胸腺素β4联合水胶体敷料对深Ⅱ度烧伤大鼠创面愈合及p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路的影响

目的 探讨胸腺素β4(thymosin β4,Tβ4)联合水胶体敷料对深Ⅱ度烧伤大鼠早期创面愈合及p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase, MAPK)信号传导通路的影响。方法 选取常规适应性喂养的健康Wister雄性大鼠40只作为研究对象,随机抽取10只作为对照组,其余30只按照随机数字表法分为烧伤组、Tβ4+水胶体敷料组、p38MAPK激动剂组,每组10只。除对照组外,其余大鼠均制作深Ⅱ度烧伤模型,造模成功后进行后续试验,Tβ4+水胶体敷料组给予外涂6μg Tβ4+安普贴贴敷,p38MAPK激动剂组给予外涂6μg Tβ4+安普贴贴敷+外涂p79350(1μg/kg),烧伤组大鼠给予等量0.9%氯化钠溶液外涂。给药3、7、10、14 d对创面进行拍照,采用MoticMed6软件及Photoshop软件处理照片并计算各组大鼠早期创面愈合率;免疫组织化学法检测创面肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)等炎症因子水平;逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)检测创面转化生长因子β1蛋白(transforming growth factor β1 protein, TGF-β1)mRNA、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blotting, WB)检测p38MAPK信号传导通路关键蛋白p38MAPK、核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)、半胱氨酸蛋白酶3(cysteine protease 3,caspase-3)表达情况。结果 给药3、7、10、14 d后,Tβ4+水胶体敷料组的创面愈合率均高于烧伤组和p38MAPK激动剂组(P<0.05)。与对照组比较,烧伤组、Tβ4+水胶体敷料组、p38MAPK激动剂组各时点TNF-α、IL-10水平均较高(P<0.05);给药后12、24、48 h,烧伤组、p38MAPK激动剂组TNF-α水平高于Tβ4+水胶体敷料料组(P<0.05),IL-10水平低于Tβ4+水胶体敷料组(P<0.05);而烧伤组、p38MAPK激动剂组各时点TNF-α、IL-10水平差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,烧伤组、Tβ4+水胶体敷料组、p38MAPK激动剂组各时间点TGF-β1 mRNA、VEGF mRNA表达均上调(P<0.05);与烧伤组比较,Tβ4+水胶体敷料组各时间点TGF-β1 mRNA表达均下调(P<0.05)、VEGF mRNA表达均上调(P<0.05);烧伤组、p38MAPK激动剂组各时间点TGF-β1 mRNA、VEGF mRNA表达差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,烧伤组、Tβ4+水胶体敷料组、p38MAPK激动剂组p38MAPK、NF-κB、caspase-3蛋白表达量均较高(P<0.05);与烧伤组比较,Tβ4+水胶体敷料组p38MAPK、NF-κB、caspase-3蛋白表达量均较低(P<0.05);但烧伤组、p38MAPK激动剂组p38MAPK、NF-κB、caspase-3蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论 胸腺素β4联合水胶体敷料有助于促进深Ⅱ度烧伤创面愈合,其机制可能与抑制p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路、降低炎性因子表达有关。

七彩神仙鱼β-胸腺素基因克隆及表达分析

为了探究胸腺素基因在七彩神仙鱼(Symphysodon aquifasciatus)中的特征、进化和功能,基于转录组序列比对及生物信息学的方法对七彩神仙鱼的胸腺素进行了鉴定、基因与蛋白结构分析、系统发生分析,通过RACE技术克隆获得了七彩神仙鱼胸腺素基因全长,利用qRT-PCR技术研究其在各组织中的表达规律,通过病原感染实验,研究了七彩神仙鱼β-胸腺素基因在病原胁迫下的表达规律。结果显示,七彩神仙鱼的胸腺素基因鉴定为胸腺素β1型,命名为dfTβ。克隆结果显示,dfTβ的全长为779 bp,ORF区序列长度为303 bp,编码100个氨基酸,其5′-UTR为43 bp,3′-UTR为433 bp,含有22个poly-A。系统发育进化分析结果显示,七彩神仙鱼β-胸腺素同尼加拉瓜湖始丽鱼β-胸腺素聚为一簇。qPCR结果显示,β-胸腺素在七彩神仙鱼各组织中均有表达,其中在肠、皮肤、鳃中表达最高,在头肾和脾中表达最低。嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染后,七彩神仙鱼皮肤、头肾、脾和肠中dfTβ均在短时间内显著上调,并随着时间出现先上升后下降的趋势,但各组织中上调倍数最高峰的时间不同。研究结果表明,dfTβ基因参与了七彩神仙鱼受病原刺激后的免疫应答,且表达模式不同,表明其可能在不同组织、免疫的不同阶段发挥不同的作用。

