脂多糖和肿瘤坏死因子α对人牙髓干细胞增殖和成骨分化的影响

目的探讨脂多糖(LPS)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)对人牙髓干细胞(hDPSCs)增殖和分化的影响。方法体外分离培养hDPSCs,分别用不同浓度LPS(0,0.1,1,10μg/mL)和TNF-α(0,1,10,100 ng/mL)培养细胞。培养24,48,72 h,应用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测hDPSCs增殖活性变化;培养7,14,21 d应用茜素红(AR)染色试剂盒和5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸盐(BCIP)/氯化硝基四氮唑蓝(NBT)碱性磷酸酯酶(ALP)显色试剂盒检测hDPSCs肉眼观AR染色变化、钙结节定量、ALP染色和ALP活性等成骨分化指标。结果①CCK-8实验显示1,10,100 ng/mL TNF-α作用于hDPSCs 24,48,72 h后细胞增殖活力降低(P<0.05)。AR成骨诱导染色结果显示培养7,14 d,TNF-α各浓度组肉眼观AR染色无明显差异;培养21 d,10 ng/mL和100 ng/mL TNF-α组矿化程度相比0 ng/mL组低(P<0.05)。ALP染色和ALP活性试剂盒分析显示诱导培养7,14,21 d后,相比0 ng/mL组,1 ng/mL,10 ng/mL和100 ng/mL TNF-α组ALP染色变浅,且ALP活性降低(P<0.05)。②CCK-8实验显示不同浓度LPS作用hDPSCs 24 h和48 h后细胞增殖活性没有明显差异,而1μg/mL和10μg/mL组LPS作用hDPSCs 72 h后OD_(450)值大于0μg/mL组(P<0.05)。ALP成骨诱导染色显示培养7,14,21 d,不同浓度LPS作用后ALP染色和ALP活性变化不明显。AR成骨诱导染色显示培养7 d,LPS各浓度组的矿化程度不明显;10μg/mL LPS培养14,21 d矿化程度较0μg/mL低(P<0.05)。结论LPS对hDPSCs成骨分化的影响取决于LPS浓度和作用时间,高浓度LPS促进hDPSCs增殖。TNF-α抑制hDPSCs的增殖和成骨分化。

虾夷扇贝脂多糖诱导的肿瘤坏死因子LITAF基因的克隆及表达分析

脂多糖诱导的肿瘤坏死因子(Lipopolysaccharide-induced TNF-alpha factor,LITAF)是一类重要的炎症细胞因子,在先天性免疫系统中发挥重要的介质作用。文章根据虾夷扇贝LITAF基因EST序列,应用RACE技术克隆了虾夷扇贝LITAF全长cDNA,对序列及编码的氨基酸进行生物信息学分析。结果显示,该基因cDNA全长1 551 bp,其5′非编码区包含76 bp,3′非编码区包含1 001 bp;开放阅读框(ORF)为474 bp,编码157个氨基酸,氨基酸序列中存在一个保守的LITAF结构域;理论分子量16.99 kDa,等电点为6.24。LITAF基因序列为3 698 bp,由3个外显子和两个内含子组成。利用实时荧光定量PCR技术分析LITAF在虾夷扇贝不同组织、不同胚胎发育阶段以及鳗弧菌(Vibrio anguillarum)刺激后各时间段的表达情况。结果表明:LITAF基因在所检测的6个成体组织中均有表达,其中肾脏的表达量最高;胚胎发育的7个时期中,担轮幼体时期表达量最高;菌刺激36 h实验组与对照组的表达量差异大。LITAF基因是LITAF家族的一员,推测LITAF基因参与虾夷扇贝的先天性免疫反应。

脂多糖、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β对鼠肺微血管内皮细胞水通道蛋白-1表达的影响

目的 通过观察脂多糖 (LPS)、肿瘤坏死因子 α(TNF- α)、白细胞介素 1β(IL- 1β)对鼠肺微血管内皮细胞水通道蛋白 1(AQP- 1)表达的影响 ,为研究急性肺损伤时肺水异常代谢的机制提供实验依据。方法 在体外培养大鼠肺微血管内皮细胞 ,分为LPS组、TNF α组、IL- 1β组和对照组 ,前三组分别给予LPS 10 0ng/mL、TNF -α 10 0 0U/mL、IL -1β10 0 0U/mL刺激 4h ,应用半定量RT- PCR法以及免疫细胞化学染色法检测AQP- 1的表达。结果 刺激组AQP -1的表达显著低于对照组 (P <0 . 0 1)。结论 LPS、TNF -α、IL- 1β刺激下AQP- 1表达下降 ,提示AQP -1在急性肺损伤时可能与肺水代谢异常有关。

