脂氧合酶在前列腺癌中的作用研究进展

前列腺癌是中老年男性的常见病。研究表明脂氧合酶(LOX)途径在前列腺癌的发生、发展、侵袭和转移中起着重要作用,可作为前列腺癌防治的一个新靶点。LOX主要包括5-LOX、12-LOX及15-LOX-1、15-LOX-2,其中5-LOX与12-LOX对前列腺癌的发生发展、侵袭和转移具有促进作用;15-LOX-1具有促进前列腺癌作用,但15-LOX-1在二十二碳六烯酸(DHA)抗前列腺癌过程中发挥着关键作用;15-LOX-2具有抑制前列腺癌作用。本文对LOX在前列腺癌中作用及机制的研究作一综述,旨在为前列腺癌的防治研究提供参考。

脂氧素A4对Ⅱ型肺泡上皮细胞-间质转化的抑制作用及其机制

目的 探讨脂氧素A4(lipoxin A4, LXA4)对Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial typeⅡcell, ATⅡ)间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响及可能机制。方法 将A549细胞分为对照组、转化生长因子β1(transforming growth factor, TGF-β1)组、空质粒+TGF-β1组、pcDNA3.1-Nrf2+TGF-β1组及LXA4+TGF-β1组。TGF-β1组以5 ng/mL TGF-β1干预A549细胞48 h;空质粒+TGF-β1组和pcDNA3.1-Nrf2+TGF-β1组A549细胞先分别转染空质粒或Nrf2过表达质粒,再以5 ng/mL TGF-β1干预48 h;LXA4+TGF-β1组A549细胞先用100 nmol/L LXA4预处理6 h再给予5 ng/mL TGF-β1干预48 h。光镜观察细胞形态变化,免疫印迹及免疫荧光法检测上皮标志物E钙黏蛋白(E-cadherin)、间质标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)表达;免疫印迹法检测核因子红细胞2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2)蛋白水平。结果 与对照组相比,TGF-β1组光镜下可见部分A549细胞形态从鹅卵石状变成细长不规则状,呈间质性改变,E-cadherin表达减少(P<0.05)、α-SMA表达增多(P<0.01),Nrf2蛋白水平下调(P<0.05)。与TGF-β1组相比,pcDNA3.1-Nrf2+TGF-β1组A549细胞E-cadherin表达增多(P<0.05)、α-SMA表达减少(P<0.01);LXA4+TGF-β1组A549细胞E-cadherin上调、α-SMA下调以及Nrf2蛋白水平增多(P<0.05)。结论 LXA4可抑制A549细胞发生EMT,其机制与上调Nrf2表达相关。

金银花绿原酸对铝致阿尔茨海默病模型小鼠相关分泌酶、脂氧素A4和生化指标的影响

目的 探讨金银花绿原酸对铝致阿尔茨海默病(AD)小鼠相关分泌酶、脂氧素A4(LXA4)和血液生化指标的影响。方法 采用超声辅助醇提法提取金银花中绿原酸。将70只小鼠随机分为正常组,模型组及金银花绿原酸低、中、高剂量组,每组14只。除正常组外,其余组小鼠均采用麦芽酚铝腹腔注射染毒建立铝致AD模型,每连续注射5 d间歇2 d,共染毒8周。从染毒第5周开始,金银花绿原酸低、中、高剂量组分别给予金银花绿原酸溶液40 mg/kg、80 mg/kg、160 mg/kg灌胃,正常组和模型组灌喂等体积蒸馏水,均1次/d,连续灌胃至第8周末。实验结束,采用Y型水迷宫测定小鼠的学习记忆能力,记录小鼠达到学会标准时所需的测试次数、20次测试中的记忆错误次数和错误率。取小鼠大脑,酶联免疫吸附法测定脑组织匀浆中β-分泌酶、α-分泌酶、γ-分泌酶、LXA4和乙酰胆碱酯酶(AchE)含量,取血测定生化指标[血糖、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总蛋白、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)]。结果 与正常组比较,模型组小鼠学习测试次数、记忆错误次数、错误率和脑组织中β-分泌酶、γ-分泌酶、AchE含量均明显升高(P均<0.05),脑组织中LXA4含量明显降低(P<0.05),α-分泌酶含量无明显变化(P>0.05);与模型组比较,金银花绿原酸各组小鼠学习测试次数、记忆错误次数、错误率和脑组织中β-分泌酶、γ-分泌酶、AchE含量均明显降低(P均<0.05),金银花绿原酸高剂量组脑组织中LXA4含量明显升高(P<0.05),金银花绿原酸各组脑组织中α-分泌酶含量无明显变化(P均>0.05)。与正常组比较,模型组血糖、TC、TG、ALT、BUN、Cr、UA水平和金银花绿原酸低、中剂量组TC、TG、BUN水平均明显升高(P均<0.05),模型组HDL-C水平和金银花绿原酸中、高剂量组UA水平均明显降低(P均<0.05);与模型组比较,金银花绿原酸各组血糖、ALT、BUN、UA水平和金银花绿原酸中、高剂量组TC、Cr水平及金银花绿原酸高剂量组TG水平均明显降低(P均<0.05),金银花绿原酸中、高剂量组HDL-C水平和金银花绿原酸高剂组总蛋白水平均明显升高(P均<0.05)。结论 金银花绿原酸可能通过调控相关分泌酶、LXA4和各生化指标而起到改善铝暴露致AD的作用。

