MR-PWI及DTI在胶质母细胞瘤诊断中的应用

目的探讨磁共振灌注加权成像(MR-PWI)及扩散张量成像(DTI)在胶质母细胞瘤诊断中的应用价值。方法选取2021-01—2023-01绵阳市中心医院收治的80例胶质母细胞瘤患者为研究对象,所有患者均行MR-PWI和DTI扫描,根据胶质母细胞瘤术后是否复发分为复发组和未复发组,比较2组患者的MR-PWI扫描参数[脑血容量(CBV)比值、脑血流量(CBF)比值、平均通过时间(MTT)比值、达峰时间(TTP)比值]、DTI扫描参数[各向异性分数(FA)最大值、FA平均值、FA最小值],采用受试者工作特征(ROC)曲线分析MR-PWI及DTI对胶质母细胞瘤的诊断价值。结果复发组CBV、CBF比值高于未复发组(t=5.454、4.404,P<0.05)。2组MTT、TTP比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线显示,CBV联合CBF诊断胶质母细胞瘤术后复发的AUC为0.888,高于CBV的0.818、CBF的0.778(Z=2.255、2.484,P<0.05)。复发组FA最大值、FA平均值低于未复发组(t=5.033、3.894,P<0.05)。2组FA最小值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线显示,FA最大值联合FA平均值诊断胶质母细胞瘤术后复发的AUC为0.831,高于FA最大值的0.793及FA平均值的0.737。结论MR-PWI、DTI扫描有助于诊断胶质母细胞瘤术后复发。

CD44表达量对胶质母细胞瘤患者预后的影响分析

目的探讨CD44表达量对胶质母细胞瘤(GBM)患者预后的影响。方法选取2021年7月1日至2023年8月31日解放军总医院第一医学中心收治的102例GBM患者为研究对象,以术中切除肿瘤组织CD44积分光密度(IOD)的平均值为分界线,将研究对象分为CD44高表达组(IOD≥699023,51例)和CD44低表达组(IOD<699023,51例)。比较分析两组患者的一般资料、生存结局。采用单因素分析及Cox多因素回归方法分析GBM患者总生存率的影响因素。结果两组患者的性别、年龄比较差异均无统计学意义(P>0.05)。患者术后随访时间2.6~27.5个月,中位随访时间15.0个月,10例患者存活,其中CD44高表达组有3例患者存活,CD44低表达组有7例患者存活,CD44低表达组患者的中位总生存期为18.3个月,CD44高表达组患者的中位总生存期为13.6个月,log-rank检验结果显示,CD44低表达组患者的总生存率高于CD44高表达组(χ^(2)=22.233,P<0.001)。术后放化疗、手术切除程度、肿瘤性质、MGMT启动子甲基化状态、CD44表达量与GBM患者的总生存率显著相关(P<0.05)。Cox多因素回归分析结果显示,原发GEM、术后放化疗、完全切除、MGMT启动子甲基化、CD44低表达均为GBM患者总生存率的独立保护因素(P<0.05)。结论CD44表达量与GBM患者的预后显著相关,且CD44低表达为GBM患者总生存率的独立保护因素。

桃叶珊瑚苷调节RhoA/ROCK信号通路对胶质母细胞瘤细胞活力和上皮间质转化的影响

[目的]研究桃叶珊瑚苷(AU)对胶质母细胞瘤(GBM)细胞活力和上皮间质转化(EMT)的影响,并对其作用机制进行探讨。[方法]将U87细胞随机分为对照组、AU低浓度组、AU中浓度组、AU高浓度组、Y-27632组、AU高浓度+Y-27632组。细胞计数器试剂盒(CCK-8)法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、波形蛋白(Vimentin)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、Ras同源基因家族成员A(RhoA)、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)1、ROCK2表达。构建GBM裸鼠模型,随机分为裸鼠对照组、AU组、Y-27632组、AU+Y-27632组,测量肿瘤质量与体积,免疫组化法检测移植瘤组织RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达。[结果]GBM细胞活力随着AU浓度的升高而逐渐降低(P<0.05),选择U87作为后续实验细胞,选择10、25、50μmol/L浓度作为AU后续实验浓度。与对照组比较,AU低、中、高浓度组和Y-27632组细胞活力、迁移和侵袭细胞数、MMP2、MMP9、N-cadherin、Vimentin、RhoA、ROCK1、ROCK2表达显著下降,凋亡率、E-cadherin表达显著升高(P<0.05),其中高浓度AU和Y-27632组共同处理的细胞变化更显著(P<0.05)。AU和Y-27632均能抑制移植瘤质量和体积,降低RhoA/ROCK信号通路蛋白表达(P<0.05)。[结论]AU能抑制GBM细胞活力、迁移侵袭和EMT,促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制RhoA/ROCK信号通路有关。