细菌脂多糖诱导人外周血单核细胞肿瘤坏死因子α的合成及核因子-κB的活化

为研究细菌脂多糖对人外周血单核细胞肿瘤坏死因子α合成和核因子 κB活化的影响 ,采用密度梯度离心法分离人外周血单核细胞 ,经细菌脂多糖刺激后 ,应用酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子α水平随刺激剂量和时间的变化 ,应用免疫细胞化学方法观察核因子 κB在单核细胞的激活随刺激时间的变化。发现核因子 κB在接受刺激 15min～ 1h之间 ,随刺激时间的延长逐渐从胞质向胞核转移 ,1h达高峰。细菌脂多糖呈浓度依赖性 (1～ 10 0 0 μg L)诱导肿瘤坏死因子α合成 ,肿瘤坏死因子α在刺激后 1h出现 ,6h达到高峰 ,其合成出现在核因子 κB的活化后。以上提示细菌脂多糖通过激活单核细胞内核因子

肿瘤坏死因子和细菌脂多糖对荷瘤小鼠的联合毒性作用

TNF和LPS对机体都具有毒性,尤其对荷瘤宿主毒性更强。在S_(180)肉瘤接种后第10 d动物静脉输注5μg TNF或25 μg LPS并未致使荷瘤小鼠死亡,但5μg LPS和0.5 μg TNF联合运用导致了80％荷瘤小鼠死亡。这种联合毒性对LPS剂量有较严格依赖性,当LPS减少到1 μg后,联合致死率锐减到14％。而TNF减少到0.1 μg后,动物死亡率仍高达50％。提示TNF在协同致死毒性中起到致敏机体,增加宿主对LPS毒性敏感性的作用。消炎痛处理可以部分阻断这种联合致死作用,说明这种联合致死毒性是部分通过前列腺素介导的。

体外培养人肠上皮细胞株接受脂多糖联合热打击后白细胞介素6、肿瘤坏死因子a的释放

背景:对于肠上皮细胞遭受高热和肠道细菌以及由细菌产生的内毒素等多重打击后经历了怎样的分子生物学变化,一直缺乏切实、可靠实验依据。目的:观察脂多糖联合热打击对人肠上皮细胞损伤及炎症因子白细胞介素6、肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子a释放的影响。方法:体外培养人肠上皮细胞株(SW 480),将3×105细胞种入实验用培养皿。实验分组为:对照组(37℃),热打击组(43℃2 h),脂多糖刺激组(1 mg/L脂多糖6 h),热打击联合脂多糖刺激组(43℃+脂多糖)。采用WST-1法观察细胞毒效应和细胞存活率;同时采用ELISA法观察各组炎症因子白细胞介素6和肿瘤坏死因子a水平。结果与结论:与对照组相比,热打击组具有细胞毒效应,其细胞活率明显下降,细胞炎症因子白细胞介素6和肿瘤坏死因子a水平也有所增高。脂多糖组单独作用也具有细胞毒效应,细胞活力、细胞增殖率也明显下降,同时白细胞介素6和肿瘤坏死因子a水平明显升高。而热打击和脂多糖联合打击后,可观察到两者的协同作用。结果说明,热打击和脂多糖单独作用均可引起细胞损伤,增加炎症因子白细胞介素6和肿瘤坏死因子a表达,并且二者之间存在协同效应。实验结果为理解重症中暑病理过程中,肠道功能障碍、肠道细菌和内毒素移位进而引发多脏器功能衰竭的病理机制提供了客观的实验依据。

