咸鱼中生物胺降解菌的筛选与降解特性研究

为获得用于咸鱼等腌制水产品的生物胺降解菌,本文采用生物胺初筛培养基与高效液相色谱技术分析,研究从传统方法加工的咸鱼中分离筛选具有降解生物胺的菌株,通过VITEK 2鉴定系统进行菌种鉴定,并分析菌株的生长曲线、降解生物胺动力学、温度、p H、盐度、生物胺底物浓度等特性,及在咸鱼中接种菌株对产品生物胺的影响。结果表明：从咸鱼中分离筛选到三株具有降解生物胺的菌株,分别是鼠李糖乳酸菌（Lactobacillus rhamnosus,Lr）、植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum,Lp）、戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus,Pp）;对生物胺降解的最适温度为30～35℃,最适p H为5.5～6.0,对食盐有较好的耐受性,在食盐浓度≤80 g/L时对生物胺的降解作用尤为明显,Lr与Lp之间无拮抗作用;接种了生物胺降解菌的咸鱼产品中腐胺、尸胺、组胺、酪胺等生物胺含量均显著性降低（p〈0.05）,而接种Lr∶Lp=1∶2的混合菌种的咸鱼产品生物胺含量下降幅度最大。

生物胺降解乳酸菌的筛选与特性研究

为筛选出高效降解生物胺的优良乳酸菌,该研究以实验室前期筛选的41株乳酸菌作为研究对象,运用显色培养、高效液相色谱(HPLC)法对菌株生物胺产生和降解能力进行筛选,并对筛选出的菌株进行耐盐及耐酸实验。结果表明,筛选得到5株高效降解生物胺菌株,其中以植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)30的生物胺降解能力最好,其对尸胺、组胺、酪胺的降解率分别为62.42%、74.32%、89.97%。植物乳杆菌30能在含盐量0~9%和pH为4.5~8.5环境中较好的生长繁殖,该菌株无生物胺生成活性,并同时具备生物胺降解能力和耐盐耐酸能力,可作为蛋白质类发酵食品的发酵剂运用于食品中降低生物胺毒性。

生物胺降解菌降胺特性的研究

以前期筛选的3株降胺菌Bacillus amyloliquefaciens LS1-002-014、Bacillus subtilis FJ5-002-005、Bacillus subtilis LS1-003-016为研究对象,利用高效液相色谱(HPLC)法动态监测3株菌在不同生物胺抑制条件下降胺率与生物量之间的关系,考察温度、NaCl浓度、亚硝酸盐浓度对菌株降胺性能的影响。结果表明,混合生物胺培养对菌株LS1-002-014、FJ-002-005抑制作用较明显,出现生物量的降低、稳定期的提前和稳定期的缩短等现象。此外,研究还发现3株菌对7种生物胺降解能力较好,其中菌株LS1-002-014和LS1-003-016对亚精胺降解能力最强,降解率分别达43.95%、34.41%;菌株FJ5-002-005对酪胺降解效果明显,降解率最高达59.40%。菌株LS1-003-016在30℃,菌株LS1-002-014、FJ5-002-005在37℃时表现出最大降胺能力,3株菌均不耐盐,但可利用环境中的亚硝酸盐合成降胺酶。本研究成果将为生物胺在发酵食品中的应用提供基础数据。

生物胺降解菌在酱油中的应用

将生物胺降解菌Wickerhamomyces anomalus和Millerozyma farinosa作为发酵剂接种至酱油发酵醪中,考察其对酱油发酵过程中生物胺含量及酱油其他指标的影响。结果表明,实验组(J2,J3)中的8种胺的含量显著低于自然发酵组(K)(P<0.01),说明生物胺降解菌J2和J3能显著抑制酱油发酵成熟过程中生物胺的形成。此外,对发酵过程中微生物菌落数的统计分析可得:2株菌在发酵酱醪中均保持着一定存活力和生长能力。发酵成熟时J2、J3的p H范围基本符合酱油产品的p H值(4.6～4.8);发酵过程中Na Cl浓度发酵前后没有显著差异(P>0.05); TVB-N的含量在酱油发酵过程中呈现上升的趋势;通过游离氨基酸的分析可以知道酱油品质满足基本要求;因此接种生物胺降解菌可以很好地控制酱油的生物胺,提高其食用安全性。

