新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞及胸腺淋巴细胞超微结构作用的实验研究

目的 :观察新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠治疗作用及对滑膜细胞、胸腺淋巴细胞超微结构的作用。方法 :将 6 0只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、新风胶囊组和雷公藤组 ,每组 15只 ,制备完全佐剂并分别向除正常对照组以外的其余动物右后足跖皮内注射 0 .1m l致炎。电镜观察滑膜细胞、胸腺淋巴细胞超微结构变化 (包括线粒体肿胀、空泡变、嵴突病变等 ) ,并计算各组滑膜细胞和胸腺淋巴细胞线粒体的病变率。结果 :新风胶囊组及雷公藤组治疗后鼠右后足跖肿胀度显著低于治疗前 (P均 <0 .0 5 ) ,与模型组相比 ,新风胶囊组和雷公藤组治疗后关节滑膜细胞线粒体的病变率均显著降低 (P均 <0 .0 5 ) ;新风胶囊组胸腺淋巴细胞线粒体病变率显著降低 (P<0 .0 5 ) ,而雷公藤组胸腺细胞线粒体病变率无显著差异 (P>0 .0 5 )。治疗后新风胶囊组滑膜细胞及胸腺淋巴细胞线粒体病变率均显著低于雷公藤组 (P均 <0 .0 5 )。结论 :新风胶囊与雷公藤一样能降低佐剂性关节炎大鼠病变关节的肿胀度 ,新风胶囊改善佐剂性关节炎滑膜病变和对胸腺的保护作用优于雷公藤 ,这可能是其治疗作用的形态学基础。

六味地黄汤及其拆方对正常小鼠和SAMP8胸腺淋巴细胞分化相关基因表达的影响

目的:研究六味地黄汤及其"三补(SB)"、"三泻(SX)"拆方对正常小鼠和快速老化模型小鼠(SAMP8)胸腺淋巴细胞分化相关的Notch信号转导通路基因表达的影响。方法:以荧光实时定量PCR方法检测Notch1、PS1、PS2、HES1等基因表达的变化。结果:口服LW(5、10、20g/kg)可明显促进正常小鼠胸腺细胞PS2、HES1基因的表达;口服LW(10g/kg)及其SB、SX拆方,可不同程度地降低SAMP8的PS2、HES1基因表达水平。结论:LW可增强正常的小鼠胸腺细胞Notch信号强度;对免疫老化的SAMP8,LW能够降低胸腺细胞Notch信号强度。

黄芪注射液对诱发性小鼠胸腺萎缩的干预作用及对胸腺淋巴细胞凋亡相关基因Bcl-2的影响

目的:观察黄芪注射液(AI)对小鼠胸腺萎缩的干预作用。方法:将昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、IL-2组、黄芪注射液高(2 g/kg)、中(1 g/kg)、低(0.5 g/kg)剂量组,除正常对照组外,均采用地塞米松(25 mg/kg)腹腔注射复制小鼠胸腺淋巴细胞凋亡模型。观察黄芪注射液对小鼠胸腺指数的影响及胸腺的形态学改变,TUNEL及胸腺琼脂糖凝胶电泳测胸腺淋巴细胞凋亡,采用免疫组织化学与医学图像分析系统结合的方法检测小鼠胸腺淋巴细胞相关凋亡基因Bc l-2的表达。结果:黄芪注射液能明显改善萎缩的胸腺,增加胸腺指数(P<0.05);黄芪各剂量组小鼠胸腺皮质细胞明显增多,胸腺淋巴细胞凋亡数目及阳性细胞百分比与模型组比较显著减少(P<0.05或P<0.01),DNA琼脂糖凝胶电泳与模型组相比有显著变化,DNA的梯状图谱显色变浅甚至消失,同时还发现黄芪注射液能提高Bc l-2的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:黄芪注射液有明显的抗胸腺萎缩及抑制胸腺淋巴细胞凋亡的作用,其作用机制可能与上调Bc l-2基因表达相关。

