阴茎白膜损伤愈合过程中胶原纤维类型分布的动态变化

目的:探讨简便、快捷、灵敏的观察阴茎白膜损伤愈合过程中胶原类型、分布动态变化的方法。方法:在15只新西兰兔阴茎背侧切除白膜5mm×5mm造成缺损,分别在术后2,6,12周(每次5只)取材,苦味酸天狼星红染色,偏振光显微镜观察。结果:术后2周,胶原纤维纤细,由Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维共同组成,此后,Ⅰ型胶原纤维逐渐增多,Ⅲ型胶原纤维逐渐减少,24周时Ⅰ型胶原纤维为主,Ⅲ型已不明显,不同时间点同型胶原纤维含量无显著性差异(P>0.05),术后2周,损伤白膜局部Ⅲ型胶原纤维占大多数;术后6周,术区Ⅰ型胶原纤维明显增加,但排列尚未有序;术后12周,Ⅰ型胶原纤维增粗、增多,呈斜行螺旋状交叉排列。结论:苦味酸天狼星红偏振光不仅能区分Ⅰ、Ⅲ型胶原的类型还能清晰地显示Ⅰ、Ⅲ型胶原的形态、分布和比例关系,具有操作简单、省时、花费少,而且特异性强、灵敏度高。

肥大细胞聚集和脱颗粒促进冠状动脉微血管栓塞后心肌内胶原纤维的沉积

目的:探讨心肌肥大细胞聚集和脱颗粒,在小型猪冠状动脉微血管栓塞后心肌胶原纤维沉积中的作用。方法:32头小型猪分成4组。分别为冠状动脉微血管栓塞组(n=8),假手术组(n=8),肥大细胞膜稳定剂曲尼司特预处理并冠脉微血管栓塞组(n=8),以及曲尼司特预处理但无冠脉微血管栓塞组(n=8)。冠脉微血管栓塞30 d后,用组织化学方法和透射电镜,研究肥大细胞总量以及脱颗粒肥大细胞的数量和胶原纤维的沉积。结果:微血管栓塞30 d后,肥大细胞总量和脱颗粒的肥大细胞数量以及胶原容积分数,同对照组相比均有显著性差异(P<0.01)。而肥大细胞膜稳定剂曲尼司特能,有效减少微血管栓塞组中肥大细胞总量和脱颗粒的数量以及胶原容积分数。胶原容积分数分别同总的肥大细胞数量(r=0.91,P<0.001)和脱颗粒的肥大细胞数量(r=0.92,P<0.001)呈正比。结论:肥大细胞的聚集和脱颗粒促使心肌胶原纤维的沉积。

川芎嗪干预早期膝骨关节炎大鼠软骨Ⅱ型胶原纤维α1基因与血管内皮生长因子mRNA及miR20b的表达

背景:课题组前期研究发现川芎嗪能明显降低骨关节炎关节液中NO、前列腺素E2水平,对减轻骨性关节炎的炎症有一定作用,但具体机制还不清楚。目的:观察川芎嗪治疗膝骨关节炎模型关节软骨中Ⅱ型胶原纤维α1基因、血管内皮生长因子mRNA及miR20b表达水平,并探讨川芎嗪治疗早期膝骨关节炎大鼠的作用机制。方法:健康雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、川芎嗪高剂量组、川芎嗪低剂量组、阳性对照组,后4组通过木瓜蛋白酶关节腔注射制作早期膝骨关节炎大鼠模型。造模后川芎嗪高、低剂量组分别灌胃川芎嗪100 mg/kg和50 mg/kg,阳性对照组灌服塞来昔布24 mg/kg;正常组、模型组灌服等量生理盐水。干预6周后取材,分别行鼠软骨大体组织学评分、qR T-PCR检测软骨Ⅱ型胶原纤维α1基因、血管内皮生长因子mRNA及miR20b的表达水平。结果与结论:(1)软骨Mankin评分:川芎嗪高、低剂量组和阳性对照组均较正常组高(P<0.05),较模型组低(P<0.05),且川芎嗪高剂量组<阳性对照组<川芎嗪低剂量组;(2)川芎嗪各剂量组和阳性对照组的Ⅱ型胶原纤维α1基因、血管内皮生长因子mRNA表达较正常组上调(P<0.05),较模型组下调(P<0.05),且川芎嗪高剂量组<阳性对照组<川芎嗪低剂量组;(3)川芎嗪各剂量组、阳性对照组及正常组的miR20b表达均较模型组上调(P<0.05),其中川芎嗪低剂量组<阳性对照组<川芎嗪高剂量组;(4)提示:川芎嗪对早期膝骨关节炎大鼠治疗具有积极作用,可能通过上调软骨中miR20b从而抑制血管内皮生长因子mRNA的表达,促进软骨的修复。

