针药结合对脑卒中肢体痉挛大鼠脑组织海马γ-氨基丁酸a型受体和脑源性神经营养因子表达的影响

目的观察针药结合对脑卒中肢体痉挛大鼠脑组织海马γ-氨基丁酸a型受体(GABAa)和脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探究针药结合治疗脑卒中后肢体痉挛的作用机制。方法采用中动脉线栓结合内囊注射NMDA受体制作脑卒中肢体痉挛大鼠模型。45只实验大鼠随机分为模型组、针药结合组(针刺阳陵泉、曲池+加味芍药甘草汤水煎剂灌胃)、西药组(巴氯芬溶液灌胃)、空白组(不做任何处理)和假手术组(干预同模型组,只分离不结扎不插线)。各治疗组大鼠成模后第1日开始干预,连续5 d。采用RT-PCR和Western blot分别检测大鼠脑组织海马BDNF、GABAa mRNA和蛋白的表达。结果与空白组比较,假手术组大鼠神经功能、肌张力评分差异无统计学意义(P>0.05),模型组大鼠神经功能和肌张力评分明显增加(P<0.01);与模型组比较,西药组和针药结合组大鼠神经功能、肌张力评分明显降低(P<0.05),BDNF、GABAa mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.01);与西药组比较,针药结合组变化不明显(P>0.05)。结论针药结合可改善模型大鼠神经功能,保护神经损伤,缓解卒中后肢体痉挛,其机制可能与上调模型大鼠脑组织海马中GABAa、BDNF mRNA和蛋白的表达相关。

负载脑源性神经营养因子胶原/肝素硫酸支架促进颅脑创伤大鼠神经运动功能的恢复

背景:研究表明胶原和硫酸肝素交联后可有效固定生长因子,显著改善脊髓损伤大鼠的神经运动功能恢复。目的:观察负载脑源性生长因子胶原/硫酸肝素支架移植修复颅脑创伤的效果。方法:制作胶原支架、胶原/硫酸肝素支架与负载脑源性神经营养因子的胶原/硫酸肝素支架,检测胶原支架、胶原/硫酸肝素支架的孔隙率、吸水率、压缩模量和压缩应力;检测载脑源性生长因子胶原/硫酸肝素支架的体外缓释性能;检测胶原/硫酸肝素支架与负载脑源性神经营养因子的胶原/硫酸肝素支架的细胞毒性与细胞相容性。将48只SD大鼠随机分4组干预:对照组开骨窗后缝合,空腔组仅制作颅脑创伤空腔模型,支架组、生长因子支架组颅脑创伤后空腔处分别植入胶原/硫酸肝素支架、负载脑源性神经营养因子的胶原/硫酸肝素支架,术后分别进行改良神经功能缺损评分、水迷宫测试与脑损伤形态学观察。动物实验获得武警特色医学中心伦理委员会批准。结果与结论:①胶原/硫酸肝素支架的孔隙率、压缩模量和压缩应力高于胶原支架(P<0.05),吸水率低于胶原支架(P<0.05);②胶原/硫酸肝素支架无细胞毒性,负载脑源性神经营养因子后更加有利于脑微血管内皮细胞的增殖;脑微血管内皮细胞在负载脑源性神经营养因子支架微孔内生长良好,分布均匀;③形态学观察显示,两支架组损伤灶处可见大量新生神经细胞及神经纤维,其中以生长因子支架组的新生神经细胞数量及神经纤维密度更高;④生长因子支架组大鼠的逃逸潜伏期短于空腔组、支架组(P<0.01,P<0.05),象限停留时间和平台穿越次数高于支架组、空腔组(P<0.01,P<0.05);⑤生长因子支架组术后3-7周的改良神经功能缺损评分低于支架组、空腔组(P<0.05,P<0.01);⑥结果表明,负载脑源性神经营养因子胶原/硫酸肝素支架移植可以促进大鼠颅脑创伤后神经运动功能的恢复。

