胶联羊膜的制备及生物力学研究

目的探索胶联羊膜的制备工艺,检测其生物力学特性,探讨其作为眼表移植材料的可行性和优越性。方法将羊膜和纤维蛋白胶粘合制备成胶联羊膜,使用光镜和扫描电镜进行形态学观察,随机选取制备好的12片胶联羊膜在电子万能试验机上进行单向拉伸性能测试,以单层羊膜和双层羊膜作对照,得出抗拉强度、断裂伸长率、弹性模量等。结果胶联羊膜厚度较单层羊膜明显增加,胶联羊膜组织切片示羊膜与胶粘合紧密,层间无间隙。胶联羊膜组的抗拉强度为(0.727±0.142)MPa,断裂伸长率为(24.130±4.523)%,弹性模量为(1.283±0.482)MPa。胶联羊膜的抗拉强度较单层羊膜和双层羊膜明显增加(P<0.01),断裂伸长率最高(P<0.01),弹性模量小于单层羊膜和双层羊膜(P<0.01)。结论胶联羊膜复合材料具有良好的生物力学特性,其柔韧性和可塑性优于单层羊膜和双层羊膜,作为眼表移植材料有更大的优越性。

胶联羊膜的组织形态、细胞相容性及抗拉力特性研究

目的研究胶联羊膜的组织形态、体外细胞相容性及抗拉力特性,探讨该材料用于眼表移植的可行性和优越性。方法使用光镜和扫描电镜观察胶联羊膜的组织形态改变;以单层胶联羊膜为载体行角膜上皮细胞的原代培养,观察细胞生长覆盖面积;在电子万能试验机上测试胶联羊膜的拉伸性能,以单层羊膜和双层羊膜作对照,得出弹性模量。结果新制备的胶联羊膜成一整体,羊膜、纤维蛋白胶结构完整、粘合紧密,保存胶联羊膜外观完整,稍薄,但仍粘合紧密,其纤维蛋白胶面结构较模糊;体外培养7d左右胶联羊膜上即形成单层上皮细胞,第2～7天的细胞生长覆盖面积差异有统计学意义(P<0.05);胶联羊膜的弹性模量小于单、双层羊膜(P<0.01)。结论羊膜和纤维蛋白胶可结合制成胶联羊膜,该材料粘合紧密,镜下形态规则,可作为上皮细胞种植的载体,其柔韧性和可塑性优于单、双层羊膜。

两性霉素B脂质体胶联羊膜药膜的体内外缓释研究

目的研究两性霉素B脂质体(amphotericin B liposome,AmBL)胶联羊膜药膜的体内外缓释性能。方法将两性霉素B脂质体与纤维蛋白胶混合,再与羊膜胶联,制备成两性霉素B脂质体胶联羊膜药膜,光镜及扫描电镜观察形态学。将药膜置于生理盐水中,连续10d置换浸出液,高效液相色谱法测定药物浓度。兔右眼眼表行药膜移植,考察房水中药物浓度变化,左眼滴入自制的两性霉素B脂质体眼液作为对照。结果药物-纤维蛋白胶与羊膜基底面贴合紧密,药物附着在胶原纤维网状孔隙内。浸出液中前3d药物浓度分别为59.9、34.1、27.9μg/ml,以后逐渐减少,第10天为0.78μg/ml。兔眼表药膜移植后,前2d房水中药物浓度较高,分别为113.1、61.2ng/ml,以后逐渐降低;对照组房水中药物浓度维持在较低水平,平均值为26.1ng/ml。结论两性霉素B脂质体胶联羊膜药膜是一种较好的药物缓释系统。

加替沙星胶联羊膜药膜治疗细菌感染性角膜炎模型兔的疗效

目的探讨加替沙星胶联羊膜药膜治疗细菌性角膜炎兔模型的效果。方法参照常规方法制作加替沙星胶联羊膜药膜。新西兰大白兔25只中随机取5只,左眼为对照眼,右为实验眼。待动物完全麻醉后,将制成的药膜片覆盖于眼球表面后揭去表层的硝酸滤纸,并用尼龙缝线间断缝合固定于角膜缘浅层巩膜。对照眼结膜囊内滴入配制的3 mg/ml加替沙星溶液50μl,并于12 h后重复滴眼一次。分别于术后和首次滴眼后1 d、2 d、3 d、4 d、5 d双眼同时抽取房水。利用高效液相色谱法检测实验眼和对照眼房水中加替沙星浓度。制作金葡球菌性角膜溃疡动物模型,将溃疡形成后的动物分为4组,每组4只,分别为A组:生理盐水组,B组:加替沙星滴眼液组,C组:加替沙星胶联羊膜药膜组,D组:单层羊膜组。取各组溃疡愈合的兔眼作细菌培养,检查各组金葡球菌性角膜溃疡的细菌阴转情况。取溃疡组织石蜡包埋、切片,HE染色。同时对各组角膜溃疡动物的疗效进行判定。结果实验眼各时间点房水中均可测出加替沙星,浓度0.036~0.274μg/ml,实验组第1、2、3天房水中加替沙星浓度与第4、5天相比明显较高;对照眼仅在第1天和第2天检测出加替沙星,且浓度显著低于实验眼(P<0.05)。角膜溃疡,加替沙星滴眼液和药膜均疗效显著,且药膜在干预3 d和7 d后评分均显著低于加替沙星滴眼液干预(P<0.05);加替沙星滴眼液和药膜在干预后细菌培养情况均出现一定程度的阴转,而另外两组仅生理盐水干预7 d后出现1例阴转。角膜切片HE染色观察加替沙星滴眼液和药膜干预角膜上皮及基质有轻微水肿,炎症细胞浸润大量减少;加替沙星滴眼液和药膜均疗效显著,痊愈率及好转率分别为(75.00%vs 87.50%)和(100.00%vs 100.00%)。结论加替沙星胶联羊膜药膜对金葡球菌性角膜溃疡具有良好的治疗作用,开辟了治疗细菌性角膜溃疡的另一途径。