接种生物胺降解菌对鱼露生物胺含量及品质的影响

将两株生物胺降解菌Millerozyma farinose A3和Enterococcus faecium R7(简称降胺菌)接种到发酵鱼露中,探究接种M.farinose A3、E.faecium R7及两者复合菌对发酵鱼露生物胺含量及品质的影响。研究表明:接种降胺菌组鱼露生物胺含量显著低于对照组,且接种复合降胺菌鱼露生物胺含量最低(P<0.05)。与对照组相比,接种降胺菌能降低发酵过程中鱼露的pH,促进乳酸菌的生长同时抑制肠杆菌的生长(P<0.05);抑制挥发性盐基氮的生成,抑制呈鱼腥味的三甲胺和庚醛的生成;促进乙酸乙酯等令人愉悦的风味物质的生成,促进游离氨基酸特别是必需氨基酸的生成。本研究中M.farinose A3和E.faecium R7能降低鱼露生物胺含量,提高食用安全性,同时还能提升鱼露的风味和营养,其有望成为鱼露的新型发酵剂。

贵州镇远道菜中生物胺降解菌的筛选及鉴定

为保障传统镇远道菜的食品安全,从不同发酵阶段的道菜中分离筛选生物胺降解菌。鉴于产胺菌对传统发酵食品风味和品质的贡献,采用双层显色平板培养技术从样品中分离出32株具有产生物胺性能的菌株,再以不同种类的生物胺作为外源氮源利用高效液相色谱法分析各菌株的生物胺降解率,从中筛选出具有较高生物胺降解性能的菌株LS1-002-014、FJ5-002-005和LS1-003-016。经形态学、生理生化和分子生物学鉴定该3株生物胺降解菌分别为解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)、枯草芽胞杆菌(B.subtilis)。研究发现菌株LS1-002-014和LS1-003-016对亚精胺具有较显著的降解效果,降解率依次为43.95%、34.41%,而菌株FJ5-002-005对酪胺的降解率高达59.40%。此外,研究还发现所筛菌株对生物胺的降解具有特异性,生物胺的降解与菌株本身有关,与其属无关,研究结果为传统镇远道菜的质量安全提供了新思路和新方案。

多胺降解产生H_2O_2在莴苣种子萌发过程中的作用

以正常莴苣(Lactuca sativa L.)"挂丝红"种子为材料,采用外源多胺(Put,Spd,Spm)、亚精胺合酶抑制剂-环已胺(CHA)、多胺氧化酶抑制剂-氨基胍(AG)、H2O2清除剂N,N-二甲基硫脲(DMTU)处理,研究多胺降解产物H2O2在莴苣种子萌发过程中的作用.结果表明,三种外源多胺都可以显著促进莴苣种子的萌发,0.5 mmol/L的Spd作用效果最为显著;与此相对应的是CHA对莴苣种子的萌发有抑制作用;Spd对莴苣种子萌发的促进作用可能与多胺氧化降解产生的H2O2有关.因为(1)Spd可显著促进多胺氧化酶活性和增加吸胀种子的H2O2含量.(2)DMTU可降低Spd对H2O2含量的促进作用而抑制Spd对莴苣种子萌发的促进作用.(3)AG显著抑制Spd对莴苣种子萌发过程中PAO活性,而降低Spd对莴苣种子萌发的促进作用.实验结果暗示多胺氧化降解产生的H2O2参与莴苣种子的萌发过程.