烫伤大鼠肿瘤坏死因子与脂多糖结合蛋白的关系及其意义

采用大鼠３５％体表面积Ⅲ度烫伤模型，探讨严重烫伤后肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）与脂多糖结合蛋白（ＬＢＰ）的关系及其意义。实验动物随机分为正常对照组（ｎ＝８）、烫伤组（ｎ＝２４）。分别检测血浆ＴＮＦ－α含量、组织ＴＮＦ－α及脂多糖结合蛋白（ＬＢＰ）ｍＲＮＡ表达水平。结果显示，烫伤后血浆ＴＮＦ－α水平迅速升高，２ｈ达高峰，８ｈ下降；组织ＴＮＦ－α与ＬＢＰｍＲＮＡ表达量较伤前显著升高，８ｈ达高峰，２４ｈ下降（Ｐ＜０．０５～０．０１）。相关分析显示：烫伤后血浆ＴＮＦ－α含量与肺、肝、肠、肾等组织ＬＢＰ表达水平均无显著相关性（ｒ＝０．２１３～０．３８４，Ｐ＞０．０５），但组织ＴＮＦ－αｍＲＮＡ与ＬＢＰｍＲＮＡ表达均呈高度正相关（ｒ＝０．７６３～０．９３４，Ｐ＜０．０１）。提示局部组织ＴＮＦ－α可能是刺激机体ＬＢＰｍＲＮＡ表达的重要因素之一，二者相互作用在创伤后组织损伤中可能具有重要意义。

人参皂甙对脂多糖诱导小鼠肺泡巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子的作用及机制探讨

目的 :研究人参皂甙Rg1和Rb1对脂多糖 (LPS)诱导小鼠肺泡巨噬细胞 (AM )过度分泌肿瘤坏死因子(TNF α)的影响 ,并探讨人参皂甙的作用机制。方法 :体外培养小鼠AM ,分为对照组、LPS组、Rg1+LPS组、Rg1组和Rb1+LPS组、Rb1组。分别收集培养细胞及上清液 ,测定上清TNF α水平、上清LPS水平以及细胞中I κB表达情况。结果 :LPS可使AM分泌大量TNF α(P <0 .0 1) ,并使I κB表达明显减少 (P <0 .0 1)。Rg1+LPS组与LPS组相比 ,上清TNF α水平显著下降 (P <0 .0 1) ,细胞内I κB表达明显增加 (P <0 .0 1)。Rg1+LPS组上清游离LPS水平明显高于LPS组 (P <0 .0 5 )。Rb1的作用结果与Rg1相似。 结论 :人参皂甙Rg1和Rb1在体外能抑制AM过量分泌TNF α ,其可能作用机制为通过阻断LPS与AM膜的结合 ,抑制LPS诱导的细胞内I κB的低表达 ,从而使TNF α的分泌水平下降。

脂多糖诱导大鼠心肌细胞肿瘤坏死因子-α表达时活性氧调控的作用

目的探讨在脂多糖(LPS)诱导大鼠心肌细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达过程中活性氧(ROS)的作用及其信号分子机制。方法以体外培养的新生SD(Sprague-Dawley)大鼠心肌细胞为实验模型,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测TNF-αmRNA和蛋白表达水平;细胞内ROS水平采用ROS敏感的荧光探针二氯荧光素二乙酸(DCF-DA)测定。采用蛋白免疫印迹法测定心肌细胞内丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)亚型p38MAPK的磷酸化水平来反映其活性。结果(1)LPS组心肌细胞TNF-αmRNA和蛋白表达水平分别为(0·29±0·07)和(83·6±14·5)pg/mL,与对照组[(0·07±0·02)、(22·1±7·1)pg/mL]比较差异均有非常显著性意义(P<0·01)。在抗氧化剂氮乙酰半胱氨酸(NAC)干预后,TNF-αmRNA水平(0·13±0·03)和蛋白含量(39·1±10·2)pg/mL与LPS组比较差异均有非常显著意义(P<0·01)。(2)LPS组心肌细胞二氯荧光素(DCF)荧光强度为83±15,与对照组比较(34±9)差异有非常显著意义(P<0·01)。在NAC干预后,DCF荧光强度(19±4)与LPS组比较明显降低,差异有非常显著性意义(P<0·01)。(3)LPS组心肌细胞p38MAPK相对活性为(0·34±0·07),与对照组(0·18±0·05)比较差异有非常显著意义(P<0·01)。NAC干预组p38MAPK活性明显降低(0·24±0·03),与LPS组比较差异有非常显著意义(P<0·01);p38MAPK抑制剂预处理组TNF-α蛋白含量为(46·8±11·6)pg/mL,与LPS组(85·5±22·4)pg/mL比较差异有非常显著意义(P<0·01)。结论LPS可上调心肌细胞内ROS生成,ROS介导的信号通路至少部分参与了LPS诱导TNF-α表达的调控过程,p38MAPK可能是该信号通路的重要下游分子之一。

