胸腺嘧啶-BH_3构型与性质的DFT和MP2研究

对胸腺嘧啶 BH3复合物分别用B3LYP/6 31G(d)和MP2/6 31G(d)进行计算,以预测该复合物的构型 及结合能,得到了5种构型,并进行了振动分析和自然键轨道分析.对各构型进行了更大基组(6 311+G(2df)和 aug cc pVDZ)的单点能量计算.结果表明,B原子与O原子直接相连的构型(a)、(b)比较稳定,其结合能为90.4 和88.0kJ/mol(B3LYP/6 31G(d),BSSE校正).N原子向B原子的空轨道提供电子形成构型(c)和(d),只找到 了一种由C原子向B原子提供π电子的构型(e).所有构型中均存在电荷授受,各构型的结合能与电荷转移量有 良好的相关性.复合物的形成,使其红外光谱均有不同程度的红移,红移幅度与复合物的稳定性相关.

商陆总皂甙对肝脾组织~3H-胸腺嘧啶核苷参人的影响

商陆总皂甙可能是一种激活核苷酸还原酶的生物活性物质,拮抗了羟基脲在二磷酸化水平对核苷酸还原反应的抑制作用,能显著提高,~3H-TdR参入率,延长动物的耐冻时间。表明商陆总皂甙是一种具有扶正固本作用的有效成分。

高比活度〔甲基-~3H〕-胸腺嘧啶核苷的制备

以 (5 - F3 ) -胸腺嘧啶核苷 (Td R)为前体 ,采用 Pd O/ Ba SO4 为催化剂 ,在 2 .5 mo L/ L KOH水溶液中进行催化卤氚取代反应。获得的标记物比活度为 9.1TBq/ g,与目前所用方法制备的标记物比活度 3TBq/ g相比提高 2倍。标记物放化纯度 >95 % ,示踪灵敏度可提高 70

3H—胸腺嘧啶核苷参入法测定甲亢病人T淋巴细胞功能及其临床意义的初步探讨

本文测定了正常人和四组甲亢病人(n=117)外周血T淋巴细胞(T 细胞)和血清中T_3T_4含量,结果显示:1、四组甲亢病人T淋巴细胞明显低于健康人;2、经抗甲状腺药物治疗后病情缓解、T_3T_4正常、T 细胞功能逐渐恢复;

堆积的胸腺嘧啶体系光物理失活的动力学模拟

采用半经典动力学方法模拟了π堆积的胸腺嘧啶体系最低激发态的光物理失活过程.设置激光脉冲仅作用于一个胸腺嘧啶分子T,另一胸腺嘧啶分子T'保持基态.模拟发现由于T与T'之间存在π堆积相互作用,导致电荷转移,形成T带负电荷、T'带正电符的激基复合物.由于相邻分子的空间效应阻碍了激发的T分子到达圆锥相交所必需的强烈扭曲,激基复合物的寿命比单体增长.当分子间距离缩短至0.3 nm后,T分子C_5—C_6键扭曲程度最大,此时发生电荷重组,两个胸腺嘧啶分子均恢复电中性.电荷重组诱导T'分子发生畸变,并在C_5'—C_6'扭曲最大时避免相交,体系衰减至基态,T和T'分子均恢复平面构型.

齐多夫定杂质3′-氯-3′-脱氧胸腺嘧啶的合成

目的:合成齐多夫定的一个特定杂质(3′-氯-3′-脱氧胸腺嘧啶)以加强该药的质量控制。方法:以β-胸苷为原料,经关环形成2,3′-脱水胸苷,再用吡啶盐酸盐开环在3′位氯化,最后脱去三苯甲基保护基得到3′-氯-3′-脱氧胸腺嘧啶即齐多夫定杂质B。结果:合成齐多夫定杂质B可作为齐多夫定质量控制的杂质对照品。该合成方法反应条件温和,原料易得,操作简单。

