原发性胶质母细胞瘤的临床与分子病理学特征及其预后相关因素分析

目的探讨原发性胶质母细胞瘤(PGBM)的临床和分子病理学特征,以及影响其预后的相关因素。方法回顾性分析2021年1月—2022年7月安徽医科大学附属省立医院收治的49例经手术切除的PGBM患者的临床资料和分子病理结果,包括性别、年龄、肿瘤切除程度、术后治疗方式以及MGMT启动子甲基化、TP53突变、CDK4/6扩增、NF1基因突变等基因表达情况。利用统计学方法对这些临床特征及基因突变与患者的无进展生存期和总生存期进行相关性分析。结果男性患者(65.30%)较女性患者(34.70%)更多见。肿瘤大体全切除81.60%,次全切除+部分切除18.4%。术后以标准同步放化疗为主(63.30%)。分子病理检测方面,MGMT启动子甲基化阳性55.10%,TP53突变38.78%,CDK4/6扩增占48.98%,NF1基因突变占28.57%。相关性分析显示,EOR、术后同步放化疗、MGMT启动子甲基化、TP53突变和CDK4/6扩增是影响患者预后的独立因素(P<0.05);NF1基因突变与患者的预后无明显相关性(P>0.05)。结论PGBM患者的临床特征和部分基因突变与预后密切相关。年龄、肿瘤切除程度、术后治疗方式和MGMT启动子甲基化、TP53突变、CDK4/6扩增可能是预测PGBM患者预后的重要指标,而NF1基因突变对预后的影响尚需更多研究来确认。这些发现有助于优化PGBM患者的个体化治疗方案和预后评估策略。

基于TCGA数据挖掘及网络药理学探讨卤泛群治疗胶质母细胞瘤的潜在机制

目的运用癌症基因图谱(the cancer genome atlas,TCGA)基因组学数据挖掘潜在治疗胶质母细胞瘤的药物卤泛群(halofantrine),通过网络药理学方法探讨卤泛群防治胶质母细胞瘤的作用机制,并结合细胞实验对卤泛群防治胶质母细胞瘤的机制进行验证。方法通过癌症临床公开数据库TCGA挖掘胶质母细胞瘤发生发展的关键基因,利用CMAP数据库寻找潜在治疗胶质母细胞瘤的药物,借助STITCH、Drug bank、Binding DB、BATMAN-TCM、TargetNet、SwissTarget、PubChem检索药物靶点信息,利用Drug bank、DisGeNET、GeneCards,TDD筛选胶质母细胞瘤靶点。通过Cytoscape构建“药物-活性成分-靶点”可视化网络图,通过进行GO、KEGG和分子对接分析,预测其作用机制。利用CCK-8及qPCR等方法验证卤泛群对胶质母细胞瘤细胞及治疗靶点的作用。结果筛选出潜在治疗胶质母细胞瘤的药物卤泛群,卤泛群有150个作用靶点,胶质母细胞瘤治疗靶点有173个,和药物交集靶点有12个,获得3个核心靶点:EGFR、MAPK14、IGF1R。分子对接结果显示,卤泛群与核心靶点结合的潜能和活性良好。CCK-8和qPCR实验结果表明卤泛群可通过EGFR、MAPK14、IGF1R靶点抑制胶质母细胞瘤细胞增殖。结论卤泛群通过EGFR、MAPK14、IGF1R靶点发挥治疗胶质母细胞瘤的作用。

