艾滋病患者肝组织瘦素的表达及与肝脂变的关系

目的:调查北京地区艾滋病患者肝脂变的发生率,研究艾滋病患者肝组织中瘦素与肝脂变的关系.方法:应用免疫组织化学法检测18例国人艾滋病患者肝组织中瘦素、CD68及TNF-α的表达,评价这些患者肝脏的组织学改变及脂变状况,分析性别、年龄、肝功能、血脂水平、空腹血糖、HIV病毒载量、CD4+细胞计数和CD8+细胞计数与肝脂变的关系.结果:本组病例艾滋病患者肝脂变的发生率为61.1%(11/18),其中大泡脂变占72.7%(8/11),合并肝病相关性机会性感染者占22.2%(4/18).18例肝组织中瘦素检出率为44.4%,有肝脂变的肝组织其瘦素及CD68表达的阳性率高于无脂变组,但无统计学意义,脂变组TNF-α的阳性率显著高于无脂变组(100%vs42.9%P=0.012).除CD8+细胞计数(×106个/L)在脂变组显著低于无脂变组(142.0±93.0vs515.6±320.7,P=0.026)外,其余因素如年龄,体质量指数、肝功能、血脂水平、空腹血糖、HIV载量、CD4+细胞计数及是否合并丙型肝炎感染均与肝脂变的发生无显著相关.结论:艾滋病患者中肝脂变发生率较高,肝脂变的发生与瘦素的表达未见明显相关,可能与肝组织损伤修复机制有关.

应用脂变供肝行减体肝移植的实验研究

目的 探讨大鼠脂变供肝用于减体肝移植的适宜植肝量及病理类型。方法 采用 70 %、60 %、5 0 %大鼠减体肝移植 (ROLT)模型 ,观察术后存活率、肝质量 /体质量、移植肝 /受体原肝及病理的改变。结果 大鼠Ⅰ级脂变的全肝移植和 70 %、60 %、5 0 %ROLT的 1周存活率分别为 91.67% ,75 % ,75 % ,2 5 % ;2周存活率分别为 83 .3 3 % ,75 % ,5 8.3 3 % ,0。Ⅱ级脂变的全肝及 70 %ROLT的 1周存活率为 83 .3 3 %和 2 5 %。小泡性脂变为主的供肝 ,其全肝及 70 %、60 %、5 0 %ROLT移植的 1周存活率分别为 83 .3 3 % ,75 % ,75 % ,3 3 .3 3 % ;2周存活率分别为 75 % ,66.67% ,66.67% ,0。Ⅰ级或以小泡性脂变为主的供肝 5 0 %ROLT的生存率与其它组相比均有显著性差异。术后病理可见肝再生及脂变减轻或消失 ,中央静脉及肝窦扩张。结论 要获得较高的术后存活率 ,大鼠Ⅰ级或以小泡性脂变为主的供肝行减体肝移植其移植肝 /受体体质量应大于 ( 2 .2 8± 0 .12 ) % (即移植肝 /受体原肝 >60 % ) ;而Ⅱ级脂变供肝不宜用于减体肝移植 ;

酒精性肝脂变的病理特点

对１１６例酒精性肝病（ＡＬＤ）肝穿标本进行了病理观察。其中具肝细胞脂变者９９例，占８５％。依脂变程度将其分为Ⅰ～Ⅳ级，脂变肝细胞≥３０％诊断为酒精性脂肪肝（ＡＦＬ）。Ⅰ级：脂变肝细胞＜小叶３０％；Ⅱ级：＞３０％（轻度ＡＦＬ，１９例）；Ⅲ级：＞５０％（中度ＡＦＬ，６例）；Ⅳ级：≥７０％（重度ＡＦＬ，２例）。对酒精性肝脂变的特点进行了观察：轻者呈散在或小灶状大泡状脂变，主要分布于小叶的Ⅱ区和Ⅲ区，严重者脂变甚弥漫，脂变处网状支架多完整保存，常同时伴有ＡＬＤ其它一些基本病变，如窦周纤维化、小坏死灶及小型肝细胞等。以上病理特点有利于从病理上与其它原因所致肝脂变进行鉴别。

