烟曲霉胶霉毒素的研究进展

胶霉毒素作为烟曲霉产生的真菌毒素之一,对哺乳动物细胞具有免疫抑制及促凋亡作用。其通过抑制NAPDH氧化酶活性进而抑制粒细胞抗微生物作用。在侵袭性曲霉病动物模型和临床确诊患者血清中均可检测到胶霉毒素,预示其可作为曲霉病诊断指标。本文将从胶霉毒素合成的操控基因组成、分布、致病性及临床检测前景予以综述。

盐胁迫对胶霉毒素生物合成基因gliT表达的影响

从烟曲霉菌株F3中克隆得到gliT基因(胶霉毒素生物合成基因簇成员之一),其编码产物GliT是一个假定的硫氧还蛋白还原酶,含有保守的Pyr_redox和TrxB结构域,与来自于烟曲酶菌株Af293的GliT在氨基酸水平上的同源性高达97%。不同盐浓度培养条件下,烟曲霉菌株F3中gliT基因的表达变化与发酵液中胶霉毒素的含量变化之间存在着明显的相关性,均在盐浓度70 g/L培养条件下达到峰值,提示gliT基因在胶霉毒素生物合成过程中的作用可能与盐胁迫有关。

LC-MS/MS分析人支气管上皮细胞与烟曲霉共培养模型中胶霉毒素的含量

目的：采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）分析人支气管上皮细胞与烟曲霉共培养模型中胶霉毒素的含量。方法建立人支气管上皮细胞与烟曲霉共培养模型并于不同时间段检测共培养模型中胶霉毒素的含量。以支气管上皮细胞单独培养为对照组，分别于12h、24h、36h收集对照组、AF293（烟曲霉标准株）共培养组、AFB5233WT（烟曲霉野生株）及AFB5233ΔGlip（烟曲霉胶霉毒素基因敲除株）共培养组细胞培养上清液，采用LC-MS/MS检测胶霉毒素的含量。结果共培养模型中胶霉毒素水平随培养时间增加而逐渐升高（P〈005），胶霉毒素回收率为687%~726%。结论该方法快速、灵敏、结果准确，适用于测定人支气管上皮细胞与烟曲霉共培养模型中胶霉毒素的含量。

高效液相色谱-串联质谱法测定多种食品和饲料中的胶霉毒素

建立了加压溶剂萃取结合全自动固相萃取技术-高效液相色谱-串联质谱法(high performance liquid chromatography-mass spectrometry,HPLC-MS/MS)测定玉米和小麦等禾谷食品、猪的肌肉和肝脏等动物源食品及猪和鸡的饲料中胶霉毒素的液相色谱串联质谱法。前处理时依次采用加压溶剂萃取(pressurized liquid extraction,PLE)和全自动固相萃取(automated solid phase extraction,ASPE)技术,乙腈/水(50/50,V/V)为玉米、小麦及饲料样品的加压溶剂萃取液,乙腈/正己烷(60/40,V/V)为猪的肌肉和肝脏样品的加压溶剂萃取液,甲醇/水(85/15,V/V)为所有样品的全自动固相萃取洗脱液。HPLC-MS/MS检测,基质匹配工作曲线外标法定量。结果表明,不同样品中胶霉毒素在0.2~100μg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数R2≥0.995 8;不同样品中的胶霉毒素最低检出限在0.09~0.15μg/kg,最低定量限在0.23~0.31μg/kg;添加不同浓度水平的胶霉毒素,平均回收率为81.8%~95.4%,变异系数≤13.2%。

深海真菌Dichotomomyces cejpii胶霉毒素生物合成基因启动子的克隆和功能鉴定

利用染色体步移技术对深海真菌Dichotomomyces cejpii中胶霉毒素的生物合成基因Gli G、Gli I和Gli O启动子进行克隆,并将其核心区域导入p GL3-basic荧光素酶报告基因载体,通过荧光强度分析发现Gli G的启动子转录活性最强。进一步将Gli G启动子核心区域导入含潮霉素抗性标记的p AN7-1载体,以替换原有启动子pgpd A,并将重组质粒导入酿酒酵母,用潮霉素抗性平板进行筛选,发现Gli G启动子能在酿酒酵母中启动潮霉素抗性基因的表达。

高效液相色谱法检测黄瓜中的胶霉毒素

建立1种测定黄瓜中胶霉毒素残留的高效液相色谱法。以乙腈-水体积比84∶16为提取溶剂,提取黄瓜中的胶霉毒素,以269 nm为检测波长,甲醇、水梯度流脱,流速1.0 mL·min^(-1),进样体积20μL。该方法对黄瓜样品中胶霉毒素残留量检测的线性范围为0.101～10.1μg·mL^(-1),对黄瓜样品测定的回收率为99.5%～108.6%,对黄瓜样品测定的相对标准偏差为1.4%～5.0%。

采用高效液相色谱法检测黄瓜中的胶霉毒素的研究

高效液相色谱法在检测黄瓜中残留的胶霉毒素时有着显著的实用价值,故而值得应用。本文简要分析了高效液相色谱法的特点,并通过合理选取待测样品、明确检测条件、有效配制检测溶剂以及精准分析检测数据等,增加检测结果的可靠性。

胶霉毒素毒性机制研究进展

胶霉毒素（gliotoxin，GT），又称胶毒素，是真菌代谢产物（epipolythiodioxopiperazine，ETP）家族中的一员，最早从粘帚霉（gliocladium）中分离得到，并因此得名。胶霉毒素是烟曲霉（Aspergillusfumiga—tus）的代谢真菌毒素之一，

胶霉毒素的研究进展

胶霉毒素(gliotoxin,GT)是一个分子量为326 Da的小分子化合物,其骨架是由非核糖体肽合成酶Gli P催化苯丙氨酸和丝氨酸缩合成的环二肽,属于表聚硫代哌嗪二酮类化合物,是一种重要的真菌次级代谢产物。体内外研究已经表明,GT对动植物产生多种效应,不仅具有免疫抑制功能和诱导细胞凋亡作用,在生物防治方面也具有潜在的应用价值。本文将对有关GT生物合成、诱导宿主效应机制及其潜在应用价值进行综述。

黄花蒿内生真菌SPS-02的鉴定和次生代谢产物研究

以黄花蒿（Artemisia annua L.）来源的一株内生真菌SPS-02为研究对象,分别进行了拮抗试验、分类鉴定和次生代谢产物研究。通过形态和培养特征观察及系统发育树构建,菌株SPS-02确定为烟曲霉（Aspergillus fumigatus）。拮抗试验结果表明,菌株SPS-02能较强地抑制植物病原真菌。通过菌株SPS-02次生代谢研究,得到4个单体化合物（1~4）,采用波谱技术确定为bisdethiobis（methylthio）-gliotoxin（1）、N-（2,4-dihydroxybenzoyl）-L-Serine（2）、2,4-dihydroxybenzoic acid（3）、2H-Benzopyran-2,5（6H）-dione（4）,其中化合物1、3和4具有较强的抑制白色念珠菌（Canidia albicans）,MIC值分别为0.90、2.08和1.98μM,并且化合物1（胶霉毒素）产量较丰富,初始效价约为15 mg/L,具有一定的应用价值。

烟曲霉产物的药理活性与抗癌新药研究前景

目的：介绍烟曲霉产物夫马霉素、胶霉毒素以及ｆｕｍｉｔｒｅｍｏｒｇｉｎＣ的理化性质、生物活性、毒性以及近年来发现的特殊药理作用。方法：查阅有关这３种化合物的大量文献加以概括。结果：夫马霉素及其衍生物具有抑制血管新生成的作用；胶霉毒素除了具有免疫抑制作用外，还是法尼基转移酶的抑制剂；ｆｕｍｉｔｒｅｍｏｒｇｉｎＣ对哺乳动物细胞周期的Ｇ２／Ｍ期有抑制作用。结论：血管生成抑制剂、法尼基转移酶抑制剂以及细胞周期（Ｇ２／Ｍ期）抑制剂代表３种不同的抗癌模式，有望开发成为新型抗癌药物。

澳发现一种具有克服移植排斥性潜能的物质组织

澳大利亚国立大学John Curtin医学研究所的两名科学家意外地发现了一种物质的作用,它具有克服组织移植排斥性的潜能,也可能会解决一些免疫系统的疑难病症,如多发性硬化和AIDS病(acquired immune deficie-ncy syndrome)。这种叫胶霉毒素(gliotoxin)的物质,系由一种普通真菌产生的。

恒山黄芪内生真菌Penicillium sp.中gliotoxin类代谢产物的分离和生物活性

目的:研究恒山黄芪内生真菌Penicillium sp.的gliotoxin类代谢产物和其对黄芪白粉病原菌Erysiphe pisi.的抑制作用。方法:次生代谢产物的分离纯化采用反复硅胶柱色谱法,Sephadex LH-20凝胶色谱法和HPLC方法,并通过化学方法结合核磁共振分析和质谱鉴定其化学结构,抑菌活性测试方法采用最小抑制浓度法。结果:从恒山黄芪内生真菌Penicillium sp.的固体发酵萃取物中分离得到7个gliotoxin类代谢产物,经波谱分析分别鉴定为gliotoxin(1),bisdethiobis(methylthio)gliotoxin(2),dehydroxybisdethiobis(methylthio)gliotoxin(3),dehydrogliotoxin(4),6-deoxy-5a,6-didehydrogliotoxin(5),didehydrobisdethiobis(methylthio)gliotoxin(6),bis-N-norgliovietin(7),抑菌活性测试结果显示,化合物1,4和5对黄芪白粉病原菌显示出强抑制作用,最小抑菌浓度(MIC)分别达到1.56,0.78,6.25 mg·L-1。结论:所有化合物都是首次从黄芪内生真菌发酵产物中分离得到,黄芪内生真菌Penicillium sp.可以作为潜在的产生gliotoxin类代谢产物的菌种资源。