腧穴“解郁方”对慢性不可预测轻度应激抑郁大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴及BDNF/TrkB/CREB通路的影响

目的:观察腧穴“解郁方”对慢性不可预测轻度应激(CUMS)抑郁大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴和脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶B受体(TrkB)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响。方法:40只无特定病原体(SPF)级Sprague Danley(SD)雄性大鼠随机分为空白组(10只)、模型组(10只)、西药组(10只)、针刺组(10只),除空白组外,其余3组连续28 d构建CUMS抑郁大鼠模型,造模成功后,西药组连续14 d灌胃盐酸帕罗西汀混悬液,每日1次;针刺组针刺百会、太冲、神门,每日1次,每次20 min,连续针刺14 d。苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠海马病理变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)水平;免疫组化(IHC)检测海马BDNF、TrkB表达情况,蛋白质免疫印迹法(Western Blot)及实时荧光定量-聚合酶链式反应(PCR)测定海马BDNF、TrkB、CREB蛋白及mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组血清CRH、ACTH和CORT含量上升(P<0.01),海马病理损伤严重,海马BDNF、TrkB平均光密度降低(P<0.01),BDNF、TrkB、CREB蛋白及mRNA明显下降(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,针刺组血清CRH、ACTH、CORT含量下降(P<0.05),海马病理损害明显减轻,BDNF、TrkB平均光密度明显增加(P<0.05),BDNF、CREB、TrkB蛋白及mRNA表达水平上升(P<0.05)。结论:腧穴“解郁方”可能通过调节HPA轴和调控BDNF/TrkB/CREB信号通路,改善CUMS诱导的大鼠抑郁样行为。

胶原支架结合脑源性神经营养因子移植促进全横断脊髓损伤大鼠轴突再生及运动功能恢复的研究

目的评价胶原支架结合脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)移植修复大鼠全横断脊髓损伤的效果。方法将32只成年雌性SD大鼠随机分成4组(n=8):A组为假手术组,只暴露T_9、T_(10)段脊髓;B、C、D组切除长4 mm的T_9、T_(10)段脊髓后,C、D组分别于损伤处植入相应长度的线性有序胶原支架(linear ordered collagen scaffolds,LOCS)和结合了胶原结合结构域(collagen binding domain,CBD)-BDNF的LOCS。术前及术后3个月内每周对大鼠进行BBB运动功能评分。术后3个月,实施神经电生理检测各组大鼠运动诱发电位(motor evoked potential,MEP);然后于L_2段脊髓组织注射荧光金(fluorogold,FG)实施逆行示踪,1周后取大鼠大脑及胸、腰段脊髓组织,脱水后观察脊髓组织形态;取包含损伤区的胸、腰段脊髓组织作切片。其中,脊髓冠状切片于激光共聚焦显微镜下进行观察,计算FG阳性细胞积分吸光度(IA)值;胸段脊髓组织水平切片采用免疫荧光染色,观察全横断脊髓损伤造模情况、脊髓损伤区轴突再生情况、D组再生轴突的突触形成情况。结果术后各时间点B、C、D组BBB评分均显著低于A组(P<0.05);术后2～12周D组BBB评分均明显高于B、C组(P<0.05)。电生理检测示,B组未观测到MEP;C、D组MEP潜伏期显著长于A组,C组显著长于D组,差异均有统计学意义(P<0.05)。脊髓组织形态观察示,B组脊髓损伤区域向两端延伸,损伤部位组织破坏严重;C、D组脊髓形态恢复较好,D组更接近正常组织形态。逆行示踪结果显示,各组大鼠损伤区以下的腰段脊髓灰质中均充满了FG阳性细胞;在损伤区以上的胸段脊髓中,A组FG阳性区域IA值显著大于B、C、D组(P<0.05),C、D组大于B组(P<0.05),C、D组间差异无统计学意义(P>0.05)。免疫荧光染色示,自同一脊髓背侧至腹侧选出的组织切片显示了明显异于正常组织的全横断脊髓损伤区域。A组NF阳性轴突数明显多于B、C、D组,C、D组多于B组,D组多于C组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 LOCS结合CBD-BDNF移植可以促进大鼠全横断脊髓损伤后轴突再生以及后肢运动功能恢复。

