DBA/1J小鼠胶原诱导关节炎模型的建立与鉴定

目的建立DBA/1J小鼠胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型,从形态学、病理学及免疫学等多方面对该模型进行鉴定。方法将牛Ⅱ型胶原(typeⅡcollagen,CⅡ)与佐剂混合并充分乳化,于DBA/1J小鼠尾根部皮下注射进行初次免疫,21 d后同样的方法进行再次免疫。观察小鼠体重变化、关节肿胀程度等形态学指标,进行踝关节病理检查,并用CBA法检测血清中细胞因子的水平。结果造模组小鼠体重于首免后35 d开始下降并持续低于对照组。于28 d,造模组小鼠出现足爪红肿,35 d足爪肿胀厚度显著高于对照组(P<0.05),至62 d发病率高达90%。病理学检测显示,造模组小鼠关节腔变窄,滑膜组织增生,炎症细胞浸润,软骨结构不同程度破坏。相比于对照组,造模组小鼠血清中炎性因子IL-6、IFN-γ、MCP-1显著升高(P<0.05),而抗炎因子IL-10轻微下降(P>0.05)。结论 DBA/1J小鼠尾根部皮下注射牛Ⅱ型胶原可成功诱导CIA模型。

性别差异对牛Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎模型的影响

目的构建雌性及雄性牛Ⅱ胶原诱导的关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型,比较性别差异对CIA模型关节及关节外表现的影响。方法选用雌性及雄性SD大鼠并注射牛Ⅱ型胶原和弗氏完全佐剂诱导CIA模型,评估各组大鼠的一般情况、关节炎指数、足肿胀度、血清炎症因子及纤溶酶原激活物抑制剂水平、脾指数、膝关节及踝关节病理、右后足爪骨破坏情况、肺间质病变情况。结果雌性CIA大鼠的关节炎指数在初次免疫后第21天较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.05),但两组足肿胀度在观察的任一时间点均无显著差异(P>0.05);雌性CIA大鼠血清肿瘤坏死因子α、白介素1β和脾指数均较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.05,P<0.001),纤溶酶原激活物抑制剂水平无显著差异(P>0.05);雌性CIA大鼠膝关节和踝关节病理的炎症细胞浸润及滑膜增生评分较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.05),雌性CIA大鼠膝关节软骨损伤及右后足爪骨破坏程度均较雄性显著升高(P<0.05);雌性和雄性CIA大鼠均出现了肺间质炎症细胞浸润及轻度纤维化,但雌性比雄性的肺间质病变更重。结论使用SD大鼠构建的雌性及雄性CIA模型均能兼具关节炎及肺间质病变,但雌性CIA大鼠的病变程度更重,在使用CIA模型进行RA相关研究时应关注性别差异带来的影响。

滑膜炎颗粒对Ⅱ型胶原诱导的关节炎模型改善作用的机制研究

目的：探讨滑膜炎颗粒对Ⅱ型胶原诱导的关节炎（CIA）模型改善作用机制。方法：牛Ⅱ型胶原乳剂大鼠尾根部皮下注射制备CIA模型,造模成功后按随机数字表法分为对照组（Ⅰ）、模型组（Ⅱ）、不完全弗氏佐剂组（Ⅲ）、雷公藤多苷片组（Ⅳ）、醋酸泼尼松龙组（Ⅴ）、滑膜炎颗粒大剂量组（Ⅵ）、中剂量组（Ⅶ）、小剂量组（Ⅷ）,每组各10~11只大鼠。免疫组化方法观察大鼠左膝关节滑膜组织IL-1、TNF-α、Erk、Jnk、Ras、Raf的表达,图像分析软件计算阳性面积比。结果：各造模组大鼠膝关节滑膜组织IL-1、Erk、Jnk、Ras、Raf表达量均较对照组增高;各给药组Erk表达量均较模型组降低,其中Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组Erk表达量与模型组比较差异有统计学意义。结论：IL-1、Erk、Jnk、Ras表达升高,参与CIA模型大鼠滑膜组织病理损伤过程;滑膜炎颗粒改善关节损伤症状可能与降低Erk的表达相关,而与IL-1、TNF、Jnk、Ras、Raf不相关。

Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠模型制备

目的:研究建立较为理想的寒湿痹型实验性类风湿关节炎模型。方法:采用不同浓度Ⅱ型胶原和弗氏佐剂联合应用于大鼠足部注射,诱导关节炎;测量大鼠足肿胀度,并计算肿胀率;检测血清唾液酸水平;观察滑膜组织病理学及超微结构变化。结果:低浓度Ⅱ型胶原和完全佐剂组大鼠关节肿势迅猛,近似于佐剂关节炎大鼠模型,高浓度Ⅱ型胶原和不完全佐剂组大鼠关节肿势和缓;各模型组大鼠血清唾液酸水平均高于正常对照组;滑膜组织的病理学变化与类风湿关节炎相符。结论:高浓度的Ⅱ型胶原加不完全佐剂给药组是较为理想类风湿关节炎大鼠模型,中医辩证属寒湿痹症,与之相比较,佐剂关节炎模型接近于湿热痹症。

清热养阴除湿汤对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠炎症因子的调节作用

目的:观察清热养阴除湿汤(QYCD)对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠的保护作用。方法:采用牛Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型,将24只CIA大鼠随机分为模型组(CIA组)、甲氨蝶呤组(0.625 mg/kg)、清热养阴除湿汤低剂量组(17 g/kg)、清热养阴除湿汤高剂量组(34 g/kg),每组6只,同时随机取6只大鼠作为正常对照组(Control组)。连续给药5周,每周观察大鼠足肿胀度及炎症指数;HE染色法观察大鼠踝关节组织病理形态学改变;micro-CT法观察骨破坏程度;ELISA法检测血清IL-4、IL-17A、TGF-β、IFN-γ水平;荧光PCR法检测脾脏组织T-bet mRNA、Gata-3 mRNA、RORγt mRNA、Foxp3 mRNA的表达。结果:初次免疫后3周CIA组大鼠右后足关节肿胀程度高于Control组(P<0.05),5周时CIA组大鼠关节炎评分最高(P<0.05)。甲氨蝶呤(MTX)、低剂量清热养阴除湿汤(QYCD-L)、高剂量清热养阴除湿汤(QYCD-H)可以缓解大鼠足关节的肿胀程度(P<0.05),减轻炎症细胞浸润、滑膜增殖及软骨表面的侵蚀,CIA大鼠骨破坏在一定程度上被缓解。QYCD-L组、QYCD-H组大鼠血清IFN-γ、IL-17A水平均低于CIA组(P<0.01或P<0.05),而血清IL-4、TGF-β水平均显著高于CIA组(P<0.01)。QYCD-L组、QYCD-H组大鼠T-bet mRNA、RORγt mRNA、Foxp3 mRNA相对表达量均高于CIA组(P<0.05或P<0.01),但Gata-3mRNA相对表达量与CIA组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:清热养阴除湿汤能有效改善CIA大鼠关节炎症状,其机制可能与调节炎症细胞因子及其转录因子水平有关。

滑膜炎颗粒对Ⅱ型胶原关节炎模型的治疗作用研究

目的：应用Ⅱ型胶原诱导的关节炎（CIA）模型探讨滑膜炎颗粒对类风湿关节炎滑膜损伤的治疗作用。方法：牛Ⅱ型胶原乳剂大鼠尾根部皮下注射制备CIA模型,取造模成功的大鼠随机分为对照组（Ⅰ）、不完全弗氏佐剂组（Ⅱ）、模型组（Ⅲ）、雷公藤多苷片组（Ⅳ）、醋酸泼尼松龙组（Ⅴ）、滑膜炎颗粒大剂量组（9.68 g生药/kg,Ⅵ）、中剂量组（4.84 g生药/kg,Ⅶ）、小剂量组（2.42 g生药/kg,Ⅷ）,每组11-12只大鼠。通过动态监测给药后各组大鼠足趾容积变化、关节炎指数评分、踝关节病理观察以及流式细胞仪检测大鼠T细胞亚群的变化,考察滑膜颗粒对CIA模型大鼠的治疗作用。结果：加强免疫6 d开始,各造模大鼠出现关节红肿、变形,滑膜炎颗粒各治疗组对关节炎指数评分和足肿胀度均有不同的抑制作用。其中Ⅵ组给药12、21、24 d关节炎指数评分与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）。Ⅶ组给药后15、18、24、27、30、33 d足肿胀度与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）。给药12、21、24、30 d关节炎指数评分与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。同时各给药组对CIA模型滑膜、软骨、纤维组织及小血管增生和炎性细胞浸润等病理损伤均有不同程度的改善。滑膜炎颗粒各给药组Th细胞百分比、Th/Tc均较模型组有所下降,但与模型组比较差异无统计学意义。结论：滑膜炎颗粒对类风湿关节炎滑膜损伤具有较好的改善作用。