大鼠肠系膜胶原纤维、弹性纤维的形态结构

目的探讨大鼠肠系膜胶原纤维和弹性纤维的形态结构。方法大鼠麻醉后,将肠系膜平辅在微循环观察盒内,用棉球吸干膜上的水份,滴染液于肠系膜表面,染一定时间后用0.9%氯化钠注射液冲去多余的染液,在显微镜下观察染色结果并用彩色CCD摄录象系统采集图象。结果胶原纤维形态,呈粗细不等的带状,相互交织排列,数量多。弹性纤维呈细线状,走行较直,有分枝,彼此交叉,纤维之间有细胞。结论肠系膜胶原纤维和弹性纤维的活体染色,可较好地观察到两种纤维的形态及其与周围组织的关系。

鼠尾Ⅰ型胶原的酸解、纤维重构和仿骨生物矿化研究

目的：利用鼠尾Ⅰ型胶原构建与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料。方法：通过醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型胶原蛋白，并重构成胶原纤维。然后，将重构后的胶原纤维放置在矿化液中模仿骨生物矿化2—6d，通过透射电子显微镜和电子衍射观察骨生物矿化。结果：酸解提取的鼠尾Ⅰ型胶原蛋白能够重构成胶原纤维，并且具有特征性的D-Band结构。透射电子显微镜和电子衍射显示：矿化2d后，羟基磷灰石钙前体渗入胶原纤维，胶原纤维部分矿化；矿化6d后，胶原纤维内部完全矿化，形成Ⅰ型胶原蛋白／羟基磷灰石钙的仿生骨材料。结论：利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型胶原蛋白可以重构成胶原纤维，经矿化可形成与人类自体骨组织化学成分和分子结构一致的仿生骨材料。

白介素-1受体拮抗剂对椎间盘纤维环胶原纤维代谢的影响

目的探讨白介素-1受体拮抗剂（IL-1Ra）对双后肢大鼠椎间盘纤维环胶原代谢的影响。方法建立双后肢大鼠模型36只，随机分为试验组和对照组，每组18只。试验组从造模当天即予腹腔注射IL-1Ra（50ng／kg体重），隔天重复注射至处死；对照组18只不予任何处理。于造模后1、3、6个月每组分别处死6只，完整取出L3-4椎间盘固定、切片，予SABC法进行免疫组化，使用图像分析系统对髓核中Ⅰ、Ⅱ型胶原染色进行面积扫描，并使用扫描电镜观察纤维环胶原纤维超微结构。结果术后第1个月试验组与对照组椎间盘纤维环中Ⅰ、Ⅱ型胶原面积差异无显著性（P〉0．05），第3个月及第6个月试验组与对照组Ⅰ、Ⅱ型胶原面积相比差异有显著性（P〈0．01）。结论IL-1Ra对双后肢大鼠椎间盘纤维环中Ⅰ、Ⅱ型胶原的代谢有重要的作用。

