胶原的百年研究历程回顾与展望

胶原作为细胞外基质的主要成分,是脊椎动物体内含量最丰富的蛋白。胶原研究历程与人们对生命本质的认识过程密不可分,从纤维学说到细胞学说确立经历了数百年的历程。近百年来,胶原的应用从制革和黏合剂等,逐渐拓展至食品、药品、化妆品、生物材料,近年来拓展至组织工程、再生医学及干细胞定向转化等。结合已有的文献报道及相关研究经验,针对胶原的研究历程、应用范围以及相关技术在胶原研究中的应用、取得的阶段性进步或成果等进行梳理。以期为胶原领域的研究人员提供胶原研究的最新动向,使其充分理解技术进步与科学研究之间的关系,同时有助于促进不同学科领域的交叉与融合。

FGF对兔关节软骨细胞基质胶原和蛋白多糖的影响

关节软骨的损伤与修复是目前骨科临床基础研究的一个重要课题。关节软骨损伤后的修复是极其有限的〔１〕。许多多肽生长因子在关节软骨损伤与修复中起着重要的调节作用，如成纤维细胞生长因子（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＦＧＦ）对中胚层来源的细胞...

硝苯地平和尼卡地平对人成纤维细胞胶原与透明质酸合成及N－乙酰β－氨基葡糖苷酶活性影响

目的：研究硝苯地平（Ｎｉｆ）和尼卡地平（Ｎｉｃ）对人胚肺成纤维细胞胶原与透明质酸（ＨＡ）合成以及Ｎ－乙酰β－氨基葡萄糖苷酶（ＮＡＧ）活性的影响，为应用钙通道阻滞剂防治器官纤维化提供依据。方法：采用３Ｈ－脯氨酸掺入、放射免疫和荧光法分别测定胶原与ＨＡ合成及ＮＡＧ活性。结果：Ｎｉｆ和Ｎｉｃ在１０～４０μｍｏｌ／Ｌ浓度范围内均呈浓度依赖性地抑制胶原与ＨＡ合成；Ｎｉｃ在１０～２０μｍｏｌ／Ｌ浓度时还使细胞培养上清液中ＮＡＧ活性增加。结论：Ｎｉｆ和Ｎｉｃ可望成为抗器官纤维化的有效药物。

p27基因转染对增生性瘢痕成纤维细胞-胶原网收缩的影响

目的:研究p27对增生性瘢痕成纤维细胞-胶原网收缩的影响差异,探讨p27在瘢痕形成中的作用。方法:取体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞(HTsFb),p27基因转染HTsFb,建立成纤维细胞-胶原网模型,观察p27基因转染对p27基因转染HTsFb-胶原网收缩的影响差异。结果:p27能抑制HTsFb-胶原网收缩。结论:p27可能通过抑制瘢痕收缩来抑制瘢痕形成。

抗纤复方对大鼠纤维化肝肝细胞胶原合成的影响

为研究抗纤复方抗肝纤维化的细胞机制,本研究观察了原代培养纤维化肝肝细胞胶原的表达,并以血清药理学方法研究抗纤复方对纤维化肝肝细胞生成胶原的影响。材料与方法1 实验动物 Wistar 雄性大鼠,体重250～300g,由中国科学院上海实验动物中心提供。制作肝纤维化动物模型,以二甲基亚硝胺(DMN 10 mg/kg)腹腔注射3周,每周连续3次。2 主要试剂Ⅳ型胶原酶为 Sigma 公司产品;199培养基、MEM 培养基为 GIBCO BRL 公司产品;Col(Ⅰ)、Col(Ⅲ)、Col(Ⅳ)胶原抗体购自上海医科大学病理教研室;ABC

血清对角膜基质细胞介导下绿脓杆菌引起的角膜胶原降解作用的实验研究

目的探讨血清在绿脓杆菌和角膜基质细胞介导的角膜胶原降解时的作用。方法Ⅰ型胶原凝胶,不混悬及混悬角膜基质细胞,在不同的血清浓度下(0、5%、10%、20%)与绿脓杆菌培养液共同培养24h,超滤去除天然原纤维,超滤液经过水解,分光光度计测定其羟脯氨酸(HYP)的量作为胶原降解的活性单位。结果不混悬角膜基质细胞组,随血清浓度增加绿脓杆菌所引起的胶原降解量无变化,差异无显著性(P>0.05);混悬角膜基质细胞组,随着血清浓度增加绿脓杆菌所引起的胶原降解量减少,差异有显著性(P<0.025orP<0.05);在相同的血清浓度(0、5%、10%)时,混悬角膜基质细胞组胶原降解量高于不混悬角膜基质细胞组,差异有显著性(P<0.025orP<0.05)。结论血清中的某些活性成分可抑制绿脓杆菌诱导的角膜基质细胞胶原降解。