重组人胸腺素β4对急性放射损伤小鼠多组织中炎症小体和凋亡相关基因表达的影响

目的探讨重组人胸腺素β4(rh-Tβ4)对急性放射损伤小鼠小肠、肺和脑组织中炎症小体和凋亡相关基因表达的影响。方法C57BL/6N小鼠随机分为正常对照组、放射损伤模型组和模型+rh-Tβ4组。8 Gy 60Coγ射线单次全身照射小鼠制备急性放射损伤模型,模型+rh-Tβ4组于照射后24 h立即ip给予rh-Tβ45μg·kg^(-1),每天1次,连续3 d。用放射免疫法检测小鼠小肠、肺和脑组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素18(IL^(-1)8)、IL-4、IL^(-1)3和转化生长因子β(TGF-β)等炎症细胞因子含量,用炎症小体和凋亡PCR芯片分别检测各组织中炎症小体和凋亡相关差异基因,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证部分差异基因。结果与正常对照组相比,模型组小鼠小肠、肺及脑组织中TNF-α,TGF-β和IL^(-1)8含量显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,模型+rh-Tβ4组小肠、肺及脑组织中TNF-α含量显著降低(P<0.05),小肠和脑组织中TGF-β和IL^(-1)8含量显著降低(P<0.05,P<0.01)。炎症小体PCR芯片结果显示,与正常对照组相比,模型组小鼠小肠、肺和脑组织中差异基因分别为13,9和11个;与模型组相比,模型+rh-Tβ4组小肠、肺和脑组织中差异基因分别为1,4和20个;与正常对照组相比,模型+rh-Tβ4组小肠、肺和脑组组织中差异基因分别为5,3和3个。RT-qPCR验证结果显示,组间存在显著差异且与PCR芯片变化趋势一致的基因为:小肠组织中,模型组炎症小体相关基因炎症小体负向调节基因Bcl2样1(Bcl2l1)mRNA较正常对照组显著下调(P<0.01),模型+rh-Tβ4组该基因较模型组显著上调(P<0.05),且与正常对照组无显著差异;脑组织中,模型组炎症小体相关基因NLR家族凋亡抑制蛋白1(Naip1)、炎症小体负向调节基因MEFV先天免疫调节因子(Mefv)及肿瘤坏死因子配体超家族成员11(Tnfsf11)mRNA较正常对照组显著上调(P<0.05);模型+rh-Tβ4组Tnfsf11 mRNA较模型组显著下调(P<0.05)。凋亡PCR芯片结果显示,与正常对照组相比,模型组小肠、肺和脑组织中差异基因分别为3,6和12个,模型+rh-Tβ4组小肠、肺和脑组织中差异基因分别为10,4和1个;与模型组相比,模型+rh-Tβ4组小肠和肺组织中无差异基因,脑组织中差异基因4个。RT-qPCR验证结果示,组间存在显著差异且与PCR芯片变化趋势一致的基因为:肺组织中,模型组抗凋亡基因肿瘤坏死因子配体超家族成员10(Tnfsf10)mRNA较正常对照组显著上调(P<0.01),模型+rh-Tβ4组该基因较模型组显著下调(P<0.05),且与正常对照组无显著差异;模型组及模型+rh-Tβ4组抗凋亡基因CD40配体(Cd40lg)mRNA较正常对照组显著下调(P<0.01);模型组促凋亡基因凋亡相关因子配体(Fasl)较正常对照组显著下调(P<0.05),模型+rh-Tβ4组该基因较模型组显著上调(P<0.05)。脑组织中,模型组抗凋亡基因Tnfsf10 mRNA较正常对照组显著上调(P<0.05);模型+rh-Tβ4组该基因较模型组显著下调(P<0.05),且与正常对照组无显著差异;模型组抗凋亡基因Cd40lg mRNA较正常对照组显著下调(P<0.05),模型+rh-Tβ4组该基因较模型组显著上调(P<0.05),且与正常对照组无显著差异。结论rh-Tβ4抑制照射所致促炎细胞因子表达,并可调节炎症小体和凋亡相关基因表达。