网络药理学、分子对接结合实验验证探讨知母皂苷AⅢ治疗胶质母细胞瘤的作用机制

目的基于网络药理学、分子对接和体外实验验证探索知母皂苷AⅢ(TIA)治疗胶质母细胞瘤(GBM)的潜在靶点及其信号通路。方法利用Pharmmapper数据库预测TIA的作用靶点,通过GeneCards数据库获得GBM相关的疾病靶点;通过STRING数据库得到交集靶点的蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络图,并使用Cytoscape 3.6.0软件进行筛选和分析;交集靶点通过DAVID数据库进行基因本体(GO)功能注释分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,采用分子对接技术考察TIA与关键靶点的结合能力。最后,采用GBM细胞U-87MG、U251进行体外细胞实验,运用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测细胞存活率、Transwell迁移测定实验检测细胞迁移能力,采用Western blot实验、实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)实验及药物亲和反应的靶点稳定性(DARTS)实验等验证网络药理学分析结果。结果网络药理学预测结果显示,TIA作用靶点与GBM疾病靶点存在65个潜在共用靶点;GO分析结果主要集中在炎症应答、细胞增殖的正向调节等过程;KEGG富集分析显示,TIA通过免疫球蛋白G Fcγ受体(FcγR)介导的吞噬作用、谷胱甘肽代谢等信号通路发挥作用;分子对接分析结果显示,TIA与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的结合潜能最强。体外细胞实验结果显示,TIA呈选择性和剂量依赖性抑制人GBM细胞U-87MG和U251的体外增殖和迁移,并通过靶向亲和MMP-2,抑制其表达而发挥作用。结论TIA可能通过靶向结合MMP-2并抑制其表达而抑制GBM细胞的体外增殖和迁移。

脑干胶质瘤病理学分级预测因素及与APT成像的关系研究

目的:探讨脑干胶质瘤病理学分级的预测因素及与酰胺质子转移(amide proton transfer,APT)成像的关系,旨在为高级别胶质瘤患者早期诊断识别及后续预测模型构建提供借鉴。方法:回顾并纳入2019年1月—2023年1月于第九〇九医院行手术治疗并接受APT成像检查的脑干胶质瘤患者79例,根据病理学分级标准分为高级别组(38例)和低级别组(41例);采用单因素分析和多因素logistic回归分析评价脑干胶质瘤病理学分级的独立预测因素,并分析脑干胶质瘤病理学分级预测因素的预测效能。结果:单因素分析结果显示,囊性病变、病灶最大径、APT成像信号强度平均值及最大值均可能与脑干胶质瘤病理学分级相关(P<0.05);多因素logistic分析结果显示,囊性病变、病灶最大径≥2 cm、APT成像信号强度平均值及最大值均是脑干胶质瘤病理学分级的独立预测因素(P<0.05)。利用囊性病变、病灶最大径≥2 cm、APT成像信号强度平均值、APT成像信号强度最大值及logistic模型预测概率对脑干胶质瘤病理学分级情况进行预测,最佳截断值分别为0.50、0.50、2.95%、4.11%、37.85%,约登指数分别为38.19%、44.42%、51.73%、42.17%、65.28%。结论:囊性病变、病灶最大径与APT成像信号强度可作为脑干胶质瘤病理学分级的独立预测因素,且APT成像信号强度平均值具有更佳的预测效能。

基于网络药理学的七叶皂苷抑制胶质母细胞瘤的潜在机制

基于网络药理学技术分析七叶皂苷治疗胶质母细胞瘤(glioblastoma)的药理机制。方法 采用pubchem、 SwissTarget预测七叶皂苷的靶标,采用“GeneCards”、“CTD”和“OMIM”数据库搜索胶质母细胞瘤的靶标。将七叶皂苷和胶质母细胞瘤的靶标进行对比。结果输入STRING数据库构建蛋白-蛋白相互作用网络,并在Cytoscape 3.8.0软件中制作“药物-靶点-通路”的网络图。采用Rstudio软件进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析、京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。利用Gene Expression Profiling Interactive Analysis(GEPIA)对胶质母细胞瘤和正常人基因表达水平进行深入分析。结果 通过分析一共得到147个七叶皂苷的靶标和1038个胶质母细胞瘤的靶标。七叶皂苷治疗胶质母细胞瘤的交集靶标65个,从其中筛选出 PPI 核心靶标为:STAT3、JUN、MTOR、MMP9、NR3C1、PRKCA,GO富集分析显示1069条生物过程(biological process)、87条细胞组分(cellular component)、54条分子功能(molecular function),KEGG富集分析显示97条相关信号通路。结论 基于网络药理学分析,七叶皂苷对胶质母细胞瘤的抑制作用具有多靶点、多通路的特点,为进一步研究和药物开发提供了基础。

