柚皮苷通过抑制Kupffer细胞的焦亡改善脂多糖诱导的肝损伤

目的探究柚皮苷(naringin,Nar)在脂多糖(LPS)诱导的肝损伤中的作用及相关作用机制。方法60只C47BL/6野生型雄性小鼠随机分为4组(每组15只):对照组(Control),柚皮苷组(Nar),脂多糖模型组(lipopolysaccharide,LPS)与柚皮苷组处理的LPS模型组(Nar+LPS),其中Nar组与Nar+LPS组小鼠予以100 mg·kg^(-1)·d^(-1)的柚皮苷持续灌胃10天,而LPS与LPS+Nar组小鼠经腹注射5 mg·kg-1LPS进行肝损伤造模,6 h后脱颈处死各组小鼠;试剂盒检测各组小鼠外周血中谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspertate aminotransferase,AST)含量,ELISA检测炎症因子白介素-6(interlukin-6,IL-6)、白介素-1β(interlukin-1β,IL-1β)与肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平;取小鼠肝脏组织,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)与脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated nick end labeling,TUNEL)观察各组小鼠肝组织病理改变与细胞焦亡水平,反转录酶-聚合酶链锁反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测肝组织中IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA表达,试剂盒检测氧化应激标志物丙二醛(malondialdehyde,MDA)与谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平;体外培养小鼠Kupffer细胞,CCK-8筛选LPS与Nar的最佳作用浓度后,将细胞同样分为Control组、Nar组、LPS组与Nar+LPS组;ELSIA检测各组细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α的表达;试剂盒检测细胞中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、MDA与GSH水平;cleaved Caspase-1/TUNEL染色检测各组细胞的焦亡情况,Western blot检测细胞中焦亡相关蛋白,核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotidebinding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1裂解片段(cleaved-cysteinyl aspartate specific proteinase-1,cleaved Caspase-1)、gasdermin D的N端寡聚化(Gasdermin D N-terminal oligomerization,GSDMD-N)、IL-1β的表达水平和核因子-κB(nuclear factor kappaB,NF-κB)的磷酸化水平(p-NF-κB/NF-κB)。结果与Control组相比,LPS组与Nar+LPS组的血清中ALT、AST与IL-6、IL-1β、TNF-α水平均显著增加(P<0.05或P<0.01),肝组织病理损伤加重,肝细胞焦亡率升高,细胞中IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNAs水平与MDA的含量均显著升高(P<0.05),而GSH明显降低(P<0.05),Nar组无明显改变(P>0.05),但较LPS组相比,Nar+LPS组中除肝组织中GSH含量明显升高外,上述其他检测指标均明显降低(P<0.05);体外细胞实验中筛选出100 ng·mL-1的LPS与200μmol·L-1的Nar为最佳作用浓度;与Control组Kupffer细胞相比,LPS组与LPS+Nar组的IL-6、IL-1β、TNF-α与MDA、LDH含量和细胞焦亡水平及焦亡相关蛋白NLRP3、cleaved Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β的表达均明显升高(P<0.05),NF-κB的磷酸化水平(p-NF-κB/NF-κB)亦显著升高,而GSH含量明显降低(P<0.05),但与LPS组相比,LPS+Nar组除GSH明显升高外,其他检测指标均显著降低(P<0.05)。结论柚皮苷可在体内外降低炎症反应与氧化应激来减轻LPS诱导的肝损伤与功能障碍,这可能与其能通过NF-κB途径抑制Kupffer细胞焦亡的机制相关。

N-乙酰半胱氨酸抗脂多糖诱导的肺动脉损伤的研究

目的 :探讨N 乙酰半胱氨酸 (N acetylcysteine,NAC)减轻脂多糖 (lipopolysaccharide ,LPS)所致的肺损伤及其机制。方法 :应用血管环张力检测技术和扫描电镜方法 ,观察了NAC对LPS引起的肺动脉反应性及肺动脉内皮细胞超微结构变化的影响 ;并测定了肺动脉组织中丙二醛 (malondialhyde ,MDA)、超氧化物歧化酶 (superoxidedismutes ,SOD)及一氧化氮 (nitricoxide,NO)的变化。结果 :LPS(4μg/ml,7h)可降低肺动脉对乙酰胆碱 (ACh)介导的内皮依赖性舒张反应 ,NAC(0 .5mmol/L)可逆转此种反应降低而对正常肺动脉舒缩反应无明显影响 ;NAC可改善LPS引起的肺动脉内皮细胞超微结构损伤并可逆转LPS引起的肺动脉组织中MDA、NO含量增高和SOD活性降低。结论 :NAC可通过抗氧化作用保护肺动脉内皮细胞并增强肺动脉内皮依赖性舒张反应 ,提示此可能是其发挥抗肺动脉压增高从而改善内毒素所致肺损伤的机制之一。