气体脱硫装置的胺降解产物并不引起腐蚀作用

用二乙醇胺和甲基二乙醇胺的气体脱硫装置中,遇到腐蚀问题的主要部位(见图1)有:

亚精胺与D-精氨酸对采后新疆赛买提杏多胺降解的影响

为研究亚精胺与D-精氨酸处理对赛买提杏多胺降解相关酶活性变化及转化产物γ-氨基丁酸的作用。分别用0.1mmol/L亚精胺和0.1mmol/L D-精氨酸溶液处理绿熟期新疆赛买提杏,于(25±2)℃条件下贮藏7d,分析不同处理对腐胺、亚精胺、精胺、γ-氨基丁酸含量及多胺氧化酶、二胺氧化酶活性等指标的影响。结果表明,亚精胺处理能提高赛买提杏中精胺、亚精胺与γ-氨基丁酸含量,降低腐胺含量,且抑制了多胺降解相关酶活性,D-精氨酸处理降低了杏果中腐胺的含量,促进了多胺降解相关酶的活性。

多胺氧化降解在莴苣种子萌发过程中的作用

[目的]了解多胺氧化降解在莴苣种子萌发过程中的作用。[方法]用多胺氧化酶专性抑制剂氨基胍(AG)对莴苣(Lactuca sativa)种子进行浸种处理,测定种子的萌发率、多胺氧化酶(PAO)和二胺氧化酶(DAO)活性、内源多胺和H2O2含量变化。[结果]AG可强烈抑制种子的萌发,12 h后种子萌发率与对照相比差异就达极显著水平。随着莴苣种子的萌发,PAO和DAO活性发生显著的变化,2种酶活性都是先上升后下降,在24和48 h分别测得DAO和PAO活性高峰。AG对DAO和PAO活性有强烈的抑制作用,培养24和36 h后就检测不到DAO和PAO活性。在种子萌发过程中,内源Put在前24 h快速降低,24～60 h降低趋缓;Spd在萌发前期降低缓慢,48 h后急剧下降;Spm含量低但略呈增加趋势;多胺总量逐渐降低。AG处理可显著增加内源多胺尤其是Put和Spd含量。在种子萌发过程中,种子H2O2含量逐渐增高,36～48 h时出现高峰后一直维持较高水平。AG处理可明显降低种子H2O2含量。[结论]在种子萌发期间,内源多胺和H2O2含量的变化与PAO和DAO活性变化相对应,暗示在莴苣种子萌发期间进行着活跃的多胺氧化降解代谢。

三株寡养单胞菌对苯噻草胺的降解及系统发育分析

从污水处理厂好氧活性污泥中分离和纯化到3个能降解苯噻草胺的细菌菌株。这些菌株均为革兰氏阴性、好氧、不形成芽孢的杆菌。根据其形态特征、生理生化性状和16SrDNA序列分析结果表明,分离菌株Y2、Y3和Y5均为寡养单胞菌(Stenotrophomonasspp.)。

一株降解生物胺乳酸菌用于葡萄酒苹果酸乳酸发酵的特性研究

葡萄酒等发酵食品中微生物通过脱羧作用形成生物胺,高浓度的生物胺对人体有害。该研究以课题组前期分离得到的一株可降解生物胺的Lactobacillus plantarum NXU-Q12为试验菌株,将其应用于葡萄酒酿造。采用HPLC法测定该菌株的生物胺降解率;采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用(head space-solid phase microextraction-gas chromatography-mass spectrometer,HS-SPME-GC-MS)和电子鼻测定经该菌株苹果酸-乳酸发酵(malolactic fermentation,MLF)前后的葡萄酒中挥发性化合物,以此评价该菌株对葡萄酒品质的影响,为葡萄酒酿造过程中生物胺的控制提供解决途径。结果表明,L.plantarum NXU-Q12在发酵葡萄酒的过程中具有降解苹果酸而不降解酒石酸、柠檬酸和甘油的特点,且MLF后酒样(赤霞珠葡萄酒、马瑟兰葡萄酒)中的酒精度、总酸、还原糖、挥发酸、甘油含量以及pH值均符合葡萄酒国家标准。此外,赤霞珠、马瑟兰酒样中L-苹果酸含量在MLF 32 d后均降至0.1 g/L以下,而且该菌株发酵的赤霞珠和马瑟兰葡萄酒样中生物胺的总含量比商业乳酸菌Oenococcus oeni发酵的酒样中分别降低了31.07%和41.51%,同时L.plantarum NXU-Q12使两种酒样中部分酯类的含量与种类增加,使葡萄酒的香气更丰富。因此,L.plantarum NXU-Q12不仅具有良好的MLF发酵潜力,而且能有效控制葡萄酒中生物胺含量。