^(18)F-FET PET/CT双模态影像组学特征对成人胶质瘤病理学分级的非侵入性预测分析

目的:基于^(18)F-FET正电子发射体层成像(positron emission tomography,PET)/计算机体层成像(computed tomography,CT)双模态影像组学特征构建模型,并对成人胶质瘤的病理学分级进行非侵入性预测分析。方法:回顾并分析58例经组织病理学检查证实的未治疗成年胶质瘤患者的^(18)F-FET PET/CT影像学数据,根据病理学分级将患者分成低级别胶质瘤组[世界卫生组织(World Health Organization,WHO)Ⅱ级,共计32例]和高级别胶质瘤组(WHOⅢ级13例、WHOⅣ级13例,共计26例)。在PET、CT影像模态中分别提取105个影像组学特征参数进行分析,采用基于R语言机器学习算法的5折交叉验证最小绝对收缩与选择算子(least absolute shrinkage and selection operator,LASSO)回归分析方法,构建成人胶质瘤病理学分级的3个独立的影像组学预测模型(PET-Rad模型、CT-Rad模型和PET/CT-Rad模型),然后再采用全子集回归对影像组学预测模型进行校正。采用受试者工作特征曲线的曲线下面积(area under curve,AUC)对预测模型进行评价。结果:基于4个^(18)F-FET PET影像组学参数建立PET-Rad模型的AUC为0.845(95%CI 0.726~0.927);基于3个CT影像组学参数构建的CT-Rad模型的AUC为0.802(95%CI 0.676~0.895);而联合3个CT和2个PET影像组学特征的^(18)F-FET PET/CT-Rad模型的AUC为0.901(95%CI 0.794~0.964),准确度为86.21%。DeLong检验结果显示PET/CT-Rad模型优于CT-Rad模型(P=0.032)。尽管PET/CT-Rad模型效能优于PET-Rad模型,但差异无统计学意义(P=0.146)。构建胶质瘤病理学级别预测的PET/CT-Rad模型中,3个CT影像组学参数分别为firstorder_10Percentile、glrlm_LowGrayLevelRunEmphasis、ngtdm_Busyness,其中glrlm_LowGrayLevelRunEmphasis是最重要的预测变量,其相对重要性为30.97%;2个PET组学特征为firstorder_Maximum和ngtdm_Contrast,其相对重要性分别为21.99%、21.01%。结论:基于^(18)F-FET PET与CT双模态影像组学特征相结合的预测模型能够有效地预测未经治疗成人胶质瘤的病理学分级,可为临床诊治决策提供依据和重要参考。

miR-652-3p通过靶向Nptn抑制胶质母细胞瘤的增殖和迁移

目的 探讨miR-652-3p对胶质母细胞瘤(GAM)增殖和迁移的影响。方法 用miR-652-3p模拟物转染胶质母细胞系C6和U87,然后分别通过CCK8、细胞流式、EdU、Transwell和划痕实验研究miR-652-3p对细胞增殖和迁移的影响。利用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白质免疫印迹(Western Blot)和双荧光素酶报告基因实验检测miR-652-3p与Neuroplastin(Nptn)的互作关系。通过CCK8、细胞流式、EdU、Transwell和划痕实验研究Nptn对细胞增殖和迁移的影响。结果 miR-652-3p的过表达可以抑制C6和U87细胞的增殖和迁移;双荧光素酶报告基因实验结果表明miR-652-3p可以与Nptn结合,Nptn表达水平受到miR-652-3p水平的影响;干扰Nptn的表达可以抑制C6和U87细胞的增殖和迁移。结论 miR-652-3p通过靶向Nptn抑制GBM的增殖和迁移。

miR-544靶向TGF-β抑制神经胶质母细胞瘤细胞迁移、侵袭及EMT

目的探究miR-544在神经胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程中的作用及机制。方法采用RT-qPCR检测miR-544及TGF-β在GBM组织和癌旁组织、GBM转移与非转移的病人血清中的表达。在GBM细胞系U251中转染MiR-544 mimics。采用Transwell、Western boltting检测细胞迁移及侵袭,EMT相关蛋白(E-cadherin和N-cadherin)的变化。荧光素酶报告基因验证miR-544与TGF-β基因3’UTR区结合。结果miR-544在GBM组织及转移组中表达显著降低;TGF-β显著升高(P<0.05)。荧光素酶报告证实miR-544靶向调节TGF-β3’-UTR区域。miR-544 mimics组及si-TGF-β组与NC组相比,细胞迁移与侵袭数目减少(P<0.05);E-cadherin蛋白表达增加,N-cadherin蛋白表达减少(P<0.05)。miR-544mimics+pcDNA-TGF-β组部分逆转了miR-544 mimics对细胞迁移与侵袭和EMT相关蛋白的表达的作用(P<0.05)。结论miR-544靶向调控TGF-β是其参与EMT过程的作用机制之一。