外源茉莉酸对脂氧合酶基因LOX3敲除的粳稻防御响应的影响

【目的】揭示外源茉莉酸(Jasmonic acid,JA)对脂氧合酶基因LOX3敲除水稻株防御响应的影响,为利用外源JA等激发子提高农作物因抗性相关基因丧失导致的水稻防御响应降低问题提供基础数据。【方法】以感病粳稻丽江新团黑谷(LTH)及其LOX3敲除水稻株系(Δlox3#1、Δlox3#10和Δlox3#20)为材料,开展水稻株高、分蘖数和百粒重等表型分析、过氧化物酶(POD)、活性氧(ROS)和木质素等抗菌化合物活性(含量)测定,以及防御相关基因表达分析;进一步对供试水稻进行稻瘟菌接种,调查供试水稻稻瘟病症状,检测稻瘟菌接种水稻中抗菌化合物活性(含量)及防御相关基因表达等,并观察稻瘟菌在水稻中的侵染进程;在此基础上,使用外源JA处理稻瘟菌接种36和48 hpi时的Δlox3敲除水稻株和LTH,分析JA对水稻稻瘟病症状及稻瘟菌侵染的水稻中抗菌化合物活性(含量)和防御相关基因表达等的影响,同时观察JA对稻瘟菌侵染进程的影响。【结果】Δlox3敲除水稻株种子发芽速度快于野生型,但株高、分蘖数和百粒重等与野生型相近;稻瘟菌接种的Δlox3敲除水稻株稻瘟病症状较稻瘟菌接种的野生型水稻严重,且胼胝质数、POD活性及木质素含量降低,ROS含量和死细胞数增加,OsWRKY45、OsPR1a和OsPOX1基因下调幅度和稻瘟菌菌丝定殖量明显高于稻瘟菌接种野生型水稻;外源JA可有效减缓稻瘟菌接种36和48 hpi的Δlox3敲除水稻株稻瘟病症状,且JA提高了稻瘟菌接种36和48 hpi的Δlox3敲除水稻株中胼胝质数、POD活性和木质素含量以及防御相关基因OsWRKY45、OsPR1a和OsPOX1表达水平,而降低了OsRbohB表达量及ROS含量和细胞死亡数,同时限制了稻瘟菌菌丝扩展;其中JA对稻瘟菌接种48 hpi的Δlox3敲除水稻株稻瘟病症状减轻效果优于JA对稻瘟菌接种36 hpi的Δlox3敲除水稻株,主要体现在JA使稻瘟菌接种48 hpi的Δlox3敲除水稻株中抗菌化合物增加幅度、防御相关基因表达水平、细胞死亡数和稻瘟菌菌丝扩展受限等优于JA处理稻瘟菌接种36 hpi的Δlox3敲除水稻株。【结论】LOX3基因敲除提升了水稻种子发芽速度而降低了水稻抗瘟性,外源JA则减缓LOX3敲除导致的水稻防御响应降低,提高了水稻抗瘟性。JA在减缓农作物因抗性基因持久性短而造成的抗性降低或丧失方面具有潜在的应用前景。