脂氧素对脂多糖诱导的巨噬细胞游离钙浓度变化及活性氧的影响

近年来越来越多的研究资料表明炎症反应的及时消退是炎症治疗的重要环节.脂氧素对多种炎症细胞和炎症相关基因有显著的负性调节作用,是体内重要的内源性脂质促炎症消退介质.细胞内游离钙离子浓度变化为巨噬细胞活化的重要第二信使.但脂氧素对巨噬细胞内游离钙浓度变化了解较少.为此,本研究采用细胞内钙离子特异性荧光探针Fluo3-AM和活性氧特异性荧光探针DCFH-DA同时标记小鼠巨噬细胞,用激光共聚焦显微镜同时动态观察脂多糖引起巨噬细胞胞内游离钙浓度和活性氧变化及脂氧素的影响作用.

甲强龙联合脂多糖诱导成年犬股骨头动-静脉系统的组织病理学特点

背景:糖皮质激素类的诸多作用机制对于与骨坏死的病理过程的启动有密切关系,然而对于激素性骨坏死时股骨头动、静脉血管在不同时段发生的病理形态学变化的区别仍缺少相关记述。目的:观察大剂量皮质激素联合脂多糖诱导下的成年犬在不同时段其动脉和静脉系统的组织病理形态学变化,以讨论这种变化对骨坏死发生和发展造成的可能影响。方法:将健康成年犬15只随机分为4,8周观察组及对照组,每组5只(10髋)。4,8周观察组行静脉注射脂多糖10 g/kg,于24 h后肌注甲强龙20 mg/kg,连续注射3次,每次间隔24 h,干预后4,8周麻醉处死,取股骨头行双侧病理切片染色,对骨内及支持带动静脉血管缩窄度进行分析测量。结果与结论:诱导4,8周后,犬骨内静脉的结构形态发生明显变化,表现为正常型静脉结构显著减少,而中度狭窄型、阻塞塌陷型静脉结构占比显著升高。在骨内动脉系统,8周观察组相对其他2组骨内区域动脉血管内膜相对增厚,血管缩窄程度高(P<0.05)。结果证实,在皮质激素联合脂多糖诱导下,成年犬股骨头动脉和静脉系统出现病理变化的时间节点存在差异。静脉系统在药物诱导早期(4周)最先呈现出病理变化,而动脉系统病理变化出现在药物诱导8周后。

虾夷扇贝脂多糖诱导的肿瘤坏死因子LITAF基因的克隆及表达分析

脂多糖诱导的肿瘤坏死因子(Lipopolysaccharide-induced TNF-alpha factor,LITAF)是一类重要的炎症细胞因子,在先天性免疫系统中发挥重要的介质作用。文章根据虾夷扇贝LITAF基因EST序列,应用RACE技术克隆了虾夷扇贝LITAF全长cDNA,对序列及编码的氨基酸进行生物信息学分析。结果显示,该基因cDNA全长1 551 bp,其5′非编码区包含76 bp,3′非编码区包含1 001 bp;开放阅读框(ORF)为474 bp,编码157个氨基酸,氨基酸序列中存在一个保守的LITAF结构域;理论分子量16.99 kDa,等电点为6.24。LITAF基因序列为3 698 bp,由3个外显子和两个内含子组成。利用实时荧光定量PCR技术分析LITAF在虾夷扇贝不同组织、不同胚胎发育阶段以及鳗弧菌(Vibrio anguillarum)刺激后各时间段的表达情况。结果表明:LITAF基因在所检测的6个成体组织中均有表达,其中肾脏的表达量最高;胚胎发育的7个时期中,担轮幼体时期表达量最高;菌刺激36 h实验组与对照组的表达量差异大。LITAF基因是LITAF家族的一员,推测LITAF基因参与虾夷扇贝的先天性免疫反应。