桃叶珊瑚苷调节RhoA/ROCK信号通路对胶质母细胞瘤细胞活力和上皮间质转化的影响

[目的]研究桃叶珊瑚苷(AU)对胶质母细胞瘤(GBM)细胞活力和上皮间质转化(EMT)的影响,并对其作用机制进行探讨。[方法]将U87细胞随机分为对照组、AU低浓度组、AU中浓度组、AU高浓度组、Y-27632组、AU高浓度+Y-27632组。细胞计数器试剂盒(CCK-8)法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、波形蛋白(Vimentin)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、Ras同源基因家族成员A(RhoA)、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)1、ROCK2表达。构建GBM裸鼠模型,随机分为裸鼠对照组、AU组、Y-27632组、AU+Y-27632组,测量肿瘤质量与体积,免疫组化法检测移植瘤组织RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达。[结果]GBM细胞活力随着AU浓度的升高而逐渐降低(P<0.05),选择U87作为后续实验细胞,选择10、25、50μmol/L浓度作为AU后续实验浓度。与对照组比较,AU低、中、高浓度组和Y-27632组细胞活力、迁移和侵袭细胞数、MMP2、MMP9、N-cadherin、Vimentin、RhoA、ROCK1、ROCK2表达显著下降,凋亡率、E-cadherin表达显著升高(P<0.05),其中高浓度AU和Y-27632组共同处理的细胞变化更显著(P<0.05)。AU和Y-27632均能抑制移植瘤质量和体积,降低RhoA/ROCK信号通路蛋白表达(P<0.05)。[结论]AU能抑制GBM细胞活力、迁移侵袭和EMT,促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制RhoA/ROCK信号通路有关。

m6A基因模型预测胶质母细胞瘤患者的预后

目的:构建m6A相关胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)预后模型,识别受m6A调控的潜在预后生物标志物。方法:从TCGA和GEO中分别收集了GBM的表达、临床表型和生存数据,m6A2Target中获取m6A调控因子。获得m6A调控因子与TCGA-GBM基因交集。根据TCGA-GBM表达,计算正常-癌症间差异的基因。基于差异的m6A调控因子进行一致性聚类,识别亚型,构建亚型间差异的预后相关基因模型,并进行验证。结果:从m6A2Target中获取了21个m6A调控因子,与TCGA-GBM包含的基因交集有19个。其中6个m6A调控因子在GBM显著上调。基于差异的m6A调控因子的表达进行一致性聚类,得到cluster1/2共2个亚型。且cluster2亚型中患者的免疫评分以及基质评分均显著高于cluster1,但cluster1的整体肿瘤纯度显著高于cluster2。生存分析发现,cluster2生存预后更差。cluster1和cluster2之间显著差异表达的基因共6591个,单因素cox回归和多因素cox回归筛选到171个显著预后相关基因。LASSO-cox回归构建预后风险模型显示在训练集(TCGA-GBM)及测试集(GSE121720)中均具有较好的模型效能。结论:多个m6A因子在GBM患者中存在显著差异,且基于m6A分型的2组患者存在预后不同,并基于m6A的组间差异构建了预后模型可指导患者的5年生存率。

下调上皮内膜蛋白1抑制胶质母细胞瘤恶性生物学行为的实验研究

目的研究下调上皮内膜蛋白1(EMP1)对胶质母细胞瘤U251与U87细胞系增殖、侵袭、迁移、凋亡及U87细胞系荷瘤小鼠肿瘤体积及免疫组化指标的影响。方法采用siRNA干扰技术下调胶质母细胞瘤细胞系U87与U251中EMP1的表达。RT-qPCR和Western blot检测EMP1mRNA和蛋白的表达;CCK8和Transwell实验检测EMP1下调后肿瘤细胞增殖迁移及侵袭能力;流式细胞术检测EMP1下调后肿瘤细胞凋亡表达水平;构建U87细胞系裸鼠荷瘤模型,免疫组化法检测Ki-67和MMP2的表达。结果RT-qPCR和Western blot结果显示siRNA-EMP1导致EMP1的表达降低(P<0.05),CCK8和Transewll实验显示下调EMP1后肿瘤细胞的增殖、迁移及侵袭能力被显著抑制(P<0.05);流式细胞术结果显示下调EMP1后肿瘤细胞的凋亡能力明显增强(P<0.05);U87细胞系裸鼠荷瘤模型中下调EMP1后肿瘤细胞生长延缓,Ki-67及MMP2的表达降低。结论EMP1的表达下调可以抑制胶质母细胞瘤的增殖、迁移及侵袭,促进凋亡,延缓荷瘤小鼠肿瘤的生长与侵袭,从而抑制胶质母细胞瘤的恶性生物学行为。

