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外用脂肪干细胞培养上清液对二氧化碳点阵激光焕肤术后伤口愈合的影响 被引量:11
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作者 周炳荣 许阳 +6 位作者 徐妍 王影 朱丰 Felicia Permatasari 吴迪 尹志强 骆丹 《中国中西医结合皮肤性病学杂志》 CAS 2013年第5期277-280,共4页
目的探讨局部外用脂肪干细胞培养上清液在二氧化碳点阵激光焕肤术后伤口愈合过程中的作用。方法 9名受试者的双侧前臂内侧分别接受二氧化碳点阵激光治疗。随机选择受试者一侧前臂激光治疗处外敷脂肪干细胞培养上清液,另一侧则外敷DMEM... 目的探讨局部外用脂肪干细胞培养上清液在二氧化碳点阵激光焕肤术后伤口愈合过程中的作用。方法 9名受试者的双侧前臂内侧分别接受二氧化碳点阵激光治疗。随机选择受试者一侧前臂激光治疗处外敷脂肪干细胞培养上清液,另一侧则外敷DMEM细胞培养基。分别在上述处理后第1,4,7,14,21天检测受试部位经皮水分丢失、皮肤颜色及皮肤弹性。结果经过局部外用脂肪干细胞培养上清液一侧的红斑指数、黑色素指数和经皮水分丢失均显著低于对照侧。而皮肤弹性与对照侧差异无统计学意义。结论局部应用脂肪干细胞培养上清液是促进二氧化碳点阵激光焕肤术后伤口愈合和减少不良影响的一种有效方法。 展开更多
关键词 二氧化碳点阵激光 脂肪干细胞培养上清液 伤口愈合
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骨髓间充质干细胞培养上清液抑制异体淋巴细胞增殖 被引量:4
2
作者 吴涛 白海 +2 位作者 王存邦 路继红 欧剑锋 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期469-469,共1页
关键词 骨髓间充质干细胞 细胞培养上 淋巴细胞增殖 异体 免疫调节作用 MSCs 多向分化潜能 临床应用前景 免疫调控机制 cells
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骨髓间充质干细胞培养上清液治疗支气管哮喘及对肺部炎症的影响 被引量:2
3
作者 雷琰 刘长卿 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第36期5764-5768,共5页
背景:医学界普遍认为支气管哮喘是一种与Th2相关的免疫反应疾病,目前尚缺乏理想的治疗方法。骨髓间充质干细胞作为一种成体干细胞,不仅具有增殖和多向分化能力,还具有低免疫原性和免疫调节能力。目的:探讨骨髓间充质干细胞培养上清液对... 背景:医学界普遍认为支气管哮喘是一种与Th2相关的免疫反应疾病,目前尚缺乏理想的治疗方法。骨髓间充质干细胞作为一种成体干细胞,不仅具有增殖和多向分化能力,还具有低免疫原性和免疫调节能力。目的:探讨骨髓间充质干细胞培养上清液对支气管哮喘小鼠肺部炎症的影响。方法:将20只实验小鼠随机分为对照组和实验组,每组10只,在第0天及第14天小鼠腹腔注射卵清蛋白溶液致敏,并在第24-26天雾化吸入卵清蛋白溶液激发。实验组从第24天开始,在每次激发前2 h,腹腔注射制备好的骨髓间充质干细胞培养上清液2 m L,对照组腹腔注射生理盐水。末次激发后麻醉致小鼠安乐死亡,采取血清、肺泡灌洗液及肺脏组织进行研究。结果与结论:1对照组小鼠肺组织结构发生异常,黏膜下层和肌层内能够看见大量嗜酸性粒细胞及单核细胞浸润,经骨髓间充质干细胞培养液治疗后,实验组小鼠肺部炎症较轻。2实验组白细胞总数、嗜酸性粒细胞数、嗜酸性粒细胞百分比显著低于对照组(P<0.01)。3实验组肺泡灌洗液以及血清中白细胞介素17水平显著低于对照组(P<0.05);肺泡灌洗液以及血清中白细胞介素4水平与对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。上述结果提示支气管哮喘小鼠腹腔注入骨髓间充质干细胞培养上清液能够减轻肺部炎性病理反应严重程度,降低肺泡灌洗液以及血清中相关的炎症指标水平。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓干细胞 骨髓间充质干细胞培养上 支气管哮喘 肺部炎症 嗜酸性粒细胞