慢性氟中毒对大鼠心肌胶原代谢的影响

目的:探讨过量氟对大鼠心肌组织I型、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响。方法:将Wistar大鼠随机分成 5组(每组8只):常规食对照组、常规食加氟组(加氟100 mg·L-1)、低钙偏食对照组、低钙偏食加低量氟组 (加氟50 mg·L-1)和低钙偏食加高量氟组(加氟100 mg·L-1)。采用苦味酸-天狼星红染色、偏振光显微镜观察以及免疫组织化学法检测氟中毒大鼠心肌I型、Ⅲ型胶原的表达。结果:图像分析显示苦味酸-天狼星红染色、偏振光显微镜下显示的I型、Ⅲ型胶原面积百分比,各加氟组其I型、Ⅲ型胶原均较其对照组稍有增高趋势, 但差异无显著性(P>0．05)。免疫组化观察I型、Ⅲ型胶原蛋白的表达量0％～10％,各加氟组与其对照组相比差异亦无显著性(P>0．05)。结论:慢性氟中毒对大鼠心肌胶原代谢无明显影响,心肌胶原可能不是氟化物作用的靶子。

前列腺素E1抑制血吸虫病家兔肝脏Ⅰ,Ⅲ型胶原生成的研究

目的探讨前列腺素E1对血吸虫病家兔肝脏Ⅰ,Ⅲ型胶原的生成及分子伴侣Grp78/BiP基因表达的影响。方法用血吸虫尾蚴皮肤敷贴法感染14只家兔,构建血吸虫病肝纤维化动物模型。其中7只兔于感染后60d开始静脉注射PGE1[2.5μg/(kg.d)]至120d。用RT-PCR检测肝组织Ⅰ,Ⅲ型胶原和Grp78/BiP基因mRNA的表达水平。结果血吸虫病家兔肝纤维化形成过程中Ⅰ,Ⅲ型胶原基因表达水平明显增加,分别为(14.81±3.57)%和(12.9±3.25)%;Grp78/BiP mRNA表达显著上调(P<0.05)。外源性PGE1与模型组比较显著降低胶原Ⅰ,ⅢmRNA,分别为(5.79±1.26)%和(5.34±1.08)%(P<0.01)。分子伴侣Grp78/BiP mRNA水平显著下调,分别为(0.43±0.07)%和(0.29±0.02)%(P<0.05)。结论PGE1可通过抑制基因表达和阻遏胶原成熟而有效地降低血吸虫病家兔肝脏胶原纤维的生成。

阿魏酸钠对大鼠肺纤维化的预防作用

目的:探讨阿魏酸钠对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的预防作用。方法:30只SD大鼠随机分为对照组,肺纤维化模型组和阿魏酸钠预防组,每组10只;模型组和预防组以气管内滴入博来霉素(5mg/kg)建立肺纤维化动物模型,预防组采用阿魏酸钠(150mg/kg)灌胃治疗;HE染色检测肺组织病理改变及细胞计数,胶原纤维染色检测总胶原纤维表达,免疫组织化学检测Ⅰ型胶原纤维。结果:与对照组比较,肺纤维化模型组肺组织内细胞数、肺内总胶原纤维及Ⅰ型胶原纤维均显著增加;阿魏酸钠预防组与肺纤维化模型组比较,肺组织内细胞数、肺内总胶原纤维及Ⅰ型胶原纤维均显著降低。结论:阿魏酸钠能有效地减轻肺纤维化大鼠肺组织的炎症和纤维化程度,对肺纤维化有一定的预防作用。