胸腺嘧啶二醇脱氧核苷单分子糖苷键断裂的理论研究

采用理论计算方法对c is-(5S,6R)胸腺嘧啶二醇脱氧核苷(dTg)单分子糖苷键断裂的热力学和动力学性质进行了研究.在气相中,所有稳定点的几何构型都采用B3LYP/6-31+G(d,p)方法进行全优化,并利用导电极化连续模型对气相优化构型进行单点计算确定水的溶剂效应,作者主要考虑了直接断裂和抽氢断裂两条路径.计算结果表明:两条反应机理均涉及较高的活化能,从而说明单分子分解并不能促进糖苷键的断裂,该研究为生物体内这一重要反应提供了更多有用的信息.

立体构型对5-羟基-6-氢过氧基-5,6-二氢胸腺嘧啶脱氧核苷热分解速率的影响

采用B3LYP/6-31 1++G(2d,p)方法对5-羟基-6-氢过氧基-5,6-二氢胸腺嘧啶脱氧核苷(5-OH-6-OOH-DHT)的trans-(5R,6R)、trans-(5S,6S)和cis-(5S,6R)三种构型的热分解机理进行了理论研究.同时利用CPCM模型对气相中的优化构型进行单点计算以确定水的溶剂效应.结果表明:与6R对的顺、反构型(5S,6R,5R,6R)相比,6S对的顺、反构型(5R,6S,5S,6S)均表现出相对较高的分解速率;此外,不论是6S对,还是6R对,它们的顺、反构型的反应速率十分接近.常温下这四种空间异构体在水溶液中分解速率的顺序为:cis-(5R,6S)>trans-(5S,6S)>trans-(5R,6R)>cis-(5S,6R).

胸腺嘧啶单体及环丁烷型胸腺嘧啶二聚体的表面增强拉曼散射

采用DFT-B3LYP方法,6-311G(d,p)(C,H,O原子)和lanl2dz(Ag原子)基组计算了胸腺嘧啶单体(Th)和DNA光损伤产物—环丁烷型胸腺嘧啶二聚体(Th_2)吸附在Ag纳米粒子上形成复合物的结构和表面增强拉曼散射(SERS).结果显示,Ag纳米粒子在胸腺嘧啶单体(Th)和环丁烷型胸腺嘧啶二聚体中最有利的吸附位点是O_7位,相比于单个分子,复合物Th-Ag,Th_2-Ag的结构和光谱发生了变化.对胸腺嘧啶单体分子,其SERS的增强因子为10,主要由N-H伸缩振动引起;复合物Th_2-Ag中,SERS增强了大约18倍,主要由C_2=O的伸缩振动引起,此增强机理属于极化率变化产生的静化学增强.

3-取代雌二醇-嘧啶类衍生物的合成与抗肿瘤活性

以雌二醇为原料，在K2CO3碱性条件下，与二溴烷烃反应生成醚类化合物，继而与尿嘧啶或胸腺嘧啶反应，共合成16个新型3-取代雌二醇-嘧啶类衍生物（化合物5~20），并采用MTT法对其进行抗肿瘤活性测试。结果表明，这些化合物对人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231、人卵巢癌SKOV-3、人肺癌NCI-H460和人胃癌MGC-803细胞株表现出不同程度的抑制活性。其中，连接链长为2的尿嘧啶单接产物5和双接产物6、连接链长为8的尿嘧啶单接产物17、连接链长为2和6的胸腺嘧啶双接产物8和16对MCF-7具有良好的增殖抑制活性；化合物5和6对MDA-MB-231细胞株具有较好的增殖抑制活性；化合物17同时对SKOV-3细胞株也呈现优良的增殖抑制活性。连接链长为6的尿嘧啶单接产物13对MGC-803细胞株的增殖抑制率最高。总之，3-取代的雌二醇-嘧啶类衍生物对MCF-7细胞株的增殖抑制活性要优于其他受试肿瘤细胞株。3-取代雌二醇-尿嘧啶衍生物比3-取代雌二醇-胸腺嘧啶衍生物具有更好的抗肿瘤细胞增殖活性。