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骨髓间质干细胞培养上清液调控肝细胞的体外研究 被引量:1
4
作者 谭雷 胡昆鹏 +5 位作者 徐丽南 姚志成 徐见亮 林楠 卢逸 许瑞云 《器官移植》 CAS 2012年第4期230-237,共8页
目的探讨骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)培养上清液对肝细胞增殖、凋亡的影响,初步探讨BMSC治疗肝纤维化的旁分泌机制。方法采用密度梯度离心及贴壁细胞分离相结合提取BMSC。培养48h的BMSC细胞培养上清液按B... 目的探讨骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)培养上清液对肝细胞增殖、凋亡的影响,初步探讨BMSC治疗肝纤维化的旁分泌机制。方法采用密度梯度离心及贴壁细胞分离相结合提取BMSC。培养48h的BMSC细胞培养上清液按BMSC不同处理(培养)时间和含量两种方法建组。不同处理时间建组:取培养48hBMSC上清液处理肝细胞(完全培养),分为处理24h、48h、72h组,对照组为1640培养基处理24h的肝细胞。不同含量BMSC建组:实验1组为完全BMSC培养上清液(含肝细胞的6孔板中每孔加入BMSC上清液2ml)处理肝细胞;实验2组为部分BMSC培养上清液(每孔加BMSC上清液1ml+1640培养基1ml)处理肝细胞;对照组为完全细胞培养基(每孔加1640培养基2ml)处理肝细胞。用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测BMSC旁分泌肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)情况及培养时间对其的影响;用流式细胞仪观察肝细胞细胞分期和检测凋亡细胞数;用蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测样本上清液中白蛋白的表达。结果 BMSC分泌HGF,其含量变化具有时间依赖性。加入BMSC培养上清液后,与对照组相比,实验1组中的培养上清液可以明显促进肝细胞增殖、抑制其凋亡,并随着处理时间的延长而增加(处理72h>处理48h>处理24h,均为P<0.05);实验组(1组、2组)的白蛋白分泌较对照组上调,且随着处理时间的延长白蛋白含量增加。结论 BMSC有可能通过分泌HGF促进肝细胞增殖、抑制凋亡,促进白蛋白分泌,从而抑制肝脏纤维化。 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞培养上 细胞生长因子 细胞 肝纤维化
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小鼠颌下腺组织培养上清液对造血干细胞和骨髓细胞增殖影响的实验研究
5
作者 吴宏 王亚平 祝彼得 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2000年第1期14-17,共4页
本实验采用脾集落形成法和流式细胞术等技术,研究了小鼠颌下腺组织培养上清液(SGCM)对造血干细胞和骨髓细胞增殖的影响。结果表明:正常雄性和雌性SGCM对小鼠造血干细胞增殖和分化有明显促进作用;SGCM能有效促进小鼠骨... 本实验采用脾集落形成法和流式细胞术等技术,研究了小鼠颌下腺组织培养上清液(SGCM)对造血干细胞和骨髓细胞增殖的影响。结果表明:正常雄性和雌性SGCM对小鼠造血干细胞增殖和分化有明显促进作用;SGCM能有效促进小鼠骨髓细胞(BMC)由相对静止期(G0/G1)进入增殖活跃期(S+G2/M),并能提高骨髓有核细胞数。研究提示,正常小鼠颌下腺可能通过分泌造血生长因子样物质促进小鼠造血干细胞增殖和分化并加快BMC从静止期进入增殖周期,从而发挥造血调控功能。 展开更多
关键词 小鼠 颌下腺组织 培养上 造血干细胞
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脂肪干细胞上清液的应用及临床转化前景 被引量:2