胸腺素β10与人类恶性肿瘤关系研究进展

胸腺素β10(TMSB10)对细胞迁移的G-肌动蛋白具有较高亲和力,是一种肌动蛋白结合蛋白。TMSB10在促进细胞迁移、血管生成、抗炎和抗凋亡作用、促进伤口愈合中发挥着重要作用。TMSB10在多种类型实体肿瘤组织中,有明显升高表现,而且这一物质在肿瘤发生、转移、侵袭及凋亡中,均发挥着重要作用。可以说,TMSB10水平直接影响肿瘤分期,同时影响患者预后情况,可能作为预测患者不良预后的独立危险因素,并有望成为潜在的肿瘤治疗靶点。本研究基于国内外研究成果,对胸腺素β10与人类恶性肿瘤关系进行探索。

突触素、胸腺素β4与非小细胞肺癌病理特征的关系

目的探讨突触素(SYN)、胸腺β4(Tβ4)与非小细胞肺癌(NSCLC)病理特征的关系。方法选取2020年3月~2021年3月收治的NSCLC患者96例,均经病理确诊。通过SYN、Tβ4表达分为观察组和对照组。分析两组SYN、Tβ4表达及SYN、Tβ4与病理特征及预后的关系。结果观察组SYN阳性表达率低于对照组,观察组Tβ4阳性表达率高于对照组(P<0.05);NSCLC组织中淋巴结转移者:TNM分期(Ⅲ期)者SYN阴性占比较高(P<0.05);TNM分期(Ⅲ期)者Tβ4阴性占比较高(P<0.05)。预后良好69例(71.88%),预后不良27例(28.13%)。多元Logistic分析;淋巴结转移、TNM分期Ⅲ期、SYN阴性表达、Tβ4阳性表达是影响NSCLC患者预后不良的危险因素(P<0.05)。结论Tβ4、SYN表达与NSCLC淋巴结转移、TNM分期密切关系,通过检测两者水平,可为临床诊疗NSCLC提高可靠资料。

仿刺参β-胸腺素基因的克隆和表达分析

β-胸腺素是一种具有抗菌活性的多肽。采用RACE方法克隆仿刺参β-胸腺素(β-Thymosin),命名为Ajβ-Thymosin。Ajβ-Thymosin基因的序列全长1877 bp,开放阅读框为126 bp,编码41个氨基酸;分子质量为4.6 ku,理论等电点为5.25。仿刺参β-胸腺素中存在着保守的功能序列EVASFD-KSKLK和保守的G-actin结合结构域LKKTET。系统发育进化分析结果显示,仿刺参β-胸腺素和紫色球海胆的β-胸腺素聚为一支。采用实时荧光定量PCR检测Ajβ-Thymosin基因在仿刺参不同组织和不同发育时期的表达量,发现其在体腔细胞中的表达量最高,在小耳幼虫期开始高表达。经过假交替单胞菌、灿烂弧菌、蜡样芽孢杆菌和希瓦氏菌4种病原菌刺激后,仿刺参体腔细胞中Ajβ-Thymosin基因的表达量在4 h均受到抑制;在蜡样芽孢杆菌和希瓦氏菌组,Ajβ-Thymosin基因的表达量在12 h开始上调;在假交替单胞菌组,Ajβ-Thymosin基因的表达量在24 h开始上调;在灿烂弧菌组,Ajβ-Thymosin基因的表达量在48 h才开始上调。病原刺激产生的动态表达模式表明,Ajβ-Thymosin基因参与仿刺参体腔细胞免疫应答的过程,并且对不同病原菌的免疫应答能力不同。对Ajβ-Thymosin基因的序列和表达进行分析,可为新型抗菌肽和养殖病害防控策略的研发奠定基础。