胶原诱导类风湿关节炎小鼠的重要脏器病理变化

目的:观察胶原诱导关节炎(Collagen Induced Arthritis,CIA)小鼠发病高峰期重要脏器的病理变化。方法:20只雄性DBA/1小鼠随机分为正常组和模型组,模型组给予牛II型胶原混合完全弗氏佐剂诱导CIA模型。造模后每周进行关节炎指数评分,于第63天处死小鼠,取心、肝、脾、肺、肾各组织和踝关节,利用HE染色法观察各脏器的病理变化,并采用Real-time PCR法检测小鼠肺组织中转化生长因子β1(Transforming GrowthFactor Beta 1,TGF-β1)以及肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factor Alpha,TNF-α)的m RNA表达水平。结果:成功建立了DBA/1小鼠胶原诱导关节炎模型。HE染色结果表明,除了踝关节出现明显的病理变化外,CIA小鼠的肺部有大量的炎细胞浸润,肺泡间隔增厚,肺泡腔中有炎性浸出物,而心脏、肝脏、脾脏和肾脏没有出现明显的病理变化。Real-time PCR结果显示病变的小鼠肺组织中TGF-β1和TNF-α的含量均显著高于正常的肺组织。结论:胶原诱导的DBA/1小鼠,其踝关节呈现严重的病理变化,其肺部也出现明显的炎症,且与类风湿关节炎肺部并发症的病理变化有相似之处,这些结果提示该模型可用于类风湿关节炎肺部病变的相关研究。

中医复方对胶原诱导性关节炎模型作用机理的研究现状

类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis,RA）是一种原因不明的,慢性全身性炎症性疾病,30～40岁妇女为高危人群。其特点为滑膜增生和外周关节对称性侵蚀性关节炎,但也可导致全身系统性损害。学者们借助胶原诱导性关节炎（collagen induced arthritis，CIA）模型研究中医复方治疗RA的机理，取得了较满意的结果。现就中医复方对CIA模型作用机理的研究现状综述如下。

基于Toll样受体4/核因子κB信号通路探讨槲皮素治疗胶原诱导性关节炎模型大鼠的作用机制

目的基于Toll样受体4(TLR4)/核因子κB信号通路探讨槲皮素治疗胶原诱导性关节炎(CIA)模型大鼠的作用机制。方法选取无特定病原体级雄性SD大鼠60只,按随机数字表法将大鼠分为正常对照组、模型组、甲氨蝶呤组和槲皮素组,各15只。CIA造模成功后每组筛选10只用于实验。正常对照组不予造模及药物干预,模型组CIA造模后予与槲皮素组等量的0.9%氯化钠注射液灌胃,甲氨蝶呤组CIA造模后予甲氨蝶呤腹腔注射,槲皮素组CIA造模后予槲皮素灌胃,均连续给药4周。比较各组大鼠后足足掌厚度、关节炎指数(AI)评分、血清细胞因子水平及踝关节滑膜组织细胞因子表达情况。结果灌胃2、3、4周,甲氨蝶呤组、槲皮素组大鼠足掌厚度均小于模型组,AI评分均低于模型组[AI评分:(6.5±1.2)、(7.6±0.5)分比(8.1±0.6)分,(5.7±1.1)、(6.6±0.5)分比(8.4±0.7)分,(4.6±1.0)、(5.9±0.7)分比(8.5±0.7)分](均P<0.05)。灌胃结束后,模型组大鼠血清γ-干扰素、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-17水平,踝关节滑膜组织中IL-1β、IL-6、IL-17、TLR4、核因子κB p50及核因子κB p65蛋白表达强度均高于正常对照组,而甲氨蝶呤组、槲皮素组均低于模型组(均P<0.05);甲氨蝶呤组与槲皮素组上述指标比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论槲皮素可有效缓解CIA大鼠关节滑膜炎症,调控细胞因子,抑制TLR4/核因子κB通路,可能是治疗类风湿关节炎的潜在药物。

