胸腺内注射异基因抗原诱导免疫耐受的实验研究

目的 :探讨胸腺内注射异基因抗原在建立特异性移植免疫耐受中的作用。方法 :自供体C5 7BL 6小鼠脾细胞中提取的H 2抗原 ,注入受体Balb c小鼠胸腺内 ,1w后移植供体C5 7BL 6小鼠皮肤及无关供体C3H小鼠皮肤。观察皮肤存活时间 ,同时做单向混合淋巴细胞培养 (mixedlymphocyteculture,MLC)、细胞介导的淋巴细胞毒 (cellmediatelymphocytotoxic ,CML)、迟发型超敏反应 (delayedtapehypersensitivity ,DTH)的检测。结果 :实验组移植皮肤平均存活时间 (mediansurvivaltimes,MST) >70d ,对照组MST为 12 .6± 1.6 9d ,移植C3H皮肤的无关供体组MST为 13.4± 1.42d。耐受小鼠淋巴细胞对供体淋巴细胞刺激的反应性减弱 ,而对无关供体淋巴细胞的刺激呈正常反应 ,耐受小鼠对供体靶细胞的CML作用、DTH反应特异性降低。显示出胸腺内注射抗原诱导耐受的特异性。结论 :胸腺注射异基因H

胸腺内注射供体MHC抗原对同种异体肢体移植的影响

目的探讨胸腺内注射异基因抗原对同种异体肢体移植存活的影响。方法 Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体。将SD大鼠随机分成3组,A组:自体肢体移植组;B组:异体肢体移植组;C组:胸腺内注射组。术后观察肢体的存活时间,并在术后7 d进行移植肢体皮肤苏木精-伊红染色检查及血清IFN-γ细胞因子的检测。结果 C组肢体存活时间长于B组,差异具有统计学意义(P<0.05)。组织学检查发现,C组出现的炎症排斥反应以及组织的改变明显较B组轻,与A组相接近。IFN-γ的检测,C组低于B组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论胸腺内注射异基因抗原可以对异体肢体移植产生特异性免疫耐受作用。

胸腺内注射异基因抗原诱导鼠异体骨移植的免疫耐受

背景:同种异体骨同其他异体组织一样具有抗原性,移植后可引起以细胞免疫为主的排斥反应,应用免疫抑制剂可抑制免疫排斥反应的发生,但对机体有一定的不良影响。目的:探讨胸腺内注射异基因抗原在建立特异性骨移植免疫耐受中的作用。方法:取60只Wistar大鼠随机分为3组,均制作骨缺损模型,供体异基因胸腺内注射组于同种异体骨移植前胸腺内注射受体大鼠脾细胞MHC抗原,同时另设自体骨移植组、同种异体骨移植加用免疫抑制剂组为对照,移植后观察切口情况。移植后1,2,4,6周进行X射线检查,苏木精-伊红染色,可溶性白细胞介素2受体、混合淋巴细胞培养免疫学检测。结果与结论:大体表现、X射线及组织学检查见供体异基因胸腺内注射组、自体骨移植组表现相近,均有炎性细胞浸润及新骨形成。同种异体骨移植加用免疫抑制剂组再生血管较少,骨愈合延迟,炎性细胞浸润明显,移植骨逐渐吸收,无新骨形成。证实了异基因MHC抗原注入小鼠胸腺内,能成功诱导受体对供体鼠骨移植物的耐受。免疫学检查各项数据表明供体异基因胸腺内注射的成骨效果接近于自体骨移植组,优于同种异体骨移植加用免疫抑制剂,证实了胸腺内注射异体MHC抗原可诱导对供体骨移植物的免疫耐受。

骨髓细胞胸腺内注射对大鼠小肠移植急性排斥反应的影响

目的了解异基因骨髓注射在大鼠小肠移植中的免疫耐受作用和意义。方法选用近交系大鼠F344/N和Wistar/A进行全小肠异位移植,试验组在行异基因移植前7d取供体骨髓细胞(BMC)行受体胸腺内注入,对照单纯同基因及异基因大鼠移植模型了解异基因供体骨髓在受体胸腺内注射能否减少移植后急性排斥反应的发生。结果异基因大鼠异位全小肠移植术后第3、5、7天可出现典型的轻、中、重度排斥反应,而同基因组和试验组未出现排斥反应。异基因移植组术后3d血清可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平明显高于其他组(P<0.01),且随排斥反应的加重,进一步增高。而异基因骨髓胸腺内注射组血清sIL-2R及TNF-α水平仅在第3、5天轻度升高,并呈下降趋势,与同基因移植组无显著性差异(P>0.05)。结论移植术前7d异基因供体骨髓在受体胸腺内注射能明显减少小肠移植后急性排斥反应的发生;血清sIL-2R和TNF-α检测有可能作为早期诊断小肠移植急性排斥反应的敏感免疫指标。