核纤层蛋白基因在胶质母细胞瘤恶性生物学行为中的作用

目的:研究核纤层蛋白基因(LMNA)在人类胶质母细胞瘤中的表达特点及该基因在胶质母细胞瘤发病过程中的作用机制。方法:分析公共数据库TCGA中LMNA基因在胶质母细胞瘤中的表达及其与患者预后的关系。构建LMNA基因的敲减慢病毒,构建胶质母细胞瘤细胞系U87的LMNA基因稳定敲减株;进一步对U87的LMNA基因敲减株及其对照细胞株进行克隆形成实验和细胞3D成球实验,检测LMNA基因对细胞增殖与成球能力的影响;通过替莫唑胺加药实验检测LMNA基因敲减细胞株对替莫唑胺的耐药性;最后经裸鼠颅内种瘤实验检测LMNA基因敲减在体内对胶质母细胞瘤生长的抑制作用。结果:TCGA数据显示,LMNA基因在胶质母细胞瘤组织中的表达程度显著高于正常组织,且与患者生存预后呈负相关,与肿瘤细胞恶性程度呈正相关。LMNA基因敲减显著降低了U87细胞株的克隆生成及细胞成球能力,显著增加了U87细胞株对替莫唑胺的敏感性;裸鼠颅内种瘤实验显示,LMNA基因敲减的U87细胞株在裸鼠脑内生成的肿瘤体积显著减小,且小鼠存活时间延长。结论:LMNA基因在胶质母细胞瘤中表达增高,与患者生存呈负相关,LMNA基因敲减可抑制U87胶质母细胞瘤细胞株的增殖,并增加对替莫唑胺的敏感性,是胶质母细胞瘤治疗的潜在靶点。

TLR2对胶质母细胞瘤的预后价值和体外作用

目的探究TCGA数据库中TLR2基因在胶质母细胞瘤(GBM)中的预后价值,并明确该基因对胶质母细胞瘤细胞LN229的体外作用。方法从TCGA数据库中获取169例胶质母细胞瘤患者的临床信息和肿瘤样本的转录组数据,通过Kaplan-Meier生存曲线分析评估TLR2基因在GBM患者中的预后作用。构建TLR2敲减的人胶质母细胞瘤LN229细胞系,通过RT-qPCR和Western Blot验证。通过CCK8、克隆形成、细胞划痕、Transwell小室法,检测敲减TLR2对LN229细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力的影响。结果与正常样本相比,TLR2在GBM患者样本中表达增高。生存分析结果显示,TLR2高表达组患者总生存期显著低于低表达组患者(总生存期中位值333 d vs.402 d,P<0.05)。RT-qPCR和Western Blot结果显示,TLR2敲减的人胶质母细胞瘤LN229细胞系成功构建。与转染si-control的LN229胶质瘤细胞相比,转染si-TLR2的LN229胶质瘤细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。与转染si-control的LN229胶质瘤细胞相比,转染si-TLR2的LN229胶质瘤细胞克隆形成数明显降低(P<0.05)。转染si-TLR2的LN229细胞迁移能力明显低于转染si-control的LN229胶质瘤细胞(P<0.05)。转染si-TLR2的LN229细胞侵袭能力明显低于转染si-control的LN229胶质瘤细胞(P<0.05)。结论本研究通过数据挖掘发现TLR2表达与胶质母细胞瘤患者的预后显著相关,通过实验验证敲减TLR2有效抑制LN229细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成能力,上述发现将为胶质母细胞瘤预后判断和靶向治疗提供新的潜在靶点。