新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞及胸腺淋巴细胞超微结构作用的实验研究

目的:观察新风胶囊对佐制性关节炎大鼠治疗作用及对滑膜细胞、胸腺淋巴细胞超微结构的作用。方法:将60只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、新风胶囊组和雷公藤组,每组15只,制备完全佐剂并分别向除正常对照组以外其余动物右后足跖皮内注射0.1ml致炎。电镜观察滑膜细胞、胸腺淋巴细胞超微结构变化(包括线粒体肿胀、空泡变、嵴突病变等),计算各组线粒体病变率。结果:新风胶囊组及雷公藤组治疗后右后足跖肿胀度显著低于治疗前(P<0.05),与模型组相比,新风胶囊组和雷公藤组治疗后关节滑膜细胞线粒体的病变率显著降低(P<0.05);新风胶囊组胸腺淋巴细胞线粒体病变率显著降低(P<0.05),而雷公藤组胸腺细胞线粒体病变率无显著差异(P>0.05)。治疗后新风胶囊组滑膜细胞及胸腺淋巴细胞线粒体病变率显著低于雷公藤组(P<0.05)。结论:新风胶囊与雷公藤一样能降低佐剂性关节炎大鼠病变关节的肿胀度,新风胶囊改善佐剂性关节炎滑膜病变和对胸腺的保护作用优于雷公藤,这可能是其治疗作用的形态学基础。

人胎儿胸腺淋巴细胞的免疫表型分析

用免疫组织化学ABC法观察了14例人胎胸腺中六种T细胞和B细胞表面抗原的表达.结果表明,CD4阳性和CD8阳性的细胞主要见于皮质深层,髓质中较少.CD3阳性细胞多分布在髓质,皮质深层有少量阳性细胞.CDla阳性细胞见于皮质.CD25阳性细胞多分布于髓质.该阳性细胞在胎儿胸腺中的分布反映了T细胞的分化.B细胞表面抗原阳性细胞主要分布在髓质,皮质中很少,在髓质及被膜下亦见少数较大并有突起的阳性细胞.后者可能为B细胞的一种亚型或一种基质细胞.

γ射线对小鼠胸腺淋巴细胞微丝形态及丝切蛋白磷酸化的影响

目的:通过观察γ射线诱导小鼠胸腺淋巴细胞的微丝形态变化和对丝切蛋白(cofilin)磷酸化的影响,探讨cofilin及相关蛋白在辐射损伤中的作用。方法:将36只BALB/c小鼠按对照组(0 h),照射后3、6、9、12和24 h时间点随机分为6组,每组6只,除对照组外,其余各组均给予2 Gyγ射线诱导,根据cofilin蛋白表达规律,确定取材时间。另将24只BALB/c小鼠按γ射线诱导剂量随机分为未照射(0 Gy)组、2、6和10 Gy组共4组,照射3 h后取材,观察淋巴细胞微丝形态,进行cofilin蛋白1(cofilin 1)、磷酸化cofilin蛋白(p-cofilin)、LIM激酶1(LIMK1)、TES激酶2(TESK2)和Slingshot家族的磷酸酶2(SSH2)表达检测。结果:BALB/c小鼠在2 Gyγ射线照射3h后胸腺淋巴细胞cofilin基因的mRNA和蛋白表达均显著下调(P<0.05),因此后续实验选择照后3 h为取材时间。通过对cofilin及相关蛋白表达的检测,发现随着γ射线照射剂量的增加,胸腺淋巴细胞cofilin的表达逐渐增加,与对照组相比,以10 Gy组增加最为明显(P<0.05);而p-cofilin的表达则减少,10 Gy组减少最为明显(P<0.05)。LIMK1、TESK2和SSH2的表达在照射后无显著变化(P>0.05)。结论:随着照射剂量的增加,更多的SSH2使p-cofilin的Ser3位点去磷酸化,胞质内cofilin的量增多,参与到微丝骨架组装的过程中,细胞的迁移能力增强。

