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胶原酶浓度对大鼠胰岛分离纯化产量的影响
被引量:
4
1
作者
蒋小峰
高玲
+5 位作者
钱滔来
陈松伟
王业增
向广阳
钱世鹍
陈德
《临床医学工程》
2011年第4期492-494,共3页
目的观察胶原酶浓度对大鼠胰岛分离纯化产量的影响,筛选出获取高产量胰岛的最佳消化液的胶原酶浓度。方法 75只雄性SD大鼠按胶原酶浓度分为5组:Ⅰ组(0.5 mg/ml)、Ⅱ组(0.75 mg/ml)、Ⅲ组(1.0 mg/ml)Ⅳ组(1.2 mg/ml)和Ⅴ组(1.5...
目的观察胶原酶浓度对大鼠胰岛分离纯化产量的影响,筛选出获取高产量胰岛的最佳消化液的胶原酶浓度。方法 75只雄性SD大鼠按胶原酶浓度分为5组:Ⅰ组(0.5 mg/ml)、Ⅱ组(0.75 mg/ml)、Ⅲ组(1.0 mg/ml)Ⅳ组(1.2 mg/ml)和Ⅴ组(1.5 mg/ml),每组15只。通过胆灌注胶原酶V来消化大鼠胰腺,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,根据胰岛直径计数所获胰岛的数量及胰岛当量,并利用葡萄糖刺激胰岛素释放试验评估胰岛功能。结果分离的大鼠胰岛具有较好的质量,胰岛纯度为95%左右,活性率为90%左右,体外培养生长良好。随着胶原酶的浓度增加,胰岛数量和胰岛当量明显增加(P〈0.05),并且最大直径的胰岛数量也在增加(P〈0.05),在胶原酶浓度1.0 mg/ml时获得的胰岛产量最高,其次为1.2 mg/ml,在其他浓度时,胰岛产量都较低(P〈0.05)。在低糖和高糖刺激下胰岛素的释放分别为(1.346±0.128)ng/ml和(2.565±0.208)ng/ml,差异具有显著性意义(P〈0.05),刺激指数为(1.908±0.152),提示胰岛细胞功能良好,电镜照片显示胰岛生长状况良好。结论进行大鼠胰岛分离纯化时最适宜的胶原酶浓度为1.0~1.2 mg/ml,可获得稳定高产量的胰岛,过低和过高的浓度都是不适宜的。
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关键词
胶原酶浓度
大鼠
胰岛
产量
下载PDF
职称材料
低浓度胶原酶原位循环灌流法用于原代大鼠肝细胞分离
被引量:
9
2
作者
姚云清
张定凤
+3 位作者
黄爱龙
周卫平
任 红
罗 云
《现代医药卫生》
2001年第2期84-85,共2页
目的:探索高效的原代大鼠肝细胞分离方法.方法:改进并建立低浓度胶原酶原位循环灌流法,比较肝细胞产量、存活率以及胶原酶用量等.结果:低浓度胶原酶原位循环灌流法肝细胞产量为1.584±0.525×108/100g大鼠体重,存活率达95.2...
目的:探索高效的原代大鼠肝细胞分离方法.方法:改进并建立低浓度胶原酶原位循环灌流法,比较肝细胞产量、存活率以及胶原酶用量等.结果:低浓度胶原酶原位循环灌流法肝细胞产量为1.584±0.525×108/100g大鼠体重,存活率达95.2±2.9%,肝细胞纯度>95%,胶原酶用量减少为4.5 mg/100g大鼠体重.而非循环门脉灌流法肝细胞产量为0.508±0.456×108/100g大鼠体重,存活率为84±8%,胶原酶用量10mg/100g大鼠体重.结论:低浓度胶原酶原位循环灌流法为一经济、高效、实用的原代大鼠肝细胞分离技术.