胶质母细胞瘤的复发模式及相关因素分析

目的:探究手术后胶质母细胞瘤(glioblastoma, GBM)的复发模式及预后影响因素。方法:回顾性收集并分析2017年01月至2020年12月期间就诊于我院的105例胶质母细胞瘤患者的资料,基于连续的影像学表现将肿瘤复发模式划分为局部复发及非局部复发。进一步收集患者的临床及病理特征,分析不同复发模式的影响因素。结果:这项单中心回顾性研究包括105例手术切除后的胶质母细胞瘤患者。所有患者的中位无进展生存期(progression-free survival, PFS)为9.8个月;中位总生存期(overall survival, OS)为22.8个月。在49例(67.1%)和24例(32.9%)患者中观察到局部和非局部复发模式。73例复发患者中局部复发患者的中位PFS为4.8个月,非局部复发的患者为9.9个月(P=0.045)。未观察到OS与复发模式之间的相关性(P=0.242)。单因素回归分析示病灶部位(P=0.002)、室管膜下区受侵犯情况(P=0.009)、MGMT启动子甲基化状况(P=0.013)、 TERT启动子突变状况(P=0.031)、化疗与否(P=0.000)与PFS相关;病灶部位(P=0.003)、化疗与否(P=0.001)、放疗完成与否(P=0.004)与患者的OS相关。多因素Cox回归分析示病灶部位(P=0.035)、室管膜下区受侵犯情况(P=0.026)、化疗与否(P=0.036)和MGMT启动子甲基化(P=0.049)为PFS的独立影响因素;化疗与否(P=0.005)及放疗完成与否(P=0.005)是影响OS的独立危险因素。结论:GBM主要复发在局部,PFS较短。不同的临床和分子特征可以影响患者的预后,为医生提供理论参考,以做出更个性化和精确的治疗决策。

视网膜母细胞瘤患者玻璃体切除术后复发眼的组织病理学研究

目的 探讨视网膜母细胞瘤(RB)患者经玻璃体切除术治疗后复发眼的组织病理学特征及其发生的高危因素。方法 回顾性分析行组织病理学检查的58例(58只眼)RB患者的组织病理学检测报告。所有患者全部为玻璃体切除术后肿瘤复发施行眼球摘除术,病变区域的切片由具有较丰富经验的病理医师进行查阅并写组织病理学检测报告。探讨全部患者复发眼的组织病理学特征及高危因素(肿瘤侵犯眼前节、肿瘤穿过巩膜壁到眼球外生长、肿瘤侵犯视神经、肿瘤侵犯巩膜、肿瘤侵犯大区域脉络膜)。结果 58例(58只眼)RB患者按肿瘤侵犯区域分类,其中32只眼(55.17%)肿瘤侵犯睫状体、24只眼(41.38%)肿瘤侵犯虹膜、14只眼(24.14%)肿瘤侵犯脉络膜、12只眼(20.69%)肿瘤侵犯视盘。58只眼中有56只眼(96.55%)存有组织病理学高危因素,其中15只眼存有单项组织病理学高危因素,占比26.79%(15/56);41只眼存在多项组织病理学高危因素,占比73.21%(41/56)。病理学高危因素中肿瘤侵犯眼前节占比(67.86%)最高,其次为侵犯脉络膜(42.86%)、侵犯视神经(26.79%)、侵犯巩膜(12.50%)、巩膜外浸润(7.14%)。结论 RB患者经玻璃体切除术后复发眼的肿瘤组织极易入侵眼前节区域,主要侵犯部位为睫状体,且多数复发眼存有组织病理学高危因素,临床应严格掌控手术适应证,并按患者自身情况合理选用玻璃体切除术进行治疗。