盐藻β-胡萝卜素对^(60)Co辐射引起小鼠胸腺淋巴细胞凋亡的影响

目的探讨盐藻β-胡萝卜素(p-C)对^(60)Co辐射引起小鼠胸腺淋巴细胞凋亡的影响。方法建立^(60)Co辐射(强度为3Gy)体外培养的小鼠胸腺淋巴细胞损伤病理模型。透射电镜观察盐藻β-C对^(60)Co辐射引起小鼠胸腺淋巴细胞超微结构变化;MTT法测定小鼠胸腺淋巴细胞的活性;Brdu法测定盐藻β-C对小鼠胸腺淋巴细胞增殖状态的影响;琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡情况;Western blot测定p38及磷酸化p38蛋白的表达。结果盐藻β-C能减轻^(60)Co辐射所致的胸腺淋巴细胞凋亡的形态学改变;能显著提高细胞活性,使处于增殖状态的细胞显著增多;能减少^(60)Co辐射所致淋巴细胞DNA梯状带的出现,降低淋巴细胞凋亡率;能抑制^(60)Co辐射后小鼠胸腺淋巴细胞P38蛋白的磷酸化。结论盐藻β-C能抑制^(60)Co辐射诱导的淋巴细胞凋亡,对^(60)Co辐射损伤的小鼠胸腺淋巴细胞具有保护作用。其作用机制可能与盐藻β-C乳剂能清除氧自由基、减少DNA的断裂、抑制磷酸化p38蛋白的表达有关。

扇贝多肽对UVB辐射小鼠胸腺淋巴细胞PI3K/Akt和ASK1-JNK信号通路的影响

目的研究扇贝多肽(polypeptide from Chlamys farreri,PCF)对紫外线B(UVB)辐射损伤小鼠胸腺淋巴细胞后PI3K/Akt和ASK1-JNK信号通路的影响。方法UVB辐射小鼠胸腺淋巴细胞,用比色法测定胸腺淋巴细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;western-blot检测Akt的活性,预先加入或不加入PI3K/Akt通路特异性抑制剂LY294002检测细胞凋亡信号调节激酶Ⅰ(apoptosis signal regulating kinase-1,ASK1)、JNK的活性、线粒体膜电位(ΔψМ)和DNA ladder。结果PCF能激活AKT的活性,抑制UVB对小鼠胸腺淋巴细胞ASK1凋亡通路的活化。结论PCF通过降低细胞内活性氧的含量,提高AKT的活性,引起ASK1的降解,导致ASK1-JNK诱导的细胞凋亡抑制。

青紫心甘薯黄酮减轻^(60)Co辐射诱导的小鼠胸腺淋巴细胞损伤的超微结构研究

目的:观察青紫心甘薯黄酮对60Co辐射损伤体外培养的小鼠胸腺淋巴细胞超微结构的影响。方法:建立单次60Co辐射损伤体外培养的小鼠胸腺淋巴细胞的病理模型,应用透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果:在强度为3Gy60Co辐射情况下,小鼠胸腺淋巴细胞超微结构在3 h后即出现核膜消失、核异染色质浓缩及边集、核碎裂、胞内空泡形成、线粒体嵴断裂、基质空泡化、粗面内质网扩张等典型细胞凋亡改变。2.500 g/L青紫心甘薯黄酮能抑制60Co辐射所致淋巴细胞的损伤,细胞的正常超微结构保存良好。结论:青紫心甘薯黄酮可有效地保护小鼠胸腺淋巴细胞对抗60Co的辐射损伤。

扇贝多肽对UVB辐射小鼠胸腺淋巴细胞的保护作用

目的:研究扇贝多肽(polypeptidefromChlamysfarreri)对中波紫外线(UVB)辐射损伤小鼠胸腺淋巴细胞的保护作用。方法:UVB辐射小鼠胸腺淋巴细胞,MTT法检测胸腺淋巴细胞的活性;酶生化法检测细胞谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性;流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)的产生量以及细胞凋亡率。结果:PCF能明显减轻UVB辐射对小鼠胸腺淋巴细胞的损伤;提高细胞GSH-Px、SOD和CAT活性;降低细胞中ROS的产生量和细胞凋亡率。结论:PCF对小鼠胸腺淋巴细胞具有明显的辐射保护作用。