人脐带沃顿胶干细胞对急性大鼠脊髓损伤的作用及脊髓组织中TNF-α和BDNF表达的影响

目的:探讨人脐带沃顿胶干细胞(WJCs)移植对急性脊髓损伤大鼠的治疗作用及其可能机制。方法:81只大鼠分为假手术组、模型组和WJCs移植组,每组27只。每组取6只,采用BBB评分法评估脊髓损伤后1、3、7、14、21和28 d各组大鼠的运动功能,采用透射电镜检测损伤局部超微结构并检测损伤后28 d脑源性神经营养因子(BDNF)的表达,其余大鼠采用实时荧光定量PCR和Western blot检测损伤后0、3、6、12、24、72、168 h损伤脊髓组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达。结果:脊髓损伤后模型组与WJCs移植组大鼠的运动功能均有不同程度的恢复,其中WJCs移植组较模型组恢复更明显。与模型组相比,WJCs移植组损伤区脊髓组织结构相对完整。模型组和WJCs移植组损伤脊髓组织中TNF-αmRNA和蛋白以及BDNF蛋白的表达较假手术组增加(P<0.05);与模型组相比,WJCs移植组中TNF-α的表达降低,而BDNF的表达增加(P<0.05)。结论:WJCs移植可改变脊髓损伤区的微环境,抑制损伤脊髓组织中TNF-α的表达,同时增加BDNF的表达,促进大鼠神经功能恢复,减少脊髓继发性损伤。

丙泊酚调控cAMP/PKA-CREB-BDNF通路对大鼠神经元凋亡、坐骨神经阻滞效果的影响

目的分析丙泊酚调控脊髓环磷酸腺苷/蛋白激酶A-磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白-脑源性神经营养因子(cAMP/PKA-CREB-BDNF)通路对大鼠神经元凋亡、坐骨神经阻滞效果的影响。方法选取40只SPF级Wistar雄性大鼠,其中对照组、假手术组、低剂量组、高剂量组各10只,空白组不做任何处理,假手术组进行手术处理和0.9%氯化钠溶液注射,低剂量组在假手术的基础上注射丙泊酚10 mg/kg;高剂量组注射丙泊酚30 mg/kg。结果与空白组相比,假手术组、低剂量组、高剂量组SOD活性降低(P<0.05);MDA含量、海马神经元凋亡率、各时间点MPE、MPE均升高以及cAMP、PKA、CREB、BDNF表达均降低(P<0.05)。与假手术组相比,低剂量组、高剂量组MDA含量降低(P<0.05);SOD活性、海马神经元凋亡率、各时间点MPE以及10、20、30、60、90、120 min时间点MPE均升高、150、180 min时间点MPE均降低(P<0.05);cAMP、PKA、CREB、BDNF表达均降低(P<0.05)。与低剂量组相比,高剂量组MDA含量降低(P<0.05);SOD活性、海马神经元凋亡率、各时间点MPE以及150、180min时间点EPT均升高;10、20、30、60、90、120 min时间点EPT均降低,(P<0.05);cAMP、PKA、CREB、BDNF表达均降低(P<0.05)。结论丙泊酚能够增强坐骨神经阻滞效果,降低神经元凋亡率,起保护作用可能与丙泊酚调控cAMP/PKA-CREB-BDNF通路有关。