基于多序列MRI影像组学的胶质母细胞瘤风险分层预测研究

目的 以多序列MRI影像组学方法开发一种胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)总生存期(overall survival,OS)预测模型,实现风险分层预测。材料与方法 本研究回顾性分析TCIA/TCGA(The Cancer Imaging Archive/The Cancer Genome Atlas)公共数据库中309例GBM患者数据,针对术前对比增强后T1加权(post-contrast enhanced T1-weighted,T1CE)序列和T2加权液体衰减反转恢复(T2-weighted fluid attenuation inversion recovery,T2 FLAIR)序列,提取坏死区、肿瘤区和水肿区三种感兴趣区域的10 128个影像组学特征。采用相关性分析、主成分分析(principal component analysis,PCA)和最小绝对收缩和选择算法-Cox等比例风险回归(least absolute shrinkage and selection operator-cox proportional-hazards,LASSO-Cox),筛选与OS显著相关的影像组学特征,计算风险评分(Risk-score)作为组学标签。采用Kaplan-Meier (KM)生存分析和对数秩(Log-rank)检验比较高、低风险组间的生存差异。应用多因素Cox等比例风险(Cox proportional-hazards,Cox)回归构建临床-影像组学联合模型和列线图。采用一致性指数(concordance index,C-index)评估临床-影像组学联合模型的预测性能,并与临床模型进行比较。结果 根据训练集筛选出的16个影像组学特征计算风险评分,依据风险评分将训练集和测试集患者划分为高、低风险组,Log-rank检验表明高、低风险组患者的生存概率差异具有明显统计学意义。单因素Cox回归确定风险评分、年龄和O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)状态是影响GBM总生存期的显著风险因素。多因素Cox回归分别构建临床模型及临床-影像组学联合模型,发现临床-影像组学联合模型性能(训练集:C-index=0.768,测试集:C-index=0.724)高于影像组学模型(训练集:C-index=0.744,测试集:C-index=0.710)和临床模型(训练集:C-index=0.659,测试集:C-index=0.653)。结论 影像组学标签可以作为GBM总生存期的独立预后因素,结合临床病理信息和影像组学标签构建的联合模型能够更好地辅助临床进行GBM风险分层和生存预测,具有重要临床价值。

胆碱激酶α通过外泌体介导胶质母细胞瘤U87MG细胞的恶性表型

目的:探究胆碱激酶α(Choline kinase alpha,CHKA)通过外泌体影响胶质母细胞瘤U87MG细胞增殖、迁移及侵袭能力的机制。方法:在胶质瘤U87MG细胞中转染shCHKA及其空载对照;采用外泌体分泌抑制剂GW4869抑制外泌体分泌;利用透射电镜及纳米粒径示踪分析鉴定外泌体形态和大小,BCA法鉴定外泌体浓度,Western Blot检测外泌体标志性蛋白表达水平;提取CHKA不同表达组细胞培养上清中的外泌体与U87MG共孵育,CCK-8检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。最后,用U87MG细胞构建裸鼠体内模型,观察不同CHKA表达U87MG细胞来源的外泌体对裸鼠成瘤能力的影响。结果:与空载对照细胞相比,shCHKA组细胞培养上清中的外泌体浓度降低(P<0.001),外泌体特异性蛋白的表达水平降低(P<0.001)。加入GW4869后,胶质瘤U87MG细胞的增殖、迁移及侵袭能力均降低(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。GW4869可以明显抑制空载对照细胞的增殖、迁移及侵袭能力(P<0.05,P<0.001,P<0.001),但对shCHKA细胞的抑制作用不明显。与加入shNC组外泌体的U87MG细胞相比,加入shCHKA组外泌体的U87MG细胞的增殖、迁移、侵袭能力明显减弱(P<0.01,P<0.05,P<0.001)。裸鼠体内成瘤实验表明,与注射shNC组外泌体相比,注射shCHKA组外泌的裸鼠移植瘤生长能力明显减弱(P<0.01)。结论:CHKA的表达可能通过外泌体介导胶质母细胞瘤U87MG细胞的恶性表型。