扇贝多肽对抗UVB辐照所致小鼠胸腺淋巴细胞凋亡的研究

目的研究扇贝多肽(PCF)对中波紫外线(UVB)辐照损伤小鼠胸腺淋巴细胞的保护作用。方法以UVB辐照制备损伤模型,预先给予PCF,应用透视电镜观察细胞超微结构的变化;免疫细胞化学检测细胞p53,Bcl-2,Bax基因蛋白的表达;原位杂交检测细胞P38mRNA的基因表达。结果UVB辐照引起小鼠胸腺淋巴细胞凋亡,PCF能明显减轻UVB辐射损伤引起的细胞超微结构改变。PCF还能抑制突变型p53蛋白和促凋亡蛋白Bax的表达,增强凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达以及抑制P38 mRNA基因的表达。结论PCF对UVB辐照的体外小鼠胸腺淋巴细胞具有明显的保护作用。

胸腺素对带瘤小鼠胸腺淋巴细胞有丝分裂指数影响的研究

本文报道胸腺素对正常及带瘤小鼠胸腺淋巴细胞有丝分裂指数的影响。试验结果表明,注射胸腺素组的胸腺淋巴细胞有丝分裂指数均高于对照组。其中不同瘤龄之间有一定差异。

斛芪浸膏对(60)~Co辐照后小鼠胸腺淋巴细胞活力及凋亡的影响

目的探讨中药斛芪浸膏对小鼠胸腺淋巴细胞经钴60(60Co)辐照后细胞活力及凋亡的影响。方法取4～8周龄健康雄性昆明小鼠,分离胸腺淋巴细胞进行原代培养,并分为对照组、辐照组,以及中药低、中、高剂量组。对照组和辐照组加等量无血清RPMI-1640培养液,中药低、中、高剂量组分别加入等量斛芪浸膏溶液(25、50和100mg/mL)。除对照组外,其他4组均给予60Co-γ射线5Gy单次辐照。分别于辐照后12、24、36、48h采用MTT法检测细胞活力;辐照后10h,采用流式细胞仪检测细胞早期凋亡率;辐照后24h,采用琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡,观察DNA损伤情况。结果辐照后24～48h,辐照组细胞活力水平较对照组同期均明显下降(P<0.01,P<0.05);中药低、中、高剂量组细胞活力水平均明显高于同期辐照组(P<0.05),且呈剂量依赖性。中药低、中、高剂量组细胞早期凋亡率均低于辐照组,中药高剂量组差异有统计学意义(P<0.01)。辐照组及中药低、中、高剂量组细胞总DNA经电泳后均出现典型的DNA断裂阶梯状条带,但中药低、中、高剂量组DNA损伤相对较轻,以中药高剂量组作用明显。结论斛芪浸膏对60Co辐照后早期小鼠胸腺淋巴细胞的细胞活力有保护作用,并能降低细胞的早期凋亡水平。

胸腺素对荷瘤小鼠胸腺淋巴细胞有丝分裂指数影响的研究

本文报道胸腺素对荷瘤小鼠胸腺淋巴细胞有丝分裂指数的影响。实验结果表明,注射胸腺素的实验组胸腺淋巴细咆有丝分裂指数均高于对照组,其中不同瘤龄之间有一定差异。

艾氏腹水癌细胞对胸腺淋巴细胞钻瘤作用的敏感性

在离体混合细胞培养中,发现胸腺淋巴细胞能主动向艾氏腹水癌(EAC)细胞移动、相互粘附,並钻入瘤细胞内。其粘瘤和钻瘤指数的基本规律一致,但不同步,不同瘤龄期以及有无Con A刺激的瘤细胞对淋巴细胞的粘瘤和钻瘤作用的敏感性不同,胸腺淋巴细胞及其PNA^-和PNA^+亚群与脾脏淋巴细胞亦有显著差异。胸腺素对淋巴细胞的粘瘤和钻瘤作用有一定的促进作用。