血必净注射液与活化蛋白C对脂多糖诱导大鼠单核细胞组织因子干预效果的比较研究

目的 比较血必净注射液与活化蛋白C(APC)对脂多糖(LPS)刺激大鼠单核细胞表达组织因子(TF)及蛋白酶激活受体1(PAR-1)的影响.方法采用黏附法分离正常大鼠外周血单核细胞后,按随机数字表法分为正常对照组、LPS刺激组、LPS+APC组和LPS+血必净组.分别于LPS刺激后12、24、48、72 h收集细胞,用流式细胞仪检测PAR-1表达的荧光强度;同时留取细胞培养上清液,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测TF、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果 LPS刺激组24 h后各时间点大鼠单核细胞PAR-1的荧光强度较正常对照组显著升高,各时间点上清液中TF、IL-6、TNF-α水平也明显高于正常对照组(P均<0.01).与LPS刺激组比较,LPS+APC组和LPS+血必净组PAR-1、TF、IL-6、TNF-α水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);且LPS+血必净组24 h、48 h时PAR-1、TF、TNF-α水平均显著低于LPS+APC组(P<0.05或P<0.01).结论血必净注射液和APC均可显著降低LPS刺激大鼠单核细胞PAR-1表达,减少TF、IL-6、TNF-α分泌,血必净的作用较APC明显.

脂氧素抑制脂多糖诱导的单核巨噬细胞向树突状样细胞分化

目的:脂氧素是天然免疫/炎症反应中的重要"刹车信号",具有促进炎症及时缓解的独特功能;但其对特异性免疫应答有何调节作用尚缺乏直接证据,为此,本研究观察了脂氧素对脂多糖诱导的单核巨噬细胞向树突状样细胞分化过程的影响.

菲律宾蛤仔脂多糖诱导的肿瘤坏死因子α VpLITAF基因克隆及其对微生物侵染的应答研究

脂多糖诱导的肿瘤坏死因子α(LITAF)是一种重要的转录因子,在调节LPS诱导炎症因子TNF-α的表达过程中发挥重要作用。采用表达序列标签(expressed sequence tags,ESTs)结合cDNA末端快速克隆技术(rapid amplification of cDNA Ends,RACE),获得了菲律宾蛤仔LITAF基因cDNA全长(VpLITAF),并利用实时荧光定量PCR技术研究VpLITAF的组织分布以及鳗弧菌、藤黄微球菌刺激下的时序表达特征。VpLITAF基因序列包含393bp的开放阅读框,编码130个氨基酸,预测分子量为14.39kD,理论等电点7.47。序列分析表明,VpLITAF具有高度保守的LITAF结构域,与其它贝类LITAF具有高度同源性,并在系统进化树中与海洋软体动物LITAF聚为一簇。VpLITAF基因主要表达于蛤仔肝胰腺,肌肉中的表达量则相对较低。鳗弧菌和藤黄微球菌刺激在某些时段可显著诱导VpLITAF基因的表达水平,最高可达对照组表达量的3.5倍,且鳗弧菌对VpLITAF基因表达的诱导作用明显强于藤黄微球菌。以上结果表明,VpLITAF在菲律宾蛤仔的固有免疫反应中发挥着重要作用。

TPCA-1对脂多糖诱导的角膜基质成纤维细胞作用及其机制的研究

通过研究 TPCA-1影响 LPS 刺激角膜基质成纤维细胞分泌炎性细胞因子（IL-1，TNF-α，IL-6）和趋化因子（IL-8）以及细胞表面 ICAM-1中的作用，旨在观察 TPCA-1对脂多糖诱导的角膜基质细胞分泌炎性细胞因子、趋化因子、细胞间黏附因子抑制作用及其信号转导途径，为临床治疗角膜溃疡提供有益的线索。1．1人角膜基质细胞的培养及鉴定组织来源于角膜移植术后剩余角膜材料，供体为健康成年人。采用消化培养法，用小鼠抗人波形蛋白及角蛋白单克隆抗体进行细胞鉴定。

维甲酸对脂多糖诱导急性肺损伤防治作用的实验研究

急性肺损伤（ALI）是指机体遭受严重感染、创伤、辐射、休克等以后，出现的以弥漫性肺泡毛细血管膜损伤导致肺通透性增加、进而导致大量蛋白和炎症细胞因子渗出为病理特征的一种肺部炎症，是急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的早期阶段。以呼吸困难、难治性低氧血症和非心源性肺水肿为临床特征。