利用地塞米松构建建鲤肝切片脂变模型

用地塞米松构建建鲤肝切片脂变模型,并探索最佳建模浓度,初步探究地塞米松致建鲤肝脏脂变的作用机理。建鲤活体取肝,用振荡切片机制备厚度为300μm的建鲤肝切片,27℃培养箱中预培养2 h。将试验分为试验组和空白对照组,试验组用含浓度为0.039 3、0.393 0、3.930 0、39.300 0、393.000 0 mg/L地塞米松的L-15培养基于27℃培养箱中培养12 h,空白对照组用L-15培养基培养相同时间,培养结束后,收集试验组和空白对照组中上清液和肝切片。参照试剂盒说明检测上清液中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)活性,肝切片匀浆中三磷酸腺(ATP)、总蛋白(TP)含量,甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)含量以及脂肪酸合成酶(FAS)活性。结果显示,建鲤肝切片经地塞米松诱导后,ATP含量变化不大;当地塞米松浓度为3.93 mg/L时,试验组的其他指标与空白对照组差异极显著(P<0.01)。由此说明,用浓度为3.93 mg/L地塞米松诱导建鲤肝切片12 h可以成功构建建鲤肝切片脂变模型。

慢性HBV感染伴肝脏脂变的病理特点及临床意义

【目的】对慢性HBV感染伴肝脏脂变的临床病理进行观察。【方法】对452例慢性HBV感染者进行肝组织病理检查,其中有112例存在肝脏脂肪性病变,对其临床资料及病理资料进行统计学分析。【结果】慢性HBV感染约1/4伴随不同程度的肝脏脂肪变,其中体重指数高于24者占61.6%,慢性HBV感染者其肝脏脂变程度的加重与体重指数密切相关(t=0.456,P<0.01)。脂变程度对部分生化指标(ALT、GGT)有明显相关性(t1=0.322,t2=0.407,P<0.05),尤其与AST关系更为显著(t=0.552,P<0.01)。【结论】慢性HBV感染患者的肝脏脂变有较高比例,脂变对生化指标有明显影响。应根据不同类型制定不同治疗方案。

灵芝三萜酸经Pnpla3基因的降脂效果体外试验——基于长爪沙鼠肝原代细胞的脂变模型

目的建立长爪沙鼠Pnpla3基因敲减的肝原代细胞的脂变模型,并用于评价灵芝三萜酸的降脂效果。方法分离培养长爪沙鼠肝原代实质细胞,以棕榈酸(PA)诱导成肝脂变模型,根据Pnpla3三个外显子序列设计、合成三对Pnpla3基因的干扰RNA载体,并通过q PCR及Western blot法检测Pnpla3的表达量及干扰效率筛选出一对稳转肝实质的干扰载体。以高(1μmol/L)、中(0.1μmol/L)、低(0.01μmol/L)三个剂量的灵芝三萜酸培养细胞,并以阳性药物蛋氨酸(7μmol/L)为对照,检测干扰Pnpla3基因后的细胞甘油三酯(TG)的含量以进行降脂效果观察。结果诱导24 h内,长爪沙鼠肝脂变细胞脂滴增加的较多且大多数细胞形状正常的PA 400μmol/L为造模的合适浓度,以Pnpla3的第二外显子为靶点设计的si RNA2组敲低效果最好,干扰效率高于70%。干扰Pnpla3基因可以起到降低细胞内TG的作用,单独加入中高剂量的灵芝三萜酸有明显的降脂效果(P <0.01),干扰Pnpla3基因与加入灵芝三萜酸的降脂效应具有累积作用(P <0.01)。结论建立了长爪沙鼠肝实质原代细胞的脂变模型,灵芝三萜酸对干扰Pnpla3基因后的长爪沙鼠肝实质细胞中TG的含量有明显的抑制或减轻作用,灵芝三萜酸降脂效应与磷脂代谢相关2个通路(ko00561,ko00564)中Pnpla3基因的表达相关。