miR-652-3p通过靶向Nptn抑制胶质母细胞瘤的增殖和迁移

目的 探讨miR-652-3p对胶质母细胞瘤(GAM)增殖和迁移的影响。方法 用miR-652-3p模拟物转染胶质母细胞系C6和U87,然后分别通过CCK8、细胞流式、EdU、Transwell和划痕实验研究miR-652-3p对细胞增殖和迁移的影响。利用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白质免疫印迹(Western Blot)和双荧光素酶报告基因实验检测miR-652-3p与Neuroplastin(Nptn)的互作关系。通过CCK8、细胞流式、EdU、Transwell和划痕实验研究Nptn对细胞增殖和迁移的影响。结果 miR-652-3p的过表达可以抑制C6和U87细胞的增殖和迁移;双荧光素酶报告基因实验结果表明miR-652-3p可以与Nptn结合,Nptn表达水平受到miR-652-3p水平的影响;干扰Nptn的表达可以抑制C6和U87细胞的增殖和迁移。结论 miR-652-3p通过靶向Nptn抑制GBM的增殖和迁移。

发生全身转移的成人胶质母细胞瘤临床及分子病理特征:个体数据汇总分析

目的评估成人胶质母细胞瘤(GBM)脑脊髓神经轴外全身转移的临床及分子病理特征。方法在“PubMed”“Embase”和“Web of Science”数据库中检索截至2023年12月31日报道的发生全身转移的成人GBM病例,收集汇总其临床特征,同时汇总分析报道的分子病理结果以评估转移发生的可能机制。结果通过数据库检索纳入1928年-2023年的113篇文献,共147例全身转移病例。男性多于女性,男女比例为2.3∶1;中位年龄45岁;转移灶几乎可见于全身各个部位,其中常见的转移部位为骨、肺及淋巴结;自GBM初次诊断至转移发生的中位间隔约10个月;自转移发生至患者死亡的中位间隔约4.5个月;中位总体生存约14.8个月。多因素分析显示年龄≤40岁、全切除以及未合并颅内复发与患者生存显著正相关。约39例患者(39/147,26.5%)报道了基因检测的结果。不同的研究所检测的基因项目存在区别,而且不同病例之间检测的基因结果呈现明显异质性。从报道的数量及阳性比例来看,异柠檬酸脱氢酶(IDH)野生型(阳性率27/30)、TERT启动子突变(阳性率11/13)、PTEN突变(阳性率10/11)、TP53突变(阳性率10/13)和RB1突变(阳性率8/9)为相对常见的基因突变。结论成人GBM脑脊髓神经轴外全身转移罕见,年轻患者相对多见,颅内病变的复发或进展仍为决定患者生存的关键因素。转移的发生应为多克隆基因突变进展的结果,其中,促增殖、促侵袭类基因改变例如癌基因或抑癌基因突变以及上皮间质转化类相关基因可能发挥了重要作用。

抗体偶联药物在胶质母细胞瘤治疗中的作用靶点研究进展与挑战

胶质母细胞瘤(GBM)是一种原发于颅脑的高度恶性肿瘤,其致死率高且药物治疗效果不佳。抗体药物偶联物(ADC)是近年来抗肿瘤药物研发热点,其结合了抗体特异的靶向性与细胞毒素的强大杀伤力。近年来,多个针对GBM的ADC临床试验结果令人鼓舞。本文综述了GBM治疗相关的ADC靶点(表皮生长因子受体、白细胞分化抗原、甘露糖受体家族、整合素家族和半乳糖凝聚素家族)、ADC药物研究现状及其挑战。