胸腺素β4在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响

目的:探讨胸腺素β4 (Tβ4)在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌MCF-7细胞迁移和侵袭的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:采用免疫组织化学染色法检测67例女性乳腺癌患者癌组织中Tβ4蛋白表达情况。人乳腺癌MCF-7细胞分为空白对照组、siRNA-control组和siRNA-Tβ4组,采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组细胞中Tβ4 mRNA表达水平,Transwell小室实验检测各组细胞侵袭细胞数,细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率。结果:67例乳腺癌患者中有59例患者癌组织中Tβ4呈阳性表达(88.06%)。Tβ4阳性表达率与乳腺癌患者的T分期、N分期和临床分期有关联(P<0.05),与患者年龄、雌激素受体(ER)表达、人表皮生长因子受体2 (HER2)表达和Ki-67表达无关联(P>0.05)。与空白对照组和siRNA-control组比较,siRNA-T β 4组细胞中Tβ4 mRNA表达水平明显降低(P<0.01),侵袭细胞数明显减少(P<0.05),细胞划痕愈合率明显降低(P<0.01)。结论:Tβ4在乳腺癌细胞中呈高水平表达,Tβ4表达与乳腺癌患者T分期、N分期和临床分期有密切关联,靶向沉默Tβ4可以抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力。

基于转录组测序筛选鹿茸胸腺素促成骨细胞增殖基因

目的对Tβ4蛋白处理组和空白组进行转录组测序,筛选Tβ4蛋白处理后促成骨细胞相关的候选基因和通路。方法通过Fmoc固相合成法体外合成梅花鹿Tβ4蛋白,并处理MC3T3细胞,CCK8法检测细胞活性。将细胞分为空白组和Tβ4处理组,利用Illumina平台进行高通量测序。对差异表达基因进行GO功能富集分类和KEGG通路分析,构建差异基因的蛋白互作网络并筛选Hub基因,通过在线软件对Hub基因进行富集分析。结果Tβ4蛋白处理成骨细胞显著促进了细胞的增殖活性。获得差异基因6106个,其中上调基因1979个,下调基因4127个。根据PPI网络中的节点连通度,得到10个Hub基因,其中,筛选到7个与成骨细胞增殖相关的候选基因,分别为CDC20、PLK1、CDK1、BUB1B、BUB1、MAD2L1、RRM2,这些基因富集到了细胞周期信号通路和p53信号通路。结论梅花鹿Tβ4蛋白处理后可以提高细胞的增殖活性和存活率。梅花鹿胸腺素Tβ4可能是通过调控细胞周期信号通路和p53信号通路中的关键基因达到促进成骨细胞增殖的功能。

胸腺素β4在治疗缺血性脑卒中的作用机制及进展

胸腺素β4是一种由43个氨基酸残基组成的小分子肽,存在于各种组织中,在大脑、肝脏、肾脏、睾丸、心肌、血小板和白细胞中高度表达,其中Tβ4的前四个氨基酸具有调节抗炎和抗纤维化作用:1~15氨基酸片段可抑制细胞凋亡,减少对细胞的毒性诱导损伤。由氨基酸17~23编码的活性片段触发血管生成和毛囊生长。胸腺素β4作为人体内主要的肌动蛋白调节分子之一,具有多重生物学功能,在以往研究中已证实其具有促进组织再生、重塑、创伤愈合的作用,在维持肌动蛋白平衡、肿瘤发病与转移、细胞凋亡、炎症、血管生成、毛囊发育等生理病理过程中扮演着极为重要的角色,近年来多位学者报道了其神经保护作用,可作为神经损伤和神经退行性疾病的修复/再生疗法。本文将综述胸腺素β4在缺血性卒中治疗中的作用机制及在临床应用中的前景。