反向消磁条件下磁流变脂隔震模拟试验研究

采用电磁线圈及永磁体共同控制磁场,自主设计一种可反向消磁的磁流变脂(MRG)剪切试验装置。利用ANSYS Electronics软件对该试验装置磁场分布进行仿真分析,并制备不同羰基铁粉质量分数的MRG,采用振动台对反向消磁条件下MRG的动态剪切性能开展试验测试,分别研究励磁电流、激振幅值和激励频率对MRG动态性能的影响。结果表明:羰基铁粉质量分数对MRG的动态性能影响显著;MRG的剪切应力随励磁电流的增大先快速增大后趋于平缓,阻尼力则逐渐减小;MRG的耗能能力随位移幅值的增加而增强;随着加载频率的增大,其阻尼力略有增加。

石墨添加剂对磁流变脂流变特性的影响

为了研究石墨添加剂对磁流变脂流变特性的影响,采用润滑脂为基体,制备了石墨粉末质量分数为0%,2%,5%,8%,10%的石墨磁流变脂(graphite magnetorheological grease,GMRG).使用安东帕流变仪测量了5种材料在稳态剪切模式和振荡剪切模式下的流变特性,并对石墨添加剂质量分数对磁流变脂屈服应力和黏弹性的影响进行了研究.结果表明,对比未添加石墨的磁流变脂,石墨质量分数分别为2%,5%,8%和10%的磁流变脂可以在加载电流为3 A时获得更高的屈服应力,并且屈服应力分别提升了40.49%,54.12%,81.48%和147.48%.此外,石墨添加剂质量分数越大,石墨磁流变脂的黏弹性特征就越明显,但获得的相对磁流变效应越小.研究还发现石墨质量分数的变化对石墨磁流变脂的线性黏弹区间影响不大.

磁流变脂组分对其动态流变性能的影响

采用原位皂化工艺制备了基于不同类型载液和磁性颗粒的磁流变脂,使用智能磁流变仪分别考察了基础油类型及黏度、磁性颗粒粒径对磁流变脂流变性能的影响,并用自然沉降法考察了基于不同组分的磁流变脂的沉降稳定性。实验结果表明,通过改变基础油类型和调节基础油的黏度可控制磁流变脂的内部骨架结构,有效地改善磁流变脂的磁流变性能和沉降稳定性;增大磁性颗粒的粒径可提高磁流变脂的流动性,增大磁场下磁流变脂的结构强度,增强其磁流变效应。

热老化行为对磁流变脂流变学性能的影响

磁流变器件在工作过程中因耗能不可避免地出现温升现象,为研究热效应对介质磁流变脂(MRG)流变学性能的影响,通过静态热处理方式模拟磁流变脂热老化情况。将磁流变脂在温度120℃的环境中进行4、8和24 h的热老化后,分别进行傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、磁学性能及流变性能分析,以探究热老化行为对磁流变脂流变学性能的影响。结果表明:热老化对磁流变脂基载液润滑脂的皂纤维结构产生影响,进而影响磁流变脂性能。随着热老化时间的增加,磁流变脂出现剪切屈服现象的时间点不断提前,长时间高温条件下的热效应对磁流变脂微观结构破坏更大,更容易造成磁流变脂流变性能的显著变化。经过24 h热老化的磁流变脂在恒定剪切速率10 s-1和温度85℃的测试条件下,磁场强度0 mT时磁流变脂的剪切应力为202.04 Pa,磁场强度440 mT时剪切应力可达1843.2 Pa。磁场在一定程度上降低了磁流变脂对温度的依赖性,但持续的热效应最终将会导致磁流变脂服役寿命缩短。

