细粉碎小麦诱导亚急性瘤胃酸中毒对奶牛乳脂合成和肝脂肪合成关键酶基因表达量的影响

旨在通过饲喂大量细粉碎小麦诱导奶牛发生亚急性瘤胃酸中毒(SARA),研究SARA对奶牛乳脂合成、肝脂肪合成关键酶及其调节因子mRNA表达量的影响,并用甜菜颗粒粕(BP)来替代玉米,试图缓解SARA。试验选取8头泌乳中期经产荷斯坦奶牛(4头带有瘤胃瘘管),采用自身对照试验设计,共分为4期(17d/期),分别饲喂4种日粮:1)对照期:全混合日粮(TMR)不含小麦(W0);2)过渡期:TMR含有10%的细粉碎小麦(W10);3)SARA诱导期:TMR含有20%的细粉碎小麦(W20);4)SARA调控期:在W20处理基础上,用10%的BP替代10%玉米(BP10)。试验结果得出:与W0处理相比,W20处理降低了瘤胃平均pH(6.37~5.94,P<0.01)和最低pH(5.99~5.41,P<0.01),pH低于5.6的时间大于180min·d-1,诱导产生了SARA;BP替代玉米时增加了瘤胃平均pH(5.94~6.05)和最低pH(5.41~5.63)。干物质采食量和产奶量未受影响,但W20和BP10处理奶牛的乳脂率和乳脂产量低于(P<0.01)W0处理。W20处理血浆葡萄糖和胰岛素浓度高于(P<0.01)对照组,而血脂浓度低于(P<0.01)对照组。W20处理肝组织中乙酰辅酶A羧化酶α(ACACA)(P=0.03)、脂肪酸合成酶(FASN)(P=0.05)和胆固醇调节元件结合蛋白1(SREBF1)(P<0.01)基因的mRNA相对表达量均高于W0处理,但在W10、W20和BP10 3个处理间差异不显著。结果提示,奶牛发生SARA时可引起乳脂下降和肝中脂肪合成关键酶其调节因子基因表达量增加;饲喂高精料日粮时用甜菜颗粒粕替代部分玉米可减缓SARA的发生。

油酸对奶牛乳腺上皮细胞内甘油三酯含量和乳脂肪合成相关基因表达的影响

本试验旨在探讨油酸对奶牛乳腺上皮细胞内甘油三酯含量和乳脂肪合成相关基因表达的影响。选取中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)为试验材料,经纯化培养后,培养基中添加0(对照)、50、100、200、400μmol/L油酸,继续培养24 h。通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞活力;利用试剂盒检测胞内甘油三酯的含量;采用实时定量PCR法检测乳脂肪合成相关基因的表达。结果表明:油酸浓度为200、400μmol/L时,BMECs相对增殖率显著低于对照组与其他试验组(P<0.05);添加100、200μmol/L的油酸促进了胞内甘油三酯的合成(P<0.05);添加油酸上调了二酰甘油酰基转移酶(DGAT)基因表达量,50μmol/L的油酸显著上调了乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARGγ)基因表达量(P<0.05),100~400μmol/L的油酸显著抑制了硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)、脂肪酸结合蛋白3(FABP3)、固醇调节原件结合蛋白1(SREBP-1)基因表达量。综上所述,50~100μmol/L的油酸对BMECs乳脂肪合成具有较好的促进效果。

小鼠不同泌乳期乳腺脂肪合成相关基因的mRNA表达

为了研究小鼠不同泌乳期乳脂肪合成相关基因的表达规律,文章采用荧光定量PCR检测了小鼠乳腺中与脂肪合成和分泌相关20个基因的mRNA相对表达丰度和表达差异。结果表明,在乳腺中脂蛋白脂酶(LPL)、乙酰辅酶A羧化酶(ACACA)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)、黄嘌呤脱氢酶(XDH)、嗜乳脂蛋白(BTN)、脂肪酸分化蛋白(ADFP)基因都具有高mRNA表达丰度(表达丰度>5%),脂肪酸转运体(CD36)、脂肪酸合成酶(FASN)、1-酰基甘油磷酸酰基转移酶(AGPAT6)和甘油酰基转移酶(DGAT)基因具有中等mRNA表达丰度(5%>表达丰度>1%),与妊娠期乳腺基因的mRNA表达相比,在泌乳期这些基因的mRNA表达均有显著上调(P<0.05),并且ACACA、SCD、FASN、AGPAT6和DGAT等脂肪合成酶基因的表达在泌乳中期(12 d)最高,而在泌乳初期(6 d)和泌乳末期(18 d)较低,呈现低-高-低的表达模式。转录因子固醇调节元件结合蛋白(SREBF)基因在泌乳开始时mRNA表达增加,在泌乳中期(12 d)表达有10倍上调,其变化规律与脂肪合成酶基因的表达模式相同,说明SREBF基因在小鼠乳腺脂肪合成酶基因的表达调控中发挥重要调节作用。