胸腺素β_(10)在乳腺癌患者中的表达及与淋巴结转移的相关性研究

目的探究乳腺癌患者体内胸腺素β_(10)(Tβ_(10))的表达及与淋巴结转移的相关性。方法选取2019年1月至2020年5月于本院就诊的67例乳腺癌患者作为观察组,另选取同期于本院就诊的64例乳腺良性病变患者作为对照组,所有患者均经病理穿刺活检确诊病情。比较两组病理组织切片中Tβ_(10)表达情况,比较观察组不同临床病理Tβ_(10)表达情况,采用Spearman分析Tβ_(10)阳性表达与患者临床病理学特征和淋巴结转移的相关性,比较不同淋巴结转移数量下乳腺癌患者血清中Tβ_(10)水平。结果观察组阳性率为80.60%,高于对照组的17.19%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组不同组织学分型、TNM分期、分化程度的乳腺癌患者及发生/未发生血行转移、淋巴结转移的乳腺癌患者Tβ_(10)表达分级结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,Tβ_(10)表达与乳腺癌患者病理组织学分型、TNM病理分期、肿瘤分化程度及淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。Tβ_(10)表达量与乳腺癌患者淋巴结转移数量无相关性。淋巴结转移数量>10个患者血清Tβ_(10)水平高于淋巴结转移数量4~10个患者、淋巴结转移数量1~3个患者、未发生淋巴结转移的患者,淋巴结转移数量4~10个患者血清Tβ_(10)水平高于淋巴结转移数量1~3个患者、未发生淋巴结转移患者,且淋巴结转移数量1~3个患者血清Tβ_(10)水平高于未发生淋巴结转移的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乳腺癌患者肿瘤组织内部Tβ_(10)呈现阳性表达,且该指标与病理组织学分型、TNM病理分期、肿瘤分化程度及淋巴结转移呈正相关,患者血清Tβ_(10)表达水平随淋巴结转移数量发生变化。

胸腺素β4和β10表达促进小鼠乳腺癌细胞转移

目的研究胸腺素β4(Tβ4)和β10(Tβ10)对小鼠乳腺癌转移的影响。方法用对照腺病毒(pENTER组)、过表达Tβ4腺病毒(TMSB4X组)或Tβ10腺病毒(TMSB10组)感染小鼠乳腺癌细胞4T1,分别作用24,48和72 h后,MTT和甲紫(结晶紫)法体外检测Tβ4和Tβ10对4T1细胞增殖的影响;划痕法检测Tβ4和Tβ10对4T1细胞迁移能力的影响;Transwell法检测Tβ4和Tβ10对4T1细胞侵袭能力的影响;RT-PCR法检测不同腺病毒感染后4T1细胞中与细胞增殖及迁移相关基因基质金属蛋白酶2(MMP2),MMP9,信号转导与转录活化因子3(Stat3),癌基因(c-myc)和骨髓基质细胞衍生因子1(Sdf1)mRNA水平的变化。通过在雌性裸鼠乳腺脂肪垫下分别接种感染了对照腺病毒、过表达Tβ4或过表达Tβ10腺病毒的荧光素酶标记的4T1细胞(4T1-Luc),建立小鼠乳腺癌模型。造模成功后,每周于小鼠瘤体内注射10μL相应腺病毒(连续5周),每5 d测量小鼠肿瘤体积。小动物活体成像法观察小鼠肿瘤生长和转移。结果与pENTER组相比,TMSB4X和TMSB10组4T1细胞增殖抑制率及穿过小室细胞数无明显变化,提示Tβ4和Tβ10对4T1细胞的增殖和侵袭无明显影响;与pENTER组细胞迁移率(22±7)%相比,另两组细胞迁移率明显升高(P<0.05),分别为(36±6)%和(36±4)%,提示Tβ4和Tβ10促进了细胞迁移;TMSB4X和TMSB10组4T1细胞MMP2,MMP9,Sdf1和Stat3 mRNA水平显著上调(P<0.05,P<0.01)。动物实验表明,TMSB4X和TMSB10组小鼠比pENTER组更早出现乳腺癌肺转移,肺部转移灶数量在35 d时明显增多(P<0.05)。结论Tβ4和Tβ10均能促进小鼠乳腺癌细胞的迁移,体内促进小鼠乳腺癌的转移。