羧胺三唑对脂多糖诱导大鼠腹腔巨噬细胞iNOS蛋白的表达和NF-κB活化的影响

目的：本课题组前期的研究结果显示，羧胺三唑（CAI）在多种急性、亚急性和慢性炎症模型中均具有良好的抗炎作用。本研究以正常大鼠的腹腔巨噬细胞为研究对象，探讨可能具有潜在抗炎作用的抗肿瘤药物CAI对与多种炎症相关因子的体外调节作用。方法：收集正常大鼠的腹腔巨噬细胞，待细胞贴壁后，将一系列浓度的CAI与上述细胞共同孵育48小时后，利用MTT法测定CAI对正常大鼠腹腔巨噬细胞活力的影响。分别将5μm、10gm、20gm和40μm的CAI加入已经贴壁的巨噬细胞中，共同培养24小时，同时加入浓度为10μg／mL的脂多糖（LPS）以诱导上述细胞的活化。培养基上清中NO的含量和TNF-α的水平分别用硝酸还原法和TNF—αELISA检测试剂盒进行测定，用Westernblot法测定iNOS蛋白的表达和NF—κB活化情况。

利拉鲁肽对脂多糖诱导大鼠肺微血管内皮细胞PI3K/Akt信号通路的影响

目的:探究利拉鲁肽对脂多糖(LPS)诱导大鼠肺微血管内皮细胞PI3K/Akt信号通路的影响。方法:使用LPS诱导培养成功的大鼠肺微血管内皮细胞为实验对象,将其差速贴壁实施纯化,使用不同浓度的利拉鲁肽(0、1、10、100、1000 nmol/L)对细胞进行干预,MTT法绘制细胞生长曲线,分析不同浓度利拉鲁肽对细胞生长影响;采用Western blot法分别检测正常细胞组、利拉鲁肽(100 nmol/L)及PI3K/Akt通路阻断剂(LY294002)对p-Akt、Akt蛋白表达的影响;采用Brdu荧光标记法及划痕实验检测利拉鲁肽对细胞增殖和迁移能力的影响。结果:①通过绘制细胞生长曲线发现,100 nmol/L利拉鲁肽为细胞最适生长浓度,优于其他组别(均P<0.05);②Western blot检测显示利拉鲁肽能够增强细胞p-Akt、Akt表达水平(均P<0.05),LY294002的加入能够降低p-Akt、Akt的表达(均P<0.05);③Brdu和划痕实验显示利拉鲁肽具有促进肺微血管内皮细胞增殖和迁移能力的作用(均P<0.05),而LY294002的加入能够降低上述细胞的增殖迁移能力(均P<0.05)。结论:利拉鲁肽对LPS诱导大鼠肺微血管内皮细胞的生物进程会产生显著影响,其机制可能与利拉鲁肽能够作用于PI3K/Akt信号通路有关。

脂多糖诱导牛肾细胞β-防御素-5mRNA表达的可能机制

β-防御素是可被炎性因子和细菌产物诱导产生的天然抗菌肽,对细菌、真菌、支原体、衣原体、螺旋体及病毒等微生物均有很强的杀伤活性[1].脂多糖（LPS）是革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分,是诱发炎症的主要致病因子,细菌在生长繁殖过程中和死亡后均可释放LPS,激发机体非特异性免疫[2,3].研究发现,β-防御素-5（BNBD5）在患子宫内膜炎的奶牛子宫内膜组织中表达显著升高,可能是LPS诱导机体免疫应答,并促进了机体BNBD5的表达.尚无证据表明,BNBD5是否通过TLR4/NF-κB信号通路表达.因此,我们有必要对LPS诱导细胞BNBD5表达的信号通路进行研究.为探索BNBD5表达的分子调控机制提供理论基础.