牛乳腺脂肪合成关键酶基因在乳汁体细胞中的表达研究

为了阐明乳脂合成的影响因素及其内在分子机理,为反刍动物原料乳的优化,特别是为乳脂肪的营养调控和遗传改良提供理论依据。本试验以奶牛初乳、常乳和末乳中的乳汁体细胞为研究对象,以看家基因GAPDH为内参,对初乳、常乳和末乳中LPL、CD36、VLDLR、ACSS2、ACSL1、FABP3、ACC、FASN、SCD、ADFP、XDH和BTN1A1 mRNA进行半定量RT-PCR分析。结果发现,LPL、CD36、VLDLR、ACSS2、ACSL1、FABP3、SCD、AD-FP、XDH和BTN1A1 mRNA在初乳、常乳和末乳中均有表达,而ACC和FASNmRNA只在初乳中表达,常乳和末乳中均不表达;半定量结果表明,与初乳相比,常乳和末乳中LPL、CD36、VLDLR、ACSS2、ACSL1、FABP3、SCD、ADFP、XDH和BTN1A1 mRNA转录水平显著降低(P<0.05),且常乳与末乳间差异不显著(P>0.05)。研究结果提示初乳期乳腺脂肪合成能力明显高于常乳和末乳期乳腺,且脂肪合成关键酶基因的表达与细胞内脂转运和代谢的生理变化有关。

注射生长激素对猪脂肪组织中脂肪合成酶的影响

注射重组猪生长激素(rpGH)能加快生长速度、降低脂肪率、提高瘦肉率。本试验测定了北京黑猪60头,其中试验组30头,每天注射rpGH2毫克,对照组30头注射1毫升75mMNaHCO_3,均连续注射28天后屠宰,在屠宰时测定了血浆游离脂肪酸(FFA)含量(试验组为673.16±232.35微克当量/升,对照组为412.09±241.84微克当量/升),试验猪比对照猪FFA含量增高63.04％,差异极显著(P<0.01)。取肩背部皮下脂肪组织,分别测定葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(0.313±0.064IU/毫克蛋白),NADP-苹果酸脱氢酶(1.199±0.208 IU/毫克蛋白),NAD-苹果酸脱氢酶(0.9425±0.233 IU/毫克蛋白),异柠檬酸脱氢酶(0.324±0.104 IU/毫克蛋白)的活性,试验猪4种酶活性均低于对照组,差异极显著,(P<0.01),上述酶活性与胴体瘦肉率 呈负相关趋势。

HJJB方对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏脂肪合成环节的影响

目的:基于肝脏脂肪合成环节,探讨HJJB方防治非酒精性脂肪肝的作用机制。方法:采用高脂饮食14周诱导的大鼠非酒精性脂肪肝模型。随机分为模型组、HJJB方组和罗格列酮组各8只,HJJB方组在第9周起按0.5 mL/100 g灌胃给药治疗。观察:肝组织HE染色;生化法检测肝组织甘油三酯(TG)含量;实时荧光定量PCR法检测肝组织SREBP-1c、ChREBP、ACCase、SCD1 mRNA水平;酶联免疫吸附法检测肝组织SREBP-1c、ChREBP、ACCase、SCD1蛋白含量。结果:模型组肝组织出现显著的肝细胞脂肪变性及空泡样变,肝组织TG含量较正常组显著升高(P<0.01),肝组织SREBP-1c、ChREBP、ACCase、SCD1 mRNA水平和蛋白含量较正常组均明显升高(P<0.01)。HJJB方组的上述病理改变明显减轻,肝组织TG含量较模型组显著降低(P<0.01),肝组织SREBP-1c、ChREBP、ACCase、SCD1 mRNA水平和蛋白含量显著低于模型组和罗格列酮组(P<0.01)。结论:HJJB方能通过降低脂肪肝大鼠肝组织SREBP-1c、ChREBP、ACCase、SCD1 mRNA水平和蛋白含量抑制肝脏脂肪合成,这可能是其防治非酒精性脂肪肝的重要机理之一。

