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人脂联素球型结构域原核表达重组质粒的构建及体外表达
1
作者
蒲素
余叶蓉
龙阳
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第9期1614-1616,共3页
目的通过分子克隆表达人脂联素基因球型结构域(gAd),为进一步研究提供实验基础。方法应用RT-PCR方法从人大网膜脂肪组织总RNA中扩增出gAd cDNA,克隆入载体pMD18-T、pET32a(+)中,形成重组质粒gAd-pET32a(+)。筛选出阳性克隆,通过限制性...
目的通过分子克隆表达人脂联素基因球型结构域(gAd),为进一步研究提供实验基础。方法应用RT-PCR方法从人大网膜脂肪组织总RNA中扩增出gAd cDNA,克隆入载体pMD18-T、pET32a(+)中,形成重组质粒gAd-pET32a(+)。筛选出阳性克隆,通过限制性内切酶酶切、PCR和测序进行鉴定,并在体外进行小量表达。结果从脂肪组织总RNA中扩增得到412 bp片段gAd基因,其cDNA序列与GenBank人gAd基因序列相同,并在体外表达得到相对分子质量为34 000的重组蛋白。结论成功构建了gAd基因原核表达质粒并实现体外的小量表达。
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关键词
脂联素球型结构域
分子克隆pET32a(+)质粒
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职称材料
题名
人脂联素球型结构域原核表达重组质粒的构建及体外表达
1
作者
蒲素
余叶蓉
龙阳
机构
四川大学华西医院内分泌科
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第9期1614-1616,共3页
基金
国家自然科学基金(30570874)
文摘
目的通过分子克隆表达人脂联素基因球型结构域(gAd),为进一步研究提供实验基础。方法应用RT-PCR方法从人大网膜脂肪组织总RNA中扩增出gAd cDNA,克隆入载体pMD18-T、pET32a(+)中,形成重组质粒gAd-pET32a(+)。筛选出阳性克隆,通过限制性内切酶酶切、PCR和测序进行鉴定,并在体外进行小量表达。结果从脂肪组织总RNA中扩增得到412 bp片段gAd基因,其cDNA序列与GenBank人gAd基因序列相同,并在体外表达得到相对分子质量为34 000的重组蛋白。结论成功构建了gAd基因原核表达质粒并实现体外的小量表达。
关键词
脂联素球型结构域
分子克隆pET32a(+)质粒
Keywords
global domain, adiponectin
gene clone
pET32a(+) plasmid
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人脂联素球型结构域原核表达重组质粒的构建及体外表达
蒲素
余叶蓉
龙阳
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
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