软骨细胞-胶原海绵复合移植修复软骨缺损的形态学研究

目的 研究软骨细胞 -胶原海绵复合移植修复软骨缺损的疗效。方法 软骨细胞取自 3日龄异体幼兔 ,体外培养后接种于胶原海绵支架上 ,再移植于兔膝关节全层软骨缺损处。在同一大白兔双膝关节内外髁分 3组作自身对照研究 ,股骨内髁作软骨细胞 -胶原海绵复合移植组 ,右膝股骨外髁作单纯胶原海绵移植组 ,左膝股骨外髁作空白对照组。移植术后第 4、8、12、16、2 0周分批处死 ,进行大体、组织学和超微结构观察。结果 软骨细胞 -胶原海绵复合移植组缺损处为软骨性修复 ,而单纯胶原海绵移植组和空白对照组为纤维性修复。结论 运用软骨组织工程的原理 ,以胶原海绵作为支架材料的异体软骨细胞移植可修复兔关节软骨缺损 ,为治疗关节软骨缺损提供了一种有效的方法。

肥大细胞对平滑肌源性泡沫细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的影响

探讨大鼠腹腔肥大细胞对平滑肌源性泡沫细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的影响。用大鼠腹腔肥大细胞上清液和氧化型低密度脂蛋白处理平滑肌细胞 4 8h后 ,逆转录聚合酶链反应检测平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA的表达 ,免疫细胞化学染色检测平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果发现 ,与对照组相比 ,处理组平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的mRNA表达降低 ,免疫细胞化学染色后 ,处理组细胞浆内棕色颗粒比对照组少且染色浅。结果提示 ,肥大细胞在体外抑制平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达 ,并且能协同氧化型低密度脂蛋白对Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的抑制作用。

疑似皮肌炎的播散性嗜酸性细胞胶原病

报告1例疑似皮肌炎的播散性嗜酸性细胞胶原病。患者女,53岁。全身泛发暗褐色斑,干燥、皲裂伴瘙痒14个月,无肌肉症状。实验室及辅助检查提示,嗜酸性粒细胞增高、血清IgE升高,抗核抗体(ANA)阳性,CT示肺部多发斑片条索影,肺功能限制性通气功能障碍伴弥散功能减低,肌电图示肌源性损害,皮损组织病理提示符合结缔组织病。诊断:播散性嗜酸性细胞胶原病。

p38MAPK参与高糖刺激大鼠肾小管上皮细胞产生细胞外基质胶原Ⅲ

目的:探讨p38MAPK信号通路在高糖刺激大鼠肾小管上皮细胞产生细胞外基质胶原Ⅲ中的作用。方法:采用体外培养和Westernblotting等方法,以不同浓度D-葡萄糖、p38MAPK信号通路特异性阻断剂SB203580以及用不同时间刺激正常大鼠肾小管上皮细胞NRK52E,分别检NRK52E细胞p38MAPK磷酸化水平和细胞外基质胶原Ⅲ的表达。结果:随D-葡萄糖浓度增加,p38MAPK磷酸化水平、胶原Ⅲ的产生也增加,SB203580可有效阻断高糖引起p38MAPK磷酸化水平的升高和细胞外基质胶原Ⅲ的表达的增高。结论:高糖引起p38MAPK磷酸化水平的升高可能在糖尿病肾病的肾间质纤维化中发挥重要作用。SB203580有潜在的糖尿病肾病防治的临床应用价值。