交泰丸加减对2型糖尿病伴失眠患者血清脑源性神经营养因子及5-羟色胺水平的影响

目的:观察交泰丸加减对2型糖尿病伴失眠患者血清脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及5-羟色胺水平(5-hydroxytryptamine,5-HT)的影响。方法:70例2型糖尿病伴失眠患者随机分成观察组和对照组,每组各35例。均予原控制血糖治疗方案,对照组在此基础上给予安定口服催眠治疗,观察组在对照组治疗基础上再给予交泰丸加减治疗,两组均治疗2周。检测血清空腹血糖、餐后2小时血糖(2 hours postprandial blood glucose,2h PG)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,Hb A1C)水平,比较治疗前后血清5-HT、BDNF水平,匹茨堡睡眠质量指数量表评分及全身中医证候积分,临床疗效。结果:与治疗前比较,两组患者血清空腹血糖、2h PG水平降低(P<0.01),5-HT、BDNF水平升高(P<0.01),匹茨堡睡眠质量指数量表评分降低(P<0.01),心烦心悸、口渴喜饮证候积分降低(P<0.01);与对照组比较,观察组患者血清空腹血糖、2h PG水平较低(P<0.01),5-HT、BDNF水平较高(P<0.01),匹茨堡睡眠质量指数量表评分较低(P<0.01),心烦心悸、口渴喜饮、神疲腰酸以及夜尿频数证候积分较低(P<0.01),治疗有效率较高(P<0.05),随访失眠复发较低(P<0.05)。结论:交泰丸加减对2型糖尿病伴失眠患者具有降低血糖及改善睡眠的双重疗效,有效升高血清5-HT及BDNF水平,不良反应少。

不同时程的慢性不可预计温和应激对大鼠海马神经可塑性相关蛋白水平的影响

目的:探讨不同时程的慢性不可预计温和应激对大鼠海马区神经可塑性相关蛋白水平的影响。方法:24只大鼠随机分为4组,各6只:正常对照组、应激1周组、应激2周组、应激3周组,分别给予应激0、1、2、3周。采用Western blot方法检测海马脑源性神经营养因子(BDNF)、cAMP反应元件结合蛋白(CREB)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的蛋白水平。结果:与正常对照组对比,应激1周组、应激3周组的BDNF、CREB、Bcl-2的蛋白水平较低(P<0.05),应激2周组无明显差异;应激1周组和应激3周组之间的BDNF、CREB、Bcl-2蛋白水平无明显差异。结论:海马区的神经可塑性相关蛋白BDNF、CREB、Bcl-2的水平变化可能与抑郁行为的变化存在一定的关联性。

原花青素对慢性应激模型大鼠抑郁焦虑样行为的改善作用

目的研究原花青素(OPC)对慢性应激模型大鼠抑郁焦虑样行为的影响及可能的作用机制。方法采用8种不同的应激因素,每天1种。应激前1 h ig给予OPC 25,50和100 mg·kg-1,连续21 d。从第22天起,给予药物处理1 h后,每天检测一个行为学指标。采用强迫游泳实验测定不动时间;测定糖水偏嗜和大理石掩埋颗数;行为学测试结束后处死大鼠取组织,采用Western蛋白质印迹法测定海马和前额叶内脑源性神经营养因子(BDNF)和磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)的表达。结果慢性应激组大鼠表现出明显的抑郁焦虑样行为,而给予OPC 25,50和100 mg·kg-1后在强迫游泳测试中的不动时间则分别由慢性应激组的(90.57±4.27)s下降为(78.25±2.53)s(P<0.05),(72.12±3.21)s(P<0.05)和(60.77±3.41)s(P<0.05)。OPC 50和100 mg·kg-1组糖水消耗率则由慢性应激组的(42.80±4.92)%增加为(67.54±4.32)%(P<0.05)和(72.21±7.99)%(P<0.05),OPC 50和100 mg·kg-1组的大理石掩埋颗数由慢性应激组的1.57±0.21下降为0.63±0.26(P<0.05)和0.44±0.18(P<0.05)。OPC 25,50和100 mg·kg-1组海马内p-CREB的表达均有显著性增加(P<0.05),前额叶内p-CREB的表达亦显著性增加(P<0.05),OPC 50和100 mg·kg-1组海马及前额叶中BDNF的表达也均有增加(P<0.05)。结论 OPC可以改善由于慢性应激对大鼠造成的抑郁和焦虑样行为,其机制可能与其能够增强cAMP-CREB-BDNF信号转导通路有关。