运用网络药理学探索血府逐瘀汤治疗胶质母细胞瘤分子机制

目的胶质母细胞瘤(GBM)是严重危害全球人类健康的最致命疾病之一。血府逐瘀汤(XFZYD)是活血化瘀的方剂。虽然XFZYD已被证明能抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭,但其活性成分、潜在靶点和潜在机制仍不清楚。研究目的是通过网络药理学来探索XFZYD治疗GBM的分子机制。方法下载GEO数据库中GBM基因表达矩阵,运用TCMSP数据库筛选XFZYD的活性成分及其作用靶点;进一步通过吸收、分布、代谢和排泄(ADME)特性进行活性化合物筛选;对XFZYD活性成分作用靶点与GBM差异表达基因取交集(共同靶点),即得XFZYD治疗GBM的潜在作用靶点;采用Cytoscape软件构建XFZYD的“活性成分-作用靶点”网络;对共同靶点进行蛋白互作(PPI)网络分析、功能富集分析。结果我们通过吸收、分布、代谢和排泄(ADME)筛选确定了117种活性组分,差异表达分析鉴定出2265个差异基因,表达上调的基因1192个,表达下调基因是1073个。由成分-靶标网络和GBM相关基因整合的成分-靶标-致病基因(C-T-P)网络显示XFZYD可通过72个相关差异基因来治疗GBM,进一步通过Cytoscape中CytoNCA插件和MCODE插件分析组分-靶标-致病基因网络(C-T-P网络),结果提示EGFR,BCL2和FOS为核心基因。功能分析提示XFZYD主要通过PI3K-Akt信号通路来治疗GBM。结论XFZYD具有多成分、多靶点、多通路的特点,主要与PI3K-Akt信号通路相关。

miR-544靶向TGF-β抑制神经胶质母细胞瘤细胞迁移、侵袭及EMT

目的探究miR-544在神经胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程中的作用及机制。方法采用RT-qPCR检测miR-544及TGF-β在GBM组织和癌旁组织、GBM转移与非转移的病人血清中的表达。在GBM细胞系U251中转染MiR-544 mimics。采用Transwell、Western boltting检测细胞迁移及侵袭,EMT相关蛋白(E-cadherin和N-cadherin)的变化。荧光素酶报告基因验证miR-544与TGF-β基因3’UTR区结合。结果miR-544在GBM组织及转移组中表达显著降低;TGF-β显著升高(P<0.05)。荧光素酶报告证实miR-544靶向调节TGF-β3’-UTR区域。miR-544 mimics组及si-TGF-β组与NC组相比,细胞迁移与侵袭数目减少(P<0.05);E-cadherin蛋白表达增加,N-cadherin蛋白表达减少(P<0.05)。miR-544mimics+pcDNA-TGF-β组部分逆转了miR-544 mimics对细胞迁移与侵袭和EMT相关蛋白的表达的作用(P<0.05)。结论miR-544靶向调控TGF-β是其参与EMT过程的作用机制之一。

2型转谷氨酰胺酶对人胶质母细胞瘤细胞U251放射敏感性的影响

为探讨2型转谷氨酰胺酶(transglutaminase 2,TG2)对胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)放射敏感性的影响。通过生信分析TG2表达与胶质瘤病人预后的关系,并分析了其在GBM放射抵抗细胞株U251中的水平;瞬时转染得到TG2过表达细胞(U251-TG2)或空载细胞(U251-EV);CCK8法绘制生长曲线;transwell检测细胞迁移能力;不同剂量X射线照射后,检测细胞克隆形成能力、ROS水平;并通过免疫荧光检测γ-H2AX水平;Western blot检测自噬关键分子Beclin-1、LC3及mTOR磷酸化水平。结果显示,TG2高表达胶质瘤患者具有更差的无进展间隔期及总生存期,TG2在放射抵抗型U251中的表达显著高于野生型U251;U251-TG2细胞增殖能力高于U251-EV,且前者迁移能力高于后者;经X射线照射后,U251-TG2细胞克隆形成率高于U251-EV,前者ROS水平及γ-H2AX荧光焦点数均低于后者;自噬关键蛋白Beclin-1及自噬活性指标LC3-Ⅱ/Ⅰ比值在U251-TG2的水平均高于U251-EV,且前者mTOR磷酸化水平低于后者。实验结果证明,X射线照射后,TG2可能通过抑制mTOR磷酸化的方式促进自噬,进而降低GBM细胞U251的放射敏感性。