右旋脱氢松香酸降解胺的合成

报道了手性试剂右旋脱氢松香酸降解胺的合成。利用工业歧化松香，精制出脱氢松香酸，以此为原料，制备脱氢松香酰氯，再通过Ｃｕｒｔｉｕｓ反应，得到右旋脱氢松香酸降解胺。

传统发酵肉制品中降解生物胺菌株的筛选鉴定与应用研究

该研究利用高效液相色谱(HPLC)法对65株来源于传统发酵肉制品的耐盐、耐亚硝酸盐乳酸菌所产生物胺进行定性定量检测,筛选出降解率最高的不产生物胺菌株PL-ZL001。经形态观察、生理生化试验研究,并结合16SrDNA序列分析对其进行鉴定,同时探索其作为发酵剂对发酵香肠中生物胺含量的影响。结果表明,菌株PL-ZL001被鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),添加菌株PL-ZL001可抑制发酵香肠中6种生物胺的积累,尤其是对毒性最大的组胺含量的控制,效果显著优于商业用木糖葡糖球菌(Staphyloccus xylose)(P<0.05)。

浓香型大曲中降解生物胺菌株的筛选及应用

从浓香型白酒大曲中筛选出生物胺降解菌,并研究其生长特性和在固态发酵条件下降解生物胺的能力。利用高效液相色谱法测定发酵液中生物胺含量,得到1株降解生物胺效果最好的酵母菌,经形态学和分子生物学鉴定其为奥默柯达酵母,将其命名为Kodamaea ohmeri HJM。研究K.ohmer HJM的生长特性,得到其最高耐受温度为43℃,乙醇最高耐受体积分数为14%,耐受酸最低为pH 2,并具有较高的葡萄糖耐受性。在固态发酵条件下,利用小麦为发酵基质得到接种菌液样品组和空白对照组中生物胺含量具有显著差异(P<0.05),其对几种生物胺的降解率分别为:腐胺(39.19±0.08)%、尸胺(33.77±0.06)%、甲胺(32.44±0.06)%、乙胺(23.39±0.06)%、吡咯烷(63.42±0.02)%、异戊胺(49.83±0.07)%、环己胺(49.73±0.03)%、环戊胺(66.07±0.08)%。该研究从浓香型大曲中分离出对生物胺降解率较高的菌株,可为白酒中生物胺的调控提供参考价值。

博来霉素和放射线诱导的间质性肺炎与5-羟色胺降解系统激活的关系及其治疗探讨

本课题组前期研究发现,细胞存在一个5-羟色胺(5-HT)降解系统(5DS),包括5-HT2A受体(5-HT2AR)、5-HT合成酶及单胺氧化酶A(MAO-A)。5-HT2AR可调控5-HT合成酶及MAO-A的表达,5DS的激活表现为这些蛋白的同时上调,导致线粒体活性氧(ROS)产生。本研究评估间质性肺炎(IP)与5DS激活的关系,并观察抑制5DS对IP的治疗作用。建立博来霉素(BLM)致小鼠IP模型和放射线(Rad)致大鼠IP模型。使用5-HT2AR拮抗剂盐酸沙格雷酯(SH)、5-HT合成抑制剂卡比多巴(CDP)或SH、CDP联合(SH∶CDP=2∶1)治疗BLM和Rad致IP模型。本文中动物福利和实验过程均遵循中国药科大学动物伦理委员会的规定。免疫组化及Western blot检测表明,两种IP模型中所有肺组织细胞的5-HT合成酶表达均明显上调,而5-HT2AR、MAO-A表达上调以巨噬细胞最明显。HE染色及Masson染色表明,SH、CDP治疗明显降低了两种IP模型中肺间质增厚、肺泡萎缩塌陷、大量巨噬细胞浸润及间质纤维化;且SH、CDP联合治疗几乎消除了两种IP模型中的肺组织病变。氧化应激、炎症和纤维化相关因子检测表明,SH、CDP联合治疗也几乎消除了ROS、丙二醛的含量升高,超氧化物歧化酶活性的降低,肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β含量的升高,核因子-κB磷酸化表达及α-平滑肌肌动蛋白、基质金属蛋白酶2、胶原Ⅰ表达的上调。SH、CDP显示协同效应。结果提示,5DS激活可能与IP的发生密切相关,主要表现为肺组织细胞的5-HT合成增多及巨噬细胞的5-HT合成及降解增多,抑制5DS可有效地治疗IP。