基因治疗药物AAV5-脂蛋白脂酶变异体临床前神经系统安全性评价

目的通过评价AAV5-脂蛋白脂酶变异体(GC304)腺相关病毒注射液对C57BL/6N小鼠中枢神经系统的影响,以确定受试物可能关系到人的安全性问题。方法共使用40只小鼠,雌雄各半,分别单次尾静脉给予溶媒对照、1.0×10^(13)、5×10^(13)、1.5×10^(14)vg·kg^(-1)GC304腺相关病毒注射液,采用功能观测组合试验方法(FOB),分别在给药前和给药后1、4、24、48、96 h,7、14 d观察小鼠运动功能、感觉功能、自主活动等行为,评价受试物对小鼠中枢神经系统的影响,并在给药后第14天检测血清TG、白蛋白和总蛋白改变。结果本研究前期,采用荧光定量PCR方法检测小鼠脑中目的基因(LPL),其结果显示给予1.5×10^(14)vg·kg^(-1)GC3042周后,仍可在脑区内检测到目的基因(LPL)的拷贝数,基于上述数据开展了GC304行为学检测,其结果显示给予GC304后,可引起与药理作用相关的甘油三酯的明显降低,但在给药后2周内,GC304各剂量组动物笼内观察、手持观察、开放场观察、反射评价各指标均未见明显异常。结论GC304可进入脑区,且给药后14 d内,目的基因在脑区内仍有少量分布,但其不会诱导产生神经毒性,为临床用药提供了参考。

基因治疗药物AAV5-脂蛋白脂酶变异体在小鼠体内的毒性研究

目的评估基因治疗药物AAV5-脂蛋白脂酶变异体(GC304)在小鼠体内的毒性。方法(1)急性毒性研究中,40只C57BL/6N小鼠随机分为2组,分别为溶媒组和受试物组,单次尾静脉注射后,进行连续15 d临床症状观察、体重和摄食量测定,于第15天剖检。(2)长期毒性研究中,440只小鼠随机分为4组,分别设置溶媒组,受试物低剂量组(1×10^(13)vg·kg^(-1))、中剂量组(5×10^(13)vg·kg^(-1))和高剂量组(1.5×10^(14)vg·kg^(-1)),单次尾静脉注射后,对动物体重、摄食量、血液学、血清生化、免疫毒性及免疫原性等毒性指标进行测定。给药后4周和6个月时解剖,动物进行组织病理学检查,并在2、4周,3、6个月采用q PCR的方法检测GC304在动物各个脏器的分布和表达情况。结果(1)急性毒性研究中,动物临床症状、体重、摄食量未见异常,未见与GC304相关的大体病理学改变。(2)长期毒性研究中,动物临床症状、体重、摄食量、细胞因子和T淋巴细胞亚群未见与GC304相关的明显异常。GC304能够降低血浆中甘油三酯以及与抗药抗体相关的白蛋白/球蛋白比值下降,能够诱导抗AAV5结合抗体和中和抗体的产生,并持续至给药后6个月。给予GC304后,未检测到抗脂蛋白脂肪酶(LPL)抗体。组织病理学结果显示,小鼠给药后4周,注射部位出现与药物相关的炎性细胞浸润,至给药后6个月可见恢复。与药物相关的改变为脾脏生发中心活跃伴易染体巨噬细胞增多、腹股沟淋巴结生发中心活跃伴易染体巨噬细胞增多。qPCR检测结果显示,GC304在小鼠外周血及脏器广泛分布和表达,但在肝脏中分布和表达显著高于其他脏器。结论C57BL/6N小鼠单次静脉给予GC304后,主要在肝脏中表达和分布,并且动物耐受性良好,未见明显毒性反应,为该药物进入临床试验提供参考。

