HBV相关原发性肝癌患者外周血T、NK、B细胞及胸腺功能特征

目的:观察乙型肝炎相关原发性肝癌患者(hepatitis B virus-related primary liver cancer,H B V-P L C)发生和进展过程中外周血T、N K、B细胞数量的变化,并初步探讨T淋巴细胞减少与胸腺功能的联系.方法:收集在首都医科大学附属北京地坛医院住院的73例HBV-PLC患者,50例乙型肝炎肝硬化患者(liver cirrhosis,LC),37例慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者.收集3组患者一般资料和临床生化指标.采用流式方法检测3组患者外周血中CD3^+T淋巴细胞、CD4^+T、CD8^+T、CD3-CD16^+CD56^+NK、CD3-CD19^+B的分布情况,并检测了T淋巴细胞表面CD31、CD45RA分子的表达水平.结果:与CHB和LC患者相比,HBV-PLC患者外周血中性粒细胞升高,淋巴细胞减少(P<0.001);与CHB患者相比,HBV-PLC患者外周血NK细胞计数减少(P=0.011),T淋巴细胞、CD4^+T、C D8^+T、B细胞计数减少,纯真CD4^+和CD8^+T细胞表面CD31表达降低(P<0.001).在肝癌Child、Okuda、BCLC分期中晚期比早期淋巴细胞计数、T、CD4^+T、CD8^+T计数均降低(P<0.05).结论:随着肝癌的发生和进展,HBV-PLC患者外周血抗肿瘤免疫细胞减少,这种减少与胸腺迁出功能降低有关.

胸腺功能及其测定方法的研究进展

胸腺是免疫系统的中枢控制器官,由于年龄相关的演化,其功能逐渐降低。本文从胸腺的发生、位置、结构、功能及其检测方法等几方面对其进行综述。

改善胸腺功能或是艾滋病治疗新思路

在经过长期正规＂鸡尾酒＂治疗的艾滋病患者中,为何仍有少数患者的病情得不到理想控制,免疫功能无法重建？北京协和医院李太生教授等历时5年多完成的一项研究显示,艾滋病患者的免疫功能能否重建,主要取决于CD4＋T淋巴细胞群中胸腺新生亚群的数量。

胸腺功能的发现及其对免疫学发展的影响

19世纪60年代初,免疫系统的发现使免疫学的发展方向发生了革命性转变。在这场转变的过程中,胸腺功能的发现起到了重要的作用。详述了胸腺功能的发现过程,并进一步深入到免疫学思想史,讨论了这个发现如何影响了免疫学的历史进程。

慢性不可预知温和应激通过抑制JAK2-PI3K通路影响乳腺癌小鼠胸腺功能的实验研究

[目的]研究慢性应激导致的抑郁/焦虑等情绪失调状态下,乳腺癌机体胸腺免疫功能异常的神经-免疫学机制。[方法]将30只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、慢性不可预知温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)-1组、CUMS-2组和CUMS-3组,每组6只。在小鼠乳腺脂肪垫接种4T1乳腺癌细胞,构建4T1乳腺癌模型,并采用不同程度CUMS刺激,分别构建不同程度CUMS乳腺癌小鼠模型。以旷场及强迫游泳实验观察行为活动;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测大脑组织5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)水平;免疫荧光法观察胸腺上皮细胞(thymus epithelial cells,TECs)细胞角蛋白5(cytokeratin 5,CK5)和CK8的表达;流式细胞术分析胸腺细胞亚群分化簇3(cluster of differentiation 3,CD3)、CD4和CD8的比例;T细胞受体重排删除环(T cell receptor rearrangement excision circles,TRECs)法检测胸腺输出功能;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)分析胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)、信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、白细胞介素-1α(interleukin-1α,IL-1α)、白细胞介素-7(interleukin-7,IL-7)、叉头样转录因子p3(forkhead transcription factor p3,Foxp3)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的mRNA表达水平;免疫印迹法检测胸腺TSLP、STAT3、Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)、磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)等相关蛋白表达水平。[结果]与正常组比较,模型组和CUMS各组胸腺结构紊乱,模型组胸腺组织TGF-β1、IL-5、IL-6、IL-10等mRNA水平显著增加,CD3+CD4-CD8-及CD3+CD4+CD8+T细胞比例显著降低,磷酸化信号转导和转录激活因子3(phospho-STAT3,p-STAT3)蛋白表达异常升高。与模型组比较,CUMS-3组小鼠大脑5-HT水平明显降低,肺转移率增高,胸腺输出功能明显抑制,髓质中TECs数量显著减少,IL-5等多个细胞因子mRNA水平显著降低,TSLP和IL-7 mRNA水平显著升高,胸腺组织磷酸化Janus激酶2(phospho-JAK2,p-JAK2)、磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶p55(phospho-PI3K p55,p-PI3K p55)降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。[结论]乳腺癌小鼠的胸腺功能紊乱,而CUMS可能通过抑制JAK2-PI3K通路,进一步抑制乳腺癌小鼠的胸腺功能,促进乳腺癌肺转移。