胶质母细胞瘤的PLK2表达及临床意义

目的探讨Polo样激酶2(PLK2)在胶质母细胞瘤(GBM)中表达及临床意义。方法计算机检索TCGA数据库,获得163个GBM组织、207个正常脑组织的PLK2表达临床资料,分析PLK2的表达情况;检索UALCAN数据库分析PLK1启动子甲基化水平。收集2019年5月至2022年6月手术切除的GBM组织50例及颅脑损伤减压术切除的非肿瘤脑组织20例为对照,RTPCR分析GBM组织PLK2 mRNA表达,MSP法分析PLK2启动子甲基化状态;同时分析GBM组织PLK1 mRNA表达水平与病人总生存期(OS)的关系。结果TCGA数据库分析显示,GBM组织PLK2表达水平显著低于正常脑组织(P<0.05),PLK2高表达组GBM病人中位OS显著低于低表达组(P<0.05)。UALCAN数据库分析显示,与正常脑组织相比,GBM组织PLK2启动子甲基化水平较高(P<0.001)。50例GBM组织标本PLK2 mRNA表达量明显低于对照组(P<0.001)。根据GBM组织PLK2 mRNA表达中位值分为高表达组和低表达组,50例GBM中,高表达20例,低表达30例。多因素Cox回归分析显示,PLK2 mRNA高表达是GBM病人生存预后不良的独立影响因素(P<0.05)。Kaplan-Meier曲线显示,PLK2 mRNA低表达GBM病人中位OS更长(15.5个月vs.10.0个月;P<0.001)。PLK2高甲基化GBM组织PLK2 mRNA表达水平更低(P<0.001)。结论GBM组织PLK2呈低表达,可能受其DNA启动子甲基化水平的调节。GBM组织PLK2低表达水平较低的病人可能是GBM的独立预后因素。

下调上皮内膜蛋白1抑制胶质母细胞瘤恶性生物学行为的实验研究

目的研究下调上皮内膜蛋白1(EMP1)对胶质母细胞瘤U251与U87细胞系增殖、侵袭、迁移、凋亡及U87细胞系荷瘤小鼠肿瘤体积及免疫组化指标的影响。方法采用siRNA干扰技术下调胶质母细胞瘤细胞系U87与U251中EMP1的表达。RT-qPCR和Western blot检测EMP1mRNA和蛋白的表达;CCK8和Transwell实验检测EMP1下调后肿瘤细胞增殖迁移及侵袭能力;流式细胞术检测EMP1下调后肿瘤细胞凋亡表达水平;构建U87细胞系裸鼠荷瘤模型,免疫组化法检测Ki-67和MMP2的表达。结果RT-qPCR和Western blot结果显示siRNA-EMP1导致EMP1的表达降低(P<0.05),CCK8和Transewll实验显示下调EMP1后肿瘤细胞的增殖、迁移及侵袭能力被显著抑制(P<0.05);流式细胞术结果显示下调EMP1后肿瘤细胞的凋亡能力明显增强(P<0.05);U87细胞系裸鼠荷瘤模型中下调EMP1后肿瘤细胞生长延缓,Ki-67及MMP2的表达降低。结论EMP1的表达下调可以抑制胶质母细胞瘤的增殖、迁移及侵袭,促进凋亡,延缓荷瘤小鼠肿瘤的生长与侵袭,从而抑制胶质母细胞瘤的恶性生物学行为。

m6A基因模型预测胶质母细胞瘤患者的预后

目的:构建m6A相关胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)预后模型,识别受m6A调控的潜在预后生物标志物。方法:从TCGA和GEO中分别收集了GBM的表达、临床表型和生存数据,m6A2Target中获取m6A调控因子。获得m6A调控因子与TCGA-GBM基因交集。根据TCGA-GBM表达,计算正常-癌症间差异的基因。基于差异的m6A调控因子进行一致性聚类,识别亚型,构建亚型间差异的预后相关基因模型,并进行验证。结果:从m6A2Target中获取了21个m6A调控因子,与TCGA-GBM包含的基因交集有19个。其中6个m6A调控因子在GBM显著上调。基于差异的m6A调控因子的表达进行一致性聚类,得到cluster1/2共2个亚型。且cluster2亚型中患者的免疫评分以及基质评分均显著高于cluster1,但cluster1的整体肿瘤纯度显著高于cluster2。生存分析发现,cluster2生存预后更差。cluster1和cluster2之间显著差异表达的基因共6591个,单因素cox回归和多因素cox回归筛选到171个显著预后相关基因。LASSO-cox回归构建预后风险模型显示在训练集(TCGA-GBM)及测试集(GSE121720)中均具有较好的模型效能。结论:多个m6A因子在GBM患者中存在显著差异,且基于m6A分型的2组患者存在预后不同,并基于m6A的组间差异构建了预后模型可指导患者的5年生存率。

