基于UPLC-Q-TOF-MS技术分析原料乳冷藏过程中脂类代谢组学

为探究4℃冷藏过程中原料乳脂类物质的变化,以酸价及过氧化值为衡量标准判定原料乳的脂肪氧化情况;采用超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱技术对各冷藏阶段脂类代谢物的差异及变化进行分析。结果显示,冷藏过程中原料乳酸价及过氧化值持续升高,其中0~1 d升高速度最快。差异代谢物分析显示,乳代谢体系变化极为复杂,脂类代谢物种类及变化在所检测的6类显著性差异代谢物中最突出,从初始的9种增至24种。进一步分析脂类代谢物表达量时发现游离脂肪酸、磷脂表达量分别在冷藏3~4 d和冷藏6 d会发生较大波动。结合KEGG通路分析,发现游离脂肪酸参与的脂肪酸生物合成在各冷藏阶段变化显著(P<0.05);冷藏3 d时脂类代谢物通路数量最多,共计9条。因此,冷藏3 d可作为原料乳冷藏品质控制的关键节点。

高分辨质谱技术分析两地缢蛏的脂质差异性

目的基于高分辨质谱技术对浙江象山和福建云霄两大主产地缢蛏的脂质差异性进行比较。方法样品经培养后,去壳、去胃进行冷冻干燥,采用脂类提取法提取,以Hypersile Gold C18(100 mm×2.1 mm,1.9μm)色谱柱为分析柱,甲醇/水(A)、甲醇/异丙醇(B)为流动相进行梯度洗脱分离,采用四极杆静电场轨道阱高分辨质谱法对缢蛏脂质进行定性和半定量分析。结果两大主产地缢蛏均检测到脂质78种,潜在生物标记物由磷脂酰乙醇胺(phosphatidyl ethanolamine,PE)、磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol,PI)、磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)、神经酰胺氨乙基亚磷酸(ceramide aminoethyl phosphite,CAEP)、甘油三酯(triglyceride,TAG)和甘油二酯(diglyceride,DAG)组成。浙江象山产地的缢蛏PE(17:1-22:6,15:1-22:6,16:1-22:6,17:1-18:4)、PI(20:3-20:5)和DAG(18:4-18:4)含量为福建云霄产地的2.55~9.11倍;福建云霄产地的缢蛏DAG(16:0-16:0)、CAEP(d18:2-n16:0)和PI(16:0-20:5)含量是浙江象山产地的2.79~2.90倍。结论浙江象山和福建云霄产地的缢蛏存在脂质差异性,为其产地鉴定提供重要依据。

UPLC-3Q MSMRM模式在Jurkat细胞脂质代谢物监测中应用

目的:以药物干预前后的Jurkat细胞为样本,旨在找出能够有效干预淋巴瘤的药物及与淋巴瘤相关的代谢及信号通路。方法:以UPLC-3Q MS为技术平台,通过多反应监测(Multiple Reaction Monitoring,MRM)扫描模式,根据实验室前期淋巴瘤代谢组学的研究成果,选择对淋巴瘤患者和健康对照组分类有显著贡献的脂类差异代谢物作为监测对象,对PI3K inhibitor干预前后的Jurkat细胞内这些潜在的生物标记物进行定量研究。结果:PI3K inhibitor与Jurkat细胞作用一段时间后,所监测的四个脂质代谢物含量呈现出与药物干预前肿瘤组相反的变化趋势,药物干预后细胞内含量有明显先升高再降低的趋势。结论:说明PI3K介导的信号通路在淋巴瘤细胞内被放大,选择性抑制该通路可以有效抑制肿瘤增殖和肿瘤细胞的代谢活动,为淋巴瘤的临床研究提供依据。