表皮生长因子受体对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的抑制作用及对炎症反应的影响

目的探讨表皮生长因子受体在脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的抑制作用及对炎症反应的影响。方法选择2014年6月至2016年7月进行实验的SD大鼠40只,取10只大鼠作为空白对照组,另取30只大鼠采用脂多糖诱导建立大鼠急性损伤模型。建模成功后随机数字法分为阳性对照组(n=10)、生理盐水组(n=10)和表皮生长因子受体组(n=10)。阳性对照组建模成功后不采取任何措施处理,生理盐水组在大鼠建模成功后注射0.5 ml/kg生理盐水,表皮生长因子受体组建模成功后注射0.5 mg/kg表皮生长因子受体抑制剂。采用酶联免疫吸附试验测定各组大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;取大鼠急性肺损伤组织进行病理HE染色,测定组织中过氧化物酶(MPO)含量、肺湿/干重比(W/D)。结果表皮生长因子受体组与空白对照组建模处理3 d后TNF-α及IL-6水平差异无统计学意义(P>0.05);表皮生长因子受体组TNF-α及IL-6水平均低于生理盐水组和阳性对照组(P<0.05);生理盐水组TNF-α及IL-6水平,均低于阳性对照组(P<0.05)。空白对照组未参与建模,肺部未见损伤,HE染色下正常;阳性对照组建模成功后未采取措施处理,肺部损伤明显,炎症反应严重;生理盐水组肺组织中损伤明显,存在肺气肿、肺泡塌陷等典型组织变化;表皮生长因子受体组大鼠肺部组织病理变化明显改善;表皮生长因子受体组MPO及W/D水平,均低于生理盐水组、阳性对照组(P<0.05);生理盐水组MPO及W/D水平,均低于阳性对照组(P<0.05)。结论脂多糖能诱导大鼠急性肺损伤,将表皮生长因子受体抑制剂用于大鼠急性肺损伤中有助于降低炎症反应,值得推广应用。

沙奎那韦对脂多糖诱导急性肺损伤大鼠PI3K-AKt-NF-κB信号通路的影响

目的:研究沙奎那韦(SQV)对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)大鼠的保护作用及其对PI3K-AKt-NF-κB信号通路的影响。方法:将36只雄性SD大鼠随机分为对照组(Control组)、LPS模型组(LPS组)、SQV处理的LPS模型组(LPS+SQV组),每组12只。LPS+SQV组大鼠在LPS造模前予以200 mg/kg·d-1的SQV连续5 d灌胃处理,Control组与LPS组大鼠用等体积的生理盐水灌胃处理,第5天LPS组和LPS+SQV组大鼠采用腹腔注射5 mg/kg的LPS制备ALI模型,造模12 h后腹腔注射120mg/kg戊巴比妥处死大鼠;苏木精—伊红(HE)染色观察各组肺组织病理变化,计算各组大鼠肺组织湿/干(W/D)比值,TUNEL染色对肺组织细胞凋亡水平进行测定,采用ELISA法检测每组大鼠支气管肺泡灌洗液中炎症因子:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)的表达量,Western blotting检测肺组织中PI3K-AKt-NF-κB信号通路相关蛋白IκBa的表达水平和PI3K、AKt、NF-κB p65蛋白的磷酸化水平。结果:与Control组相比,LPS组的大鼠肺组织病理学损伤加重,肺组织W/D比值升高(P<0.05),TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10含量和PI3K的磷酸化水平(p-PI3K/PI3K)、AKt的磷酸化水平(p-AKt/AKt)、NF-κB的磷酸化水平(p-NF-κB p65/NF-κB p65)均升高(P<0.05),而IκBa表达水平降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.01);与LPS组相比,LPS+SQV组的大鼠肺组织病理学损伤减轻,肺组织W/D比值下降(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.01),IL-10含量、IκBa表达均升高(P<0.05),而其他检测指标均降低(P<0.05)。结论:SQV通过抑制细胞凋亡和炎症反应对LPS诱导的大鼠ALI产生一定的保护作用,其机制可能与PI3K-AK-NF-κB信号通路有关。

脂多糖诱导滤泡树突状细胞分泌蛋白在结合上皮中快速丢失

滤泡树突状细胞分泌蛋白（follicular dendritic cell secreted protein，FDC—SP）的mRNA被发现在龈沟结合上皮特异性表达，且FDC—SP在多种与固有免疫密切相关的组织中呈高表达，推断FDC—SP在龈沟内宿主防御机制中发挥重要作用。基于此，本研究探讨FDC—SP在结合上皮中的表达和定位，并观察其在实验性炎症条件下的动态变化。

金银花提取物对脂多糖诱导H9c2心肌细胞的炎症、氧化损伤和凋亡的作用机制

本研究旨在探究金银花提取物对脂多糖诱导下H9c2心肌细胞炎症、氧化损伤和凋亡的作用机制。方法 使用H9c2心肌细胞作为研究对象,分为对照组、脂多糖诱导组和金银花提取物处理组。然后通过对炎症相关因子表达水平、氧化损伤标志物和凋亡相关因子表达水平的检测结果对细胞的炎症反应、氧化损伤和凋亡情况进行进一步的评估。结果 与脂多糖诱导组相比,金银花提取物处理组显示出明显的抑制炎症反应、减轻氧化损伤和凋亡的作用。金银花提取物处理组中炎症相关因子表达水平显著降低,氧化损伤标志物水平较低,并且凋亡相关因子表达水平明显减少。结论 金银花提取物对脂多糖诱导的H9c2心肌细胞具有抗炎、抗氧化和抗凋亡的作用。通过研究结果可以得出,金银花提取物可能成为预防和治疗心肌细胞炎症、氧化损伤以及凋亡相关疾病的潜在药物。