运动对大鼠海马长时程增强效应及其相关因子的影响

目的:探讨运动对大鼠海马长时程增强(long-term potentiation,LTP)效应及其相关因子的影响。方法:28只成年雄性Wistar大鼠,随机分为对照组与运动组,每组14只。运动组采用4周自愿跑轮运动为体力运动模型。脑立体定位-神经电生理法检测海马齿状回LTP;高效液相-电化学法测定海马5-羟色胺(5-HT)含量;实时荧光定量PCR测定海马5-HT1A受体、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)和脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达。结果:运动组海马齿状回LTP较对照组明显提高(P<0.05),运动组海马5-HT含量(P<0.01)、5-HT1A受体mRNA(P<0.01)、CREB和BDNF mRNA表达水平也显著高于对照组(P<0.05)。结论:运动可能通过对5-HT—5-HT1A受体—cAMP—CREB—BDNF—LTP通路元件的上调机制,发挥增强海马LTP的作用。

基于BDNF/TrkB/CREB通路研究六味地黄丸对丙戊酸钠诱导的孤独症谱系障碍模型仔鼠的作用机制

目的基于脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)/酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor B,TrkB)/cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)通路,探讨六味地黄丸对丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)诱导的孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)仔鼠的作用机制。方法将13只SD孕鼠随机分为两组,其中10只孕鼠在第12.5天时腹腔注射VPA溶液(600 mg·kg^(-1))为VPA组,另外3只孕鼠注射等体积生理盐水为对照组。第21天对两组雄性仔鼠开展行为学检测,筛选出符合ASD疾病模型的仔鼠30只,随机分为模型组(等体积生理盐水),维生素D组(1480 IU·kg^(-1)),六味地黄丸高(3 g·kg^(-1))、中(1.5 g·kg^(-1))、低(0.75 g·kg^(-1))剂量组,每组6只。正常雄性仔鼠6只,设为空白组(等体积生理盐水)。各组仔鼠连续灌胃14 d,1次/d,给药后再次开展行为学检测。尼氏染色观察各组仔鼠海马组织神经元形态学变化,比色法检测各组仔鼠海马组织中谷氨酸(glutamic acid,GLU)、γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)含量;qRT-PCR检测各组仔鼠海马组织中BDNF、TrkB、CREB mRNA相对表达。结果与对照组比较,VPA组仔鼠体质量、身长、尾长更小(P<0.05)。与空白组比较,模型组社交障碍症状明显(P<0.01),焦虑障碍症状明显(P<0.01),重复刻板行为增多(P<0.05或P<0.01),海马神经元结构损伤,GLU升高(P<0.01)、GABA下降(P<0.01),BDNF、TrkB、CREB mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,维生素D组及六味地黄丸中、低剂量组仔鼠社交能力增强(P<0.05或P<0.01),焦虑障碍减轻(P<0.05或P<0.01),重复刻板行为减少(P<0.01或P<0.05),海马神经元结构明显复原,GLU下降(P<0.01),BDNF、TrkB、CREB mRNA表达增加(P<0.05或P<0.01),六味地黄丸中、低剂量组GABA上升(P<0.05或P<0.01)。结论六味地黄丸能显著改善VPA诱导的ASD仔鼠行为表现,增强海马组织神经元的再生与修复,其机制可能与平衡GLU、GABA水平,上调仔鼠海马组织中BDNF/TrkB/CREB的表达有关。

早期恐惧声音应激对大鼠远期学习记忆能力及海马CA1区5-HT1AR-CREB-BDNF信号通路的影响

目的观察早期恐惧声音应激对大鼠远期学习记忆功能及海马CA1区5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法 40只出生后1 d的健康新生SD雄性大鼠随机分为对照组和应激组各20只。应激组以恐惧的声音为应激源,于每日上、下午各播放2 h,持续21 d,建立早期恐惧声音应激模型;对照组于正常环境下饲养。应激结束后5 w行Morris水迷宫实验检测学习记忆能力;水迷宫实验结束后断头取脑,苏木精-伊红(HE)染色观察海马区的病理情况,免疫荧光组织化学法和蛋白免疫印迹法检测大鼠海马CA1区5-HT1AR、CREB和BDNF蛋白表达。结果与对照组相比,应激组学习记忆能力明显下降(P<0.01);对照组海马CA1区的神经元结构整齐、排列紧密,而应激组海马CA1区的神经元排列疏松并且出现了神经元的丢失;与对照组相比,应激组海马CA1区的5-HT1AR、CREB和BDNF蛋白表达均明显降低(P<0.01)。结论早期恐惧声音应激可导致大鼠成年后学习记忆功能障碍,其机制可能与早期恐惧声音应激抑制5-HT1AR-CREB-BDNF信号通路有关。

Dopamin促进出血性卒中大鼠恢复的作用机制研究

目的应用多巴胺(dopamine)对实验性脑出血大鼠进行腹腔注射,研究dopamine对出血性卒中的神经保护作用机制。方法 SD雄性大鼠60只,体质量300±20g,造脑出血模成功后随机分为dopamine治疗组、生理盐水(NS)对照组(n=30),同一条件下饲养。每天进行神经功能评分,不同亚组按相应时间点取材。分别测定出血周围脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和脑源性神经营养因子(BDNF)的免疫组化评分。取脾组织制作匀浆,反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),测定转录调节家族中叉头翼状双螺旋家族的一个独特的成员Foxp3与β-actin的相对密度值,表示CD4+、CD25+、T细胞的活性。结果 dopamine组大鼠与NS组在对应时间点进行神经功能评分,显示前者高于后者差异有统计学意义(P<0.05)。GFAP和BDNF在实验大鼠脑组织中的表达,dopamine组均高于相应对照组差异有统计学意义(P<0.01)。Foxp3mRNA在dopamine组的大鼠脾脏中的表达与相应的对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 dopamine能上调实验性脑出血大鼠脑内GFAP和BDNF蛋白表达水平,促进神经症状的好转。CD4+、CD25+、调节性T细胞对中枢神经系统损伤的恢复有抑制作用;dopamine可下调CD4+、CD25+、调节性T细胞对D4+Th1细胞的抑制作用,促进出血性卒中大鼠脑损伤的恢复。

小鼠慢性酒精中毒及戒断过程中抑郁样行为的改变及其共病机制

目的:研究小鼠慢性酒精中毒及戒断过程中抑郁样行为的改变,进一步探讨酒精中毒与抑郁症的共病机制。方法:构建新型慢性酒精中毒小鼠模型;实验分为正常对照组及慢性酒精7 d、14 d、21 d和28 d组。在第6、13、20和27天分别进行酒精偏好度测试,测试后戒断酒精1 d,随后次日进行抑郁行为学测试,测试结束后处死小鼠取海马与额叶皮层,采用高效液相色谱法测定5-羟色胺(5-HT)及去甲肾上腺素(NE)含量,采用免疫印迹法测定c AMP反应元件结合蛋白(CREB)和脑源性神经营养因子(BDNF)的含量。结果:随着酒精饮酒天数及戒断次数的增加,小鼠表现出明显嗜酒现象,并且在强迫游泳和悬尾测试中,表现出明显的不动时间增加。7 d组小鼠额叶皮层内5-HT水平升高(P<0.05),海马与额叶5-HT水平在21 d与28 d组降低(P<0.01);7 d和14 d组小鼠海马与额叶NE水平无明显变化,21 d和28 d组NE水平降低(P<0.05)。21 d和28 d组小鼠海马与额叶内pCREB/CREB比值及BDNF表达水平明显下降(P<0.05),7 d与14 d组无明显变化。结论:酒精中毒、戒断阶段与抑郁的共病机制涉及5-HT。5-HT-c AMP-CREB-BDNF信号转导通路可能为酒精中毒与抑郁症的共病机制。

