转化生长因子β相关激酶1抑制剂对人肝癌细胞系HepG2脂滴积累的影响及其机制

目的观察转化生长因子β相关激酶1(TAK1)抑制剂(NG25)对人肝癌细胞系HepG2脂滴积累的影响,并探讨其作用机制。方法取HepG2细胞并分为两组,处理组细胞加入2μmol/L NG25处理24 h,对照组加入等体积DMSO处理24 h,两组均同时用终浓度为250μmol/L脂肪酸(OA、PA各125μmol/L)共同孵育,采用油红O染色观察细胞脂滴积累情况(油红O染色红光强度),荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法检测细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、诱导细胞凋亡DNA分裂因子样效应因子C(CIDEC)mRNA、蛋白相对表达量,双荧光素酶报告基因检测系统检测细胞荧光素酶活性。另取HepG2细胞并分为3组,恢复组细胞预先转染1μg质粒PPARγ后再加入2μmol/L NG25处理24 h,处理组细胞加入2μmol/L NG25处理24 h,对照组细胞加入等体积DMSO处理24 h,3组同时用终浓度250μmol/L脂肪酸(OA、PA各125μmol/L)共同孵育,荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法检测细胞CIDEC mRNA、蛋白。结果与对照组比较,处理组油红O染色红光强度弱(P<0.05)。与对照组比较,处理组PPARγ及CIDEC mRNA、蛋白相对表达量和PPARγ启动子荧光素酶活性降低(P均<0.05);与对照组比较,恢复组和处理组CIDEC mRNA和蛋白相对表达量降低(P均<0.05)。结论NG25对HepG2细胞脂滴积累有抑制作用,机制可能是抑制PPARγ的转录,进而下调CIDEC表达,即NG25通过PPARγ-CIDEC信号途径最终抑制HepG2细胞脂滴积累。

干扰CIDEA基因抑制牦牛皮下脂肪细胞的脂滴积累

旨在明确CIDEA基因在牦牛皮下脂肪细胞中的表达模式,并阐明其对皮下脂肪细胞脂滴积累的影响,为进一步研究CIDEA基因对牦牛皮下脂肪细胞脂代谢作用机制提供基础数据。本研究以金川牦牛为试验对象,使用siRNA介导的干扰技术作用于CIDEA基因后,检测其干扰效率;通过观察皮下脂肪细胞的脂滴积累和检测脂代谢相关基因表达,明确该基因对皮下脂肪细胞脂滴积聚的影响。结果表明,干扰牦牛CIDEA基因后其脂滴的积聚显著降低,油红O染料萃取后的D值显著下降,且干扰后脂代谢相关基因C/EBPα、FAS均显著下调,ATGL表达水平显著上调,表明CIDEA基因参与牦牛脂肪组织沉积与代谢。

不同豆浆饮品对普通及高脂饲料饲喂小鼠健康的影响

研究普通日粮和高脂饲料条件下不同豆浆饮品对小鼠健康的影响。采用4种不同豆浆饮品(自磨非转基因豆浆F、自磨转基因豆浆G、两种常见市售豆浆K和M)灌胃C57小鼠,并分别饲喂普通日粮和高脂饲料,10周后处死,测定其体重增长率、肝脏系数和结肠长度等参数,并用生化分析仪测定小鼠血清葡萄糖(Glucose,GLU)、甘油三脂(Triglycerides,TG)、总胆固醇(total cholesterol,CHOL)、高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(Low density lioprotein cholesterol,LDL-C)等指标。用不同豆浆处理人结肠癌细胞HCT-116,检测其对细胞增殖和脂滴积累的影响。结果显示,所有豆浆都不同程度地降低了小鼠血液TG,且市售豆浆M还降低了小鼠血液GLU和CHOL浓度;豆浆处理后结肠癌细胞增殖活性得到明显抑制,但是对油酸诱导的细胞增殖和脂滴积累影响不显著。不同豆浆由于营养及功能活性物质的含量不同,对小鼠血糖、血脂和胆固醇等参数的影响不同,市售豆浆相对自磨豆浆更利于减轻高脂饲料带来的健康副作用。

SIRT1/FoxO1通路对奶山羊乳腺上皮细胞脂质合成的影响

为研究SIRT1/FoxO1通路在奶山羊乳腺脂质合成中的作用,本实验采用0(对照)、50、100、150μmol/L的SIRT1激动剂(RES)处理奶山羊乳腺上皮细胞,qRT-PCR检测脂质代谢相关基因的表达,检测细胞中甘油三酯含量,油红O染色法观察脂滴的积累情况。结果表明:100μmol/L RES处理组的SIRT1和FoxO1基因的相对mRNA表达量高于对照组(P<0.05),乳脂关键调控因子SREBP1和PPARγ表达量下降(P<0.05);SIRT1/FoxO1通路激活后,脂肪酸合酶FASN(P<0.01)、脂肪酸去饱和酶SCD1(P<0.01)和脂肪酸转运酶CD36(P<0.05)表达量均下降;而脂解相关基因HSL和ATGL的表达上调(P<0.05)。SIRT1/FoxO1激活后,细胞中甘油三酯含量显著降低(P<0.05),脂滴积累减少。综上可知,SIRT1/FoxO1通路负调控奶山羊乳腺上皮细胞脂质合成,为改善羊奶营养价值和风味提供基础资料。

小胶质细胞演变致衰老相关机制研究进展

小胶质细胞演变和衰老的发展机制密切相关,监测小胶质细胞的状态将有助于衰老及相关神经退行性疾病的诊断,同时保护小胶质细胞功能的措施将有助于减缓大脑衰老和保存大脑功能,成为干预衰老和退行性疾病的一种可行策略.本文总结了衰老发展过程中小胶质细胞发生的一系列变化,以及小胶质细胞功能改变对脑内神经元和星形胶质细胞的影响.