MiR-145-5p对胶原诱导的关节炎小鼠关节炎症的影响

目的:探讨miR-145-5p对胶原诱导的关节炎(CIA)小鼠关节变化的影响。方法:采用牛Ⅱ型胶原免疫DBA/1小鼠诱导CIA,对关节指数评分及足跖肿胀程度进行比较,成模后随机分为agomiR-145-5p组和agomiR空载体(agomiR-NC)组进行干扰,采用足爪micro-CT摄片,踝关节病理检查评分及石蜡切片、HE染色进行处理,并通过免疫组化方法(IHC)检测踝关节中金属蛋白酶-1(MMP-1)、金属蛋白酶-3(MMP-3)、金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶-13(MMP-13)、白细胞介素17(IL-17)和金属蛋白酶17(ADAM17)的表达。结果:成功建立CIA小鼠模型,与agomiR-NC组相比,agomiR-145-5p组micro-CT分析显示骨侵蚀更严重,组织病理学显示滑膜炎症减轻,免疫组化结果显示MMP-3、MMP-9、MMP-13和IL-17水平升高,MMP-1水平无差异,ADAM17水平降低(P<0.05)。结论:成功建立CIA小鼠模型,并发现mi R-145-5p加重关节破坏的同时部分抑制了CIA小鼠的关节炎症。

Ⅱ型胶原诱导的关节炎大鼠滑膜成纤维细胞的培养、纯化和鉴定

类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)病人滑膜成纤维细胞(Fibroblast-like synoviocytes,FLS)是研究RA发病机制和进行RA药物筛选的最理想的细胞来源.但是对于众多非医疗机构的高校和科研院所而言,由于RA病人滑膜组织不易获取而难以进行细胞水平的操作.因此,建立胶原诱导的关节炎大鼠(Collagen-induced arthritis,CIA)模型,成功分离膝关节滑膜组织并进行滑膜成纤维细胞的原代培养和纯化,将有效解决RA FLS的来源问题,为后续实验奠定基础.本实验通过皮内和皮下两次注射鸡Ⅱ型胶原诱导Wistar大鼠罹患关节炎,通过关节炎指数评分和膝关节HE染色明确CIA模型的建立;分离膝关节滑膜组织,采用Ⅱ型胶原酶和无EDTA胰酶消化法分离细胞并进行传代培养,传至第三代时,细胞免疫荧光检测细胞中VCAM-1蛋白含量以鉴定细胞纯度.结果显示,滑膜组织经过消化和培养后得到大量大鼠滑膜成纤维细胞;在显微镜下观察所得细胞呈梭形树突状,具有成纤维样细胞特征;VCAM-1蛋白阳性细胞达98%以上,确证所分离细胞为滑膜成纤维样细胞,且纯度极高.本研究建立了较简便快捷地获得大量滑膜成纤维细胞的方法,为RA的发病机制研究和药物防治提供了丰富的实验材料.

清热养阴除湿汤治疗胶原诱导性关节炎大鼠的血清代谢组学研究

目的:利用代谢组学技术探讨清热养阴除湿汤治疗类风湿关节炎的作用机理。方法:采用大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)模型,应用LC-MS/MS技术,结合多元变量分析和数据库检索,分析对照组、模型组、甲氨蝶呤组和清热养阴除湿汤组大鼠血清代谢物,筛选鉴定潜在差异代谢物;通过Metabo Analyst软件进行代谢通路分析。结果:清热养阴除湿汤治疗类风湿关节炎的机制与下调(R)-3-羟基丁酸、L-丝氨酸、嘧啶二氮[艹卓]、抗坏血酸、L-苹果酸、N-乙酰-D-氨基葡萄糖、1,6-二磷酸果糖7个差异代谢物水平有关(P<0.05),涉及甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,氧化磷酸化,丁酸代谢,癌症途径,肾细胞癌,AMPK信号通路,以及酮体合成和降解7个代谢途径(P<0.05)。结论:清热养阴除湿汤可能通过调节异常的能量代谢过程和抗氧化应激,减轻炎症反应治疗类风湿关节炎。