老龄小鼠胸腺内皮细胞的变化

目的研究老化引起胸腺萎缩和功能减低的相关机制。方法用组织化学和免疫荧光染色方法分析胸腺皮质和髓质结构;用BrdU标记流式细胞仪方法研究胸腺内皮细胞增殖;细胞凋亡测定用TUNNEL流式细胞仪方法。结果老龄小鼠胸腺内皮细胞增殖阳性率6.7%,对照年轻小鼠为9.2%。老龄小鼠胸腺内皮细胞凋亡率为11.3%,对照年轻小鼠为2.6%。老龄小鼠胸腺结构出现退行性改变。结论老化引起胸腺内皮细胞增殖能力下降、凋亡率增加和胸腺结构出现退行性改变,可能是老年胸腺萎缩免疫力降低的原因之一。

胸腺内注射异基因骨髓细胞诱导特异性免疫耐受的实验研究

目的:探索通过胸腺内注射异基因骨髓细胞加腹腔注射环磷酰胺,以小鼠皮肤移植为模型,诱导移植免疫耐受,为免疫耐受提供理论和实验依据。方法:提取供体B6小鼠(H-2b)骨髓细胞,注入受体BALB/C(H-2d)小鼠胸腺内,48h后腹腔注射200mg/kg的环磷酰胺,2周后移植供体小鼠(H-2b)和无关供体C3H(H-2k)小鼠皮肤。共设空白对照组、CP对照组、BM对照组、实验组、第三方供体组5个组。观察皮肤存活时间;皮肤移植2周后对受体小鼠作单向混合淋巴细胞反应(mixed lympho-cyte reaction,MLR)、脾细胞增值反应及迟发型超敏反应(delayed type hypersensitivity,DTH)耐受状态的检测。结果:受体小鼠获得了对供体小鼠的特异性皮肤移植耐受,实验组移植皮肤平均存活时间(MST)为(22.00±2.51)d,对照组MST为(8.75±1.04)d,耐受的受体小鼠对第三供体C3H小鼠的移植皮肤仍正常排斥,MST为(10.25±1.91)d。单向混合淋巴细胞反应和迟发型超敏反应证明耐受的BALB/C小鼠对B6小鼠的脾细胞的反应性特异性降低,而仍保持对第三方供体C3H小鼠的免疫反应。耐受的受体小鼠脾细胞对丝裂原(ConA)的增殖反应在正常范围。结论:使用胸腺内注射供体异基因骨髓细胞,结合腹腔应用环磷酰胺的方法,可在成年动物诱导出对供体移植物的特异性免疫耐受,无非特异性免疫抑制。小鼠皮肤移植模型是观察免疫耐受状态的可靠动物模型。

胸腺内注射异基因抗原诱导同种异体肢体移植免疫耐受的实验研究

目的:探讨胸腺内注射异基因抗原对同种异体肢体移植存活的影响。方法:Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体。将SD大鼠随机分成4组,A组(自体肢体移植组)、B组(异体肢体移植组)、C组(异体肢体移植加用免疫抑制剂组)、D组(胸腺内注射组)。术后观察肢体的存活时间,术后7d进行组织学检查。结果:肢体存活时间C组和D组比较,差异无统计学意义(P>0.05),与B组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。组织学检查,D组优于B、C组(P<0.05)。结论:胸腺内注射异基因抗原可诱导对异体肢体移植的特异性免疫耐受。

胸腺内注射同种异体抗原抑制坐骨神经移植排斥反应的免疫学研究

目的:探讨胸腺内注射同种异体MHC抗原对同种异体坐骨神经移植的效应。方法:以C57BL/6(H-2b)为供体,BALB/c(H-2d)为受体,将受体鼠分为4组:Ⅰ:自体移植组、Ⅱ:异体移植组、Ⅲ:异体移植加用免疫抑制剂组、Ⅳ:胸腺内注射组:坐骨神经移植前2周将供体MHC抗原提取物注射到受体鼠的胸腺内,移植后3周进行IL-2R、TNF-α、MLR、细胞凋亡等免疫学的检测。结果:胸腺内注射组小鼠的各项免疫指标与异体移植组相比具有统计学意义。结论:胸腺内注射同种异体抗原对抑制同种异体神经移植排斥反应具有一定作用。