β-榄香烯抗胶质母细胞瘤作用机制的研究进展

胶质母细胞瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,具有复发率高、生存时间短、病死率高等特点。β-榄香烯是一种广谱抗肿瘤药物,通过抑制细胞增殖、阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡等多途径发挥抗肿瘤作用。本文通过回顾现有的基础研究及相关成果,对榄香烯在抑制胶质母细胞瘤的作用机制进行总结概括,以期为其临床应用及深入研究提供参考。

王昌俊教授“分期论治、通利二便”治疗脑胶质母细胞瘤的经验撷萃

脑胶质母细胞瘤(Glioblastoma,GBM)是成人中枢神经系统中最常见的原发性恶性肿瘤,目前以手术治疗为主,其他还有放疗、化疗、电场治疗、靶向治疗和免疫治疗等。由于本病独特的生物学特性、血脑屏障的存在及治疗时需尽量避免脑功能受损等因素的影响,治疗效果不佳、治疗费用高、复发率极高、生存期短,给患者及其家庭、医院、社会造成了很大负担。王昌俊教授认为GBM为本虚邪实之病。本虚以肝脾肾亏虚、髓海不足为主,邪实以痰、瘀、风、癌毒为主。其病位在脑,与肝、脾、肾密切相关。正虚为本,痰、瘀、风、癌毒齐扰清窍而发为本病。治疗上,第一,强调分期论治,根据患者在不同阶段所接受的西医治疗手段对“本虚”“邪实”影响的不同,调整扶正和祛邪的力度。第二,全程注重通利二便,使痰、瘀、毒等邪有出路。第三,重视引药上行。临床多选用对脑肿瘤有效的药物和对药、引经药,以引药上行、引药到达脑窍,从而提高疗效。第四,扶正以健脾和胃为先,兼顾补益肝肾。此疗法在提高患者生活质量、延长生存时间等方面取得了良好疗效。

核纤层蛋白基因在胶质母细胞瘤恶性生物学行为中的作用

目的:研究核纤层蛋白基因(LMNA)在人类胶质母细胞瘤中的表达特点及该基因在胶质母细胞瘤发病过程中的作用机制。方法:分析公共数据库TCGA中LMNA基因在胶质母细胞瘤中的表达及其与患者预后的关系。构建LMNA基因的敲减慢病毒,构建胶质母细胞瘤细胞系U87的LMNA基因稳定敲减株;进一步对U87的LMNA基因敲减株及其对照细胞株进行克隆形成实验和细胞3D成球实验,检测LMNA基因对细胞增殖与成球能力的影响;通过替莫唑胺加药实验检测LMNA基因敲减细胞株对替莫唑胺的耐药性;最后经裸鼠颅内种瘤实验检测LMNA基因敲减在体内对胶质母细胞瘤生长的抑制作用。结果:TCGA数据显示,LMNA基因在胶质母细胞瘤组织中的表达程度显著高于正常组织,且与患者生存预后呈负相关,与肿瘤细胞恶性程度呈正相关。LMNA基因敲减显著降低了U87细胞株的克隆生成及细胞成球能力,显著增加了U87细胞株对替莫唑胺的敏感性;裸鼠颅内种瘤实验显示,LMNA基因敲减的U87细胞株在裸鼠脑内生成的肿瘤体积显著减小,且小鼠存活时间延长。结论:LMNA基因在胶质母细胞瘤中表达增高,与患者生存呈负相关,LMNA基因敲减可抑制U87胶质母细胞瘤细胞株的增殖,并增加对替莫唑胺的敏感性,是胶质母细胞瘤治疗的潜在靶点。