板蓝根凝集素对小鼠胸腺淋巴细胞分裂作用的电镜观察

目的 :研究板蓝根凝集素引起小鼠胸腺淋巴细胞分裂增殖过程中的超微结构变化 .方法 :用生物化学方法提取板蓝根凝集素 ,并测其凝集活性 ,以 0 .0 54mg/ kg/ d的剂量灌胃 ,连续 3 0 d,胸腺组织经处理后 ,用 Epon81 2包埋 ,经超薄切片后 ,在电镜下观察 .结果 :与对照组相比 ,实验组小鼠胸腺淋巴细胞质内的线粒体、核糖体数量均较对照组多 ,处于分裂前期的细胞数目较对照组多 .结论

单剂CD25单克隆抗体联合小剂量抗胸腺淋巴细胞球蛋白在肾移植中的应用

目的探讨单剂CD25单克隆抗体（舒莱/赛呢哌）联合小剂量兔抗胸腺淋巴细胞球蛋白（ATG）免疫诱导方案在肾移植中应用的临床效果。方法回顾性分析我院2000年1月至2006年12月所完成的741例肾移植病例,分为两组。诱导组,448例,应用＂CD25单克隆抗体＋ATG＂免疫诱导方案,其中141例属高危人群。CD25单克隆抗体（舒莱/赛呢哌）为单剂,术前2h内静脉滴注;ATG共500mg,手术当天及术后2d,100mg/d,静脉滴注,术后第3～6天,50mg/d,静脉滴注;术后免疫抑制剂减量;对照组,293例,未应用＂CD25单克隆抗体＋ATG＂免疫诱导。两组术后常规应用环孢素A（CsA）或他克莫司（FK506）＋吗替麦考酚酯（MMF）＋泼尼松（Pred）＂三联＂免疫抑制方案。比较诱导组与对照组的临床效果和并发症的发生率。结果诱导组,①普通人群（非高危人群）急性排斥反应（AR）发生率8.1﹪（25/307）,逆转率为100﹪（25/25）;感染发生率7.2﹪（22/307）,无巨细胞病毒（CMV）感染;术后1年人/肾存活率99.7﹪/99.7﹪;②高危人群AR发生率14.9﹪（21/141）,逆转率为90.5﹪（19/21）;感染发生率13.5﹪（19/141）,其中确诊CMV感染1例;术后1年人/肾存活率96.5﹪/95.0﹪。对照组,AR发生率14.7﹪（43/293）,逆转率88.4﹪（38/43）;感染发生率15.4﹪（45/293）,其中CMV感染2例;术后1年人/肾存活率97.6﹪/95.9﹪。普通人群中,诱导组的AR发生率、感染发生率及人/肾存活率与对照组比较有统计学差异（P〈0.05）。结论单剂CD25单克隆抗体联合小剂量ATG方案在肾移植免疫诱导中具有重要的临床应用价值,可降低术后1年内AR发生率、降低感染发生率,提高1年人/肾存活率,尤其适于高危人群。

胎儿胸腺淋巴细胞诱导的LAK细胞的实验研究

我们利用胎儿胸腺淋巴细胞作为IAK细胞的前身细胞,制备成Th-LAK细胞,进行了实验研究。结果表明:1.Th-LAK细胞对离体癌细胞有直接杀伤作用。2.用^(125)I同位素释放法测定Th-LAK细胞对靶细胞(K562)具有杀伤活性。3.Th-LAK细胞对裸鼠移植瘤具有一定抑制作用。说明Th-LAK细胞对肿瘤具有杀伤作用和抑制作用。

胸腺淋巴细胞抑裂素的分离纯化及性质分析

通过抽提,超滤,Biogel—P4凝胶过滤,DEAE—Sephadex A—25层析,Sephadex—G10层析等实验方法,同时通过淋巴细胞转化实验进行活性跟踪,从猪胸腺中分离出一种分子量小于3,000Da的胸腺淋巴细胞抑裂素。该抑裂素体外抑制ConA刺激的淋巴细胞3H—TdR掺入。

胸腺淋巴细胞免疫血清制备的初步研究

试验研究以猪胸腺淋巴细胞为完全抗原,采用一定的免疫程序致敏兔,刺激兔产生抗猪胸腺淋巴细胞的特异性抗体,在30天后分离血清,免疫效价达到1∶640,证明兔血清含有该特异抗体,免疫程序合理,抗体效价确实。