胸腺内抗原注射抑制小鼠神经移植排斥反应

目的 探讨胸腺内注射异基因抗原在同种异基因神经移植免疫耐受中的作用。方法 自供体鼠C5 7BL/ 6(H - 2 b)的脾细胞中提取MHC(H - 2 b)抗原 ,注入受体鼠Balb/c(H - 2 b)胸腺内 ,两周后移植供体坐骨神经。共设 4组 :胸腺内注射组 (I组 )、自体移植组 (Ⅱ组 )、异体移植组 (Ⅲ组 )和异体移植加用免疫抑制剂组 (Ⅳ组 )。移植后 3周做单向混合淋巴细胞培养 (MLC) ,诱导迟发型超敏反应 (DTH)。结果 I组小鼠淋巴细胞对供体淋巴细胞刺激的反应性减弱 ,DTH反应性降低。结论 胸腺内注射异基因H一

胸腺内注射异基因抗原延长移植皮片存活期

目的 探讨胸腺内注射异基因抗原在延长移植皮片存活期中的作用。方法 经破碎、超速离心、透析等步骤自C5 7BL/ 6小鼠脾细胞提取MHC(H 2 )抗原 ,注射到Balb/c受体小鼠胸腺内 ,1周后移植供体C5 7BL/ 6皮肤。共设实验组、第三供体组、对照组、无处理组 4组。结果 实验组皮肤移植物存活时间大于 70天 ,第三供体组为(13 4± 1 42 )天 ,对照组为 (12 6± 1 6 9)天 ,无处理对照组为 (5 6± 1 2 6 )天。实验组与对照组相比有显著性意义 (P<0 0 1)。

胸腺内注射法诱导免疫耐受

胸腺内注射法诱导免疫耐受已被肯定。不同的诱导抗原（细胞性和可溶性）、不同移植模型（同种和异种）以及不同的动物模型（小动物和大动物）均能以此法诱导免疫耐受。以前认为在胸腺内注射抗原时需要短时加用抗淋巴细胞血清（ＡＬＳ）等免疫抑制剂，此观点最近受到挑战。作者认为耐受的诱导与注射的抗原剂量相关，而与抗原形式关系不大，对其临床应用可能性亦进行了探讨。

新生大鼠胸腺内接种同种和异种脾细胞对移植心脏存活的影响

目的 :诱导新生大鼠免疫耐受。方法 :将Wistar大鼠或豚鼠脾淋巴细胞通过胸腺途径分别注射给新生SD大鼠 ,8～ 10周龄时分别行同种Wistar大鼠或异种豚鼠供心移植 ,观察移植心存活的时间及病理学改变。结果 :胸腺内注射Wistar大鼠脾淋巴细胞者接受Wistar供心移植 ,供心存活时间显著延长 ,平均存活 >6 0 4d(P <0 0 0 1) ;而胸腺内接种豚鼠脾淋巴细胞者接受豚鼠供心移植 ,供心平均存活仅 9 8d(P >0 0 5 )。结论 :单一胸腺内接种同种脾细胞可以诱导新生大鼠的免疫耐受 。

胸腺内注射异基因脾细胞诱导移植心免疫耐受的实验研究

目的 通过大鼠同种异体心脏异位移植 ,探讨胸腺内注射异基因脾细胞对移植心的影响。方法 用供体脾细胞 (SC)在心脏移植前 2 1d预处理受体鼠 ,术后 1周每日腹腔注射环孢素A(CsA) 10mg/kg。检测移植心存活时间、混合淋巴细胞反应 (MLR)及细胞介导的细胞毒试验 (CML)。结果 胸腺注射脾细胞抗原联合短期应用CsA组的移植心平均存活时间较其他组显著延长 (P <0 .0 5 ) ,移植心耐受的受体鼠中MLR增殖活跃 ,产生免疫耐受的受体鼠的T细胞对供体鼠的靶细胞无明显的细胞毒作用。结论 胸腺内注射供体脾细胞抗原预处理受体同时联合短期应用CsA ,可诱导产生移植心脏的免疫耐受 ,且诱导移植耐受的抗原量以 2 .5× 10