运动对RBP4诱导的脂代谢异常鼠肝脏ACC1表达和脂肪合成的影响

目的:研究运动对RBP4诱导的脂代谢异常鼠肝脏ACC1表达和脂肪合成的影响。方法:重组人RBP4注射建立脂代谢异常鼠模型。设一次性运动组(RBP4 One-time exercise group,ROE组)、8周有氧运动组(RBP4aerobic exercise group,RAE组)和安静对照组(RBP4control group,RC组)。结果:ROE组血清RBP4水平与RC组相比显著降低(P<0.05),血清TG和肝脏TG含量无显著改变(P>0.05)。RAE组血清RBP4、TG和肝脏TG含量与RC组和ROE组相比均显著降低(P<0.01)。与RC组相比,ROE组和RAE组肝脏ACC1mRNA表达均显著降低(P<0.01)。与RC组相比,ROE组ACC1蛋白表达无显著改变(P>0.05)。与RC组和ROE组相比,RAE组ACC1蛋白表达均显著降低(P<0.01)。结论:高RBP4显著增加小鼠肝脏ACC1基因和蛋白表达增加,促进肝脏脂肪合成。8周有氧运动抑制了RBP4在肝脏的脂肪合成促进作用,改善脂代谢,机制涉及降低RBP4水平、减少肝脏ACC1基因和蛋白表达以及TG的合成。

中华绒螯蟹性腺发育期脂肪合成酶活性变化研究

NADPH的活性与河蟹发育密切相关,在河蟹性腺进入快速发育期,肌肉、肝胰腺、卵巢脂肪合成酶的活性明显提高,但是不同组织不同脂肪合成酶达到峰值的时间有较大的差异。肌肉中ME、NAD-ICDH、6PGDH的峰值通常出现在Ⅲ2期,肝胰腺基本类似,而卵巢中通常出现在Ⅲ1期。性腺成熟后,脂肪合成酶活性增加。在性腺发育过程中,不同器官NADPH的活性有较大差异:雌蟹肌肉中ME和ICDH是参与肌肉脂肪合成过程主要的合成酶,性腺快速发育期肝胰腺中主要脂肪合成酶为6GPDH和G6PDH。

组胺对白色脂肪细胞脂肪合成以及调控的机制研究

目的:在体外探索组胺对脂肪合成的影响及其作用机制。方法:培养3T3L1细胞,诱导为白色脂肪细胞,运用RT-PCR技术检测组胺和苯海拉明对白色脂肪细胞中脂肪细胞脂肪酸结合蛋白2(aP2 mRNA)水平的影响。结果:组胺可以增加分化成熟的3T3L1小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪细胞)aP2的表达,剂量效应图显示组胺为20μmol/L时aP2表达量为最高,时间效应图显示在共同孵育6 h后aP2表达量达到最高;苯海拉明与同剂量组胺相比,可以显著降低aP2的表达(P<0.05)。结论:组胺可以刺激分化成熟的3T3L1细胞的aP2的表达,苯海拉明可以抑制组胺的效应。组胺能增加脂肪细胞的脂肪合成,维持白色脂肪细胞能量代谢的平衡。

半胱胺对肉仔鸡脂肪合成代谢的影响

21日龄艾维茵商品代肉仔鸡96只,随机分成2组,分别为基础日粮组和添加半胱胺(cysm ine,CS)组。研究CS对肉仔鸡血浆中胰岛素、肝脏中苹果酸脱氢酶(MDH)水平的影响。结果表明:在42日龄以前,CS使体内胰岛素和MDH水平高于对照组;在42日龄以后,使体内胰岛素和MDH水平低于对照组。