系统性红斑狼疮患者腺嘌呤-胸腺嘧啶碱基富含互作域3a^+B细胞的变化及临床意义

目的探讨转录因子——腺嘌呤-胸腺嘧啶碱基富含互作域3a(ARID3a)在SLE患者外周血B细胞中的表达及临床意义。方法流式细胞术检测17例SLE患者、13名健康对照外周血中ARID3a+B细胞的比例,结果采用独立样本t检验比较,并采用Pearson相关性分析法分析ARID3a+B细胞的比例与临床指标的相关性;选取14例LN患者肾脏穿刺蜡块,采用免疫组织化学方法检测肾脏ARID3a的表达量。结果SLE患者外周血ARID3a+B细胞比例[(51.6±3.2)%]显著高于健康对照[(32.6±3.4)%](t=4.0,P<0.01);ARID3a+B细胞比例与尿蛋白定量(24 h)(r=0.68,P<0.05)呈正相关;活动性LN患者外周血ARID3a+B细胞比例[(62.3±4.3)%]显著高于非活动性LN和无肾脏损害SLE患者[(43.3±2.8)%](t=3.8,P<0.01);LN患者肾小球及肾小管细胞ARID3a的表达量显著升高。结论B细胞过度表达转录因子ARID3a可能参与SLE患者LN的发病,可作为预测狼疮疾病发展的新指标。

槲皮素及异鼠李素对去甲肾上腺素促人血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的观察槲皮素、异鼠李素和去甲肾上腺素对培养人血管平滑肌细胞增殖的影响.方法利用培养的人主动脉平滑肌细胞,采用细胞计数和3H-胸腺嘧啶掺入法,观察槲皮素、异鼠李素和去甲肾上腺素对血管平滑肌细胞增殖、DNA合成的影响,以及槲皮素、异鼠李素和酚妥拉明对去甲肾上腺素促血管平滑肌细胞增殖、DNA合成的影响.结果槲皮素有明显抑制血管平滑肌细胞增殖和DNA合成的作用,而异鼠李素作用较弱.在所观察1～200 μmol/L的浓度范围内,槲皮素和异鼠李素均在200 μmol/L浓度发挥了最大的抑制作用,其抑制作用有剂量依赖关系.去甲肾上腺素有促进血管平滑肌细胞增殖、DNA合成的作用, 而这些促进作用能被酚妥拉明所阻滞.槲皮素和异鼠李素均呈剂量依赖性抑制去甲肾上腺素促血管平滑肌细胞增殖和DNA合成的作用, 且槲皮素和异鼠李素有明显的协同作用.槲皮素和异鼠李素对去甲肾上腺素刺激作用的抑制明显强于酚妥拉明. 槲皮素和异鼠李素对血管平滑肌细胞无细胞毒性作用.结论槲皮素和异鼠李素是细胞毒性低的天然黄酮类物质,对血管平滑肌细胞增殖、DNA合成尤其是对去甲肾上腺素刺激的血管平滑肌细胞增殖、DNA合成有较强的抑制作用.

一种新的腺苷酸人工受体

本文报道由刚性双环胍桥联胸腺嘧啶碱基和亲脂性(特丁基二苯基)硅醚基的腺苷酸受体的合成.液液萃取和 1H NMR实验表明该受体能通过互补氢键和静电引力与腺苷酸钠盐,尤其是与3′-腺苷酸二钠盐互相识别形成脂溶性的超分子配合物,因而能把水溶性的腺苷酸盐从水相转移到有机相.