胸腺功能测定在评价艾滋病免疫功能重建中的应用概况及进展

上世纪90年代科学家关于艾滋病（Acquired Immune Deficieney Syndrome，AIDS）研究领域最重要的成就在于找到“鸡尾酒疗法”又称“高效抗逆转录病毒治疗方法（highly active anti-retroviral therapy，HAART）”和提出艾滋病人免疫功能重建理论，使降低艾滋病发生率、病死率成为可能。但随着研究的深入和治疗时间的延长，人们发现在保证良好依从性的前提下接受“鸡尾酒治疗”后，

强度化疗之后年龄、胸腺功能及CD4＋T淋巴细胞再生

强度化疗之后年龄、胸腺功能及ＣＤ４＋Ｔ淋巴细胞再生ＭａｃｋａｌＣＬ，ｅｔａｌ．ＮＥｎ┐ｇｌＪＭｅｄ．１９９５；３３２：１４３～１４９在化疗骨髓移植和ＨＩＣ感染患者中，ＣＤ４＋Ｔ淋巴细胞减低是一重要临床问题。但ＣＤ４＋Ｔ淋巴细胞再生机理尚很不清楚。骨髓...

苯中毒患者胸腺近期输出功能和T细胞亚群变化

目的 分析职业性慢性轻度苯中毒工人外周血单个核细胞中信号结合T细胞受体删除DNA环 (sjTRECs)的含量和CD4+/CD8+比值 ,从而了解其初始 (naive)T细胞含量和胸腺近期输功能 ,以及外周T细胞亚群分布情况。方法 利用间接免疫荧光法检测 11例健康人和 5例轻度苯中毒患者外周血单个核细胞中CD4+/CD8+比值 ;采用实时荧光定量聚合酶链反应 (real timePCR)和TaqMan方法检测两组外周血单个核细胞中sjTRECs的含量。结果 每 10 0 0个外周血单个核细胞中sjTRECs含量在正常人中为 9 10± 4 5 5 ,轻度苯中毒为 2 80± 3 79,P <0 0 5 ;轻度苯中毒者CD4+/CD8+的比值 (0 92± 0 3 5 )明显低于正常人 (1 49± 0 2 1) ,P <0 0 1。结论 轻度苯中毒患者胸腺近期输出功能低下 。

重度苯中毒患者胸腺输出近期功能明显低下

本研究目的在于分析重度苯中毒患者外周血单个核细胞中T细胞受体删除DNA环 (T cellreceptorexci sionDNAcircle ,TREC)的含量 ,从而了解其初始 (naive)T细胞的含量和胸腺近期输出功能。利用实时定量PCR和TaqMan方法检测 8例重度苯中毒患者和 16例正常人外周血单个核细胞 (PBMNC)中TREC的水平。结果显示正常人中TREC含量为 :6 .6 9± 4 .79 10 0 0PBMNC ;而重度苯中毒患者则为 1.0 3± 0 .4 4 10 0 0PBMNC ,显著低于正常人TREC水平 (P <0 .0 1) ,并持续苯中毒的全过程 ,即使在外周血血象基本恢复正常时 ,TREC水平仍处于较低状态。结论 :重度苯中毒患者胸腺近期输出功能明显低下 ,苯中毒明显损伤T细胞免疫功能。

胸腺输出功能的评价手段—T细胞受体重排删除环的定量分析

多年来 ,因缺乏合适的检测胸腺输出naiveT细胞的技术 ,未能明确胸腺输出功能。由于胸腺T细胞的分化始于T细胞受体 (TCR)基因的重排 ,在TCRα基因重排时 ,通过δRec和 ψJα基因片段重组形成染色体外DNA环而删除TCRδ基因 ,该删除环称为信号结合T细胞受体重排删除环 (sjTRECS)或TRECs。TRECs十分稳定 ,不扩增且随着细胞增殖而稀释 ,故近期研究认为对TRECs的定量检测可以直接地估计胸腺的输出功能。本文综述了TRECs定量分析在评价正常人和造血干细胞移植 ,血液肿瘤、HIV感染和自身免疫性疾病等等的胸腺输出功能中的作用。