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对脂多糖致大鼠急性肺损伤的保护作用

目的:探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhTNFR:Fc)对脂多糖(LPS)致大鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。方法:建立大鼠急性肺损伤模型,随机分为对照组、rhTNFR:Fc组、LPS组和rhTNFR:Fc+LPS组。给药后记录各组大鼠死亡情况,测定肺组织湿重/干重比,HE染色观察肺组织病理学改变,检测血清TNF-α含量及其生物活性。结果:LPS注射后大鼠死亡率及肺湿重/干重比显著高于对照组(P<0.05),HE染色可见大鼠肺间质充血、水肿,大量炎性细胞浸润,血清TNF-α含量及生物活性增高;rhTNFR:Fc+LPS组大鼠死亡率降低,肺组织病理损伤明显减轻,血清TNF-α生物活性显著低于LPS组(P<0.05)。结论:rhTNFR:Fc通过中和TNF-α,降低TNF-α生物活性,有效减轻LPS引起的大鼠急性肺损伤。

脂多糖通过MAPK通路影响星形胶质细胞的谷胱苷肽和肿瘤坏死因子生成

目的研究脂多糖(LPS)对原代培养的星形胶质细胞(AC)代谢的影响及其可能机制。方法原代培养AC,予以LPS作用30min、24、48和72h后,观察AC的生存率、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、谷胱苷肽(GSH)和谷胱苷肽过氧化物酶(GPx)含量的变化,Western blot检测AC磷酸化MAPK家族信号蛋白P-p38的表达,观察MAPK通路抑制剂对TNF-α分泌的影响。结果低剂量LPS促进AC增殖,高剂量抑制。LPS(10μg/ml)作用72h后细胞内GPx活性降低,GSH含量下降。TNF-α的含量随LPS作用时间延长而升高,48h后与对照组相比有显著性差异,P-p38蛋白高峰出现在24h,随后下降。MAPK通路抑制剂可阻断TNF-α的升高。结论LPS激活的AC下调GSH的表达,增加TNF-α的分泌,其可能的分子机制是激活MAPK通路。

B16F10黑素瘤细胞培养上清液对脂多糖刺激小鼠腹腔巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α和一氧化氮的影响

目的探讨B16F10黑素瘤细胞培养上清液对脂多糖（LPS）刺激小鼠腹腔巨噬细胞释放肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和一氧化氮（NO）的影响。方法体外培养同基因小鼠腹腔巨噬细胞，分为实验组和空白对照组。实验组加入B16F10黑素瘤细胞培养上清液，空白对照组加入RPMI1640完全培养基，分别用LPS刺激后继续培养24h，采用免疫细胞化学染色法及L929细胞抑制实验[四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法]检测巨噬细胞TNF-α的表达及活性，Griess法检测NO的含量。结果实验组TNF-α阳性表达较空白对照组明显减少，TNF-α活性较空白对照组明显降低[吸光度（A值）：0．746±0．049比0．387±0．030，P〈0．01]；巨噬细胞释放NO的水平明显低于空白对照组（μmol／L：4．830±1．384比11．455±0．175，P〈0．01）。结论B16F10黑素瘤细胞培养上清液对LPS诱导的同基因小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α、NO具有抑制作用。

脂多糖对BV-2细胞的形态及肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的探讨脂多糖对BV-2细胞的形态及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。方法 DMEM高糖培养基中培养的BV-2细胞平均分为空白对照组与脂多糖处理组。脂多糖处理组BV-2细胞采用含100ng/ml脂多糖的培养基培养24 h;空白对照组用PBS替代脂多糖。采用免疫组化染色法观察BV-2细胞的形态及TNF-α蛋白的表达,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测BV-2细胞培养上清液中TNF-α的浓度。结果空白对照组BV-2细胞形态呈上皮细胞样,每个细胞有2~3个突起,突起较细长,细胞核较小。脂多糖处理组BV-2细胞多数聚集成团,大部分胞体肥大、饱满,细胞核大而圆,核仁明显,胞体突起短小,形态均具有小胶质细胞激活后形态特征。BV-2细胞中TNF-α蛋白的阳性表达均主要在胞浆中,为棕黄色颗粒。空白对照组BV-2细胞TNF-α蛋白阳性表达产物的OD值（5.46±0.87）明显低于脂多糖处理组（53.01±5.72）,差异有统计学意义（t=26.01,P〈0.01）。空白对照组BV-2细胞培养上清液中TNF-α浓度为（218.13±24.10）pg/ml,脂多糖处理组BV-2细胞培养上清液中TNF-α浓度为（1098.69±72.18）pg/ml,两组间比较差异有统计学意义（t=23.14,P〈0.01）。结论脂多糖可显著诱导BV-2细胞系TNF-α的表达,同时可显著改变BV-2细胞的形态。