苗药验方“四大血”对胶原诱导关节炎大鼠IL-17和VEGF表达的影响

目的:探讨苗药验方“四大血”(SX)对牛Ⅱ型胶原蛋白诱导关节炎(CIA)大鼠白细胞介素17(IL-17)及血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的影响。方法:42只SD大鼠分为空白对照组(NG组,n=7)及造模组(n=35),除NG组外,所有大鼠用牛Ⅱ型胶原与等量不完全弗氏佐剂混合乳化剂于尾根部皮下注射致炎、复制CIA动物模型,造模第14天将造模组大鼠均分为模型对照组(Mod组),SX高、中、低药物治疗组(分别给予SX40、20及10g/kg灌胃,21d,n=7)及阳性药物对照组(GTW组,给予雷公藤多甙片40g/kg灌胃,21d,n=7);于造模第14天、给药治疗第7、14及21天时检测足肿胀度(ER);给药第21天时,观察大鼠膝关节滑膜组织病理改变,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定大鼠膝关节滑膜组织VEGFmRNA的表达,ELISA法检测测大鼠血清IL-17及VEGF水平。结果:与Mod组相比,SX40、20及10g/kg组、GTW组大鼠足关节ER减轻,关节滑膜组织炎性细胞浸润明显下降,纤维组织增生及水肿程度减轻;治疗第21天时,与Mod组比较,SX40、20及10g/kg组大鼠膝关节滑膜组织VEGFmRNA水平、血清VEGF含量均显著降低(P<0.01),SX40、20g/kg组血清IL-17含量显著降低(P<0.01)。结论:SX能有效缓解CIA病情,其机制可能与降低IL-17和VEGF含量有关。

基于Ⅱ型胶原诱导性关节炎模型大鼠探讨雷公藤多苷片的长期毒性研究

目的观察雷公藤多苷片对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠多系统的毒性反应。方法将健康SD大鼠随机分为正常组、模型组及实验组,每组10只;除正常组外,其余各组建立胶原诱导性关节炎模型。首次免疫后灌胃给药,正常组和模型组均给予等体积0.3%羧甲基纤维素钠溶液,实验组给予72 mg·kg^(-1)·d^(-1)雷公藤多苷溶液,每天给药1次,连续给药6周。于第42天取材,各组分别检测血常规,计算脏器指数;用酶联免疫吸附试验法检测大鼠肝、肾功能及性激素等水平;用苏木精-伊红(HE)染色法观察肝、肾、卵巢、睾丸组织病理形态学改变。结果正常组、模型组和实验组的睾丸指数分别为(0.81±0.05)%、(0.97±0.06)%和(0.81±0.12)%,雌二醇含量分别为(63.90±16.19)、(55.42±7.23)和(40.04±5.97)pg·mL^(-1),睾酮含量分别为(1290.96±257.94)、(1198.43±190.77)和(912.62±61.72)pg·mL^(-1)。模型组的上述指标与实验组比较,在统计学上差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。HE病理结果表明,雷公藤多苷片能引起CIA模型大鼠的卵巢、睾丸组织病理学异常改变。结论雷公藤多苷片8倍临床等效剂量连续用药6周可以引起CIA大鼠生殖系统的损伤。