胸腺素β4对大鼠皮质神经细胞氧糖剥夺-复氧损伤的保护作用研究

目的研究胸腺素β4对体外培养大鼠皮质神经细胞氧糖剥夺-复氧(OGD/R)损伤的保护作用及其机制。方法分离并鉴定原代培养的皮质神经细胞,通过OGD/R法建立皮质神经细胞模拟缺血-再灌注损伤模型(氧糖剥夺6h,复氧12h)。实验分为对照组、模型组、治疗组(建模前2h加入胸腺素β4)。CCK8法确定胸腺素β4的最佳作用浓度,流式细胞术和末端脱氧核苷酸转移酶脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,Western blotting检测78000葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bax的表达水平并进行组间比较。应用SPSS19.0软件分析处理数据,正态分布的计量资料3组间比较采用单因素方差分析。结果大鼠皮质神经细胞被正确分离。胸腺素β4最佳作用浓度为10μg/L。与对照组比较,模型组皮质神经细胞存活率明显下降(P=0.002),细胞凋亡率明显增加(P<0.01),GRP78、CHOP、Bax表达水平明显升高(P值分别为0.034、0、0.045),Bcl-2的表达水平明显下降(P=0.006);与模型组比较,治疗组(10μg/L外源性胸腺素β4)细胞活力明显增高(P=0.008),细胞凋亡率明显降低(P=0.002),GRP78、CHOP、Bax表达水平明显下降(P值分别为0.032、0.027、0.019),Bcl-2表达水平明显升高(P=0.028),差异均有统计学意义。结论胸腺素β4能抑制OGD/R诱导的内质网应激依赖性细胞凋亡,为胸腺素β4在脑缺血-再灌注损伤治疗中的应用提供了理论依据。

胸腺素β_4及胸腺素β_(10)与非小细胞肺癌转移和预后关系

目的研究胸腺素β4(thymosinβ4,Tβ4)和胸腺素β10(thymosinβ10,Tβ10)在人非小细胞肺癌(NSCLC)组织中表达的临床意义及其与肺癌转移和预后的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测Tβ4、和Tβ10在NSCLC中的表达,并结合临床资料分析Tβ4和Tβ10表达意义。结果NSCLC中,Tβ4和Tβ10主要表达在癌细胞质中,癌组织的表达率分别为76.3%和72.4%。统计分析显示:Tβ4表达水平与肺癌的分化程度呈明显负相关;Tβ10的表达水平与与淋巴结转移呈明显正相关,二者单独表达均与患者的年龄、性别、肺癌的分型无关。Tβ4与Tβ10具有明显相关性,二者共表达时与肺癌的分化程度、淋巴结转移具有更显著相关性。Tβ4、Tβ10、、Tβ4/Tβ10的高表达组5年生存率明显低于低表达组(P<0.05)。同时Tβ4可作为肺癌患者预后评估的独立指标。结论Tβ4和Tβ10的高表达明显增强肺癌的恶性度,促进肺癌转移,使患者预后更差。通过研制降低两者表达的药物将为肺癌的治疗提供新的靶点。

人胸腺素α1真核表达重组体的构建及其转染人外周血淋巴细胞对后者免疫活性的影响

目的 :构建人胸腺素α1(Tα1)真核表达重组体 p BK- Tα1,并研究其转染人外周血淋巴细胞 (PBL)对后者免疫活性的影响。方法 :将已构建的 Tα1克隆重组体 p UC18- Tα1经 Eco R I、Hind 酶切 ,获得 Tα1片段 ,再将其克隆入真核细胞表达载体 p BK- CMV得到 p BK- Tα1重组体 ,p BK- Tα1以脂质体包裹的方法转染 PBL细胞 ,作 RT- PCR在 m RNA水平检测 p BK- Tα1在 PBL细胞中的表达。用 E玫瑰花环试验检测转染 p BK- Tα1后的 PBL细胞中T淋巴细胞表面 E受体的表达情况 ,并以酶联免疫吸附试验检测转染 p BK- Tα1后的 PBL细胞培养上清中的 IFN- γ和 IL- 2值。结果 :构建成功 Tα1真核细胞表达重组体 p BK- Tα1;在 m RNA水平证实 ,p BK- Tα1可在 PBL细胞中得以转录 ;初步证实 p BK- Tα1转染入 PBL细胞可促进 IFN- γ、IL- 2的表达和 T淋巴细胞表面 E受体的产生。结论 :p BK- Tα1在 PBL细胞内的表达可能会增强