点阵Er：YAG激光对光老化豚鼠皮肤胶原纤维和弹性纤维的影响

目的探讨点阵Er：YAG激光照射对紫外线所致豚鼠光老化皮肤胶原纤维和弹性纤维的影响。方法随机数字表法将60只豚鼠分为无处理组10只和模型组50只，中波紫外线（UVB）和长波紫外线（UVA）照射模型组豚鼠皮肤构建光老化模型，随机选择10只作为光老化模型组，余40只豚鼠分为2周、4周、8周、12周治疗组。点阵Er：YAG激光连续多脉冲照射治疗组豚鼠左侧背部（治疗侧）皮肤，HE染色、Masson染色、Weigertvan Gieson染色和碱水解-分光光度法比较照射后，治疗侧和对照侧皮肤组织学改变、胶原纤维、弹性纤维和羟脯氨酸含量。结果UVA和UVB的最小红斑量4224mJ／cm2和504mJ／cm2隔日照射豚鼠背部皮肤，累积照射UVA459．36J／cm2和UVB54．81J／cm2，成功获得光老化模型。HE染色显示，治疗组治疗侧皮肤真皮浅层激光刺激区新生的胶原纤维和弹性纤维增加、排列致密。12周组Masson染色胶原面积比值治疗侧（0．70±0．12）较对照侧（0．63±0．08）均有增加，差异有统计学意义（t=1．18，P〈0．05）；羟脯氨酸含量治疗侧[（4．73±0．39）mg／g]较对照侧[（3．66±0．85）mg／g]亦有增加，差异有统计学意义（t=3．40，P〈0．05）。结论点阵Er：YAG激光连续多脉冲照射可以刺激光老化豚鼠皮肤真皮浅层胶原纤维含量增加，纤细的弹性纤维新生。

复合降解膜对异体神经再生的影响

目的:探讨抑制结缔组织增生的复合降解膜对异体神经再生作用。方法:实验于2003-04/2004-04在沈阳医学院附属奉天医院动物实验室完成。选取SD大鼠60只随机分成干预组、对照组和正常组,每组20只。用20g/L戊巴比妥钠25mg/kg腹腔麻醉后,将大鼠左下肢坐骨神经切除2cm,用同种异体坐骨神经移植。干预组在神经移植处置入包裹含有抑制胶原纤维合成试剂的降解膜;对照组在神经移植处置入不含试剂的降解膜;正常组在神经移植处不放任何膜。术后180d取材标本制作,并测定各组大鼠神经植入处有髓神经纤维数量、直径,神经近端缝合处胶原纤维数量、羟脯氨酸含量,各组大鼠坐骨神经支配腓肠肌的潜伏期及波幅等。结果:60只实验动物均纳入结果分析。再生坐骨神经纤维的数量、直径以及电生理的潜伏期和波幅等指标上,均明显较不置药的对照组和正常组的多、粗、恢复快、短而大。干预组和对照组胶原纤维数量分别为(521±135,1020±133)条,两组比较有显著性差异(t=-11.833,P<0.05);干预组羟脯氨酸含量较正常组低[(13.13±3.36,21.72±2.85)ug/g,(t=-5.374,P<0.05)];对照组羟氨酸含量(20.65±2.83)ug/g,与正常组(21.72±2.85)ug/g比较差异无显著性意义(t=-0.798,P>0.05)。维生素正常浓度明显较对照组和正常组低。干预组术后潜伏期明显小于对照组与正常组(P<0.05),波幅明显大于对照组和正常组(P<0.005)。结论:抑制结缔组织增生的复合降解膜有提高同种异体神经移植的再生作用。

妊娠期发生盆底功能障碍的影响因素分析

目的:探讨阴道壁组织中弹力纤维、胶原纤维、fibulin-5和转化生长因子β(TGF-β)与初产妇妊娠晚期盆底功能障碍的关系。方法:选取阴道分娩并行会阴侧切的初产妇40例,无妊娠期高血压、妊娠期糖尿病、胎儿生长受限(FGR)和巨大儿。将既无阴道前壁脱垂也无压力性尿失禁(SUI)初产妇设为对照组(20例),将阴道前壁脱垂(包括Ⅰ度和Ⅱ度脱垂的)合并SUI初产妇设为病例组(20例)。所有研究对象阴道分娩行会阴侧切时取少许阴道壁组织行Masson染色检测弹力纤维和胶原纤维的差异,免疫组织化学检测fibulin-5和TGF-β的表达情况,免疫组化结果使用Image-Pro Plus软件分析。结果:2组患者TGF-β蛋白表达量差异无统计学意义(t=1.670,P=0.098),对照组fibulin-5蛋白表达量高于病例组(t=3.062,P=0.005)。病例组胶原纤维和弹力纤维排列稀疏、紊乱,且纤维之间出现断裂,对照组纤维排列致密,形态完整。结论:妊娠期盆底弹力纤维和胶原纤维的异常以及fibulin-5表达减少可能与妊娠期盆底功能障碍发病有关。