水环境中溴化1-烷基-3-甲基咪唑类离子液体与胸腺嘧啶相互作用体系的计算研究

溴化咪唑类离子液体的生物小分子作用机制亟待探索.本文采用M06-2X/6-311++G(2d, p)/PCM/water理论方法计算了研究胸腺嘧啶(T)与溴化1-烷基-3-甲基咪唑类离子液体([Cnmim]Br,n=2、 4、 6、 8、 10)相互作用形成的T-[Cnmim]+、T-Br-、 T-[Cnmim]Br和T-2[Cnmim]Br体系的结构和能量学特征.结果表明T与阴阳离子间形成典型构型的稳定顺序是:共面<垂直<堆积(T-[Cnmim]+), top <front (T-Br-), T-[Cnmim]+<T-Br-<T-[Cnmim]Br <T-2[Cnmim]Br. T与Br-之间的氢键作用与咪唑阳离子伴随弱氢键的堆积环境更有利,阳离子烷基链长影响不明显.在堆积构型中胸腺嘧啶与咪唑阳离子以π-π+色散吸引为主,并伴随C-H…O和C-H…π弱氢键作用,部分碱基电子转移至阳离子(π→π+),其NBO分析显示稳定化能主要来自π→π+*(∑Eπ→π+*2)轨道作用的贡献;T与Br-之间以静电吸引为主,溴离子向胸腺嘧啶转移电子,稳定化能源于lpBr→σ*N-H.

膀胱尿路上皮癌组织CD44V6、GATA-3的表达变化及与肿瘤病理分级的关系

目的观察膀胱尿路上皮癌组织CD44变异体6(CD44V6)、鸟嘌呤腺嘌呤胸腺嘧啶腺嘌呤序列结合蛋白3(GATA-3)的表达变化,探讨其与膀胱尿路上皮癌病理分级的关系。方法采用免疫组化Envision法检测120例膀胱尿路上皮癌组织、60例尿路上皮增生组织CD44V6、GATA-3蛋白的表达,分析不同病理分级膀胱尿路上皮癌组织中二者阳性表达的差异。结果膀胱尿路上皮癌组织、尿路上皮增生组织中CD44V6蛋白阳性表达率分别为49%(59/120)、13%(8/60),GATA-3蛋白阳性表达率分别为95%(114/120)、62%(37/60),二者CD44V6、GATA-3蛋白阳性表达率比较差异有统计学意义(P均<0.05)。不同病理分级膀胱尿路上皮癌组织中CD44V6、GATA-3蛋白阳性表达率比较差异有统计学意义(P均<0.05)。结论膀胱尿路上皮癌组织CD44V6、GATA-3蛋白阳性表达率升高,且肿瘤病理分级越高二者阳性表达率越高。

不同时间深低温保存对胸骨组织活性的影响

目的观察不同时间深低温保存对胸骨组织活力的影响。方法切取SD大鼠胸骨后立即放入含有低钾右旋糖酐（LPD）冻存液的冻存管,在程序降温仪降至-80℃后投入液氮,分别保存1、15、30、60、120 d后对胸骨组织进行体外培养,加入3H-胸腺嘧啶核苷（TdR）以做标记,使用β液体闪烁计数器检测组织细胞吸收情况和培养上清中的碱性磷酸酶（ALP）活性。结果与冷冻前比较,低温保存1 d后胸骨组织培养上清中ALP活性开始降低,15 d降至最低,以后基本保持稳定。低温保存1 d后,3H-TdR掺入率降至90.02%。冷冻15 d以后3H-TdR掺入率降至73.9%,以后无明显变化。结论深低温保存后胸骨组织保留70%~80%的活力,损伤主要发生在冷冻早期,ALP活性检测和3H-TdR体外组织培养是测定胸骨组织活力的有效方法。