新型多金属氧酸盐化合物{BiW_(8)O_(30)}对胶质母细胞瘤细胞体内、体外抑制作用的研究

目的:明确新型多金属氧酸盐化合物{BiW_(8)O_(30)}对胶质母细胞瘤细胞体内、体外抑制作用的影响,并探讨可能的作用机制。方法:采用不同浓度{BiW_(8)O_(30)}处理LN229、U251细胞。CCK-8法检测细胞增殖能力;细胞划痕和侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力;流式细胞实验检测细胞凋亡情况;DAPI染色观察细胞核形态变化;裸鼠皮下移植瘤模型实验检测肿瘤体内增殖能力;Western blot实验检测细胞中凋亡相关蛋白的表达水平;蛋白质组测序技术分析{BiW_(8)O_(30)}发挥对胶质母细胞瘤细胞抑制作用的可能机制。结果:与对照组相比,{BiW_(8)O_(30)}处理组的细胞存活率、划痕愈合率、侵袭细胞数均显著降低(P<0.001)。流式细胞实验显示,{BiW_(8)O_(30)}处理提高肿瘤细胞凋亡率(P<0.05)。DAPI染色结果显示,{BiW_(8)O_(30)}处理后,肿瘤细胞出现核浓缩、核碎裂等形态变化。{BiW_(8)O_(30)}处理显著抑制异种移植肿瘤在裸鼠体内的增殖能力(P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,{BiW_(8)O_(30)}处理组凋亡相关蛋白XIAP表达降低(P<0.001),caspase 3表达升高(P<0.001)。蛋白质组测序分析显示,{BiW_(8)O_(30)}处理后胶质母细胞瘤细胞内共有559个蛋白的表达出现显著差异,其中250个蛋白上调,309个蛋白下调(符合adj.P-value<0.05,|Fold change|>1.5)。通过基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,发现差异蛋白主要富集于程序性细胞死亡的调控、细胞凋亡过程、细胞运动的调节、细胞黏附等通路。结论:{BiW_(8)O_(30)}抑制胶质母细胞瘤细胞体内、体外的增殖能力,体外迁移和侵袭能力,并可诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与细胞凋亡过程、细胞黏附与运动等通路相关。

区分胶质母细胞瘤和单发性脑转移瘤的多模态融合深度学习模型的开发和验证

目的:胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)和脑转移瘤(brain metastases,BMs)是成人中常见的恶性脑肿瘤,目前磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)是筛查和评估脑肿瘤预后的常用方法,但其鉴别诊断GBM和BMs的特异性和敏感性有限。近年来,深度神经网络在诊断分类和创建临床决策支持系统方面显示出极大的潜力。本研究旨在应用深度学习技术提取的放射组学特征,探讨其在初诊GBM和单发性脑转移瘤(solitary brain metastases,SBMs)术前准确分类中的可行性,进一步探索基于多模态数据融合对分类任务的影响。方法:回顾性分析经组织病理或临床诊断证实的135例初诊GBM患者和73例SBMs患者的头颅MRI序列数据。首先,选择结构性T_(1)加权、T_(1)C加权和T_(2)加权作为整个模型的3个输入,在配准后的3种模态MR图像上人工勾画感兴趣区域(regions of interest,ROI),并获取多模态放射组学特征,使用基于随机森林(random forest,RF)的特征选择方法降低维度,进一步分析每个特征的重要性。然后,通过对比解纠缠的方法寻找不同模态特征之间的共享特征和互补特征。最后,通过融合不同模态的2种特征,预测每个样本对GBM和SBMs的响应。结果:应用机器学习和本文提出的多模态融合方法的放射组学特征对GBM和SBMs有较好的区分能力。相较于单模态数据,应用支持向量机(support vector machine,SVM)、Logistic回归、RF、自适应增强(adaptive boosting,AdaBoost)、梯度提升决策树(gradient boosting decision tree,GBDT)机器学习算法的多模态融合模型均取得了较大提升,曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.974、0.978、0.943、0.938、0.947。本研究的对比解纠缠多模态MR融合方法表现更好,测试集上AUC、准确度(accuracy,ACC)、灵敏度(sensitivity,SEN)、特异度(specificity,SPE)分别为0.985、0.984、0.900、0.990。相较于其他多模态融合方法,本研究方法的AUC、ACC和SEN均呈现出最好的性能表现。验证本研究各模块组件作用的消融实验中,同时使用3种损失函数后,AUC、ACC和SEN分别提升了1.6%、10.9%和15.0%。结论:基于深度学习的对比解纠缠多模态MR放射组学特征融合技术有助于提高GBM和SBMs的分类准确性。

CD73/NT5E在胶质母细胞瘤中的研究进展

胶质瘤是最常见的原发性中枢神经系统肿瘤,主要来源于神经胶质细胞,具有侵袭性强、易复发、预后差的特点。胶质母细胞瘤是恶性程度最高的高级别胶质瘤,临床治疗方法为手术切除为主,辅以放化疗及电场治疗等综合治疗,但治疗效果并不令人满意。CD73是一种与腺苷代谢相关的新型免疫检查点,近年来随着肿瘤免疫治疗领域的迅速发展,发现CD73可以通过抑制抗肿瘤免疫反应和促进血管生成来促进肿瘤进展。本文系统综述了CD73的作用机制,并讨论其在胶质瘤中的生物学作用及应用,旨在为胶质瘤患者的治疗提供潜在的治疗方案。