B淋巴细胞肿瘤患者胸腺近期的输出功能

本研究了解B细胞肿瘤患者胸腺近期输出naiveT细胞的水平,以评价其T细胞免疫潜能。利用实时定量PCR(TaqMan)方法检测61例B细胞肿瘤患者(成人B-ALL20例,儿童B-ALL6例,B-CLL4例,B-NHL17例,MM14例)外周血单个核细胞(PBMNC)中T细胞受体重排删除DNA环(T-cell receptor rearrangement excision circles,TREC)的含量,并根据外周血中CD3阳性率计算CD3细胞中TREC水平。5例ALL-CR病人和17例正常人外周血作为对照。实验结果显示,正常人外周血中TREC拷贝数为3.76±3.42/1000PBMNC和5.87±4.96/1000CD3+细胞,而各B细胞肿瘤组的TREC水平均显著低于正常人水平,其TREC水平在成人B-ALL为0.53±1.52拷贝/1000PBMNC和2.01±3.93拷贝/1000CD3+细胞(p=0.0005和p=0.0123),在B-CLL为0.11±0.15拷贝/1000PBMNC,0.23±0.27拷贝/1000CD3+细胞(p=0.0015和p=0.0381),在B-NHL为0.71±1.34拷贝/1000PBMNC(p=0.0017),在MM为0.53±0.90拷贝/1000PBMNC(p=0.0018)。ALL-CR组TREC水平同样低于正常人水平,儿童B-ALL组TREC水平明显高于成人组。结论:各类B细胞肿瘤胸腺近期输出naiveT细胞功能均明显降低,个体差异较大,在病人达到完全缓解期时,胸腺近期输出功能仍没有得到恢复,提示对病人有动态观察的必要性。

实时定量PCR分析CML患者胸腺近期输出功能

目的 了解慢性粒细胞白血病 (CML)患者CD3+ 、CD4 + 和CD8+ 细胞中T细胞受体重排删除DNA环 (TRECs)的含量 ,从而推测CML患者的胸腺近期输出功能。方法 利用实时定量PCR(Taq Man)方法检测 8例CML患者外周血单个核细胞、3例CML患者CD4 + 和CD8+ 细胞中TRECs的水平。并根据外周血中CD3阳性率计算CD3+ 细胞中TRECs水平。 9例正常人外周血作为对照。结果 CML患者中TRECs含量为 0 .1± 0 .2 2 / 10 0 0T细胞 ,明显低于正常人TRECs水平 (6 .84± 4 .71/ 10 0 0T细胞 ,P <0 .0 1)。其中 5例患者外周血单个核细胞中未能检测到TRECs ,经分选CD4 + 和CD8+ 细胞后 ,2例可以检测到低水平的TRECs。结论 本研究首先报道了CML患者TRECs水平情况 。

接苯工人胸腺近期输出功能和外周血T细胞亚群变化

目的分析接苯工人外周血单个核细胞中T细胞受体删除DNA环(TRECs)和T淋巴细胞亚群的含量,了解接苯后工人胸腺近期输出功能和外周T淋巴细胞亚群变化,为接苯后机体细胞免疫改变提供资料。方法利用间接免疫荧光法检测健康人和接苯工人外周血单个核细胞中CD3+,CD4+,CD8+的含量;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real time PCR)和TaqMan方法检测标本外周血单个核细胞中TRECs的含量。结果在接苯工人外周血白细胞总数正常情况下,接苯组CD8+含量显著增加,CD4+/CD8+比值为(1.13±0.78),低于健康人(1.43±0.25)(P<0.05)。每1000个外周血单个核细胞中接苯组与对照组TRECs含量分别为(3.90±3.58)和(7.39±6.83),两者相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论长期低剂量接苯可能引起一些工人的胸腺近期输出功能低下,导致机体细胞免疫功能障碍。

自体造血干细胞移植后的胸腺近期输出功能

目的:了解血液病患者接受自体造血干细胞移植(auto-HSCT)后外周血中的T细胞受体重排删除环(TRECs)水平,从而了解其胸腺近期输出功能和T细胞免疫重建情况。方法:采用实时定量PCR法检测9例血液病患者经auto-HSCT治疗后外周血单个核细胞(PBMNCs)中的TRECs水平;22例正常人外周血样本作为对照。结果:PBMNCs中的TRECs水平有着较大的个体差异,年龄与PBMNCs中的TRECs水平呈负相关;auto-HSCT组的每1 000个PBMNCs中的TRECs平均拷贝数(2.533±4.194)明显低于正常组(4.367±3.626)(P<0.05),但部分病例的TRECs水平已基本达到正常水平。结论:在一定时间内,auto-HSCT后的胸腺近期输出功能仍较低,不同个体T细胞免疫重建时间存在差异。