芪麝丸对直立大鼠腰椎骨质增生的影响

目的:观察芪麝丸对长期直立大鼠腰椎骨质增生的影响,探讨其可能的作用机制。方法:30只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和芪麝丸组。正常对照组不进行处理,普通饲养笼喂养。模型组和芪麝丸组大鼠行手术截断前肢配合强迫站立建立长期直立大鼠模型。芪麝丸组于术后8个月开始予芪麝丸5g/(kg·d)灌胃,连续灌胃1个月。所有大鼠术后9个月处死并取材,第5腰椎椎体行藏红-固绿染色、天狼星红染色观察病理学改变,免疫组织化学法检测Ⅰ型胶原、Ⅹ型胶原、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)表达;应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术检测第1～3腰椎生长板及椎间盘Ⅰ型胶原α2(typeⅠcollagenα2,Col1α2)、Ⅹ型胶原α1(typeⅩcollagenα1,Col10α1)、TGF-β1、VEGF和runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)基因的表达。结果:藏红-固绿染色显示模型组椎体边缘-椎间盘连接处非基质成分增加,发生骨质增生;正常对照组改变不明显;芪麝丸组与模型组比,相同部位非基质成分较少。天狼星红染色示正常对照组椎体边缘-椎间盘连接处胶原排列致密,模型组该处Ⅰ型和Ⅲ型胶原增加,芪麝丸组椎体边缘-椎间盘连接处胶原致密,以Ⅰ型胶原为主。免疫组织化学检测提示模型组骨质增生形成部位Ⅹ型胶原、VEGF和TGF-β1表达均较正常对照组增加,芪麝丸组Ⅹ型胶原和VEGF表达均较模型组减少,而TGF-β1表达无明显改变。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应示芪麝丸组Col10α1和Runx2基因表达较模型组下降(P<0.01)。结论:芪麝丸能延缓腰椎边缘-椎间盘连接处骨质增生形成,其机制可能与减少增生骨质中细胞外基质Ⅹ型胶原的含量和椎间盘Ⅹ型胶原及Runx2基因表达有关。

慢性冬眠心肌的间质重塑

目的:观察慢性冬眠心肌(CHM)间质变化及其对心功能的影响。方法:对小型猪采用球囊扩张及内膜剥脱术,造成心脏左前降支中段狭窄、心肌慢性缺血,建立CHM模型。24只小型猪被分成:CHM组和假手术组,于模型建立后4周、12周终止实验。心脏切片以HE染色,透射电镜观察组织形态学;以苦味酸天狼星红(PSR)染色,偏光镜观察间质胶原纤维类型和比例;以免疫组化法测定间质糖蛋白、纤维结合蛋白(FN)和骨桥蛋白(OPN);以超声心动图观察左室收缩功能。结果:较之假手术组(1)CHM的间质空间扩大,成纤维细胞增多,胶原增生;(2)CHM的间质胶原容积分数(ICVF)、血管周围胶原容积分数(PCVF)及光密度积分(IOD)、FN和OPN均明显增加,并随时间延长而增加(P<0.01);(3)PSR染色偏光镜观察示CHM组Ⅰ型胶原大量聚集,排列紊乱,Ⅲ型胶原少量,Ⅰ/Ⅲ胶原比例增高;(4)CHM组的左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、室壁增厚率(%WT)显著降低(P<0.01);(5)胶原纤维含量与LVFS、LVEF和%WT呈高度负相关(r=-0.754～-0.872,P<0.01)。结论:慢性冬眠心肌出现间质重塑。