脂氧素A_(4)在运动改善骨关节炎中的作用与机制研究

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种慢性关节疾病,主要表现为软骨退行性改变、滑膜炎症及关节功能衰退。在其病理发展中,炎症反应及炎症因子的过度释放起关键作用。脂氧素A_(4)(lipoxin A_(4),LXA_(4)),是一种具有显著抗炎特性的脂质调节因子,在OA的发病中展现出内源性抗炎和免疫调节效应。近期研究揭示,作为OA的非药物治疗策略,运动能显著调控LXA_(4)水平及炎症反应。LXA_(4)能抑制NF-κB和p38-MAPK信号通路,缓解OA相关炎症和疼痛。运动能激活12-氧脂合酶(12-LOX)和氧化脂质途径,增强LXA_(4)合成,并进一步通过与滑膜成纤维细胞、巨噬细胞及中性粒细胞的交互作用,降低炎症因子水平。运动的强度和频率也对LXA_(4)水平和OA治疗效果产生影响。中至高强度运动在提升LXA_(4)水平和抑制炎症因子方面表现尤为显著,但高强度运动可能对软骨产生负面效应。目前适宜的运动模式为每次20~30 min,每日2~3次,间隔4 h,此模式在降低软骨分解相关酶及优化软骨组织结构方面展现出卓越效果。

茉莉酸甲酯类生长调节剂对‘蛇龙珠’葡萄果实品质及脂氧合酶代谢途径的影响

以‘蛇龙珠’葡萄果实为试材,通过测定其基本理化指标,筛选茉莉酸甲酯(methyljasmonate,MeJA)类物质最适浓度,同时结合顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术及酶联免疫吸附试验分析MeJA类物质响应的挥发性关键代谢物及关键酶活性,探究采前MeJA类物质处理对‘蛇龙珠’葡萄果实品质及脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)代谢途径中绿叶挥发物的影响。结果表明,与对照组相比,0.1 mmol/L MeJA和5 mmol/L二氢茉莉酸甲酯处理可显著提高‘蛇龙珠’葡萄果实百粒质量、总糖质量浓度、可溶性固形物质量分数、pH值、总酚及总花色苷含量,在采收期时分别提高了10.24%、27.83%、28.24%、4.80%、77.63%、85.29%和9.15%、24.01%、24.41%、8.30%、69.21%、71.57%,果实可滴定酸质量浓度分别降低40.0%及30.24%,果实品质得到显著提高和改善。此浓度处理后,‘蛇龙珠’葡萄果实C6类化合物含量明显提高,更加突出其果实香气的典型性。同时,LOX代谢途径中各个关键酶活性与代谢产物之间具有显著相关性,说明较适浓度的MeJA类物质处理对‘蛇龙珠’葡萄果实中绿叶挥发物的积累具有积极作用。

脂氧素A4抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路减缓脓毒症性急性肾损伤

目的探讨脂氧素A4(LXA4)通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路减缓脓毒症性急性肾损伤(SAKI)。方法将40只无特定病原体级雄性C57BL/6J小鼠随机分为SAKI组、SAKI+LXA4组、假手术组、假手术+LXA4组,每组10只。采用盲肠结扎穿孔术进行SAKI造模,SAKI+LXA4组、假手术+LXA4组在术后30 min腹腔注射LXA4(40 ng/kg)。各组小鼠在造模术后24 h收集血清、尿液、肾组织。酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组小鼠血肌酐(Scr)、血尿素氮(Bun)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),尿液中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白(NGAL)及肾损伤分子1(KIM-1);HE及PAS染色观察小鼠肾脏损伤情况;实时荧光定量PCR检测各组小鼠肾脏Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB p65(NF-κB p65)mRNA水平;免疫组化法、蛋白免疫印迹实验检测各组小鼠TLR4、MyD88、NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)的表达。结果ELISA实验提示SAKI组Scr、Bun、IL-1β、IL-6、TNF-α、NGAL、KIM-1水平均高于SAKI+LXA4组(P<0.05),假手术组及假手术+LXA4组Scr、Bun、IL-1β、IL-6、TNF-α、NGAL、KIM-1无明显上升;HE及PAS染色提示SAKI组肾损伤程度明显高于SAKI+LXA4组(P<0.05),假手术组及假手术+LXA4组无明显肾损伤;实时荧光定量PCR提示SAKI组较SAKI+LXA4组TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA升高(P<0.05),假手术组与假手术+LXA4组TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA均低于SAKI组及SAKI+LXA4组(P<0.05);免疫组化法、蛋白免疫印迹实验结果提示SAKI组较SAKI+LXA4组TLR4、MyD88、NF-κB p65、p-NF-κB p65表达升高(P<0.05),假手术组与假手术+LXA4组TLR4、MyD88、NF-κB p65、p-NF-κB p65表达均低于SAKI组及SAKI+LXA4组(P<0.05)。结论TLR4/MyD88/NF-κB通路在SAKI发生发展中起重要作用,LXA4可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路减缓SAKI。