Caspase-12在D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导小鼠急性肝功能衰竭中的表达及作用

目的探讨Caspase-12在D-氨基半乳糖(D-Gal)/脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肝功能衰竭发生发展过程中表达水平的变化及Caspase-12介导的内质网应激肝细胞凋亡途径在急性肝功能衰竭中的作用。方法以D-Gal/LPS联合腹腔注射诱导小鼠急性肝功能衰竭建立实验模型,在不同时间点动态检测血清氨基转移酶水平和观察肝组织病理变化,评估肝细胞凋亡和肝坏死演变过程;应用琼脂糖凝胶电泳检测肝细胞DNA凋亡条带;用半定量逆转录聚合酶链反应检测肝组织中Caspase-12 mRNA表达水平;west- ern blot检测Caspase-12、Bip/GRP78蛋白表达。结果药物诱导5h时肝组织中典型凋亡细胞增多,血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)开始升高,Caspase-12 mRNA表达明显增加, Caspase-12蛋白量表达反而减少;7h镜下出现大量肝细胞凋亡和坏死,ALT、AST水平达高峰,分别为(2564±1384)U/L和(1198±497)U/L,正常对照组为(59±17)U/L和(135±12)U/L,Caspase- 12 mRNA表达仍增加,Caspase-12蛋白表达量继续降低;9h 肝细胞坏死明显,伴散在凋亡细胞,ALT、AST水平明显下降,Caspase-12 mRNA表达较7 h下降。Bip/GRP78蛋自表达从5 h开始,至7 h逐渐增加。结论D-Gal/LPS诱导小鼠急性肝功能衰竭早期Caspase-12 mRNA表达水平逐渐升高,后期(7-9 h)降低,与肝细胞凋亡发生的时相一致;Caspase-12蛋白酶因内质网应激而被大量活化,提示Caspase-12介导的内质网应激肝细胞凋亡参与炎症性急性肝功能衰竭的发生发展,是急性肝功能衰竭中肝细胞损伤的重要机制之一,提示早期干预Caspase-12表达及活化对急性肝功能衰竭可能具有保护作用。

TREM-1在脆弱类杆菌脂多糖诱导单核细胞炎症反应中的作用

脂多糖（LPS）与免疫细胞表面相应的受体结合后可引发一系列信号转导进而诱生大量炎性介质，导致全身炎症反应综合征（SIRS）或脓毒症。以往的研究多以大肠杆菌LPS为对象，对于临床厌氧菌感染中最重要的致病菌脆弱类杆菌（bacteroides fragilis，B．fragilis的LPS研究较少。髓系触发受体-1（TREM-1）是新近发现的表达于单核／巨噬细胞等髓系细胞表面的激活型受体，能在细菌或LPS等的刺激下触发髓系细胞产生大量炎性因子，从而在炎症反应的触发和放大过程中起重要作用。本文拟通过体外单核细胞炎症反应模型，观察TREM-1在转录及翻译水平的表达情况，以探讨其是否参与脆弱类杆菌LPS所致炎症反应。

异丙酚对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶及NF-κB表达的影响

一氧化氮合酶（NOS）在血管内皮细胞中主要有两种亚型：内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和诱生型一氧化氮合酶（iNOS），前者在生理状态下正常表达，后者则在炎性刺激等病理情况下被大量诱生。由iNOS所产生的过量NO可对血管内皮细胞造成损伤。NF-kB是一种与急性炎症密切相关的核转录因子，多种炎症介质如iNOS等基因的启动子和增强子均含有kB位点。前期研究证实异丙酚能减少脓毒症动物体内一氧化氮（NO）的产生，对内毒素（LPS）所致急性肺损伤具有保护作用。本研究拟观察异丙酚对人脐静脉内皮细胞eNOS、iNOS及NF-KB表达的影响，探讨异丙酚抗炎作用的机制。