胸腺内注射异基因骨髓细胞对大鼠异位心脏移植影响的研究

本文采用同种大鼠颈部异位心脏移植模型研究受体胸腺内注射异基因骨髓细胞对移植心脏存活时间的影响及免疫学功能变化。实验分 4组。对照组 (Control组 )、环磷酰胺组 (CP组 )、单纯胸腺内注射异基因骨髓细胞组 (IT组 )、胸腺内注射异基因骨髓细胞辅以短期环磷酰胺组(IT +CP组 )。结果显示 :移植心脏存活时间最长的是IT +CP组为 68 3± 13 4d ,CP组移植心脏存活时间为 18 3± 2 4d ,两组间移植心脏存活时间差异显著 (P <0 0 1) ,而二者分别与Control组比较差异显著 (P <0 0 1,P <0 0 5) ,Control组、IT组移植心脏存活时间较短 ,分别为 8 5±1 4d、 7 8± 1 2d ,受体接受实验处理因素 1个月后免疫功能测定表明 :各组大鼠脾细胞的淋巴细胞转化试验无明显差异 (P >0 0 5)。IT +CP组大鼠脾细胞对供体脾细胞的单向混合淋巴细胞培养有明显抑制作用 (P <0 0 1) ,对供体靶细胞的细胞介导的细胞毒试验呈明显抑制作用 (P<0 0 1) ,说明受体对供体产生特异性免疫无反应性 ,即免疫耐受。

胸腺内注射不同剂量的异基因抗原诱导大鼠同种异体神经移植的免疫耐受反应

目的探讨大鼠胸腺内注射不同剂量异基因抗原(MHC),诱导大鼠同种异体坐骨神经产生的特异性免疫耐受反应。方法雄性Wistar大鼠20只为供体,选用清洁级雄性SD大鼠50只为受体,受体随机分为5组,每组10只:A:新鲜自体神经移植组;B:新鲜异体神经移植组;C、D、E组分别为低、中、高剂量异基因抗原注射异体神经移植组,剂量分别为1.5 mg、3.0 mg、6.0 mg。术后2周进行运动神经传导速度、病理学、混合淋巴细胞培养(MLC)和血清sIL-2R检查。结果胸腺内抗原注射组动物肢体的生理功能、免疫学、组织学及透射电镜指标恢复,其中,E组动物各项指标恢复最明显,与A组指标类似。结论胸腺内注射异基因抗原可以诱导大鼠对异体坐骨神经移植的免疫耐受,在一定范围内,免疫耐受的程度与抗原量有关。

大鼠胸腺内促性腺激素释放激素-mRNA的表达

目的 对大鼠胸腺 Gn RH的存在及胸腺 Gn RH- m RNA的表达进行研究。 方法 采用免疫组织化学及原位杂交方法。 结果 大鼠胸腺内不仅有 Gn RH样物质 ,而且有 Gn RH- m RNA的表达。这种 Gn RH除了表达在胸腺上皮细胞以外 ,在皮质和髓质的部分淋巴细胞及巨噬细胞也有表达。 结论 Gn RH可能是一种在免疫系统和神经内分泌系统之间起双向直接联系作用的因子。

人胸腺内Ghrelin的免疫组织化学定位

目的:观察Ghrelin在人胸腺的定位与分布,为深入探讨胸腺内Ghrelin的功能意义提供实验依据。方法:采用特异性抗Ghrelin血清,用免疫组织化学ABC法观察人胸腺内Ghrelin的定位与分布。结果:Ghrelin免疫反应阳性细胞在胸腺内分布广泛。胸腺皮质浅层的Ghrelin阳性细胞呈巨噬细胞形态特点;而皮髓质交界区有大量上皮性网状细胞呈Ghrelin免疫反应阳性;胸腺髓质内Ghrelin阳性信号主要定位于树突状细胞和上皮性网状细胞;胸腺小体呈Ghrelin免疫反应强阳性。结论:胸腺内Ghrelin分布广泛,定位于胸腺巨噬细胞、上皮性网状细胞、树突状细胞和胸腺小体。Ghrelin可能参与胸腺细胞分化和成熟的调节。

