脂肪技术之四:脂肪冻存技术的研究进展

脂肪移植在面部年轻化中的应用比较广泛,其注射移植的血管基质片段基质胶(stromal vascular fraction gel,SVF-gel)和nanofat均来源于脂肪组织,在面部年轻化过程中需要多次注射才能达到良好效果。因此如何冻存脂肪组织及其细胞,从而避免多次吸脂引发的手术痛苦,是临床应用亟待解决的问题。现对脂肪组织及其提取物的冻存的研究进展作一综述,旨为临床应用提供参考。

人脂肪组织体外冻存研究现状

自体脂肪移植对各种原因导致的软组织容量不足具有良好的效果,但移植脂肪最终的体积保持率难以预测,因此常需多次手术。脂肪组织冻存有望解决脂肪移植前需多次吸脂的问题。现通过总结脂肪组织冻存的损伤机制、目前常用的流程、冻存后效果的评估及临床应用,对目前研究中可能存在的不足进行分析,并对未来进行展望。

浓缩血小板提高冻存脂肪来源间充质干细胞活性的研究

目的探讨浓缩血小板(PC)对冻存脂肪组织(CF)来源的间充质干细胞(ADSCs)活性的促进作用。方法将CF来源的ADSCs分别使用含胎牛血清(FBS)、低、中、高浓度(9.75×10^(10)/L、1.95×10^(11)/L、3.90×10^(11)/L)血小板培养基进行培养,记为CF+FBS、CF+LP、CF+MP、CF+HP。新鲜脂肪(FF)来源的ADSCs采用含FBS培养基进行培养,记为FF+FBS。检测PC对P3代冻存ADSCs增殖活性、克隆形成率及分化(成脂、成骨、成软骨)活性的影响。动物实验采用Coleman脂肪注射技术,根据注射脂肪的类型把雄性裸鼠分为新鲜脂肪组(FF)、冻存脂肪组(CF)、添加低浓度血小板的冻存脂肪组(LP+CF)。移植28 d后,测量注射移植除油脂后的各组移植脂肪团的湿重与移植前脂肪重量之比计算湿重保留率,并对除油脂后的各组移植脂肪团行HE和CD31免疫组化染色。两组间比较采用Dunnett-t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果与CF+LP比较,FF+FBS、CF+FBS体外克隆形成率[(5.29±0.64)%,(2.87±0.64)%比(98.72±0.59)%]、油红O染色阳性区域面积比[(2.46±0.93)%,(1.30±0.54)%比(15.96±5.59)%]降低,差异有统计学意义(P均<0.05);与CF+FBS相比,FF+FBS和CF+LP甲苯胺蓝染色阳性区域面积比[(20.49±3.16)%,(24.67±3.02)%比(7.65±4.76)%]、茜素红染色562 nm处的吸光度值(0.22±0.01,0.21±0.00比0.19±0.01)升高,差异有统计学意义(P均<0.05)。脂肪移植后28 d,与FF相比,CF与LP+CF的湿重保留率[(17.79±2.872)%,(19.62±2.65)%比(34.22±4.22)%]均降低,差异有统计学意义(P均<0.05)。与FF相比,CF及LP+CF的HE染色红染面积比[(25.75±7.11)%,(33.83±9.17)%比(14.14±3.97)%]升高,差异有统计学意义(P均<0.05);与FF比较,CF移植脂肪团中的血管数[(2.20±3.35)比(14.60±8.11)个]减少,差异有统计学意义(P均<0.05),与LP+CF比较差异无统计学意义。结论PC能有效促进冻存ADSCs的增殖与分化活性,并可在一定程度上改善冻存脂肪的移植效果,但是与新鲜脂肪仍有一定差距。