铁死亡调控因子花生四烯酸脂氧合酶-15与肿瘤相关性的研究进展

铁死亡(Ferroptosis)是一种铁依赖性的新型的细胞程序性死亡(PCD)方式。花生四烯酸脂氧合酶-15(Arachidonate 15-lipoxygenase,ALOX15)是铁死亡的重要调控因子,它可以催化多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acid,PUFA)生成脂质氢过氧化物,从而促进铁死亡的发生。ALOX15参与了多种癌症的发生发展,并发挥重要作用。本文对铁死亡的重要调控因子ALOX15与乳腺癌、食管癌、胃癌、结直肠癌以及前列腺癌的相关性进行综述,为相关肿瘤的研究提供参考。

脂氧素A4及其类似物与巨噬细胞的相互作用促进炎症反应消退的研究进展

脂氧素A4(lipoxin A4,LXA4)是花生四烯酸的产物之一,是内源性脂肪酸产生的天然促分解代谢分子,被誉为炎症因子的“刹车信号”,有强大的抗炎作用,但其代谢迅速,而LXA4类似物相对更稳定,也具有一定的抗炎效果。对抗炎症的明星细胞——巨噬细胞,是天然免疫屏障的重要组分,和LXA4一样,在炎症的消退中有着不可替代的作用。LXA4及其类似物与巨噬细胞在抑制炎症反应的过程中有着千丝万缕的联系,本文就两者在炎症反应中的相互作用进行综述,为多种炎症相关疾病的治疗提供新思路。

补阳还五汤对脑缺血后12/15-脂氧合酶及相关炎性产物影响

目的观察补阳还五汤对脑缺血再灌注后12/15-脂氧合酶(12/15-LOX)及下游相关代谢产物的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组和12/15-LOX抑制剂PD146176组。假手术组只分离组织和剥离血管,模型组建立大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,补阳还五汤组于造模术后给予补阳还五汤16 g·kg-1灌胃,2次/d,PD146176组于造模术前30 min给予PD14617610 mg·kg-1皮下注射(同补阳还五汤组做阳性对照)。缺血再灌注后6 h、24 h、48 h和72 h运用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脑组织12/15-LOX的表达水平;免疫荧光(IF)法观察大鼠脑组织中12/15-LOX蛋白与神经元标记物(NeuN)、小胶质细胞标记物(Iba1)及星形胶质细胞标记物(GFAP)的共定位;酶联免疫吸附(ELISA)法检测12/15-LOX抗炎代谢产物消退素D1(RvD1)的含量,以及促炎代谢产物12-羟基廿碳四烯酸(12-HETE)和15-羟基廿碳四烯酸(15-HETE)的含量;免疫荧光法检测髓过氧化物酶(MPO)的表达,反映炎症细胞浸润程度。蛋白免疫印迹法检测脑组织白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)表达水平。结果与假手术组比较,模型组在脑缺血再灌注不同时间点12/15-LOX表达均升高(P<0.01),与模型组比较,补阳还五汤组在脑缺血再灌注后6 h、24 h、48 h、72 h 12/15-LOX表达均降低(P<0.05或P>0.05)。12/15-LOX与NeuN和Iba1共定位重合较多,与GFAP共定位基本无重合。与假手术组比较,模型组RvD1含量降低(P<0.01),12-HETE和15-HETE含量升高(P<0.01),MPO和IL-6表达升高(P<0.01),IL-10表达降低(P<0.01);与模型组比较,PD146176组和补阳还五汤组RvD1含量升高(P<0.05,P<0.01),12-HETE和15-HETE含量降低(P<0.01),MPO表达减少(P<0.01),IL-6蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),补阳还五汤组IL-10蛋白表达升高(P<0.01)。结论补阳还五汤可能通过抑制12/15-LOX表达而增加抗炎产物RvD1,降低促炎产物12-HETE和15-HETE,以减轻脑缺血再灌注后炎症损伤。

