胶原酶解复合物的制备及其抗冻活性

以水解度为指标,优化了碱性蛋白酶水解猪皮胶原蛋白的条件。在此基础上,制备了不同水解度的酶解复合物,并对其抗冻保护活性进行了研究。结果表明,酶浓度5%(w/v),酶解温度50℃,酶解时间5 h,p H值8.0,胶原质量浓度为15 mg/m L可得到最高水解度,为猪皮胶原蛋白最佳的酶解条件。在此条件下制备水解度分别为4%、6%、8%、10%、13%和16%的酶解复合物,发现水解度为10%的酶解复合物,在使用质量浓度为1.2 mg/m L时对微生物的保护活性最高。该水解度的酶解复合物还能显著抑制冰淇淋的重结晶,并具有较高的热滞活性,为4.64℃,其分子质量主要分布在小于1 000 Da范围内。

猪皮胶原酶解复合物在冰淇淋中的应用

采用碱性蛋白酶对猪皮胶原进行酶解得到具有抗冻活性的复合产物,考察了该复合物对冰淇淋浆料黏度、膨胀率、微观结构、冰晶生长、重结晶及Tg’的影响。结果表明,猪皮胶原酶解复合物具有明显改善冰淇淋品质的效果,当酶解复合物添加浓度为0.5%时,冰淇淋的黏度和膨胀率达到最大,分别为34.5 m Pa·s和26.87%,并表现出最大的重结晶抑制活性,冰淇淋的Tg’也达到最大,为-17.64℃。结合感官分析评价,胶原酶解复合物添加浓度为0.3%时冰淇淋口感最佳,其品质也较高。

冰亲和吸附装置对胶原抗冻肽的分离纯化

抗冻肽是一类可以非依数性降低体系冰点的多肽,在生命体内具有非常重要的生理作用。研究搭建了冰亲和吸附装置,并以微生物保护活性为指标,优化了其对猪皮胶原酶解复合物中胶原抗冻肽的吸附条件,同时对分离产物的性质进行了研究。结果表明:在胶原酶解复合物浓度为1 mg/mL,吸附时间为10 h,吸附温度为-5℃,吸附次数为2次的条件下,所获得的胶原抗冻肽对微生物的低温保护活性最强。经过冰亲和吸附后,胶原抗冻肽的主要洗脱峰之间的分离效果明显增加,其胶原抗冻肽的分子质量主要分布小于1 000 Da、且富含甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸。