HRM方法检测肺腺癌胸水细胞块中EGFR基因突变的临床意义

目的:探讨应用HRM方法检测肺腺癌患者胸水细胞块中癌细胞EGFR基因突变的临床价值。方法:收集43例肺癌阳性胸水标本,制作胸水细胞块,经HE及免疫组化染色确诊为肺腺癌,常规提取DNA,应用HRM方法检测EGFR基因第18-21外显子突变。所有标本均经基因测序法验证。结果:43例肺腺癌胸水细胞块中,HRM法检测出EGFR基因突变共15例,总突变率为34.88%。基因测序检测出EGFR基因突变共14例,总突变率为32.56%。两者的突变率差异有统计学意义。结论:对难以获得肺癌组织标本的肺腺癌患者可应用HRM方法检测胸水细胞块,筛查EGFR基因突变,指导EGFR酪氨酸激酶受体抑制剂应用。

TTF-1、CK7在胸水细胞块中鉴别肺腺癌诊断的应用

目的探讨TTF-1、CK7在胸水细胞块中鉴别肺腺癌中表达的敏感性和特异性及在肺腺癌诊断中的应用。方法临床资料和影像学资料诊断为肺癌的病人,胸水离心涂片中见到癌细胞,胸水再离心制成细胞块,HE显微镜观察有肿瘤细胞,进行免疫组化Max Vision法检测TTF-1及CK7等抗体。结果10例肺癌中有7例肺腺癌和1例肺小细胞癌都表达TTF-1、CK7;2例肺鳞癌中TTF-1、CK7不表达。结论 TTF-1、CK7在肺腺癌中表达有较高的敏感性和特异性,胸水细胞块诊断后,可作为鉴别肺腺癌的可靠标记抗体。

胸水细胞块免疫标记TTF-1、CEA、CK7的表达及意义

目的探讨T T F-1、C E A、C K 7在胸水细胞块的表达及诊断应用价值。方法收集临床诊断为肺癌的胸水标本30例。胸水经离心常规涂片查见癌细胞,再离心沉淀制成细胞块切片诊断有癌细胞(或癌组织),然后进行免疫细胞化学SP法检测TTF-1、CEA、CK7等抗体。结果 21例肺腺癌中,18例(85.7%)TTF-1呈阳性表达,19例(90.5%)CEA呈阳性表达,18例(85.7%)CK7呈阳性表达;6例肺鳞癌中,1例(1/6)TTF-1呈阳性表达,4例(4/6)CEA呈阳性表达,6例(6/6)CK5/6呈阳性表达;3例肺小细胞癌中,除CK5/6外,其余标记均有表达。结论 T T F-1、C E A、C K 7在肺腺癌中表达有较高的敏感性,三者可作为常规胸水细胞块免疫标记鉴别肺腺癌,具有重要参考价值。

胸水细胞蜡块与免疫组化对肺癌的诊断敏感性分析

目的 研究胸水细胞蜡块与免疫组化对肺癌的诊断敏感性。方法 纳入我院2020年1至2023年1月收治的126例疑似肺癌患者,病理检查显示肺癌105例,肺良性病变21例。所有患者均行薄层液基细胞学检查与胸水细胞蜡块与免疫组化检查,观察比较不同检查方式对肺癌的诊断效能。结果 薄层液基细胞学检查结果显示,恶性93例(73.81%),良性33例(26.19%);以病理检查结果为金标准,薄层液基细胞学检查的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值分别为80.95%、61.90%、77.78%、91.40%、39.39%。胸水细胞蜡块与免疫组化检查结果显示,恶性103例(81.75%),良性23例(18.25%);以病理检查结果为金标准,胸水细胞蜡块与免疫组化检查的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值分别为96.19%、90.48%、95.24%、98.06%、82.61%。胸水细胞蜡块与免疫组化检查灵敏度、特异度、准确度、阴性预测值均高于薄层液基细胞学检查(P <0.05);胸水细胞蜡块与免疫组化检查诊断肺癌不同分型的整体检出率为91.43%。结论 胸水细胞蜡块与免疫组化诊断肺癌具有较高的敏感性与特异性,且能够有效检出不同类型肺癌。

胸水细胞蜡块与免疫组化对肺癌的诊断敏感性分析

评定胸水细胞蜡块与免疫组化对肺癌的诊断敏感性分析。方法 本次研究接受回顾性调查,纳入接受临床诊断的疑似肺癌患者87例,符合入组标准。入院时均采集胸水标本,进行胸水细胞蜡块及胸水细胞蜡块联合免疫组化检查,判定诊断结果,以肺组织病理活检作为诊断“金标准”。按照病理组织学检查,可分为肺癌患者64例和非肺癌患者23例。对比两种方式对于肺癌的诊断应用。分析两种方式与病理组织学检查的一致性。比较两种方式下对于肺癌分型的检出对比。结果 细胞蜡块对于肺癌检出61例,非肺癌检出26例,经Kappa一致性分析(k=0.724,P<0.05);细胞蜡块联合免疫组化对于肺癌检出63例,非肺癌检出24例,经Kappa一致性分析(k=0.815,P<0.05)。细胞蜡块联合免疫组化对于肺癌的检出阴性预测值、灵敏度、准确度高于细胞蜡块(P<0.05)。两种方式对于肺癌的检出阳性预测值和特异度对比(P>0.05)。细胞蜡块联合免疫组化对于腺癌检出率(98.00%)高于细胞蜡块(86.00%),二者分析有意义(P<0.05)。两种方式对于鳞癌、鳞腺癌的检出率比较(P>0.05)。结论 胸水细胞蜡块联合免疫组化可以进一步提高肺癌的诊断敏感性,并且腺癌的检出率最高。

胸水细胞蜡块在肺腺癌诊断及EGFR/ALK/ROS1基因突变检测中的应用

目的:探索肺腺癌胸水细胞蜡块在肺腺癌病理诊断及EGFR/ALK/ROS1基因突变检测中的应用价值。方法:选取2017年1月至2021年12月在温州医科大学附属第一医院诊断为肺腺癌的41例患者胸水细胞,采用常规细胞涂片与细胞蜡块切片进行病理HE染色鉴定,并采用NGS及ARMS方法进行EGFR/ALK/ROS1基因突变检测。结果:恶性胸腔积液(MPE)细胞涂片癌细胞鉴定敏感性为90.2%,假阴性率为9.8%,MPE细胞蜡块癌细胞鉴定敏感性为100%,假阴性率为0;MPE细胞涂片样本EGFR/ALK/ROS1总体突变率为70.7%(29/41),其中EGFR突变率为61.0%(25/41),ALK融合基因检出率为7.3%(3/41),ROS1融合基因检出率为14.6%(6/41);MPE细胞蜡块样本中EGFR/ALK/ROS1总体突变率为73.2%(30/41),其中EGFR突变率为68.3%(28/41),ALK融合基因检出率为2.4%(1/41),ROS1融合基因检出率为4.9%(2/41);此外,胸水细胞涂片及细胞蜡块的基因突变阳性的肺腺癌患者较未突变肺腺癌患者具有显著增加的总生存率、无进展生存率及疾病控制率。结论:与胸水细胞涂片相比,胸水细胞蜡块肿瘤检出率及EGFR/ALK/ROS1总体突变率相对更高,可用于指导病理诊断及分子检测的靶向治疗。

肺腺癌伴恶性胸腔积液患者胸水细胞蜡块KCa3.1的表达及其意义

目的探讨肺腺癌(LUAD)伴恶性胸腔积液患者胸水细胞蜡块中电导钙激活钾离子通道蛋白(KCa3.1)的表达及其意义。方法利用GEPIA、Kaplan-Meier plotter数据库分析KCa3.1在肺腺癌组织中的表达情况及其与肿瘤分期、总生存期(OS)的关系。选取2019年6月1日至2021年6月30日绍兴市人民医院收治的LUAD伴恶性胸腔积液患者72例,应用免疫组化法检测胸水细胞蜡块KCa3.1表达,分析其与临床特征及预后的关系。结果生物信息学分析和临床资料分析提示,LUAD患者KCa3.1表达水平明显高于正常肺组织(P<0.05),KCa3.1高表达和低表达患者性别、年龄、吸烟情况、T分期、N分期、肺外转移情况、表皮生长因子受体基因突变情况比较差异均无统计学意义(均P>0.05),KCa3.1高表达患者OS低于低表达患者(P<0.05)。结论KCa3.1在LUAD患者中高表达,且与不良预后有关,提示KCa3.1可作为LUAD患者诊断和预后判断的潜在靶点。

胸水细胞蜡块结合免疫组织化学染色技术诊断肺癌的临床意义

目的分析胸水细胞蜡块结合免疫组织化学染色技术诊断肺癌的价值。方法选取2021年5月—2023年3月睢宁县人民医院收治的疑似肺癌患者67例为研究对象,均给予液基细胞学、细胞蜡块结合免疫组化检测,以病理检查结果为金标准,比较不同检测方法诊断效能以及对不同类型肺癌的鉴别准确性。结果67例患者中经病理检查确诊肺癌47例、良性病变20例,细胞蜡块结合免疫组织化学染色检查灵敏度、特异度、准确性、阳性预测值、阴性预测值均高于液基细胞学检测结果。以病理检查为金标准,细胞蜡块结合免疫组织化学染色检测对于腺癌诊断符合率100.00%,高于液基细胞学检测的78.95%,差异有统计学意义(χ^(2)=6.846,P<0.05)。结论肺癌诊断中,以胸水细胞蜡块结合免疫组化检测技术应用价值较高,除进行肺癌检出之外,还可进行肿瘤类型鉴别。

胸水细胞蜡块在晚期肿瘤诊断及肺腺癌EGFR/ALK/ROS1检测中的应用

目的:分析胸水细胞蜡块在晚期肿瘤诊断及肺腺癌EGFR/ALK/ROS1检测中的应用价值。方法:收集胸水细胞学制片后剩余的细胞标本制备蜡块,行HE染色,对来源不同的肿瘤选择不同的抗体进行免疫组织化学标记,联合HE形态学及免疫组织化学结果对恶性胸水进行肿瘤分类,同时对明确诊断为肺腺癌的病例,进行EGFR/ALK/ROS1基因状态的检测。结果:79例患者中,60例检出恶性肿瘤细胞,15例为增生的间皮细胞,4例为极少量异型细胞,免疫组织化学难以做出准确标记。60例恶性肿瘤细胞中,腺癌51例,小细胞癌4例,鳞状细胞癌3例,梭形细胞肉瘤1例,弥漫大B细胞淋巴瘤1例。51例腺癌中,结合免疫组织化学标记及临床病史,肺腺癌43例,乳腺癌2例,卵巢高级别浆液性癌2例,胃癌2例,结肠癌1例,肝癌1例。在43例肺腺癌中,22例患者进行了EGFR/ALK/ROS1基因检测,结果显示EGFR突变率为54.5%(12/22例),ALK,ROS1基因融合突变率分别为9.1%和4.5%(2/22例和1/22例)。结论:利用胸水标本制备细胞蜡块,结合免疫组织化学标记有助于晚期肿瘤的诊断,并为肺腺癌患者个体化治疗方案的选择提供帮助。

肺腺癌胸水标本中PD-L1的蛋白表达与临床病理特征及分子改变的相关性研究

背景与目的非小细胞肺癌的免疫治疗药物pembrolizumab需要基于包括免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)在内的检测结果,即通过检测程序性死亡配体1(programmed cell death protein 1,PD-L1)的表达等手段来预测治疗反应。评估肺腺癌细胞学标本免疫细胞化学(immunocytochemistry,ICC)方法检测PD-L1的可行性,并探讨PD-L1表达与临床病理及分子特征的相关性。方法收集60例肺腺癌胸水细胞学标本应用PD-L1 sp263试剂按照生产说明书进行免疫细胞化学染色,同时对胸水细胞学标本做高通量二代测序(next-generation sequencing,NGS),探讨PD-L1与驱动基因突变的相关性。结果60例肺腺癌胸水细胞块标本ICC检测中,有35例PD-L1表达阳性,阳性表达率为58.3%。本院57例组织学标本PD-L1 IHC表达的阳性率为33.3%,细胞学标本与组织学标本差异无统计学意义(P>0.05)。60例细胞学标本中26例接受NGS检测,15例(57.7%)发现表皮生长因子受体(epidermal growth factorreceptor,EGFR)突变,经统计PD-L1表达与EGFR突变未发现相关性。PD-L1的阳性表达率与研究人群的年龄、性别、是否淋巴结或远处转移及是否进行放化疗或靶向治疗均未发现相关性(P>0.05)。结论在无手术标本可取时,胸水细胞学细胞块标本可以对PD-L1进行免疫细胞化学检测,其结果具有可行性。

晚期NSCLC患者细胞块与配对组织块VEGF检测的对比研究

目的探讨晚期非小细胞肺癌患者细胞学样本用于VEGF检测的临床价值。方法收集具有组织学对照的细胞学样本62例,采用Eli Vision法检测VEGF蛋白表达情况,分析比较细胞块与组织块的VEGF表达情况。结果组织块VEGF免疫组化阳性结果共24例,阳性率38.71%;细胞块VEGF免疫组化阳性结果共22例,阳性率35.48%;两组比较,差异不具有统计学意义(P=0.168>0.05)。结论胸水细胞块可代替组织学方法对晚期非小细胞肺癌进行VEGF筛查。

