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不同方法制备的1型肺炎球菌多糖-蛋白结合疫苗生化及免疫学特性比较 被引量:5
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作者 张萍 王欣茹 +3 位作者 侯亚莉 张新庄 杜琳 谢贵林 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期369-371,共3页
目的对两种方法制备1型肺炎球菌荚膜多糖-蛋白结合疫苗的生化及免疫学特性进行比较。方法分别采用溴化氰活化法与胺还原法制备结合物,并对其进行生化及免疫学检测。结果采用溴化氰活化法制备的结合物,较胺还原法具有较高的结合率及高分... 目的对两种方法制备1型肺炎球菌荚膜多糖-蛋白结合疫苗的生化及免疫学特性进行比较。方法分别采用溴化氰活化法与胺还原法制备结合物,并对其进行生化及免疫学检测。结果采用溴化氰活化法制备的结合物,较胺还原法具有较高的结合率及高分子结合物含量,免疫小鼠产生的抗体效价较胺还原法明显提高。结论采用溴化氰活化法制备1型肺炎球菌荚膜多糖-蛋白结合疫苗优于胺还原法。 展开更多
关键词 溴化氰活化法 胺还原法 结合疫苗 生化特性 免疫学特性
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介入途径下中药白芨提取物作为基因递送载体的可行性 被引量:12
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作者 夏向文 李欣 +4 位作者 冯敢生 郑传胜 梁惠民 柳曦 熊斌 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第18期1832-1835,共4页
目的:探讨经介入途径中药白芨提取物作为基因递送载体的可行性.方法:从中药白芨中提取其有效成分-白芨多糖,采用胺化还原法制备阳离子型白芨多糖,体外实验检测该阳离子型多糖对质粒DNA的结合与保护作用,以及阳离子白芨多糖载基因复合物... 目的:探讨经介入途径中药白芨提取物作为基因递送载体的可行性.方法:从中药白芨中提取其有效成分-白芨多糖,采用胺化还原法制备阳离子型白芨多糖,体外实验检测该阳离子型多糖对质粒DNA的结合与保护作用,以及阳离子白芨多糖载基因复合物对肝癌细胞系HepG2的转染,进一步通过介入途径经肝动脉给予该复合物,以GFP作为报告基因检测复合物在体内对活体兔肝细胞的转染.结果:所制备的阳离子型白芨多糖载基因复合物可以结合并保护质粒DNA免受DNA酶的降解;体外实验证实该复合物可以转染入体外培养肝癌细胞,以阳离子白芨多糖作为转染载体时转染效率要低于脂质体组,差异具有统计学意义(28.87%±3.27% vs 36.64%±6.87%,P<0.05).采用介入方法经肝动脉给药时复合物能靶向转染入活体兔肝细胞内并实现表达.结论:采用介入途径经肝动脉给药时阳离子白芨多糖载基因复合物可以实现活体肝细胞靶向转染,有望作为一种新型的多聚阳离子型的基因载体在基因治疗中发挥作用. 展开更多
关键词 介入 白芨多糖 基因载体 还原法 转染
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Significance of Biogenic Amines in Foods and Their Reduction Methods 被引量:2
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作者 Songul Sahin Ercan Huseyin Bozkurt Cigdem Soysal 《Journal of Food Science and Engineering》 2013年第8期395-410,共16页
The term "biogenic amines" defines decarboxylation products such as histamine, putrescine, serotonin, tyramine, phenylethylamine, tryptamine and also aliphatic polyamines. They can be detected in both raw and proces... The term "biogenic amines" defines decarboxylation products such as histamine, putrescine, serotonin, tyramine, phenylethylamine, tryptamine and also aliphatic polyamines. They can be detected in both raw and