异基因供体骨髓细胞胸腺内注射对肠移植大鼠的影响

目的:观察异基因骨髓注射在大鼠小肠移植中的免疫耐受作用。方法:实验于2006-09/2007-03在平凉市第二人民医院及兰州大学第二医院完成。①将大鼠分为空白对照组(Wistar)、同基因移植组(FK344/N)、异基因移植组(Wistar)、骨髓胸腺内注射组(Wistar),空白对照组18只,其余每组18只受体大鼠,供体为18只FK344/N大鼠。除空白对照组外,各组选用供受体大鼠进行全小肠异位移植,骨髓胸腺内注射组在行异基因小肠移植前7d取供体骨髓细胞行受体胸腺内注入,同基因移植组、异基因移植组大鼠不注射异基因骨髓细胞,只进行全小肠移植。②每组大鼠分别于术后3,5,7d观察排斥反应,于各时间点每次处死6只,检测血清可溶性白细胞介素2受体表达,并取出移植肠进行苏木精-伊红染色后观察组织学变化。结果:纳入受体大鼠54只及空白对照组大鼠18只均进入结果分析。①排斥反应:异基因移植组大鼠异位全小肠移植术后3,5,7d可出现典型的轻、中、重度排斥反应,而同基因组和骨髓胸腺内注射组中未出现排斥反应。②可溶性白细胞介素2受体水平:术后3d,同基因移植组、骨髓胸腺内注射组可溶性白细胞介素2受体表达水平高于空白对照组(P<0.01),而第5,7天与空白对照组差异不显著(P>0.05),异基因移植组受体大鼠各时间点血清可溶性白细胞介素2受体表达均高于同基因移植组(P<0.01)。结论:移植术前7d异基因供体骨髓在受体胸腺内注射能显著减少小肠移植后急性排斥反应的发生。血清可溶性白细胞介素2受体的检测可能作为小肠移植急性排斥反应的早期诊断敏感的免疫指标。

骨髓间充质干细胞移植后在胸腺内的定居

背景:骨髓间充质干细胞具有低免疫原性,并可诱导机体产生免疫耐受。目前对骨髓间充质干细胞发挥免疫调节作用的机制还不完全了解,对于骨髓间充质干细胞移植后能否迁移到免疫器官胸腺尚鲜有报道。目的:观察骨髓间充质干细胞移植后在衰老模型大鼠免疫器官胸腺组织内的存活情况。方法:以腺病毒介导绿色荧光蛋白基因体外转染骨髓间充质干细胞,通过大鼠尾静脉注射移植给衰老模型大鼠,于移植后第3,7,14,21天取材,荧光显微镜下观察骨髓间充质干细胞归巢到胸腺的存活情况。移植骨髓间充质干细胞第3天,取材胸腺组织,进行苏木精-伊红染色,观察移植细胞部位的组织病理变化。结果与结论:(1)骨髓间充质干细胞移植后第3,7天:绿色荧光蛋白荧光表达较强,细胞轮廓清晰,两者平均吸光度值比较,差异均无显著性意义(P>0.05)。(2)移植后第14,21天:绿色荧光蛋荧光表达较弱,与第3天平均吸光度值相比,差异有显著性意义(P<0.05)。(3)细胞移植后第3天:胸腺组织切片光镜显示无急性排斥反应特征出现。(4)结果表明骨髓间充质干细胞可通过血液循环迁移至受损胸腺组织,且至少能够存活1周。

成年小鼠胸腺内神经肽免疫组织化学研究

目的：探讨成年ＢＡＬＢ／ｃ鼠胸腺内血管活性肠肽（ＶＩＰ）、Ｐ物质（ＳＰ）、５羟色胺（５ＨＴ）、生长抑素（ＳＯＭ）以及神经肽Ｙ（ＮＰＹ）免疫反应性的分布及与Ｔ细胞发育的关系。方法：利用免疫组织化学方法在组织原位显示胸腺内的神经肽。结果：各神经肽的免疫反应性主要位于髓质，均可见到阳性神经纤维，并与胸腺细胞密切接触。除ＳＰ外，其它神经肽在皮、髓质交界区的血管平滑肌上均有表达。这些神经肽也都与肥大细胞密切相关。结论：ＶＩＰ、ＳＰ、５ＨＴ、ＳＯＭ及ＮＰＹ可能参与成熟Ｔ细胞的功能调节。ＶＩＰ、５ＨＴ、ＳＯＭ、ＮＰＹ可能有控制Ｔ细胞迁移的功能。