^(3)H─TdR体内滞留诱发生殖毒性研究

研究了摄入氚标记胸腺嘧啶核苷（^(３)Ｈ－ＴｄＲ）在机体滞留过程诱发的生殖毒性效应。拟合了^(３)Ｈ－ＴｄＲ在睾丸、肝、脾、肾、股骨和血活中的滞留方程通式为：Ｒ（ｔ）＝Ａｅ－λａｔ＋Ｂｅ－λβｔ。比较了在不同组织的快组份和慢组份的有效半减期，估算了在不同脏器部位的累积吸收剂量。^(３)Ｈ－ＴｄＲ可诱发雄性生殖细胞的生殖毒性，表现为显性致死突变和显性骨骼畸形。关于显性致死突变与摄入了^(３)Ｈ－ＴｄＲ放射性活度之间呈正相关。Ｙ＝８０ . ２０Ｉ＋７４．１３；而显性骨骼畸形享与摄入^(３)Ｈ－ＴｄＲ放射性活度间的关系式为：Ｂ＝０．０７９１＋０．１６。

顺-[Pt(NH3)2Cl2]与核苷的作用

用分光光度法研究了37℃、pH=5.5、0.1M NaClO4介质中cis[Pt(NH_(3))_(2)Cl_(2)]和DNA组成物——鸟嘌呤核苷、腺嘌呤核苷、胞嘧啶核苷及胸腺嘧啶核苷的作用。发现顺-[PtⅡ(NH_(3))_(2)]与前三种核苷能生成组成为1:1、1:2二种络合物,与胸腺嘧啶核苷不作用。所测得一级和二级表观生成常数,以及作用初速分别有如下大小次序:Guo>Ado>Cyt>>Thy;Guo>Ado>Cyt>>Thy.在所得结果基础上讨论了顺-[Pt(NH_(3))_(2)Cl_(2)]和癌细胞中DNA作用的可能方式。

陕西省部分人群中β_3肾上素能受体基因多态性调查

目的 人体 β3 肾上素能受体 (β3 AR)基因具有多态性 ,其胞嘧啶与胸腺嘧啶的突变导致 β3 AR6 4位色氨酸被精氨酸置换 (Trp 6 4Arg)。本文调查了陕西省部分人群 β3 AR基因的变异情况。方法 采取PCR -RFLP方法检测β3 肾上素能受体基因TC突变。结果 98名大学生中 ,纯合突变型基因的频率为 4 0 8% ,杂合突变型基因的频率为 2 0 4 1% ,野生型基因的频率为 75 5 1% ,T等位基因的频率为 85 71% ,C等位基因的频率为 14 2 9%。结论 我国也存在 β3 AR基因的变异。

微量全血^3H—TdR掺入试验对滋养细胞肿瘤治疗的指示意义

长期以来,临床工作者就注意到滋养细胞肿瘤病人的预后与其细胞免疫功能有关。利用微量全血氚—胸腺嘧啶核苷(~3H-thymidine deoxyriboside简称~3H-Tdr)掺入试验,测定T淋巴细胞功能,目前仍认为是比较客观、重复性强的试验。它是将胸腺嘧啶核苷进行氚标记,使~3H-TdR在T淋巴细胞受抗原刺激后DNA增殖时掺入DNA,掺入到DNA中~3H-TdR的量就代表了T淋巴细胞的功能,其掺入量以放射性同位素的脉冲数(cpm)来表示。本文是以微量全血进行体外~3H-TdR掺入试验,对治疗过程中的恶性葡萄胎(恶葡)、绒毛膜上皮癌(绒癌)进行动态观察,了解其变化规律,探索本试验对其治疗的指导意义。 对象和方法 一、对象:妊娠滋养细胞肿瘤病人32例(恶葡20例、绒癌12例)。其诊断以病理诊断为准,未取得标本者按宋鸿钊的临床诊断标准诊断。每例病人均在治疗前、化疗疗程结束后二周、治愈后抽静脉血试验。并以正常育龄女性25名作为正常对照。 二、方法:微量全血培养,在植物血凝素(PHA)刺激下测定T淋巴细胞的反应能力。方法如下。 (一)1.7ml RPMI1640培养液,加入0.1ml(50μg)PHA,混合后放入平底试管内,再加入抗凝全血0.1ml。置37℃培养箱内培养50小时后,加入~3H-TdR 0.1ml(比活5Ci/mM。