Col24α1基因低表达对成骨细胞碱性磷酸酶及矿化作用的影响

目的:探讨细胞外基质基因Col24α1在MC3T3-E1细胞成骨样分化过程中的表达情况,及其对分化过程中碱性磷酸酶活性和细胞矿化作用的影响。方法:培养MC3T3-E1细胞并诱导成骨分化,从基因及蛋白水平观察Col24α1在成骨细胞分化过程中的表达情况;构建Col24α1低表达慢病毒载体包装,滴度测定,细胞转染效率的验证;分别转染MC3T3-E1细胞,与空白组对照观察Col24α1沉默后碱性磷酸酶活性变化,细胞成骨矿化的影响。结果:Col24α1在成骨细胞在分化过程中表达随着矿化过程的进展而增加。使用慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)技术,可以在MC3T3-E1成骨细胞中成功降低Col24α1表达,发现沉默Col24α1表达显著降低ALP活性和细胞矿化作用。结论:Col24α1可以调节成骨细胞的ALP活性和细胞矿化作用,其异常表达可能与骨骼病变相关。

外用汇涵术泰护创液对创面愈合影响的实验研究

目的 观察汇涵术泰纳米银护创液重组对创面愈合的影响,探讨其在组织修复中的作用机制.方法 利用大鼠创伤模型,采用苏木素-伊红染色观察不同时间点创面愈合情况;应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及定量图像分析方法检测伤后不同时间点创面愈合组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase-3）的表达情况;采用羟脯氨酸测试法检测伤口中胶原纤维的含量,并对照观察创面应用汇涵术泰护创液后以上各项指标的变化.结果 经汇涵术泰护创液治疗的大鼠创面,伤后第8天成纤维细胞生长活跃,数量多,其毛细血管胚芽与成纤维细胞数量明显多于对照组.伤后第14天,经汇涵术泰护创液治疗的大鼠创面的再上皮化明显强于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.治疗组大鼠皮肤中caspase-3表达量明显升高[分别为（9.53±3.76）、（12.23±4.53）、（20.79±8.36）],与对照组[分别为（2.21±0.97）、（4.36±1.23）、（7.67±2.56）]相比,差异有统计学意义（P＜0.05）.治疗组与对照组的伤口中羟脯氨酸的含量的增加趋势相似,但治疗组在第8天和第14天的表达量[分别为（3.83±1.03）、（5.19±1.06）μg/L]明显高于对照组[分别为（2.82±1.50）、（4.95±1.78）],差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 外用护创液在创伤愈合的前期可以促进肉芽组织生长使得愈合周期缩短.在创伤愈合的后期可以直接或间接的促进成纤维细胞的凋亡,维持了细胞增殖与凋亡的平衡.

马桑内酯致痫大鼠海马结构内SYN和GFAP的表达及其意义

目的:研究马桑内酯所致癫痫持续状态下海马结构内突触体素(SYN)及胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)表达的变化规律,探讨癫痫的发生机制。方法:成年健康雄性SD大鼠30只,随机分为模型组及对照组,采用马桑内酯(50μg/kg)侧脑室注射法建立急性癫痫动物模型,应用免疫组织化学方法观察癫痫持续状态下SYN和GFAP的表达。结果:①模型组海马结构各区突触体素阳性免疫反应产物的密度较对照组普遍增加,尤以CA3区苔藓纤维层和齿状回分子层内带为甚(P<0.05)。②模型组海马结构内GFAP免疫反应阳性的胶质细胞与对照组相比,其平均光密度、胞体截面积和周长均显著增强或增大(P<0.05),GFAP免疫反应性增强。结论:突触体素表达的增强可能易化了神经递质的装载和释放,与癫痫持续状态的维持和加重相关。活化的星形胶质细胞在癫痫持续状态中可能主要起保护作用。

Efficient and Comprehensive Utilizatio℃n of Hemicellulose in the Corn Stover

Pretreatment of the corn stover powder by dilute sulphuric acid （solid-liquid ratio 1 ： 20） at 130 for 30 min was carried out with 89.09% of the hemicellulose removed. After filtration, the xylose-rich corn stover pretreatment liquid, whose fermentable sugar was from hemicellulose hydrolysis only, consisting of 81.16% xylose and 15.27% glucose, was used to cultivate genetic recombinant Escherichia coli BL21 with human-like collagen （HLC） expression enhanced by 50.00% and 63.71% xylose consumption.