黑龙骨茎叶抗类风湿性关节炎作用研究

目的:研究苗药黑龙骨茎叶对胶原诱导性关节炎(Collagen-induced Arthritis,CIA)模型大鼠类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)作用,探究黑龙骨茎叶抗RA作用的潜在开发利用度。方法:SD大鼠随机选取8只作为正常组,其余大鼠建立CIA模型。造模成功后随机分为模型组,黑龙骨茎叶高剂量组(100 mg·kg^(-1))、低剂量组(25 mg·kg^(-1)),雷公藤多苷(TG)组(10 mg·kg^(-1)),每组8只。在试验因素干预后,对各组大鼠AI评分、足趾厚度及病理形态变化进行分析比较。结果:给药前后,正常组与模型组比较有极显著差异(P<0.01),说明造模成功。给药后,大鼠左、右足趾厚度测量值显示,模型组与黑龙骨茎叶高、低剂量组相比均有显著性差异(P<0.05);AI评分显示,黑龙骨茎叶高、低剂量组与模型组相比,存在显著差异,组内比较中,黑龙骨茎叶低剂量组的消肿效果优于高剂量组(P<0.05)。病理切片结果显示,与正常组相比,模型组大鼠滑膜组织内见大量、弥漫性炎性细胞浸润;与模型组相比,黑龙骨茎叶低剂量组大鼠滑膜组织内炎性细胞浸润减少。结论:黑龙骨茎叶表现出了良好的抗RA效果,具有潜在的抗RA开发利用价值。

Wistar大鼠胶原诱导型关节炎模型构建、评价及用药时间的选择

目的:通过足跖部注射牛Ⅱ型胶原和不完全佛氏佐剂的乳化剂,建立胶原诱导型关节炎模型(collagen induced arthritis,CIA),并对其进行评价,成模后即用激素干预,以明确用药的时间。方法:取Wistar大鼠,随机分为2组:正常组、模型组,模型组采用等量的牛Ⅱ型胶原和不完全佛氏佐剂乳化后在雄性Wistar大鼠足跖部皮下注射0.4ml(含胶原400μg),14天后用同样方法于足跖部皮下注射0.1ml(含胶原100μg)做加强注射,于致炎20天后肿胀达高峰期时,用足爪X-ray证明成模,再将模型组分为模型组与激素组,此时激素组开始用药物干预,连用20天药物,并用足爪X-ray说明成模大鼠用药物干预后关节和骨质改变的情况。结果:在致炎20天时,模型组的左足跖厚度显著地高于正常组。同时结合相机拍摄的大鼠足爪图片,以及足爪的X-ray进行评价,说明了模型成功。在致炎20d开始用药,间隔1天用药,连用20d后,结合各组大鼠足爪图片、足爪的X-ray、酶联免疫吸附实验检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α的含量,免疫组织化学检测膝关节滑膜中的TNF-α表达情况,以观察在这样的用药情况下对CIA大鼠模型的影响情况。结论:在致炎20d时模型成功建立,并且在此时用激素干预20d,是有效的。

蓬草除痹汤干预类风湿性关节炎大鼠骨吸收骨重建及细胞因子的表达

背景:实验研究显示,复方中药能有效下调RANKL或上调护骨素及调节RANKL/OPG轴而发挥中药抑制关节破坏和骨吸收的作用。目的:进一步验证中药蓬草除痹汤对类风湿性关节炎大鼠细胞因子及骨吸收和重建的影响。方法:取Wistar大鼠60只,随机分为6组,空白组、模型组、中药蓬草除痹汤高、中、低剂量组、雷公藤对照组。空白组不做处理,其余大鼠建立胶原诱导性关节炎大鼠模型,模型组不做处理,其他各组均为灌胃给药,1次/d,连续给药28d。结果与结论:与模型组比较,各治疗组可以显著抑制大鼠右足肿胀的程度(P<0.01或P<0.05)。各治疗组血清白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α及前列腺素E2水平均明显低于模型组(P<0.01),其中蓬草除痹汤中、高剂量组抑制作用明显优于雷公藤多甙片组(P<0.05)。各治疗组大鼠关节软骨下骨和骨小梁区核因子κB受体活化因子配体表达均低于模型组(P<0.01),护骨素关节软骨组织表达量均低于模型组(均P<0.01)。表明,蓬草除痹汤能有效改善胶原诱导性关节炎大鼠关节炎症状,减轻骨侵蚀,其机制可能与下调血清中致炎因子白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α及前列腺素E2的水平,抑制类风湿性关节炎大鼠关节中核因子κB受体活化因子配体表达有关。