基因治疗药物AAV5-脂蛋白脂酶变异体在食蟹猴体内的毒性研究

目的评估基因治疗药物AAV5-脂蛋白脂酶变异体(GC304)在食蟹猴体内的毒性。方法30只食蟹猴,分为溶媒对照组(静脉注射溶媒)、GC304低剂量组(3×10^(13)vg·kg^(-1))和高剂量组(1×10^(14)vg·kg^(-1))。试验期间,所有动物进行临床症状和注射部位观察,每周进行摄食量和体重测定。在给药前后不同时间点进行免疫原性检测(包含抗AAV5结合抗体、中和抗体及抗LPL结合抗体)、血液学、血清生化、血凝和尿生化检查,并同时进行T淋巴细胞分型、细胞因子、心电、血压、体温和眼科检查。给药后4周和6个月解剖,动物进行大体观察、脏器称重和组织病理学检查,同时进行GC304的生物分布研究及表达产物测定,并在不同时间点对血液中目的基因DNA进行检测。结果受试物对食蟹猴临床症状、注射部位、体重、摄食量、眼睛各项指标、体温、血压、心电图、血凝、血清生化、T淋巴细胞分型、尿液、细胞因子、脏器重量等指标未见影响。高剂量组动物给药后4周血小板下降。与给予受试物相关的组织病理学改变为脾脏和腹股沟淋巴结生发中心活跃伴易染体巨噬细胞增多。低剂量和高剂量均可引起食蟹猴产生抗AAV5结合与中和抗体,给药后6个月2种抗体仍维持在较高的水平,但未见明显的剂量-效应关系。给予GC304后,未显著诱导食蟹猴产生抗LPL抗体。qPCR检测结果显示,受试物在食蟹猴外周血及脏器广泛分布和表达,但主要集中在肝脏。结论食蟹猴单次静脉给予GC304,动物耐受性良好,未见明显毒性反应,且主要在肝脏中分布和表达,为该药物进入临床试验提供参考。

位移相关磁流变脂减振器结构设计及优化

针对磁流变液减振器结构设计磁场利用率不高,同时磁流变液易产生沉降现象导致控制特性劣化,而磁流变脂粘度高、流动性差导致减振器初始阻尼力过大、阻尼调校空间小的问题,本文提出一种减振效果与活塞位移相关的新型磁流变脂减振器。本文阐述了该减振器的结构形式和工作原理,基于流体力学理论,选用宾汉本构模型,建立了输出阻尼力数学模型,在MATLAB环境下对模型进行仿真研究。为了提高减振器性能对其在基础尺寸上进行了合理的优化,优化结果显示优化后减振器相较之前得到了更低的初始阻尼力以及更宽的阻尼可调范围。

糖肾方对自发性2型糖尿病模型大鼠脂代谢及肝脏脂变的影响

目的:观察糖肾方对自发性2型糖尿病模型(OLETF)大鼠脂代谢及肝脏脂变的作用,探讨相关的作用机制。方法:45只雄性OLETF大鼠随机分成OLETF组、糖肾方组(1.60g/kg)和蒙诺组(0.833mg/kg)。18只LETO大鼠作为正常组。各实验组从动物12周龄起开始给药。分别在36周龄和56周龄取材,检测血脂水平,观察肝组织病理组织学变化并进行半定量分析,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分析SREBP-1及G6PDmRNA在肝组织中的表达。结果:糖肾方能显著降低OLETF组大鼠总胆固醇(TC)水平(P<0.01),减轻肝脂病变,显著改善肝脏组织大、小空泡的发生面积(P<0.05);抑制SREBP-1mRNA在肝脏中的表达(P<0.05);上调G6PDmRNA在肝脏中的表达(P<0.001)。结论:糖肾方可以改善OLETF大鼠的血脂水平异常及肝脂变,其可能的机制是通过降低SREBP-1和增加G6PDmRNA在肝脏的表达,减少脂肪在肝脏中的淤积及降低TG的合成。

热氧化对锂基磁流变脂分子结构和磁流变性能的影响

以乙基硅油、羰基铁粉、十二羟基硬脂酸和氢氧化锂为原料,采用原位皂化法制备锂基磁流变脂(MRG),并分别在60,120,180℃下进行热氧化,研究了热氧化对MRG质量、分子结构、静态屈服应力和磁流变性能的影响。结果表明:热氧化会使MRG的质量发生损失,乙基硅油分子中的-CH_(3)、-CH_(2)-和Si-C_(2)H_(5)基团含量减少,交联Si-O-Si含量增加;随着热氧化温度升高,MRG的剪切应力和静态屈服应力增大,储能模量在磁场下的可调节范围变小;在60℃热氧化15 d时,MRG的磁流变效应仍能保持未热氧化的84.6%,但温度达到180℃时,磁性颗粒受磁场激励时的定向排列受阻,导致磁流变效应急剧下降。