SYT7调控Hedgehog/Gli信号通路对胶质母细胞瘤进展的影响

目的探讨人突触结合蛋白Ⅶ(synaptotagmin-7,SYT7)通过调控Hedgehog/Gli信号通路对胶质母细胞瘤进展的影响。方法通过构建并转染短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体,利用定量反转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcriptase-medi ated polymerase chain reaction,qRT-PCR)分析SYT7在人脑胶质瘤U87细胞系中的表达,采用蛋白质印迹和qRT-PCR分析U87细胞中SYT7 shRNA的敲低效率。通过细胞计数、细胞周期分析和动物实验验证SYT7在胶质母细胞瘤中的作用。结果qRT-PCR分析显示SYT7在U87细胞系中的表达高于正常脑细胞系。蛋白质印迹和qRT-PCR分析证实SYT7 shRNA在U87细胞中的有效敲低。细胞计数显示SYT7 shRNA的表达通过慢病毒载体下调SYT7,抑制U87细胞的生长;流式细胞术证实细胞周期阻滞。此外,基因富集分析和蛋白质印迹发现SYT7通过促进p53磷酸化与Hedgehog/Gli信号通路相关,进而在胶质母细胞瘤中发挥作用。结论SYT7通过调控Hedgehog/Gli信号通路促进胶质母细胞瘤的生长,因此SYT7可能是治疗胶质瘤的潜在靶点。

TLR2对胶质母细胞瘤的预后价值和体外作用

目的探究TCGA数据库中TLR2基因在胶质母细胞瘤(GBM)中的预后价值,并明确该基因对胶质母细胞瘤细胞LN229的体外作用。方法从TCGA数据库中获取169例胶质母细胞瘤患者的临床信息和肿瘤样本的转录组数据,通过Kaplan-Meier生存曲线分析评估TLR2基因在GBM患者中的预后作用。构建TLR2敲减的人胶质母细胞瘤LN229细胞系,通过RT-qPCR和Western Blot验证。通过CCK8、克隆形成、细胞划痕、Transwell小室法,检测敲减TLR2对LN229细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力的影响。结果与正常样本相比,TLR2在GBM患者样本中表达增高。生存分析结果显示,TLR2高表达组患者总生存期显著低于低表达组患者(总生存期中位值333 d vs.402 d,P<0.05)。RT-qPCR和Western Blot结果显示,TLR2敲减的人胶质母细胞瘤LN229细胞系成功构建。与转染si-control的LN229胶质瘤细胞相比,转染si-TLR2的LN229胶质瘤细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。与转染si-control的LN229胶质瘤细胞相比,转染si-TLR2的LN229胶质瘤细胞克隆形成数明显降低(P<0.05)。转染si-TLR2的LN229细胞迁移能力明显低于转染si-control的LN229胶质瘤细胞(P<0.05)。转染si-TLR2的LN229细胞侵袭能力明显低于转染si-control的LN229胶质瘤细胞(P<0.05)。结论本研究通过数据挖掘发现TLR2表达与胶质母细胞瘤患者的预后显著相关,通过实验验证敲减TLR2有效抑制LN229细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成能力,上述发现将为胶质母细胞瘤预后判断和靶向治疗提供新的潜在靶点。

胶质母细胞瘤恶性进展中不同细胞亚群的动态轨迹和细胞通讯网络

目的:探索胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)恶性进展过程中细胞亚群的动态轨迹以及免疫细胞亚群之间的通讯网络,结合GBM患者的转录组数据和临床信息,挖掘GBM恶性进展过程中的关键风险标志物,以期为该疾病的治疗和预后提供科学依据。方法:基于单细胞测序数据分析方法,构建GBM恶性进展中的细胞亚群图谱,利用Monocle2技术构建GBM恶性进展中肿瘤细胞亚群的动态进展轨迹,基于基因富集分析,挖掘肿瘤细胞亚群随GBM恶性进展中显著变化的基因所富集的生物学过程,利用CellChat软件识别不同免疫细胞亚群间的复杂通讯网络,通过生存分析识别GBM恶性进展中影响患者预后的关键风险分子标记物。结果:单细胞测序数据分析识别出6种不同的细胞类型,包括淋巴细胞、周细胞、少突神经胶质细胞、巨噬细胞、胶质瘤细胞、小胶质细胞,单细胞数据集中了27151个细胞,其中包含3881个来源于低级别胶质瘤患者的细胞,10166个来源于新诊断GBM患者的细胞,13104个来源于复发性胶质瘤患者的细胞。胶质瘤细胞亚群逆时序分析提示,胶质瘤细胞亚群在恶性进展中存在着明显的细胞异质性;免疫细胞亚群的细胞相互作用分析揭示,GBM恶性进展中不同免疫细胞亚群之间的通讯网络共识别出22条具有生物学意义的配体-受体对,涉及12条通路;生存分析识别出8个与GBM患者预后密切相关的基因,其中SERPINE1、COL6A1、SPP1、LTF、C1S、AEBP1、SAA1L是GBM患者的高风险基因,ABCC8是GBM患者的低风险基因。结论:深入揭示了GBM恶性进展中胶质瘤细胞亚群的动态变化以及免疫细胞亚群之间的通讯模式,对于理解GBM的复杂生物学过程具有重要意义,为GBM的精准医疗和治疗决策提供了科学依据,也为GBM患者更准确的预后评估提供了新的线索。