血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂对肝星状细胞Ⅲ型胶原合成的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂对体外培养的肝星状细胞Ⅲ型胶原蛋白合成及其mRNA表达的影响。方法采用HSC-T6肝星状细胞系作为活化的肝星状细胞的研究模型。将培养的肝星状细胞随机分为对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组、受体拮抗剂(AT1RA)组和血管紧张素Ⅱ+受体拮抗剂(AngⅡ+AT1RA)组。采用ELISA法检测细胞培养上清液中Ⅲ型胶原蛋白的含量;RT-PCR法检测肝星状细胞中Ⅲ型胶原mRNA的表达。结果细胞培养上清液中Ⅲ型胶原蛋白的含量对照组、AngⅡ组和AngⅡ+AT1RA组分别为(6.301±0.432)ng/ml、(7.356±0.237)ng/ml和(6.263±0.236)ng/ml,AngⅡ组高于对照组(P<0.05),AngⅡ+AT1RA组显著低于AngⅡ组(P<0.05)。肝星状细胞Ⅲ型胶原mRNA的表达水平对照组、AngⅡ组和AngⅡ+AT1RA组分别为2.317±0.015、2.643±0.057和2.330±0.036,AngⅡ组高于对照组(P<0.05),AngⅡ+AT1RA组显著低于AngⅡ组(P<0.05)。结论血管紧张素Ⅱ能够促进肝星状细胞Ⅲ型胶原蛋白的合成及其mRNA的表达,而血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂能够明显抑制这一作用。

播散性嗜酸粒细胞胶原病1例

患者女,45岁,3个月前出现双小腿红斑、丘疹伴瘙痒,在当地医院按湿疹治疗,效果不明显。10天前出现低热,体温约38℃,伴乏力,关节痛,肌痛,腹痛,胃纳差。于1997年3月31日入院。既往无慢性疾病及过敏史。检查:慢性病容,体温37.9℃,皮肤科情况:双足背。

辛伐他汀对大鼠血管外膜成纤维细胞增殖迁移和胶原合成的影响

为观察辛伐他汀对血管外膜成纤维细胞增殖、迁移和胶原合成的影响 ,用组织贴块法培养SD大鼠的血管外膜成纤维细胞 ,以四氮唑蓝比色法测定细胞增殖 ,以Sarkar方法测定血管外膜成纤维细胞迁移距离 ,以3 H 脯氨酸掺入法测定胶原合成。结果发现 ,随着辛伐他汀浓度增高血管外膜成纤维细胞的A4 90值呈递减趋势 ,10 -7、10 -6、10 -5和 10 -4mol/L组的A4 90值分别为 0 .2 91± 0 .0 11、0 .2 6 5± 0 .0 0 6、0 .2 34± 0 .0 0 8和 0 .2 14± 0 .0 0 6 ,与对照组(0 .335± 0 .0 18)差异显著 (P均 <0 .0 1) ;随着辛伐他汀浓度增高血管外膜成纤维细胞的迁移距离呈递减趋势 ,10 -7、10 -6、10 -5和 10 -4mol/L组的迁移距离分别为 6 .5± 1.1mm、5 .3± 1.2mm、4 .1± 1.0mm和 2 .9± 0 .9mm ,与对照组 (8.1± 1.8mm)差异显著 (P均 <0 .0 1)。随着辛伐他汀浓度的增高的3 H 脯氨酸掺入率呈递减趋势。 10 -7、10 -6 、10 -5及 10 -4mol/L组血管外膜成纤维细胞的3 H 脯氨酸掺入率分别为 (cpm/ 5 0 0 0细胞 ) 385± 5 1、2 72± 4 8、16 1± 38和 14 1± 36 ,与对照组 (6 5 5± 5 8)差异显著 (P均 <0 .0 1)。此结果提示 ,辛伐他汀可以剂量依赖地抑制血管外膜成纤维细胞增殖、迁移和胶原合成 ,这可能对改善血管重塑有一?