processed foods. In the recent years, there is a great interest in biogenic amines as they are associated with quality, safety and freshness of some foods, particularly fermented foods. The presence of biogenic amines in foods can also be used as an indicator of hygienic quality. Biogenic amines also cause health hazards due to their toxic effects especially in sensitive individuals. It is therefore important to control and reduce the biogenic amines. The reduction can be brought about by the use of high pressure, irradiation, packaging, additives, starter cultures and by reduction of decarboxylase activity and temperature. This review summarizes the significance, function, occurrence and formation of biogenic amines in different foods and their reduction by different methods. 展开更多
关键词 Biogenic amines REDUCTION quality index health effects
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23F型肺炎球菌多糖与CRM197蛋白结合物制备及特性研究 被引量:1
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作者 江山 周觉非 +8 位作者 尹丹丹 张珂 陈思 刘威 代洁 邹莎莎 饶海林 马诚 崔长法 《职业卫生与病伤》 2013年第2期81-83,共3页
目的采用改良胺化还原法,白喉无毒突变体CRM197蛋白作为载体,制备23F型肺炎球菌多糖蛋白结合物。方法在还原胺法的基础上,以1,6-己二酰肼(ADH)为分子臂,在碳二亚胺(EDAC)作用下衍化CRM197蛋白,衍化后蛋白再与多糖上的醛基反应,形成共轭... 目的采用改良胺化还原法,白喉无毒突变体CRM197蛋白作为载体,制备23F型肺炎球菌多糖蛋白结合物。方法在还原胺法的基础上,以1,6-己二酰肼(ADH)为分子臂,在碳二亚胺(EDAC)作用下衍化CRM197蛋白,衍化后蛋白再与多糖上的醛基反应,形成共轭结合;采用高效液相色谱技术(HPLC)、免疫扩散等方法分析结合物,并将获得的结合物免疫NIH小鼠,用ELISA方法检测多糖IgG水平。结果 HPLC图谱和免疫扩散检测结果证明了结合物的获得;动物免疫产生了较多糖高的抗23F肺炎多糖抗体,并有免疫记忆发生。结论采用改良还原氨化法可以制备出动物免疫原性良好的23F型多糖蛋白结合物。 展开更多
关键词 23F型肺炎球菌荚膜多糖 白喉无毒突变体CRM197蛋白 结合疫苗 改良还原法
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红毛五加多糖AHP-Ⅱ的荧光标记及其在小鼠腹腔巨噬细胞上的定位 被引量:3
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作者 陈永 张青 +5 位作者 孙风祥 李桂芝 孟爱霞 陈志婷 黄传洲 刘志军 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2113-2119,共7页
目的:对红毛五加多糖AHP-Ⅱ的还原性末端进行选择性荧光标记,并观察AHP-Ⅱ与小鼠腹腔巨噬细胞结合情况。方法:利用胺化还原法对AHP-Ⅱ进行异硫氰酸荧光素(FITC)荧光标记,并通过紫外吸收光谱扫描和荧光分光光度术对偶联标记结果进行确证... 目的:对红毛五加多糖AHP-Ⅱ的还原性末端进行选择性荧光标记,并观察AHP-Ⅱ与小鼠腹腔巨噬细胞结合情况。方法:利用胺化还原法对AHP-Ⅱ进行异硫氰酸荧光素(FITC)荧光标记,并通过紫外吸收光谱扫描和荧光分光光度术对偶联标记结果进行确证。通过测定多糖标记前后对小鼠腹腔巨噬细胞激活情况,检验该标记方法对AHP-Ⅱ生物学活性的影响。采用荧光显微技术和流式细胞术观察AHP-Ⅱ与小鼠腹腔巨噬细胞的结合情况。结果:AHP-Ⅱ荧光标记后的多糖得率和荧光标记效率分别为20.57%和0.809%。生物活性检测发现,AHP-Ⅱ还原性末端荧光标记后,对其激活小鼠腹腔巨噬细胞的能力没有显著影响(P>0.05)。荧光显微观察显示AHP-Ⅱ-FITC定位在小鼠腹腔巨噬细胞表面,流式细胞术检测发现在试验剂量范围内(50~200μg·m L^(-1)),巨噬细胞的荧光强度与AHP-Ⅱ-FITC加入量呈正相关,且荧光标记多糖与未标记多糖间存在竞争关系。结论:该方法可用于AHP-Ⅱ的标记研究,AHP-Ⅱ可与小鼠腹腔巨噬细胞细胞膜结合。 展开更多