运动对视黄醇结合蛋白4诱导的脂代谢异常鼠肝脏SREBP-1c信号通路和脂肪合成的影响

研究运动对RBP4诱导的脂代谢异常鼠肝脏SREBP-1c信号通路和脂肪合成的影响;重组人RBP4注射建立脂代谢异常鼠模型,设一次性运动组(RBP4 One-time exercise group,ROE组)、8周有氧运动组(RBP4 aerobic exercise group,RAE组)和安静对照组(RBP4 control group,RC组)。结果发现:ROE组血清RBP4水平与RC组比较非常显著降低(P<0.01),血清TG和肝脏TG含量无显著性改变(P>0.05)。RAE组血清RBP4、TG和肝脏TG含量与RC组和ROE组比较均非常显著降低(P<0.01)。与RC组比较,ROE组和RAE组肝脏SREBP-1c m RNA表达均非常显著降低(P<0.01);ROE组SREBP-1c蛋白表达、FASm RNA和FAS蛋白表达均无显著性改变(P>0.05);RAE组SREBP-1c、FAS的m RNA和蛋白表达比ROE组均非常显著减少(P<0.01)。结果说明RBP4显著使小鼠肝脏SREBP-1c基因和蛋白表达增加、激活SREBP-1c信号通路、促进肝脏脂肪合成。8周有氧运动抑制了RBP4在肝脏的脂肪合成促进作用,改善脂代谢,机制涉及降低RBP4水平,减少肝脏SREBP-1c基因和蛋白表达,抑制SREBP-1c信号通路的激活,降低肝脏脂肪合成功能。

共轭亚油酸影响乳脂肪合成及相关基因表达研究进展

共轭亚油酸(CLA)研究已成为国内外研究热点,共轭亚油酸具有预防和减低癌症发生,减肥功效,尤其具有显著降低乳脂肪合成作用。研究共轭亚油酸对奶牛乳脂合成及调控相关机理对提高牛乳品质、产量及人类健康具有重要意义。文章结合国内外大量研究成果,分析CLA对乳脂肪合成的影响和调控机制,综述共轭亚油酸在影响乳脂肪合成及相关基因表达的最新进展,以期为调控乳脂肪合成提供理论参考。

里芋提取物拮抗脂肪分解、促进脂肪合成生理活性研究

目的：对里芋提取物在脂肪代谢中的生理活性进行研究。方法：在体外调制动物脂肪细胞，分别进行脂肪分解和脂肪合成实验，后者用１４Ｃ同位素标记法。结果：有效浓度与生理活性呈一定的正比关系，其活性具不耐热性，有效部分为水溶性物质。结论：里芋含有拮抗肾上腺素诱发的脂肪分解和胰岛素类样作用的物质。

饲料中D-葡萄糖含量对白鲟稚鱼的生长、脂肪合成酶及肝组成的影响

以不同含量的D-葡萄糖(0%,7%,14%,21%,28%和35%)饲料饲喂白鲟稚鱼8周.7%以上各组的能量贮留和体脂含量均显著高于0%实验组,但机体的蛋白组成及贮留却不受此处理影响.饲料中D-葡萄糖含量的增加,导致稚鲟的血糖、血浆三酰甘油脂以及4种主要肝脂肪合成酶活性的提高.28%和35%两组的肝脂肪合成酶活性比0%和7%两组要大2—3倍.肝体指数、肝重及肝糖元水平均随饲料中D-葡萄糖含量的提高而逐渐增加,饲喂葡萄糖饲料各组的肝糖元水平均显著高于0%组2倍以上.

树豆酮酸A抑制3T3-L1细胞脂肪合成与分解的作用研究

目的探讨树豆酮酸A(caianonic acid A,CAA)对小鼠3T3-L1脂肪细胞脂质代谢的影响及其机制。方法诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞加入不同浓度的CAA作用48 h后进行总脂肪、甘油三酯、游离脂肪酸和甘油含量测定。实时荧光定量PCR法检测脂质代谢相关基因的表达。结果CAA明显降低3T3-L1脂肪细胞总脂肪和甘油三酯含量,抑制游离脂肪酸和甘油的释放,下调乙酰辅酶A羧化酶(acetyl CoA carboxylase,ACC)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)、激素敏感性脂肪酶(hormone sensitive lipase,HSL)和脂肪甘油三酯脂酶(adipose triglyceride lipase,ATGL)基因的表达,但增加乙酰辅酶A氧化酶(acyl CoA oxidase,ACOX)和肉碱棕榈酰转移酶-1(carnitine palmitoyl transferase 1,CPT-1)基因的mRNA水平。结论 CAA通过抑制脂肪吸收与合成相关基因(ACC、FAS、LPL)的表达,减少脂肪细胞甘油三酯的合成,抑制细胞过度肥大。同时,下调脂肪分解限速酶基因(HSL、ATGL)mRNA水平,促进脂肪酸氧化关键基因(ACOX和CPT-1)的表达减少游离脂肪酸的释放,改善脂肪细胞的脂质代谢平衡。

