。