中药玉米须对小鼠胸腺免疫功能的影响的实验研究

目的 :观察玉米须水煎剂及其粗多糖对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠胸腺指数及胸腺 DNA含量的影响。方法 :利用环磷酰胺注射小鼠造成免疫功能低下模型 ,采用称重法、二苯胺法观察小鼠胸腺指数、胸腺 DNA含量的变化。结果 :(1)环磷酰胺所致模型小鼠的胸腺指数 (P <0 .0 5 ) ,胸腺 DNA含量均下降 (P <0 .0 5 )。 (2 )中药玉米须水煎剂及其粗多糖均能提高免低小鼠的胸腺指数 (P <0 .0 5 )及胸腺 DNA含量 (P <0 .0 5 )。结论 :(1)中药玉米须水煎剂及其粗多糖均能提高免低小鼠的胸腺指数及胸腺 DNA含量。(2 )中药玉米须水煎剂及其粗多糖对免低小鼠的胸腺指数及胸腺

造血干细胞移植患者动态监测胸腺输出功能的意义

目的观察造血干细胞移植患者胸腺近期输出功能的动态变化情况,分析其相关影响因素,从而了解移植后T细胞免疫重建情况。方法选择2007年1月~2012年6月于北京大学深圳医院接受造血干细胞移植的血液病患者41例,采用实时荧光定量PCR方法检测患者不同时期200μL外周血中T细胞受体重排DNA删除环（sjTREC）水平,计算每毫升血液中sjTREC拷贝数。同时检测32例年龄匹配的正常者外周血T细胞受体重排DNA删除环含量作为正常对照。比较患者造血干细胞移植后sjTREC随时间变化情况。结果 32例正常对照组外周血Log sjTREC/mL为3.78±0.22,它与年龄呈负相关（r=-0.59,P〈0.05）。41例移植患者移植前外周血sjTREC水平显著低于正常对照组,移植后外周血sjTREC进一步下降,移植6个月后TRECs逐渐升高,移植后1.5年基本恢复至移植前水平,移植后2.5年恢复至接近正常水平。反复化疗可使患者胸腺输出功能下降。不同年龄组患者移植后胸腺输出功能恢复差异无统计学意义（P〉0.05）。移植6个月后,自体造血干细胞移植组患者外周血sjTREC水平恢复快于异基因移植组（P〈0.05）,至移植后2年二者差异无统计学意义（P〉0.05）。移植1年后存在广泛型cGVHD的患者其外周血sjTREC水平下降,低于无cGVHD者（P〈0.05）。结论造血干细胞移植后T细胞免疫重建缓慢,并受多种因素影响。胸腺输出功能可作为评价移植后免疫重建的有效指标。

抗-HBs、抗-HBe和抗-HBc阳性人群的胸腺近期输出功能初步探讨

目的观察抗-HBs、抗-HBe和抗-HBc阳性人群外周血单个核细胞(PBMCs)中T细胞受体重排删除环(TRECs)的含量,从而推测其胸腺近期输出功能。方法利用实时荧光定量PCR方法检测30例抗-HBs、抗-HBe和抗-HBc阳性人群及22例正常人PBMCs中TRECs含量。结果抗-HBs、抗-HBe和抗-HBc阳性人群中TRECs含量为(5.67±1.55)cop ies/103PBMCs,与正常人TRECs水平(6.11±2.11)cop ies/103PB-MCs无差异(P>0.05)。结论抗-HBs、抗-HBe和抗-HBc阳性人群TRECs水平情况显示其胸腺近期输出功能与正常人比较无差异。

胸腺近期输出功能测定在评价细胞免疫功能重建中的应用

T细胞受体重排删除环 (TRECs )是T细胞受体基因重排过程中删除的DNA环 ,可作为胸腺近期输出功能的指标 ,本文综述其在造血干细胞移植、HIV - 1感染和AIDS患者抗逆转录病毒治疗。

慢性粒细胞白血病患者胸腺输出功能与bcr-abl mRNA水平的关系

本研究了解慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)患者体内T细胞受体重排删除环(Tcell receptor rearrangement excision circles,TREC)的含量与bcr-abl mRNA水平的关系,进而明确CML患者的胸腺近期输出功能测定对疾病预后判断的意义。实时定量PCR检测15例CML-CP患者外周血TREC含量及bcr-abl融合基因转录本的水平,并追踪检测6例患者bcr-abl水平的变化。结果发现:在CML初发时患者外周血TREC含量与bcr-abl融合基因水平无明显的相关性;随访2年后,TREC含量高的患者bcr-abl水平下降幅度更大,而在接受造血干细胞移植的2例患者中,移植前TREC含量相对较高者,移植1年后连续3次均检测不到bcr-abl,另1例则检测到低水平的bcr-abl。结论:CML患者胸腺输出功能较高者,可能对机体抵抗残留CML细胞有一定的帮助。