有序胶原材料联合CBD-BDNF对大鼠脊髓损伤的修复作用

目的联合有序胶原支架材料和胶原结合结构域-脑源性神经营养因子(CBD-BDNF)修复大鼠脊髓损伤。方法以大鼠脊髓半横断损伤模型观察有序材料联合CBD-BDNF对脊髓损伤的修复效果。大鼠分为3组:Control组即损伤后自动恢复组、Collagen组即损伤部位植入有序材料组和CBD-BDNF/collagen组(CBC组)即损伤部位植入有序胶原材料联合CBD-BDNF组。通过神经丝免疫荧光染色、BBB评分和斜板实验观察修复效果。结果体外实验发现,有序材料能够引导神经元细胞方向性延伸轴突;体内实验发现,CBC组再生神经丝阳性的神经突起数量明显比Control组和Collagen组多(P<0.05),且再生神经丝延伸具有方向性。CBC组大鼠术后9周BBB评分为8(7,13),明显高于Control组[1(1,1)]和Collagen组[2(1,2)](P<0.05)。CBC组大鼠斜板耐受角度也要高于Control组和Collagen组(P<0.05)。结论 CBD-BDNF联合有序胶原支架材料促进脊髓损伤部位神经突起再生和方向性延伸,促进大鼠运动功能恢复,为临床上治疗脊髓横断损伤提供一定实验依据。

颅脑损伤后BDNF及其小分子模拟物的治疗潜力

颅脑损伤（traumatic brain injury,TBI）是一个全球性的公共卫生问题[1],是全球死亡、致残的主要原因.TBI是由外力所致的脑功能的损失或改变.原发性损伤指外部损害导致细胞立即死亡,继发性损伤是原发性损伤周围区域的一系列生物化学变化的结果,进一步导致记忆、认知等功能缺陷.

几丁糖胶原复合膜及激活态雪旺细胞修复周围神经缺损的实验研究

目的研究几丁糖胶原复合膜、激活态雪旺细胞(activatedSchwanncell,ASC)促进周围神经再生的作用。方法将激活态雪旺细胞培养于几丁糖胶原复合膜后,将膜缝制成导管修复大鼠坐骨神经10mm的缺损(D组);并以自体神经移植(A组)、几丁糖胶原复合膜管(B组)及几丁糖胶原复合膜加脑源性神经营养因子[(brainderivedneurotrophicfactor,BDNF)C组]为对照。术后4、8、12周观察肢体运动,复合肌肉动作电位(CMAP)的波幅、潜伏期和运动神经传导速度(MNCV)。术后12周取材,样本染色观察神经轴突再生情况。结果几丁糖胶原复合膜加激活态雪旺细胞修复10mm神经缺损的效果优于几丁糖胶原复合膜加BDNF,与自体神经相似。结论几丁糖胶原复合膜加激活态雪旺细胞能有效地促进周围神经再生。

