梨树胶孢炭疽病生防菌筛选及其抑菌活性初步评价

采集安徽农业大学农业园果树实习基地梨园不同组织和根际土壤样本共83份,将分离纯化后得到的细菌、真菌和放线菌采用琼脂拮抗法,测定各微生物对梨胶孢炭疽病菌菌丝生长的抑制作用,并选用几种常用药剂分别对病原菌菌丝和分生孢子进行处理,观测其化学抑制效果。结果表明,菌株RT-30对梨胶孢炭疽病菌丝生长的抑制率达65.5%,明显高于80%波尔多液可湿性粉剂400倍液,将RT-30进行形态学观察及分子学序列分析,初步将RT-30菌株鉴定为甲基营养型芽孢杆菌Bacillus methylotrophicus。

7种杀菌剂和5种植物抗病激活剂对油茶炭疽病病菌活性研究

胶孢炭疽菌引起的油茶炭疽病是油茶的主要病害之一,试验通过室内毒力测定及活体测定,分别筛选出防治油茶炭疽病的高效杀菌剂和植物抗病激活剂。采用菌丝抑制法测定杀菌剂及植物抗病激活剂对胶孢炭疽菌的毒力;采用离体叶片法,通过病斑减小率评价植物抗病激活剂对油茶炭疽病的诱抗效果。供试7种杀菌剂中以咪鲜胺抑菌活性最强,EC_(50)为0.129 mg/L;嘧菌酯抑菌活性最低,EC_(50)为52.110 mg/L;植物抗病激活剂对菌丝生长无直接抑制作用,但在2年生的油茶苗上喷施后,对病斑在叶片上的扩展均有一定抑制作用,以水杨酸100 mg/L剂量处理的叶片诱导抗病性最佳,诱抗效果为50.13%,芸苔素内酯、茉莉酸甲酯,井岗霉素,苯并噻二唑处理组的最大诱导防病效果依次为36.82%、26.93%、19.67%、17.73%。该试验结果为杀菌剂和植物抗病激活剂的复配制剂提供参考依据,为油茶炭疽病的防治提供新思路。

刺葡萄类钙调蛋白基因VdCML8克隆与表达分析及其启动子转录活性测定

【目的】克隆刺葡萄类钙调蛋白基因VdCML8基因及其启动子序列,并对VdCML8基因进行表达分析,对其启动子进行转录活性测定,为深入探究该基因在葡萄抗炭疽病中的生物学功能提供理论参考。【方法】以刺葡萄紫秋为材料,采用RT-PCR技术克隆VdCML8基因及其启动子序列,对VdCML8蛋白的理化性质和二级结构进行生物信息学分析,并采用实时荧光定量PCR检测刺葡萄紫秋和欧洲葡萄红地球CML8基因在接种胶孢炭疽菌及外施水杨酸(SA)和茉莉酸(JA)处理后的表达特征,通过构建β-葡萄糖苷酶(GUS)融合载体转化烟草进行转录活性检测。【结果】VdCML8基因的开放阅读框(ORF)长度为450 bp,编码149个氨基酸残基,具有EF-hand结构域,其二级结构中α-螺旋占65.10%,延伸链占4.70%,无规则卷曲占20.13%,β-转角占10.07%,该蛋白定位于细胞膜中。由系统发育进化树可知,刺葡萄VdCML8蛋白与欧洲葡萄VvCML8和河岸葡萄VrCML8的亲缘关系较近。VdCML8基因的启动子序列(pVdCML8)长度为1050 bp,除含有大量的CAAT-box和TATA-box外,还含有一些光响应元件(L-box、chs-CMALa和TCT-motif)、脱落酸(ABA)响应元件(ABRE)、厌氧诱导响应元件(ARE)、防御和应激元件(TC-rich repeats)、伤害响应元件(WUN-motif)等。构建pVdCML8的瞬时表达载体pVdCML8::GUS,瞬时转化烟草后发现pVdCML8具有转录活性,且能驱动VdCML8基因表达。在接种胶孢炭疽菌后,刺葡萄紫秋VdCML8基因和欧洲葡萄红地球VvCML8基因表达均上调,均在接种后12 h达峰值,二者的相对表达量是对照组(清水处理)的22.08和9.30倍。SA处理3 h时,VdCML8基因的相对表达量是对照组的7.68倍,是VvCML8基因的2.76倍。JA处理6 h时,VdCML8基因达峰值,是对照组的22.25倍,是VvCML8基因的9.04倍。【结论】VdCML8基因是SA和JA信号途径的下游调控基因,SA和JA可诱导其高效表达,参与葡萄炭疽病响应过程,对提高植株抗病性具有一定作用。

Isolation and Identification of Anthracnose Pathogen from Fruit of Red Fuji Apple

The fruits of Red Fuji apple with anthracnose symptoms were collected and submitted to tissue isolation and culture. One strain of anthracnose pathogen （numbered as Acgl） was obtained, and it was identified by both morphological and molecular biological methods. According to the morphological characteristics of the colony and conidia and the results of rDNA-ITS sequence analysis, the Acgl strain was identified as Colletotrichum gloeosporioides.

7种龙舌兰属植物提取物对两种炭疽病病菌抑菌活性初探

采用菌丝生长速率法测定了7种龙舌兰属植物提取物对胶孢炭疽病病菌（Colletotrichum gloeosporioides）和香蕉炭疽病病菌（Calletotrichum musae）的抑菌活性。结果表明,在质量浓度10、5 mg/m L下处理72 h,7种龙舌兰属植物提取物对两种炭疽病病菌均有很强的抑菌活性。其中,H.11648、广西76416、有刺番麻和番麻对两种炭疽病病菌抑菌率均为100%,普通剑麻、粤西114和灰叶剑麻对两种炭疽病病菌抑菌率为77.78%～100%。毒力测定表明,有刺番麻对胶孢和香蕉炭疽病病菌抑菌效果最显著,有效中浓度（EC_（50））分别为0.027 7 mg/m L和0.048 2 mg/m L,其次是广西76416,有效中浓度（EC_（50））分别为0.093 4 mg/m L和0.240 9 mg/m L。