谷氨酰胺对脂多糖血症大鼠热休克蛋白70和肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:观察谷氨酰胺对脂多糖血症大鼠热休克蛋白70和肿瘤坏死因子-α的影响。方法:将大鼠分为脂多糖组(LPS)、谷氨酰胺组(Gln)和对照组(C)。各组动物均在给予LPS前(对照组在给予生理盐水)和后2、4、6h采血。用放射免疫法测定血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。于术后6h处死,取肺、肝、肠组织,采用SABC方法,免疫组织化学染色进行HSP70检测,并HE染色,观察组织变化。结果:注射LPS后2h,LPS组血浆TNF-α表达显著升高(P<0·01),Gln可显著抑制其升高(P<0·01)。而注射LPS后4、6h,两组血浆TNF-α浓度没有明显差异。LPS组肺、肝、肠组织的HSP70灰度值分别为(107·94±10·96)、(120·04±5·73)和(123·31±14·81)。Gln组的HSP70灰度值显著降低,分别为(89·71±9·64)、(89·38±12·03)和(107·61±14·02)(均P<0·05)。病理学观察显示,Gln组肺、肝、肠组织损伤程度比LPS组轻。结论:谷氨酰胺可提高热休克蛋白70的表达,对脂多糖血症大鼠有防治作用。

非诺贝特对脂多糖诱导的心肌细胞肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的 探讨过氧化体增殖物激活型受体α(PPARα)激活剂对新生大鼠心肌细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和PPARα自身表达水平的影响。方法 体外原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞,给予不同浓度的非诺贝特(PPARα激活剂)刺激,并辅加脂多糖诱导TNF-α表达。采用半定量逆转录-聚合酶链反应法检测TNF-α和PPARαmRNA的表达,酶联免疫吸附测定法检测TNF-α的蛋白水平,Westem印迹法检测PPARα蛋白表达。结果 与对照组相比,非诺贝特组的TNF-αmRNA及蛋白表达水平明显降低,且呈剂量依赖性。而相应的PPARα mR-NA及蛋白水平则无显著变化。结论 PPARα激活剂可显著抑制新生大鼠心肌细胞中脂多糖诱导的TNF-α表达,PPARα活化后发挥抗炎作用,但PPARα本身的表达水平可能并没有改变。

脂多糖结合蛋白联合白介素-6、肿瘤坏死因子-α水平检测对产褥期感染早期诊断价值

目的研究脂多糖结合蛋白(LBP)联合白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平检测在产褥期感染早期的诊断价值。方法选取2016年1月至2018年5月产褥期感染者86例,为感染组(放弃治疗2例、生存84例);正常分娩产褥期未感染者90例,为未感染组;健康体检女性44例,为对照组。疑似感染时(T0)、感染24h(T1)、感染48h(T2)、感染控制时(T3)测定传统感染指标(白细胞(WBC)、降钙素原(PCT))、LBP、IL-6、TNF-α水平及未感染组、对照组对象指标水平。绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)。比较曲线下面积(AUC)大小,明确诊断灵敏度、特异性。结果T0时,感染组WBC、PCT、LBP、IL-6、TNF-α水平均高于未感染组、对照组,差异有统计学意义(P<0.05);未感染组高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。T1、T2、T3时,感染组WBC、PCT、LBP、IL-6、TNF-α水平先升高、后下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。T0、T1、T2、T3时,产褥感染放弃治疗者WBC、PCT、LBP、IL-6、TNF-α水平呈不断升高趋势,产褥感染生存者呈先升高、后下降趋势,差异均有统计学意义(P<0.05);且各个时刻,放弃治疗者水平均高于生存者,差异均有统计学意义(P<0.05)。LBP、IL-6、TNF-α和LBP联合IL-6、TNF-α曲线下面积分别为0.790、0.580、0.714和0.829,AUC均>0.50。LBP联合IL-6、TNF-α水平检测早期诊断产褥期感染敏感度81.40%、特异性94.44%、阳性预测值93.33%、阴性预测值84.16%,均高于LBP的74.42%、74.44%、73.56%、75.28%,IL-6的60.47%、65.56%、62.65%、63.44%,TNF-α的66.28%、66.67%、65.52%、67.42%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论LBP联合IL-6、TNF-α水平动态检测,利于提高产褥期感染早期诊断率及早期诊断灵敏度与特异性,从而为临床提供更加有效的参考信息及依据。