脂氧合酶对甜瓜果实后熟软化生理及相关基因表达的影响

为探究甜瓜果实在采后贮藏过程中脂氧合酶对果实后熟软化生理及相关基因表达的影响,以西州蜜17号为试验材料,通过对甜瓜果实贮藏期间脂氧合酶活性、乙烯释放量、果实硬度、呼吸强度、果胶酶活性、淀粉酶活性以及相关基因表达量进行测定,研究甜瓜果实采后脂氧合酶代谢、乙烯产生、后熟软化生理及相关基因表达的作用关系。分别将甜瓜果实在20℃贮藏(对照组)、经1-MCP处理后20℃贮藏、2℃贮藏,分析甜瓜果实中LOX活性与乙烯释放量的变化趋势。结果表明,在甜瓜果实后熟软化过程中,LOX活性上升先于乙烯释放量的增加,而在乙烯释放量与呼吸强度跃变后,LOX活性逐渐下降。同时,果实中果胶酶与淀粉酶活性及其基因表达量在跃变现象发生后显著增加,果实硬度随之迅速下降,说明果胶酶与淀粉酶基因表达增强和酶活性升高是甜瓜果实发生软化的关键因素。此外,LOX活性升高能够启动乙烯释放量的增加,促使果实发生呼吸跃变并进入后熟阶段,但乙烯对LOX却没有调控作用。由此可知,LOX活性对果胶和淀粉的变化没有直接影响,而是通过启动乙烯的释放来调节果胶和淀粉的代谢反应,使果实发生软化。

人5-脂氧合酶重组蛋白的纯化及其多克隆抗体的制备

目的:原核表达并纯化人5-脂氧合酶(5LO)△112蛋白,将其免疫新西兰大白兔制备5-LO多克隆抗体。方法:使用DNAMAN设计重组引物,PCR扩增N端缺失112个氨基酸的5-LO截短DNA片段,将其重组到KpnⅠ和EcoRⅠ酶切的pET30a(+)质粒中,重组质粒pET30a-5LO△112转化大肠杆菌Rosetta(DE3),培养至OD_(600)为0.4时加入IPTG以诱导5LO△112重组蛋白表达,目的蛋白经纯化后免疫新西兰大白兔制备其多克隆抗体。结果:使用BugBuster蛋白提取试剂裂解细菌并获得纯度较高的包涵体,包涵体用含6mol/L盐酸胍的溶液变性溶解,再经Ni-NTA agarose亲和纯化得到高纯度的5LO△112重组蛋白。用该蛋白免疫新西兰大白兔获得5-LO的特异性抗体,该抗体的效价为1∶51200。结论:使用6mol/L盐酸胍溶解包涵体蛋白结合Ni-NTA agarose亲和纯化的方法成功获得了纯度较高的5LO△112重组蛋白,并用此蛋白制备了高效价的多克隆抗体。

星星草脂氧合酶基因家族鉴定及生物信息学分析

星星草具有较强的耐盐碱特性,是改良土壤盐碱化的优良牧草。脂氧合酶(lipoxygenase,LOXs)广泛存在于动植物中,催化多不饱和脂肪酸的双加氧反应,最终生成各种氧脂素,从而在植物生长发育、响应逆境胁迫中发挥重要的生物学功能。目前,星星草中的LOXs家族基因仍未见报道。本研究利用生物信息学方法对PutLOXs基因家族成员进行鉴定,并对其理化性质、亚细胞定位和系统进化进行了分析。结果表明,星星草基因组中共有8个LOX基因,它们均具有lipoxygenase homology 2(简称LH2)和lipoxygenase结构域,均不包含跨膜结构域,预测定位于细胞质或叶绿体。系统发生分析表明PutLOXs蛋白分为9-LOX和13-LOX两个亚家族,并且与水稻和玉米这类单子叶植物的LOXs蛋白系统发生关系更近。本研究将为后期深入分析星星草耐盐碱分子机制提供理论依据。