基于磁流变脂的电力变压器减振装置设计

电力变压器在运行过程中会产生噪声,安装减振装置是控制噪声的有效手段之一,针对现有电力变压器减振装置阻尼不可调的缺点,设计一款新型磁流变脂减振器。首先分析变压器振动噪声产生机理和磁流变脂力学特性,论证了减振的可行性。然后设计减振器的结构并进行磁场仿真,结果显示所设计的电磁场可以满足磁流变脂的调控需求,改变线圈电流可调整减振器阻尼大小。最后设计自适应模糊PID控制算法,根据加速度传感器采集到的振动信号调整输出电流,以获得更好的减振效果。仿真结果表明,该算法超调量低、鲁棒性好,为电力变压器的噪声控制提供一种可行的变阻尼减振方案。

大鼠脂肪变性供肝移植的可行性研究

目的 探讨大鼠脂变供肝用于肝移植的可行性及术前病理评估。方法 采用酒精加高脂、高胆固醇的喂饲方法诱导成大鼠不同级别和类型的脂变肝脏 ,通过双袖套、胆管端端缝合法的肝移植模型来评估适宜用于供肝的脂变肝脏。结果 Ⅲ级大泡脂变供肝术后存活率低 ,早期死于肝功能不全 ,肝细胞坏死多 ;Ⅰ级大泡脂变供肝术后生存率和正常供肝无异 ,脂变可较快地逆转 ;Ⅱ级大泡脂变供肝术后存活比正常供肝低 ( 2周存活率 66.7%) ,但检验尚无显著性差别 ,术后脂变不同程度减轻并有肝细胞再生 ( 2 8d) ,坏死较少 ;小泡为主的脂变供肝术后存活率反而较高。结论 Ⅲ级大泡脂变肝脏不宜用作供肝 ;Ⅰ级大泡或Ⅲ级小泡脂变肝脏可较安全地用于肝移植 ,术后脂变肝脏可较快地逆转 ;Ⅱ级大泡脂变肝脏用于肝移植时要考虑肝细胞坏死及缺血性损害因素 ;脂变肝脏炎症活动度计分大于 2 .7者术后存活低 。

肝脂肪变性和肝细胞水样变的一种诊断实验法

目的探讨脂肪染色法在临床病理诊断中的应用。方法对肝脂肪变性组织和肝水样变性组织分别进行脂肪染色法和H-E法染色。结果脂肪染色法把肝脂变组织中肝细胞内的脂滴保存下来并染上特定的颜色,能够很好的区分两种病变。结论对区分以上两种病变脂肪染色法是具有诊断性的试验方法。

稠化剂含量对磁流变脂流变行为的影响

稠化剂含量是决定磁流变脂骨架结构强度的重要因素,对磁流变脂的实际应用具有较大的影响。实验制备了羰基铁粉质量百分数含量为30%、不同稠化剂含量的5种磁流变脂,考察了不同稠化剂含量对磁流变脂屈服应力、储能模量、损耗模量及磁流变效应的影响。结果表明,磁流变脂表现出剪切稀化的假塑性流体特征,不同稠化剂含量磁流变脂的屈服应力与磁场强度呈现出幂律关系,在适宜稠化剂含量时,幂律指数达到最佳值。提出评价磁流变脂的磁流变效应、交联结构体系强度和稳定性的参数指标,通过调节稠化剂的含量可改变非磁性骨架结构的密度,优化磁性部分对磁流变脂结构强度的贡献,改善磁流变脂的磁流变效应,拓宽磁流变脂的储能模量在磁场下的可控范围。