关键词 红毛五加 多糖 生物活性检测 异硫氰酸荧光素(FITC) 荧光显微技术 流式细胞检测 巨噬细胞 还原法
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不同分子大小b型流感嗜血杆菌结合物免疫原性的比较 被引量:3
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作者 孙述学 陈中伟 +6 位作者 穆姗姗 王振业 刘晓磊 王震 刘峰 马宏初 褚自青 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第3期229-233,共5页
目的评价不同分子大小b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)结合物的免疫原性,确定结合物的最适分子大小。方法制备不同活化度的Hib多糖,分别与载体蛋白CRM197以胺还原法制备不同分子大小(K_D)的Hib结合物;此外,利用凝... 目的评价不同分子大小b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)结合物的免疫原性,确定结合物的最适分子大小。方法制备不同活化度的Hib多糖,分别与载体蛋白CRM197以胺还原法制备不同分子大小(K_D)的Hib结合物;此外,利用凝胶过滤层析分离Hib结合疫苗原液,收集K_D于0.05~0.25、0.25~0.45之间及大于0.45的结合物组分;分别免疫小鼠,采用间接ELISA法测定小鼠血清中抗Hib多糖IgG抗体滴度,以市售Hib疫苗作为对照。结果不同分子大小Hib结合物第2针及第3针免疫后,K_D0.35组与K_D0.01组诱导的抗体水平相当(P=0.166和0.882),显著高于K_D0.53组(P=0.008和0.031),也高于对照疫苗组;同样K_D0.25组第2针免疫后诱导的抗体滴度也显著高于K_D0.48组(P=0.037)。不同分子大小片段的Hib结合物组分第2针及第3针免疫后,K_D0.05~0.25组抗体水平最高,K_D0.25~0.45组次之,K_D>0.45组最低。结论较高分子大小Hib结合物的免疫原性优于较低分子大小的结合物,在制备Hib结合疫苗时,以分子大小K_D0.20~0.35为宜。 展开更多
关键词 B型流感嗜血杆菌 结合疫苗 分子大小 胺还原法 免疫原性
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19F型肺炎球菌荚膜多糖与载体蛋白P64K结合物的制备及免疫原性 被引量:4
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作者 周觉非 姚静 +8 位作者 尹丹丹 陈思 杨溢尧 代洁 张珂 饶海林 李春阳 江山 张雪梅 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1131-1134,1185,共5页
目的:采用改良胺化还原法,重组B群脑膜炎球菌外膜蛋白(rP64K)作为载体蛋白,制备19F型肺炎球菌荚膜多糖(PN19F)结合物。方法:在胺化还原法的基础上,以1,6-己二酰肼(ADH)为分子臂,在碳二亚胺(EDAC)作用下衍化rP64K,蛋白衍化后再与多糖上... 目的:采用改良胺化还原法,重组B群脑膜炎球菌外膜蛋白(rP64K)作为载体蛋白,制备19F型肺炎球菌荚膜多糖(PN19F)结合物。方法:在胺化还原法的基础上,以1,6-己二酰肼(ADH)为分子臂,在碳二亚胺(EDAC)作用下衍化rP64K,蛋白衍化后再与多糖上的醛基反应,形成共轭结合。采用HPLC、电泳、免疫印迹等方法分析结合物,并将获得的结合物免疫NIH小鼠,用ELISA方法检测多糖IgG水平。结果:电泳和免疫印迹证明了结合物制备成功。动物免疫产生了高滴度的抗PN19F的抗体,并有免疫记忆发生。结论:新的结合方法和新的载体蛋白能有效提高结合效率,以本工艺制备PN19F蛋白结合疫苗是可行的。 展开更多
关键词 19F型肺炎球菌荚膜多糖 重组B群脑膜炎球菌外膜蛋白 结合疫苗 改良还原法 免疫原性
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