冠心病患者颈动脉-股动脉脉搏波传导速度与升主动脉组织结构成分的相关性研究

目的探讨冠心病患者动脉弹性功能指标颈动脉-股动脉脉搏波传导速度（cfPWV）与升主动脉组织结构成分的相关性。方法入选在我院行冠状动脉旁路移植术（cABG）的老年冠心病患者60例，应用法国Artech—Medical公司生产的脉搏波速度测定仪测定cfPWV。将CABG术中从升主动脉前壁取下的组织进行病理切片，分别用Masson染色平滑肌和胶原纤维，Weigert’s间苯二酚复红法染弹性纤维。光镜下以计算机图像分析系统分别定量测定血管平滑肌、胶原纤维和弹性纤维的相对面积。cfPWV与升主动脉组织结构成分间的相关性应用直线相关分析。结果冠心病患者cfPWV高于正常范围为（14．2±2．0）m／s，升主动脉壁中膜胶原纤维增多为（44．1±3．9）％，弹性纤维减少为（18．4±3．2）％，胶原纤维、弹性纤维和平滑肌排列紊乱。cfPWV与升主动脉中膜胶原纤维的相对含量呈正相关（r=0．68，P〈0．01），与弹性纤维的相对含量呈负相关（r=-0．59，P〈0．01），而与平滑肌的相对含量无相关性（r=0．01，P〉0．05）。结论冠心病患者大动脉弹性下降，其主要病理基础是胶原纤维增多和弹性纤维减少及这两种主要成分的排列紊乱。cfPWV随着升主动脉中膜胶原纤维的增多和（或）弹性纤维的减少而升高。

β-CTX和N-MID对预测老年肺癌骨转移患者发生骨相关事件和总生存的临床价值

目的 :分析血清骨代谢标志物Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(βisomer of the C-terminal telopeptide of typeⅠcollagen,β-CTX)和骨钙素N-端中分子片段(N-terminal midfragment of osteocalcin,N-MID)在老年肺癌骨转移患者接受唑来膦酸治疗过程中的变化情况,探讨二者对老年肺癌骨转移患者临床预后的预测价值。方法:在本项前瞻性研究中,选取年龄>60岁的肺癌骨转移患者126例,肺癌无骨转移患者110例,同时入组的正常对照为89例。所有肺癌骨转移患者均应用唑来膦酸治疗,每4周1次(4 mg静脉滴注)。采用放射免疫法动态监测肺癌骨转移患者在治疗前和唑来膦酸治疗后2、4、6、8、10和12个月的血清β-CTX和N-MID水平,并记录研究期间患者发生骨相关事件(skeletal-related events,SREs)和总生存的情况。结果:肺癌骨转移组血清β-CTX和N-MID基线水平明显高于肺癌无骨转移组及正常对照组(P值均<0.001),而唑来膦酸治疗后肺癌骨转移组的β-CTX和N-MID水平较治疗前基线水平明显下降(P值均<0.01)。多因素分析结果显示,β-CTX和N-MID是影响SREs发生的独立危险因素[比值比(odds ratio,OR)=6.367,P=0.001;OR=3.015,P=0.025)。高水平β-CTX组发生SREs的中位时间和中位生存时间均短于低水平β-CTX组,差异均有统计学意义(6.0个月vs 10.5个月,P=0.031;13.0个月vs 16.5个月,P=0.028);高水平N-MID组发生SREs的中位时间也低于低水平N-MID组(6.5个月vs 10.5个月,P=0.046),但是二者的中位生存时间无明显差异(14.5个月vs 17.0个月,P=0.226)。结论:血清β-CTX和N-MID是预测老年肺癌骨转移患者发生SREs的有效指标,同时β-CTX可能对评估老年肺癌骨转移患者的预后有一定价值。