钩吻脂氧合酶基因GeLOX1的鉴定及低温胁迫表达分析

近年来,钩吻(Gelsemium elegans)的药用和饲用价值日益凸显,但钩吻在生长过程中不耐低温,挖掘其低温响应基因,为钩吻的抗寒育种研究奠定基础。植物中,脂氧合酶(lipoxygenase, LOX)在种子老化、抗逆境胁迫等方面的生理生化过程中有重要影响。基于课题组构建的钩吻转录组数据库,挖掘响应低温胁迫的钩吻LOX基因,运用RT-PCR技术,从中克隆到一条GeLOX1的cNDA全长序列,对其进行生物信息学、亚细胞定位、基因表达、原核表达及平板胁迫等分析。结果显示,GeLOX1所编码蛋白的氨基酸长度为761 aa,蛋白相对分子质量为87.00 kD,预测为不稳定的亲水性蛋白,含有28个丝氨酸磷酸化位点,22个苏氨酸磷酸化位点和9个酪氨酸磷酸化位点。进化树分析结果表明,GeLOX1属于9-LOX家族的成员。亚细胞定位检测结果显示,GeLOX1蛋白定位于细胞质中。实时荧光定量PCR分析发现,GeLOX1在钩吻的根中高表达,且其在4℃低温胁迫下的表达量呈现下调的趋势。经原核表达诱导后,GeLOX1的重组蛋白在约111 kD处出现目标条带,且重组蛋白的积累量在诱导8 h时达到峰值。此外,平板胁迫试验表明,GeLOX1的原核表达菌株相较于对照组对低温胁迫更敏感。钩吻GeLOX1能够应答低温胁迫。

脂氧素A4及脂氧素A4受体在慢性鼻-鼻窦炎上皮-间质转化中的作用

目的研究脂氧素A4(lipoxin A4,LXA4)及脂氧素A4受体(lipoxin A4 receptor,ALXR)在慢性鼻-鼻窦炎(CRS)上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用,进一步探究CRS黏膜组织重塑的发病机制。方法①检测CRS患者鼻黏膜中ALXR的表达;②通过转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导体外人鼻黏膜上皮细胞(human nasal mucosa epithelial cells,HNEpC)上皮向间质转化后,分别加入0、1、10、100、200 nM的LXA4,显微镜下观察细胞的形态变化,RT-PCR、Western blot检测细胞表面标志物钙黏附蛋白E(E-cadherin,E-Cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达变化,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养液中Ⅲ型胶原蛋白的含量;预先用ALXR拮抗剂叔丁氧羰基-2(Butoxycarbonyl-2,BOC-2)处理30 min后,再依次加入LXA4及TGF-β1,观察LXA4对TGF-β1诱导的HNEpC发生EMT的影响。结果①ALXR在CRS患者中高表达,与对照组比较有统计学差异(χ^(2)=4.862,P<0.05);②TGF-β1作用120 h,细胞变得疏松,部分由扁平状变为长梭形,E-Cad表达减少,α-SMA表达增加,且培养皿中Ⅲ型胶原蛋白的沉积量也随着观察时间的延长逐渐增加;③LXA4可抑制TGF-β1诱导的EMT,阻止细胞转化为梭形,抑制α-SMA的表达,而ALXR拮抗剂BOC-2可减弱LXA4的抑制作用(χ^(2)=3.027,P<0.05)。结论①ALXR在CRS患者中高表达;②一定浓度的TGF-β1能够诱导HNEpC发生EMT,致细胞形态、功能及表面标志均发生变化;③一定浓度的LXA4可通过ALXR抑制TGF-β1诱导的鼻黏膜EMT。LXA4及ALXR可能参与黏膜组织的重塑,与CRS的病理生理过程密切相关。

脂氧合酶对茶油品质和风味的影响

本文研究了油茶成熟过程中茶油中脂氧合酶活力、脂肪酸含量和挥发性化合物数量的变化趋势,以及添加不同活力的外源脂氧合酶对茶油品质和风味的影响。结果表明:油茶成熟过程中,茶油中脂氧合酶活力、挥发性化合物数量均呈先增加后减少的趋势,单不饱和脂肪酸含量逐渐上升,且均在秋分前后出现拐点,因而秋分前后采收的油茶籽的油脂品质和风味最佳;外源脂氧合酶的添加量和茶油单不饱和脂肪酸含量成正相关,对挥发性化合物生成则无影响。

基于5-脂氧合酶代谢通路的中药复方干预动脉粥样硬化炎症的新思路

动脉粥样硬化(AS)是一种慢性炎症性病理过程,具有慢性炎症的“共同点”,即炎症消散的缺失和炎症介质的持续释放。抗炎一直是防治AS的有效途径,而促炎症消散则是近年来研究的热点,但很少有兼顾二者研究的报道,主要原因还是炎症介质和促炎症消散介质一般都由不同的信号通路所介导。5-脂氧合酶代谢产物白三烯B_(4)(LTB_(4))和脂氧素(LX)在AS炎症中具有截然相反的作用特点。现系统阐述LTB_(4)和LX在AS炎症中的表达及作用机制,再结合中药复方的多靶点多途径的整合调节作用,从抗炎和促炎症消散两方面干预AS炎症更具有优势,为中药复方干预AS炎症提供一种可能的理论依据和研究新思路。