脱氢枞酸降解胺Schiff碱及其铜(Ⅱ)配合物的合成与表征

由水杨醛合成了四种取代水杨醛:5-溴水杨醛、5-氯水杨醛、5-硝基水杨醛、3,5-二硝基水杨醛,用从歧化松香中分离出的纯净的脱氢枞酸先合成脱氢枞酸酰氯,通过Curtius重排转化成脱氢枞酸降解胺,利用水杨醛和取代水杨醛与脱氢枞酸降解胺合成了五种Sch iff碱,并与铜离子配合制得铜配合物.用红外、核磁和元素分析进行了分析.

不同条件对两株乳酸菌降解生物胺的影响

为探究从新疆熏马肠中分离出的植物乳杆菌和唾液乳杆菌在不同环境条件下降解生物胺的效果,通过高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)检测两株菌在不同条件下(生物胺浓度、初始p H、温度、Na Cl浓度和乙醇浓度)降解生物胺的情况。结果表明:当生物胺浓度在200~300μg/m L时两株菌生物胺降解能力基本达到最大,而当生物胺浓度大于300μg/m L时两株菌降解生物胺的能力逐渐下降,但唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)对生物胺的降解能力显著高于植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)(p<0.05),分别在p H为6.5和7.0时对大多数生物胺具有较高的降解能力;两株菌均在32~37℃温度范围内对生物胺有较好的降解效果;当Na Cl浓度达到8%,乙醇浓度达到4.5%时,两株菌对生物胺的降解活性被强烈抑制。可见本研究中的唾液乳杆菌相对于植物乳杆菌更适合作为商业发酵剂,具有更好的降解生物胺的特性。

多胺氧化降解在大豆子叶节分化形成不定根中的作用

以"吉林小粒7号"大豆种子[Glycine max(L.)Merr.]为材料,研究多胺氧化降解在大豆子叶节分化形成不定根中的作用.结果显示:三种外源多胺(Put,Spd和Spm)都能显著促进大豆子叶节分化形成不定根,而亚精胺合酶抑制剂环已胺(CHA)对大豆子叶节分化出不定根有抑制作用;多胺氧化酶专性抑制剂氨基胍(AG)可显著抑制大豆子叶节分化形成不定根,与此相一致的是,外植体DAO活性和H2O2含量相应降低,内源多胺有一定的积累;H2O2清除剂N,N-二甲基硫脲(DMTU)处理可显著抑制大豆子叶节分化形成不定根,并可降低外源多胺对大豆子叶节分化形成不定根的促进作用.这些结果暗示,大豆子叶节分化出不定根的过程可能与多胺氧化降解有关,并且降解产物H2O2可能参与了此过程.

花生芽中具有降解生物胺活性物质的制备工艺

为了从花生芽中获得具有降解生物胺能力的物质,对其制备条件进行了优化。本研究通过单因素试验、25-1部分析因试验、Box-Behnken Design(BBD)响应面设计,研究纤维素酶处理和浸提条件对花生芽提取液胺氧化酶活性的影响。结果表明:纤维素酶溶液pH值5.49、纤维素酶质量浓度50.11g/L、浸提体系pH值7.67为最优条件,预测花生芽提取液胺氧化酶活性为23.94U/g。生物胺降解能力试验结果表明,所制备的花生芽提取液对总生物胺降解率达到(89.60±6.73)%,其中对组胺的降解率为(65.94±2.42)%。作为一种新型的具有生物胺降解能力的资源,花生芽存在潜在应用价值。