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关键词
肝细胞分离
原代大鼠
低
浓度
胶原酶
原位循环灌流法
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职称材料
题名
胶原酶浓度对大鼠胰岛分离纯化产量的影响
被引量:
4
1
作者
蒋小峰
高玲
钱滔来
陈松伟
王业增
向广阳
钱世鹍
陈德
机构
广州医学院第二附属医院普通外科
深圳市南山区蛇口人民医院麻醉科
出处
《临床医学工程》
2011年第4期492-494,共3页
基金
广州医学院第二附属医院博士启动项目(NO:201001)
文摘
目的观察胶原酶浓度对大鼠胰岛分离纯化产量的影响,筛选出获取高产量胰岛的最佳消化液的胶原酶浓度。方法 75只雄性SD大鼠按胶原酶浓度分为5组:Ⅰ组(0.5 mg/ml)、Ⅱ组(0.75 mg/ml)、Ⅲ组(1.0 mg/ml)Ⅳ组(1.2 mg/ml)和Ⅴ组(1.5 mg/ml),每组15只。通过胆灌注胶原酶V来消化大鼠胰腺,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,根据胰岛直径计数所获胰岛的数量及胰岛当量,并利用葡萄糖刺激胰岛素释放试验评估胰岛功能。结果分离的大鼠胰岛具有较好的质量,胰岛纯度为95%左右,活性率为90%左右,体外培养生长良好。随着胶原酶的浓度增加,胰岛数量和胰岛当量明显增加(P〈0.05),并且最大直径的胰岛数量也在增加(P〈0.05),在胶原酶浓度1.0 mg/ml时获得的胰岛产量最高,其次为1.2 mg/ml,在其他浓度时,胰岛产量都较低(P〈0.05)。在低糖和高糖刺激下胰岛素的释放分别为(1.346±0.128)ng/ml和(2.565±0.208)ng/ml,差异具有显著性意义(P〈0.05),刺激指数为(1.908±0.152),提示胰岛细胞功能良好,电镜照片显示胰岛生长状况良好。结论进行大鼠胰岛分离纯化时最适宜的胶原酶浓度为1.0~1.2 mg/ml,可获得稳定高产量的胰岛,过低和过高的浓度都是不适宜的。
关键词
胶原酶浓度
大鼠
胰岛
产量
Keywords
Collagenase concentration
Rat
Pancreatic islets
Yield
分类号
R657.5 [医药卫生—外科学]
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职称材料
题名
低浓度胶原酶原位循环灌流法用于原代大鼠肝细胞分离
被引量:
9
2
作者
姚云清
张定凤
黄爱龙
周卫平
任 红
罗 云
机构
重庆医科大学病毒性肝炎研究所
重庆医科大学附二院(
出处
《现代医药卫生》
2001年第2期84-85,共2页
文摘
目的:探索高效的原代大鼠肝细胞分离方法.方法:改进并建立低浓度胶原酶原位循环灌流法,比较肝细胞产量、存活率以及胶原酶用量等.结果:低浓度胶原酶原位循环灌流法肝细胞产量为1.584±0.525×108/100g大鼠体重,存活率达95.2±2.9%,肝细胞纯度>95%,胶原酶用量减少为4.5 mg/100g大鼠体重.而非循环门脉灌流法肝细胞产量为0.508±0.456×108/100g大鼠体重,存活率为84±8%,胶原酶用量10mg/100g大鼠体重.结论:低浓度胶原酶原位循环灌流法为一经济、高效、实用的原代大鼠肝细胞分离技术.
关键词
肝细胞分离
原代大鼠
低
浓度
胶原酶
原位循环灌流法
分类号
R329-33 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
胶原酶浓度对大鼠胰岛分离纯化产量的影响
蒋小峰
高玲
钱滔来
陈松伟
王业增
向广阳
钱世鹍
陈德
《临床医学工程》
2011
4
下载PDF
职称材料
2
低浓度胶原酶原位循环灌流法用于原代大鼠肝细胞分离
姚云清
张定凤
黄爱龙
周卫平
任 红
罗 云
《现代医药卫生》
2001
9
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职称材料
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