青蒿琥酯对胶原诱导型关节炎模型大鼠IL-17表达的影响研究

目的研究青蒿琥酯对胶原诱导型关节炎(CIA)模型大鼠IL-17表达的影响并探讨其相关的作用机制。方法将40只Wistar大鼠随机分为正常组和模型组。模型组进行造模处理且于造模成功后进行再次分组,即模型组、甲氨蝶呤组(MTX组)及青蒿琥酯组(Art组)。各组按照要求给予生理盐水或是药物处理,取左前肢和右后肢第3足趾关节进行HE染色,并于光镜下观察组织的病理形态。对中性粒、滑膜细胞增生、纤维组织增生及淋巴细胞核浆细胞浸润进行盲法评价。对每只大鼠的足趾和踝关节破坏分骨侵蚀和关节间隙改变两个方面进行检测。取关节滑膜,以免疫组化检测白细胞介素-17的蛋白表达水平。结果 CIA模型关节炎症在起病后7d达到高峰,而后逐渐降低,关节肿胀后1d,CIA组与正常组的差异有统计学意义(P<0.05),给药29d后,Art组和MTX组的肿胀均能被抑制,差异具有统计学意义(P<0.05);CIA大鼠X线表现双侧为对称分布,且第三十天可见明显的骨侵蚀和骨增生;各组大鼠给药30d后,其滑膜组织增生和软骨破坏明显,其中Art组和MTX组其均可显著的抑制CIA大鼠的淋巴细胞、滑膜细胞增生及软骨破坏且差异具有统计学意义(P<0.05);在大鼠滑膜中,存在着50%的正常表达,但着色程度较弱,在IL-17表达面积的比较中,模型组较之正常组明显增多,着色程度较深,在阳性面积及着色强度的比较中,Art组明显低于模型组,MTX组明显低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论青蒿琥酯可有效的抑制IL-17的表达,阻止类风湿关节炎的进展和关节破坏。

日龄对Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎模型成功率的影响

为了研究大鼠日龄对Ⅱ型胶原诱导性关节炎模型(CIA模型)成功率的影响,试验利用鸡Ⅱ型胶原与弗氏完全佐剂制成的乳剂,皮内免疫不同日龄Wistar大鼠,建立类风湿关节炎的大鼠模型,2周后开始测量四肢的足趾部厚度,每周测量1次,根据肿胀程度进行评分。结果表明:31日龄大鼠CIA造模成功率为50%,37日龄大鼠CIA造模成功率为58%,42日龄大鼠CIA造模成功率为92%,49日龄大鼠CIA造模成功率为83%。说明日龄对CIA模型的构建起到关键作用。

蓬草除痹汤对类风湿性关节炎大鼠TNF-α、IL-1β、前列腺素E2水平、RANKL及护骨素影响随机平行对照研究

[目的]观察蓬草除痹汤对类风湿性关节炎大鼠细胞因子及骨吸收和重建影响。[方法]使用随机平行对照方法,将60只Wistar大鼠编号查随机数字表分为六组,空白组、模型组、蓬草除痹汤(高、中、低剂量)组、雷公藤多甙片组,10只/组。复制胶原诱导性关节炎大鼠模型,分别灌胃干预,空白组、模型组等容积生理盐水;蓬草除痹汤组(生药38.5g/kg,19.5g/kg,9.75g/kg),雷公藤多甙片混悬液5.75g/kg,1次/d,连续28d。连续干预4周后,各组大鼠眶静脉取血,3500r/min,离心10min,取上清液存于-70℃冰箱备用。观测关节炎指数、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α及前列腺素E2水平、光镜下RANKL、护骨素。[结果]各药物干预组均可显著抑制大鼠右足肿胀程度(P<0.01/P<0.05),血清白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α及前列腺素E2水平均明显低于模型组(P<0.01);蓬草除痹汤中、高剂量组抑制作用明显优于雷公藤多甙片组(P<0.05);各药物干预组大鼠关节软骨下骨和骨小梁区核因子κB受体活化因子配体表达均低于模型组(P<0.01),护骨素关节软骨组织表达量均低于模型组(P<0.01)。[结论]蓬草除痹汤可有效改善胶原诱导性关节炎大鼠关节炎症状,减轻骨侵蚀,机制与下调血清中致炎因子白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α及前列腺素E2的水平,抑制类风湿性关节炎大鼠关节中核因子κB受体活化因子配体表达有关。