大鼠骨髓间充质干细胞对免疫耐受的作用

目的:体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BMSCs),观察和检测其生长特性及表面标记,探讨它对免疫耐受的作用。方法:通过密度梯度离心、贴壁筛选法分离培养大鼠BMSCs,观察细胞形态学变化,应用流式细胞术测定其表面分子CD34、CD44的表达。将培养第3代的BMSCs经尾静脉输注大鼠,应用流式细胞技术检测大鼠外周血中CD4+CD25+Treg比率,通过3H-TdR掺入实验检测BMSCs对大鼠胸腺细胞自发增殖反应的影响。结果:体外培养的大鼠BMSCs呈贴壁生长,似成纤维细胞样,表面分子CD44表达阳性率为98,但CD34表达阴性。输注BMSCs的大鼠外周血中CD4+CD25+Treg占2.5±0.69,明显高于对照组(0.8±0.14)和PBS输注组(1.0±0.23),P<0.05;胸腺细胞自发增殖活性(cpm值3275.41±1736.05)明显低于正常对照组(7368.25±2532.13)和PBS输注组(6143.71±2380.47),P<0.05。结论:体外培养可获得形态单一、生长稳定、增殖活性较强的BMSCs,BMSCs能增强大鼠的免疫耐受作用。