β淀粉样蛋白诱导大鼠小胶质细胞脂多糖受体CD14和肿瘤坏死因子-α mRNA的表达

目的:研究不同浓度的β淀粉样蛋白(Aβ1-42)诱导大鼠小胶质细胞脂多糖受体CD14和肿瘤坏死因子-αmRNA表达的变化。方法:小胶质细胞株复苏培养后分为2组:Aβ1-42组和抗CD14加Aβ1-42组。抗CD14加Aβ1-42组使用抗CD14抗体拮抗CD14的表达,再分别用不同浓度的Aβ1-42(0、62.5nmol/L、125nmol/L、250nmol/L)进行干预,2组均在Aβ1-42干预2h后用RT-PCR法检测CD14及TNF-αmRNA表达的量。结果:不同浓度的Aβ1-42干预小胶质细胞2h后,62.5nmol/L与0nmol/LAβ1-42组CD14mRNA的表达相比较,差异无统计学意义。当Aβ1-42浓度为125nmol/L和250nmol/L时,CD14mRNA的表达逐渐增加(P<0.05)。使用CD14抗体后,抗CD14加Aβ1-42组中CD14mRNA的表达与Aβ1-42组比降低(P<0.05)。Aβ1-42组TNF-αmRNA的表达随Aβ1-42的浓度增加而增加(P<0.05),与Aβ1-42组相比,抗CD14加Aβ1-42组中TNF-αmRNA的表达在Aβ1-42浓度为125nmol/L开始明显受到抑制(P<0.05)。结论:Aβ1-42诱导的小胶质细胞可通过脂多糖受体CD14使TNF-αmRNA的表达增加,且与Aβ1-42的作用浓度呈正相关。

脂多糖干预后成牙本质细胞系MDPC-23中肿瘤坏死因子受体相关因子6基因表达的研究

目的观察不同浓度脂多糖(LPS)干预后,成牙本质细胞中肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)基因表达的情况。方法体外培养小鼠永生化成牙本质细胞系MDPC-23,采用对照组不干预(即0μg/ml组)、10μg/ml和20μg/mlLPS干预MDPC-23后,通过反转录聚合酶链反应法(RT-PCR)和计算机图像分析方法,观察其TRAF6基因的表达变化。结果TRAF6在小鼠成牙本质细胞系MDPC-23中呈阳性表达,当LPS干预后,TRAF6基因表达呈现上调趋势。结论本实验表明TRAF6参与调控LPS引发的成牙本质细胞炎症损伤过程中的细胞因子网络,推测TRAF6可能影响龋病的形成和发展过程。

人牙髓细胞受内毒素脂多糖、肿瘤坏死因子、复合树脂浸出液刺激后的MTT值研究

目的 :观察人牙髓细胞 (humandentalpulpcells,HDP)热休克模型及正常HDP受到LPS、TNF -α及复合树脂浸出液的细胞毒刺激后的MTT值。方法 :用LPS、TNF -α各三种浓度及 75 0ml/LDurafill复合树脂浸出液分别处理HDP及其热休克模型 ,72h后计算各组相对增殖率 (RGR)。结果 :热处理板与非热处理板相比RGR有显著差异 ;同一处理因素随浓度增加RGR有下降趋势 ,且在低浓度与高浓度之间有显著差异。结论 :在受到LPS、TNF -α及复合树脂浸出液的细胞毒作用后 ,经过热休克处理的HDP的MTT值显著高于未经热处理的HDP ,提示热处理可能提高HDP的抗细胞毒能力。