β-羟丁酸对奶牛乳腺上皮细胞内乳脂肪合成及其相关基因相对表达量的影响

本试验主要研究了不同浓度的β-羟丁酸（ BHBA）对奶牛乳腺上皮细胞（ BMECs）活力、甘油三酯（ TAG）含量、脂滴形成以及乳脂肪合成相关基因转录水平的影响。将传至第3代的BMECs悬液（1×10^5个/孔）接种于细胞培养板上,每孔加入含10%胎牛血清（ FBS）的DMEM/F12培养液,于37℃的5%二氧化碳（CO2）培养箱培养48 h。再将培养48 h的BMECs随机分配到6个组,各组向培养孔中加入含不同浓度BHBA的DMEM/F12培养液,培养液中的FBS用1 g/L无脂肪酸的牛血清白蛋白（ BSA）代替,并使反应体系中BHBA的最终浓度分别为0（对照）、0.58、1.16、2.32、4.64和9.28 mmol/L。置于37℃的5%CO2培养箱继续培养48 h。试验结果显示：随着BHBA浓度的增加,BMECs活力[（相对增殖率（ RGR）]呈显著的二次曲线增加（P=0.041）,其中BMECs活力以0.58～4.64 mmol/L BHBA组较高,9.28 mmol/L BHBA组较低；低浓度（0.58～2.32 mmol/L）的 BHBA 可促进 BMECs 内脂滴的形成,而较高浓度（4.64～9.28 mmol/L）的BHBA对脂滴形成的促进作用减弱；BHBA与TAG含量及乳脂肪合成相关基因脂肪酸合成酶（ FASN ）、乙酰辅酶 A 羧化酶α（ ACACA ）、硬脂酰辅酶 A 去饱和酶（ SCD）、脂肪酸结合蛋白3（ FABP3）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（ PPARG）和分化抗原簇36（CD36）的相对表达量均无显著的一次线性或二次曲线关系（P〉0.05）。综上,BHBA 对BMECs活力的促进作用呈显著的二次曲线增加,即BHBA对BMECs活力呈显著浓度依赖关系；BHBA对细胞内乳脂肪的合成有提高的趋势。

脂肪酸对奶牛乳脂肪合成的调控作用

1 乳脂肪的合成 乳脂肪主要由98％的甘油三酯和少量的胆固醇、甘油二酯、甘油一酯、游离脂肪酸组成。乳脂肪酸主要有两个来源（图1）：

L-阿拉伯糖促进秀丽隐杆线虫的生长发育及降低脂肪合成

本文以秀丽隐杆线虫作为模式生物,研究L-阿拉伯糖对其生长发育及脂肪合成能力的影响。试验采用葡萄糖作为对照组,分别添加浓度为2.5、5、7.5、10、20mmol/L的L-阿拉伯糖作为试验组,将线虫进行同步化处理后,分析线虫头部摆动频率、身体弯曲频率、身体长度、子代数目及其甘油三酯含量和油红O染色结果。结果显示,在现有添加浓度下,L-阿拉伯糖对秀丽隐杆线虫的身体弯曲频率、子代数目无显著影响,但对线虫的头部摆动频率、身体长度影响显著:当浓度为20 mmol/L时,线虫头部摆动频率相对于对照组增加了约20%;当浓度为7.5mmol/L时,线虫身体长度与对照组相比增加了约11%;甘油三酯分析结果显示,L-阿拉伯糖试验组中线虫体内的甘油三脂含量均低于对照组,并随添加浓度的增加显著降低(p<0.01),当L-阿拉伯糖浓度为20 mmol/L时,线虫体内甘油三酯含量与对照组相比降低了约67%;油红O染色结果与甘油三酯分析结果一致。本试验研究表明,L-阿拉伯糖能够促进秀丽隐杆线虫的头部摆动频率和身体生长,并对于降低其脂肪合成作用具有较为明显的效果,具有一定的降脂功效。