局部植入神经干细胞/胶原支架复合体对大鼠脊髓损伤的修复作用观察

目的：观察局部植入神经干细胞／胶原支架复合体对大鼠脊髓损伤的修复作用。方法分离、培养、鉴定SD 大鼠神经干细胞，将其植入胶原支架中，制备神经干细胞／胶原支架复合体。取90只6周龄 SD 大鼠，随机分为 A、B、C 组，各30只，均常规行左侧脊髓半切术，制备 T10脊髓半横断损伤模型；A 组脊髓切除后于缺损区植入神经干细胞／胶原支架复合体，B 组脊髓切除后于缺损区植入胶原支架，C 组脊髓切除后不作特殊处理。术后1～8周，每周分别对三组大鼠进行 BBB 评分（评价其左后肢运动功能）；术后第4、8周时，三组各处死大鼠15只，进行脊髓组织结构及病理形态观察。结果①术后第4～8周时，A 组大鼠的左下肢 BBB 评分明显高于 B、C 组（P 均＜0．05）。②术后第4周时，A 组大鼠脊髓内支架与周围组织连接紧密，有少量空洞形成；B 组大鼠脊髓内支架与周围神经组织形成纤维蛋白连接，并有较多空洞形成；C 组大鼠脊髓缺损较大，缺损区周边有较多神经元及神经胶质细胞死亡。术后第8周时，A 组大鼠脊髓内有较多的神经纤维生成，支架与周围神经组织形成一体，连接紧密，无空洞形成；B 组大鼠脊髓内衣支架与周围神经组织连接较紧密，有一定量的空洞形成；C 组大鼠脊髓缺损区有岛状神经组织形成，细胞排列不整，仍有大面积缺损区存在。③术后第4周时，A 组大鼠脊髓缺损区的神经纤维排列较规律，B 组与 C 组脊髓缺损区排列杂乱。术后第8周时，A 组脊髓缺损区神经纤维排列有序，彼此间连接紧密；B 组与 C 组脊髓缺损区神经纤维，但仍杂乱，纤维之间不能形成突触连接。结论局部植入神经干细胞／胶原支架复合体可以较好修复损伤的大鼠脊髓，并促进大鼠肢体运动功能的恢复。

人巩膜成纤维细胞体外三维胶原基质培养系统的构建及其生物力学特性

背景眼轴的过度伸长和巩膜组织的扩张是高度近视发病机制研究的热点之一，建立合理的人巩膜成纤维细胞（HSFs）培养体系模型有助于进一步探讨HSFs在高度近视形成过程中与胶原基质相互作用的生物学机制。 目的构建HSFs与Ⅰ型胶原的三维培养系统，微观模拟在体巩膜，建立巩膜重塑模型。 方法采集新鲜供体巩膜组织，采用组织块培养法分离和培养HSFs，采用免疫荧光技术检测细胞中波形蛋白和角蛋白的表达以鉴定细胞；获取8周龄SPF级雄性SD大鼠鼠尾腱制备鼠尾胶原，400 μl胶原加入50 μl NaOH（0.1 mol/L）溶液中混匀，加入80 μl 10倍培养液，混匀，溶液pH值约为7。加入1 100 μl终浓度1×106/ml细胞悬液混合形成凝胶培养系统，于倒置相差显微镜下观察HSFs的增生情况和细胞形态，采用IPP-5软件对三维培养的含细胞胶原收缩面积进行测量以分析三维胶原系统的物理特性；采用生物力学试验机对三维胶原系统的生物力学特性进行测定。 结果培养的HSFs波形蛋白呈阳性表达，角蛋白表达阴性。未接种培养细胞的无成纤维细胞SD鼠鼠尾胶原凝胶透明，实验期间性状无明显变化，而含HSFs的三维胶原凝胶随着细胞培养时间的延长细胞数量增加，倒置相差显微镜下可观察到数十层成纤维细胞相互交错呈网状排列，培养后7～14 d凝胶块呈乳白色，凝胶面积保持在正常的10%左右，三维培养系统中的HSFs接种后24 h细胞产生多向性突起，呈双极形或纺锤形。HSFs胶原凝胶复合物的弹性材料蠕变曲线呈非线性（0～100 s）部分与线性（100～600 s）部分，前者是胶原凝胶在短暂应力的作用下本身的弹性变化，后者是胶原凝胶在定力的作用下随拉伸时间的延长而出现的蠕变变化。 结论鼠胶原凝胶对培养的HSFs有良好的生物相容性，HSFs胶原凝胶可形成三维复合物，可呈现机械性生物学特性，是研究成纤维细胞与细胞外基质之间以及细胞之间相互作用的良好模型，可用于巩膜重塑的模拟研究。

抗纤复方含药血清对HSC-LI90细胞Ⅰ型、Ⅳ型前胶原和基质金属蛋白酶基因表达的影响

目的:探讨抗纤复方含药血清对肝星形细胞(HSC)L190细胞(HSC-LI90)Ⅰ型、Ⅳ型前胶原和基质金属蛋白酶基因表达的影响。方法:以0.5、2.0、4.0g/kg等不同剂量抗纤复方灌胃,制备大鼠的含药血清,作用HSG-LI90细胞48小时,应用Northem印迹杂交的方法,检测Ⅰ型、Ⅳ型前胶原、基质金属蛋白酶-2及膜型基质金属蛋白酶基因的表达,并用酶图法检测基质金属蛋白酶-2的活性。结果:抗纤复方含药血清能抑制HSC-LI90细胞Ⅰ型、Ⅳ型前胶原、增加模型基质金属蛋白酶基因表达,对基质金属蛋白酶-2基因表达及活性无影响。结论:抗纤复方能下调Ⅰ型、Ⅳ型胶原的合成,增加模型基质金属蛋白酶基因的表达。