高油酸低脂氧合酶(FAD-LOX)多基因编辑大豆优异种质创制

大豆是植物油和蛋白质的主要来源。不饱和脂肪酸的含量是影响植物油品质的主要因素,油酸是不饱和脂肪酸中含量最丰富的成分之一,具有较强的氧化稳定性和热稳定性。增加油酸的含量可以提高大豆油的耐储存性,也有利于人体健康。GmFAD2-1A和GmFAD2-1B是大豆编码脂肪酸去饱和酶,调控油酸向亚油酸转化的关键基因。脂氧合酶是大豆种子中的抗营养因子之一。它在酶促氧化的条件下产生豆腥味,限制了大豆产品的应用。为满足不同人群的需要和降低加工成本,有必要培育无脂氧合酶的突变品系。大豆中GmLOX基因(包括GmLOX1、GmLOX2、GmLOX3)编码脂氧合酶。脂氧酶也能催化亚油酸氧化生成脂质氢过氧化物,然后形成豆腥味。因此,降低亚油酸的含量有助于减少豆腥味的形成。同时编码脂氧酶也能延缓豆油的酸败。本研究利用CRISPR/Cas9对中吉602的GmFAD2-1A、GmFAD2-1B、GmLOX1、GmLOX2和GmLOX3基因进行编辑。通过农杆菌介导的大豆遗传转化,在T2代分离到7个具有不同等位变异的优异新种质。与中吉602相比,突变体种子中脂氧合酶活性显著降低,油酸含量提高至81.7%~83.5%。本研究为有效开发大豆种质资源以满足不断变化的市场需求提供了新材料。

脂氧素A4保护大鼠脊髓缺血再灌注损伤的实验研究

探讨脂氧素A4通过抑制炎症对脊髓缺血再灌注损伤大鼠模型的保护作用。方法为:实验大鼠随机分为3组:脂氧素A4组(LXA4)、再灌注组(SCII组)和空白组(sham组),构建大鼠SCII模型,LXA4组和sham组大鼠在关腹后30 min应用10μL脂氧素A4(300 pmol)行脊髓鞘内注射。对3组大鼠在再灌注后6 h、12 h、24 h、48 h时间点时行BBB评分,并应用HE染色观察3组大鼠再灌注后24 h的脊髓组织性形态,分别在6 h、12 h、24 h、48 h测定同一节段脊髓组织MPO和TNF-α、IL-1β的活性。结果:与sham组相比,LXA4组和SCII组大鼠的BBB评分明显降低,而MPO、IL-1β及TNF-α活性明显升高,差异有显著意义(P>0.05)。LXA4组和SCII组两组间对比:(1)LXA4组大鼠在各个时间点BBB评分均明显高于SCII组,而MPO活性均明显降低(P<0.05);(2)LXA4组大鼠在12 h和24 h时TNF-α、IL-1β含量显著低于SCII组大鼠;(3)SCII组脊髓组织中较LXA4组出现大量炎症细胞浸润以及神经元变性坏死。结论:LXA4通过抑制炎症反应,从而起到治疗SCII的目的。

糖尿病兔心房5脂氧合酶及12脂氧合酶蛋白变化研究

目的观察糖尿病兔心房炎症和心房纤维化改变及5脂氧合酶(ALOX5)、12脂氧合酶(ALOX12)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)在心房组织中表达变化。方法选择健康雄性日本大耳白兔13只,随机选取8只白兔建立1型糖尿病兔模型,其中5只建模成功作为糖尿病组,另外5只白兔作为对照组。检查超声心动图、病理指标,并提取左心房组织蛋白进行Western blot检测。结果与对照组比较,糖尿病组室间隔厚度明显增加,LVEF明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。糖尿病组左心房组织胶原容积分数较对照组明显增加[(7.97±1.01)%vs(3.11±0.99)%,P<0.01]。糖尿病组左心房组织ALOX5、ALOX12表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);2组MCP-1表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论ALOX5、ALOX12表达可能与糖尿病兔心房炎症及纤维化相关。