探讨胸水细胞蜡块在肺腺癌EGFR与ALK基因检测中的应用价值研究

探讨胸水细胞蜡块在肺腺癌EGFR、ALK基因检测中的应用价值。方法 选取本院2018年1月至2021年12月共计125例肺腺癌患者作为研究对象,并采集胸水制作为细胞蜡块,开展qPCR法行EGFR基因(21种突变位点)和EML4-ALK融合基因(9种融合突变)突变检测,将检测结果与活检组织蜡块的检测结果进行比对,探讨胸水蜡块在肺腺癌EGFR、ALK基因检测中的应用价值。结果 胸水细胞蜡块癌细胞检出率相较活检组织蜡块,对比差异不显著(P>0.05)。细胞蜡块EGFR基因检测结果显示阳性34例,阳性率为27.20%,ALK基因检测结果显示阳性9例,阳性率7.20%;活检组织蜡块EGFR基因检测结果显示阳性32例,阳性率25.60%,ALK基因检测结果显示阳性8例,阳性率为6.40%;两种检测方式的EGFR、ALK基因突变检测结果对比差异不显著(P>0.05)。本次研究中共34例患者检出EGFR基因,其中占比最高的突变类型是p.Leu858Arg。本次研究中共计9例患者检出ALK突变基因,共计2种突变类型,其中p.Phe1174leu检出8例,占比达到88.89%。结果 利用胸水细胞制备细胞蜡块进行肺腺癌EGFR、ALK基因突变检测,其检测结果与活检组织蜡块的结果吻合率高。由于胸水细胞获取更为容易,因此是活检组织蜡块的重要补充,甚至对于部分肺癌晚期、无法通过手术来获得标本的患者而言,采用胸水细胞制备细胞蜡块进行检测具有不可替代的作用。

应用ARMS检测不同类型的肺腺癌标本EGFR基因突变

目的探讨应用扩增阻滞突变系统(amplification refractory mutation system,ARMS)法检测不同类型肺腺癌标本表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)基因突变的特点。方法收集80例山东省西部地区肺腺癌患者肿瘤标本(胸水细胞块、肺活检、手术切除组织),采用ARMS法检测EGFR基因19、20、21号外显子突变状态,并分析EGFR突变与标本类型、患者性别、年龄、吸烟状态及家族史等的关系。结果肺腺癌中,总EGFR突变率为41.25%,胸水细胞块、肺活检、手术切除组织EGFR突变率分别为43.14%、31.25%、46.15%(P=0.649)。EGFR突变标本中,21号外显子错义突变(L858R)发生比例最高(59.58%,19/33),其次为19号外显子缺失(19del)(39.39%,13/33),二者同时突变占3.03%(1/33);女性与男性的突变率差异有显著性(54.55%vs 25.00%,P=0.008);吸烟与不吸烟患者的突变率差异有显著性(25.81%vs 51.02%,P=0.026)。结论在肺腺癌中,胸水细胞块、肺活检、手术切除组织等标本均可用于EGFR基因突变检测,21号外显子L858R突变最常见;女性、不吸烟患者突变率明显高于男性、吸烟患者。

探讨不同肺腺癌标本中EGFR突变和TTF-1表达的关系及临床意义

目的探讨在不同肺腺癌标本中EGFR突变和TTF-1表达的关系及意义。方法收集肺腺癌标本603例(手术标本343例、小活检176例及胸水细胞块86例),用扩增阻滞突变系统(amp1ification refractory mutation system,ARMS)法检测EGFR的突变及用免疫组化方法检测TTF-1表达。结果 EGFR突变在手术组织172例(50.1%)、小活检90例(51.1%)及胸水细胞块48例(57.1%)。TTF-1阳性在手术组织中206例(60.1%)、小活检98例(55.7%)及细胞块50例(59.5%)。所有标本中EGFR突变310例(51.4%),TTF-1阳性356例(58.7%)。所有突变中19外显子157例(50.6%)、21外显子143例(46.1%)、18外显子10例(3.3%)。结论胸水细胞块标本检测EGFR突变与组织标本具有同样的效果。肺腺癌患者TTF-1表达与EGFR的突变在手术标本、小活检及胸水细胞块中都有高度相关性。TTF-1对EGFR突变也有比较好的提示作用。