预知子提取物对抑郁症大鼠海马神经可塑性相关蛋白BDNF/CREB/Bcl-2的影响研究

探讨预知子提取物对抑郁症大鼠海马神经可塑性相关蛋白BDNF/CREB/Bcl-2的影响。90只SD大鼠,随机选取10只,设为A组(空白对照组),常规饲养;其余80只随机分为2组,B组(模型对照组)和C组(预知子提取物干预组),每组各40只,均予以抑郁大鼠模型制备。C组予以预知子提取物干预,每天灌胃1次,直至B组全部大鼠均达到抑郁模型标准。计算C组预知子提取物干预有效率。A组、B组、C1组、C2组各随机选取6只大鼠,剥离海马组织,常规病理染色,光镜下观察海马的组织形态学变化;同时检测海马BDNF/CREB/Bcl-2蛋白的表达。C组预知子提取物干预有效率为69. 23%。B组大鼠海马神经细胞排列稀疏散乱,细胞间隙增大、数量明显减少,核深染。C1组、C2组大鼠海马神经细胞数量增多,细胞间隙明显缩小,海马损伤明显减轻。与A组比较,B组大鼠海马中BDNF、CREB、Bcl-2相对灰度值均显著降低(P <0. 01);与B组比较,C1组、C2组大鼠海马中BDNF、CREB、Bcl-2相对积分光密度值均不同程度增高(P <0. 05或P <0. 01);C2组大鼠海马中BDNF、CREB、Bcl-2相对积分光密度值均高于C1组相应水平(P <0. 05)。预知子提取物可改善抑郁症大鼠海马神经可塑性相关蛋白BDNF/CREB/Bcl-2的水平,可能对抑郁损伤具有一定的保护作用。

银杏提取物缓解丙泊酚麻醉大鼠海马组织损伤的机制研究

目的:探究银杏提取物(GBE)对麻醉大鼠海马环腺苷酸反应元件结合蛋白-1(CREB1)、脑源性神经营养因子(BD-NF)表达的影响。方法:将大鼠随机分为正常对照组、模型组、银杏提取物低(GBE-L,40 mg·kg^-1)、中(GBE-M,60 mg·kg^-1)、高(GBE-H,80 mg·kg^-1)剂量组、盐酸多奈哌齐(donepezil,1.67 mg·kg^-1)组,模型组经腹腔注射100 mg·kg^-1丙泊酚麻醉,GBE各组和Donepezil组在麻醉前腹腔注射相应药物,正常对照组经腹腔注射生理盐水,麻醉结束后测定大鼠舒张压(DAP)、收缩压(SAP)、心率(HR);麻醉结束后第2天行水迷宫实验,大鼠断颈处死后,HE染色观察海马组织的变化,免疫印迹(WB)和免疫组化法检测CREB1、p-CREB1、BDNF、caspase-3、Bal-2蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型组SAP、DAP、逃避潜伏期、caspase-3蛋白表达均显著升高,穿越原平台次数、Bal-2、BDNF、p-CREB1蛋白以及蛋白阳性率表达均显著降低(P<0.05)。与模型组相比,GBE各剂量组及Donepezil组SAP、DAP、逃避潜伏期、caspase-3蛋白表达显著降低,穿越原平台次数、Bal-2、BDNF、p-CREB1蛋白以及蛋白阳性率表达显著升高(P<0.05)。正常对照组海马神经元细胞结构完整,形态正常,细胞紧密排列染色质分布均匀;模型组细胞形态不规则,排列紊乱,细胞膜破碎,细胞融合,界限模糊;经GBE干预后神经元细胞逐渐恢复正常。结论:GBE能够缓解麻醉药物对大鼠海马组织的损伤,可能与上调BDNF表达以及激活CREB1磷酸化有关。

CBD-BDNF诱导面神经损伤后面神经再生及功能恢复的作用

目的探讨带有多肽胶原连接结构域(CBD)的脑源性神经生长因子(BDNF)(CBD-BDNF)诱导面神经再生及功能恢复的效应。方法 140只SD大鼠随机分为三组:对照组20只作为空白对照;A组40只,建立面神经损伤模型;B组40只,建模后在面神经挫伤处鞘内注入CBD-BDNF;C组建模后在面神经挫伤处鞘内注入BDNF治疗。分别于术后1、3d、1、2和4周观察面神经功能恢复、电生理检测、电镜观察神经轴突与髓鞘的变化。结果 B、C组治疗后神经功能恢复、电生理检测、神经轴突及髓鞘变化效果明显优于A组(P<0.05),B组效果明显优于C组(P<0.05)。结论神经营养因子能明显提高面神经功能的恢复;CBD-BDNF具有更好的神经修复及再生作用。