IDH1突变型胶质母细胞瘤磁共振纹理特征的研究

目的探讨异柠檬酸脱氢酶1(isocitrate dehydrogenase 1,IDH1)突变型胶质母细胞瘤(Glioblastoma,GBM)的磁共振纹理特征。方法共纳入118例GBM患者。通过横断位T1WI增强图像,采用3D slicer软件选取的31种磁共振纹理特征进行分析。通过SPSS 26.0软件,研究IDH1突变型GBM与其磁共振纹理特征的联系,采用了χ^(2)检验、独立样本T检验以及Mann–Whitney U检验分析方法;生存分析采用的Kaplan-Meier单因素方法。结果IDH1突变型GBM与IDH1野生型GBM相比,磁共振纹理特征共有18种有明显差异,包括运行百分比、表面:体积比、能量、熵、一致性、自相关、集群突出、聚类趋势、差值熵、能量:灰度共生矩阵、熵:灰度共生矩阵、同质性1、平均总和、熵和、方差和、方差、GLN、群集阴影。结论3D slicer中有18种磁共振纹理特征可以IDH1突变型GBM关系密切。

CircRTN4调节miR-224-5p/MYT1L轴对胶质母细胞瘤细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨环状RNA(CircRNA)RTN4调节微小RNA(miR)-224-5p/髓磷脂转录因子1样(MYT1L)轴对胶质母细胞瘤(GM)细胞恶性生物学行为的影响。方法:以对数生长期的U251细胞进行设置分组:空白组、阴性对照(sh NC)组、沉默circRTN4 shRNA(sh circRTN4)组、sh circRTN4+抑制剂对照(inhibitor NC)组、sh circRTN4+miR-224-5p抑制剂(miR-224-5p inhibitor)组。Transwell实验、流式细胞术、CCK-8、qRT-PCR、Western blot以及双荧光素酶分别检测细胞迁移与侵袭、凋亡、增殖、CircRTN4、miR-224-5p、MYT1L mRNA表达、增殖蛋白(ki-67)、凋亡蛋白(cleaved Caspase-3)、MYT1L蛋白表达以及miR-224-5p分别与CircRTN4、MYT1L靶向关系验证;qRT-PCR检测GM细胞系U118、U87、U251和LN229细胞及正常人星形胶质细胞系NHA细胞中CircRTN4、miR-224-5p、MYT1L mRNA表达水平。结果:U118、U87、U251和LN229细胞中CircRTN4、MYT1L mRNA表达较NHA细胞显著增加,miR-224-5p表达显著下降(P<0.05);miR-224-5p分别与CircRTN4、MYT1L的有靶向关系。与空白组、sh NC组相比,sh circRTN4组迁移、侵袭数、24h、48h A450值、ki-67、CircRTN4、MYT1L mRNA及蛋白表达显著降低,凋亡率、cleaved Caspase-3表达显著增加(P<0.05);与sh circRTN4+inhibitor NC组相比,sh circRTN4+miR-224-5p inhibitor组迁移、侵袭数、24h、48h A450值、ki-67、MYT1L mRNA及蛋白表达显著增加,凋亡率、cleaved Caspase-3表达显著下降(P<0.05),CircRTN4表达无统计学差异(P>0.05),体内实验证明干扰CircRTN4可显著抑制移植瘤裸鼠肿瘤质量(P<0.05)。结论:沉默CircRTN4调节miR-224-5p/MYT1L轴抑制GM细胞恶性生物学行为。