胸腺素α原的研究进展

胸腺素α原(ProTα)是一种在哺乳动物细胞中广泛分布、结构保守的酸性小分子蛋白,是胸腺素α1(Tα1)的前体蛋白。目前在细胞内和细胞外均已发现了ProTα。在胞内,ProTα作为一种核蛋白,参与对细胞周期的调节,促进细胞增殖;在胞外,ProTα通过潜在的膜受体调节免疫应答,促进IFN-γ、TNF-α、IL-2等细胞因子的产生,进而增强细胞和体液免疫应答。但该蛋白的分泌机制、受体以及信号通路还有待研究。

胸腺素α_1 基因的克隆表达及其生物活性

胸腺素α1(thymosinalpha 1 ,Tα1)作为一种免疫增强剂 ,临床用途广泛 .为大量制备Tα1,按大肠杆菌惯用密码子合成Tα1基因 ,克隆于质粒pUC1 9的EcoRⅠ和PstⅠ位点 .经测序证明序列正确后 ,串联为 4串体 (Tα1④ ) ,经再次测序确认后克隆入pThioHisA的EcoRⅠ和PstⅠ位点 .转化大肠杆菌T0P1 0 ,酶切鉴定正确后 ,经 1mmol LIPTG诱导 4h ,获得硫氧还蛋白与Tα1④的融合表达 ,用离子交换层析纯化融合蛋白 .溴化氰裂解融合蛋白 ,释放出Tα1单体 ,经离子交换色谱纯化出Tα1.采用3 H TdR参入法进行生物活性测定 ,证实融合蛋白和Tα1均具有刺激小鼠脾淋巴细胞分裂增殖的能力 .

胸腺素β4促进创伤愈合过程中对多种生长因子及新生细胞迁移的作用

学术背景:近年来,胸腺素β4的促进创伤愈合作用受到关注。最近的研究发现,在心肌、角膜和皮肤的创伤愈合过程中,胸腺素β4主要是作为一种化学诱导因子,调节多种生长因子的表达以及趋化新生细胞的迁移。目的:阐述胸腺素β4的生物学性质及创伤愈合的机制,并重点就胸腺素β4促进皮肤创伤愈合的作用及机制进行分析。检索策略:文章作者应用计算机检索Medline1980-01/2007-08有关胸腺素β4促进创伤愈合机制的文章,检索词为"thymosinβ4,skin wound healing,myocardium wound healing,cornea wound healing",限定文章语言种类为English。同时检索中国期刊全文数据库2000-01/2007-08有关胸腺素β4促进创伤愈合机制的文章,检索词为"胸腺素,皮肤创伤愈合,心肌修复,角膜修复",并限定文章语言种类为中文。初检得到660篇文献,全部为机检。文献评价:阅读标题和摘要对660篇文献进行初筛,排除研究目的与本课题无关及内容重复性研究,保留218篇中英文文献进一步分析,其中55篇综述类文献,163篇研究论文。按纳入标准筛选,共126篇文章满足全部纳入标准,予以纳入。其中23篇文献研究了胸腺素β4的生物学特性,51篇研究了胸腺素β4与皮肤愈合的问题,33篇研究了胸腺素β4与心肌损伤修复的问题,19篇研究了胸腺素β4与角膜修复的问题。资料综合:由于机体自身修复愈合的能力极其有限,一旦发生损伤或者病变很难自愈,甚至导致溃疡或瘢痕形成,多需要外缘性修复或启动内源性修复,但目前尚未发现有效的促进创伤愈合的药物。近年来,胸腺素β4促进创伤愈合的作用受到关注,为创伤愈合药物的研究提供了一个新方向。结论:虽然有很多研究证实胸腺素β4在创伤愈合过程中有重要作用,但是具体作用机制尚未完全明了。目前,人工合成的胸腺素β4已用于大量实验,以探讨其在创伤愈合中的作用和机制,结果显示胸腺素β4很有可能成为促进创伤愈合,尤其是糖尿病溃疡、免疫功能低下慢性损伤的新的治疗药物。

小儿反复呼吸道感染T细胞亚群检测及TF、胸腺素疗效观察

本文应用单克隆抗体CD_3、CD_4、CD_8系列检测44例小儿反复呼吸道感染(RRI)患儿末梢血中T细胞亚群,有变化者18例占40.91%。RRI患儿应用TF、胸腺素治疗可改善被抑制的细胞免疫功能。