大气细颗粒物对胶原结构样巨噬细胞受体基因敲除小鼠呼吸和循环系统的影响

目的探讨大气细颗粒物(PM_(2.5))对胶原结构样巨噬细胞受体(MARCO)基因敲除小鼠呼吸和循环系统的作用。方法将12只野生型C57BL/6小鼠随机分为野生型生理盐水组和野生型PM_(2.5)组,12只MARCO^(-/-)型C57BL/6小鼠随机分为MARCO^(-/-)型生理盐水组和MARCO^(-/-)型PM_(2.5)组,每组6只。野生型PM_(2.5)组和MARCO^(-/-)型PM_(2.5)组小鼠气管滴注PM_(2.5)混悬液4 mg·kg^(-1),野生型生理盐水组和MARCO^(-/-)型生理盐水组小鼠给予等量无菌生理盐水,隔日1次,共6次。末次滴注24 h后检测各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、乳酸脱氢酶(LDH)及血清中C-反应蛋白(CRP)、TNF-α和LDH水平;免疫组织化学法检测各组小鼠肺组织中磷酸化表皮生长因子受体(EGFR)表达情况。结果野生型生理盐水组与MARCO^(-/-)型生理盐水组小鼠BALF中IL-6、TNF-α、LDH水平及血清中CRP、TNF-α、LDH水平比较差异均无统计学意义(tBALF=-0. 230、-0. 964、1. 263,t血清=-0. 944、-1. 908、-0. 392,P> 0. 05)。野生型PM_(2.5)组与野生型生理盐水组小鼠BALF中IL-6、TNF-α、LDH水平及血清中CRP、TNF-α、LDH水平比较差异无统计学意义(tBALF=-0. 583、-2. 130、-1. 016,t血清=-0. 890、-1. 649、-0. 885,P> 0. 05)。MARCO^(-/-)型PM_(2.5)组小鼠BALF中IL-6、TNF-α、LDH水平及血清中CRP、LDH水平显著高于MARCO^(-/-)型生理盐水组(tBALF=2. 469、3. 364、3. 000,t血清=2. 530、4. 605,P <0. 05),2组小鼠血清TNF-α水平比较差异无统计学意义(t=1. 911,P> 0. 05)。MARCO^(-/-)型PM_(2.5)组与野生型PM_(2.5)组小鼠BALF中IL-6、TNF-α、LDH水平及血清中CRP、TNF-α水平比较差异无统计学意义(tBALF=1. 723、1. 114、-0. 324,t血清=1. 643、1. 311,P> 0. 05);MARCO^(-/-)型PM_(2.5)组小鼠血清LDH水平显著高于野生型PM_(2.5)组(t=2. 378,P <0. 05)。免疫组织化学结果显示,野生型与MARCO^(-/-)型生理盐水组小鼠肺组织中均未见磷酸化EGFR表达,而野生型与MARCO^(-/-)型PM_(2.5)组小鼠肺组织均可见磷酸化EGFR表达,且MARCO^(-/-)型PM_(2.5)组小鼠肺组织中磷酸化EGFR水平高于野生型PM_(2.5)组。结论PM_(2.5)急性暴露可导致MARCO^(-/-)小鼠呼吸和循环系统发生炎性效应,MARCO可能在PM_(2.5)导致的小鼠急性呼吸和循环系统炎症中发挥重要作用。

槲皮素及异鼠李素对人血管平滑肌细胞胶原合成的影响

目的观察槲皮素、异鼠李素和去甲肾上腺素对人血管平滑肌细胞胶原蛋白合成的影响。方法利用培养的人主动脉血管平滑肌细胞,在培养基中加入不同浓度的槲皮素、异鼠李素、去甲肾上腺素及酚妥拉明,孵育不同时间。采用3H脯氨酸掺入法检测胶原蛋白的合成量。结果10μmol/L去甲肾上腺素有促进血管平滑肌细胞胶原蛋白合成的作用,72h达高峰,去甲肾上腺素的促进作用能被酚妥拉明所阻滞。槲皮素和异鼠李素有抑制血管平滑肌细胞胶原蛋白合成的作用,在1～200μmol/L的浓度范围内其抑制作用有剂量依赖关系,200μmol/L浓度时发挥最大的抑制作用。槲皮素和异鼠李素均对去甲肾上腺素促血管平滑肌细胞胶原蛋白合成有明显的剂量依赖抑制效应,72h抑制作用最强。槲皮素和异鼠李素在抑制去甲肾上腺素的刺激作用方面具有明显的协同作用。槲皮素和异鼠李素对去甲肾上腺素促血管平滑肌细胞胶原蛋白合成的抑制作用,明显大于未受去甲肾上腺素作用的血管平滑肌细胞。槲皮素和异鼠李素对去甲肾上腺素刺激作用的抑制也明显强于酚妥拉明的作用。结论槲皮素和异鼠李素对人主动脉血管平滑肌细胞的胶原蛋白合成,尤其是对去甲肾上腺素刺激的血管平滑肌细胞胶原蛋白合成有很强的抑制作用。

Triptolide抑制角膜免疫反应及TGF-β诱导角膜基质细胞胶原收缩实验研究

雷公藤内酯醇（Triptolide,TP）是中药雷公藤的一种成分,已证实具有多种药理作用如抗炎、免疫调节等[1]。感染性角膜炎是世界范围内,尤其是发展中国家的主要致盲性眼病之一。TNF-α作为Thl细胞分泌产生的炎性细胞因子之一,与IL-2、IFN-1等共同介导细胞免疫[2,3],这些炎性因子及趋化因子可诱导炎性细胞对组织的浸润功能。

胶原凝胶复合骨髓间充质干细胞对小鼠急性肝衰竭的疗效与机制研究

目的探讨移植胶原凝胶复合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,MSCs)对小鼠急性肝功能衰竭(acute liver failure,ALF)的治疗效果与机制。方法 105只雄性C57BL/6 小鼠随机分为5组:对照组、ALF组、ALF+胶原凝胶组、MSCs组和胶原凝胶-MSCs组,每组21只。ALF组、ALF+胶原凝胶组、MSCs组和胶原凝胶-MSCs组采用腹腔注射D-氨基半乳糖苷(D-Gal)12 h后,分别于肝脏多点注射200 μL PBS、200 μL胶原凝胶、1×10^6 MSCs和1×10^6 胶原凝胶-MSCs。记录各组小鼠7 d存活率,全自动生化仪检测肝功能水平,HE染色检测肝脏组织病理学改变,免疫组化检测肝细胞凋亡和增殖情况,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肝脏炎症因子水平,Western blotting检测PI3K-AKT信号通路表达。结果扫描电镜示胶原凝胶与MSCs具有较好的相容性,动物活体成像检测显示胶原凝胶-MSCs移植的信号强于单独MSCs移植的ALF小鼠。D-Gal处理后,胶原凝胶-MSCs组和MSCs组的小鼠生存率明显提高(P<0.05),小鼠血清AST、ALT在胶原凝胶-MSCs组和MSCs组的小鼠明显优于ALF组和ALF+胶原凝胶组(P<0.05),且肝功能指标明显改善,胶原凝胶-MSCs组要更优于MSCs组(P<0.05)。HE染色提示胶原凝胶-MSCs组肝脏的病理改变(肝细胞坏死部位和范围)轻于MSCs组,Western blotting、Ki-67 和cleaved-Caspase3 免疫组化结果显示,胶原凝胶-MSCs组肝细胞增殖能力强于MSCs组,同时肝细胞凋亡程度要低于MSCs组,相应的胶原凝胶-MSCs组肝脏内IL-1β、IL-6、TNF-α、iNOS和CCL2 等炎性因子水平也低于MSCs组。且胶原凝胶-MSCs移植能明显激活肝脏内的PI3K-AKT通路。结论胶原凝胶复合MSCs移植能增强MSCs的肝脏定植能力,通过抑制细胞凋亡和促进细胞增殖减轻肝损伤,并调控AKT信号通路改善肝细胞功能,因此胶原凝胶复合MSCs移植优于单纯MSCs移植治疗ALF。