6
作者 张洋 张碧雅 肖丽玲 《广东医学》 CAS 2018年第2期163-166,共4页
近年来脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)作为热受追捧的间充质干细胞,在再生医学和临床工作中已受到了广泛的关注与应用。含有多种生长因子的ADSCs上清液(ADSCs-CM)的应用价值逐渐被认识及认可。本文将对近年来ADSCs-CM的... 近年来脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)作为热受追捧的间充质干细胞,在再生医学和临床工作中已受到了广泛的关注与应用。含有多种生长因子的ADSCs上清液(ADSCs-CM)的应用价值逐渐被认识及认可。本文将对近年来ADSCs-CM的研究进展进行分析总结,并对ADSCs-CM在临床转化上的可能性作出展望。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 脂肪干细胞上清 生长因子
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视网膜干细胞培养上清液诱导骨髓间充质干细胞的分化
7
作者 汪卓 王丹 +1 位作者 郝冬海 李博 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第40期7021-7027,共7页
背景:骨髓间充质干细胞向神经细胞诱导分化可为神经系统受损伤后的修复和再生带来了新的希望。目的:探讨骨髓间充质干细胞在视网膜干细胞培养上清液诱导条件下向神经元细胞分化。方法:采用全骨髓培养方法,用视网膜干细胞培养上清液诱导... 背景:骨髓间充质干细胞向神经细胞诱导分化可为神经系统受损伤后的修复和再生带来了新的希望。目的:探讨骨髓间充质干细胞在视网膜干细胞培养上清液诱导条件下向神经元细胞分化。方法:采用全骨髓培养方法,用视网膜干细胞培养上清液诱导骨髓间充质干细胞,通过免疫荧光染色鉴定其分化的结果。结果与结论:诱导72 h,骨髓间充质干细胞表达神经干细胞的特异性抗体巢蛋白和神经元中的标志性微管相关蛋白微管相关蛋白2。视网膜干细胞培养上清液能够促进骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化,提示视网膜干细胞可能分泌神经生长因子。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓干细胞 骨髓间充质干细胞 诱导分化 神经元样细胞 视网膜干细培养上 巢蛋白 微管相关蛋白2 干细胞图片文章
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2种不同成牙本质诱导液对大鼠脂肪干细胞增殖凋亡的影响 被引量:2
8
作者 吴娟娟 田芳 +3 位作者 宋琦 李萍 赵彩霞 魏丹 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第7期881-884,共4页
目的探索2种不同的成牙本质诱导液——牙胚条件培养液(TGC-CM)和牙本质非胶原蛋白(DNCPM)对大鼠脂肪干细胞增殖和凋亡的影响。方法 (1)取出生4d的SD乳鼠4只,分别取腹股沟脂肪组织,用酶消化法进行脂肪干细胞分离和培养,免疫细胞化学法对... 目的探索2种不同的成牙本质诱导液——牙胚条件培养液(TGC-CM)和牙本质非胶原蛋白(DNCPM)对大鼠脂肪干细胞增殖和凋亡的影响。方法 (1)取出生4d的SD乳鼠4只,分别取腹股沟脂肪组织,用酶消化法进行脂肪干细胞分离和培养,免疫细胞化学法对细胞进行鉴定。(2)2种诱导液作用细胞后,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,MTT法检测细胞增殖情况,Annexin/PI双染后流式细胞仪检测细胞的凋亡情况。结果 (1)细胞培养至第2代时表型分子CD44和CD105表达呈阳性。(2)经TGC-CM及DNCPM培养3d后形态上发生极性改变。培养6d后,TGC-CM培养的细胞数量未见明显改变,而DNCPM培养的细胞密度明显降低。(3)MTT结果显示DNCPM组OD值低于对照组及TGC-CM组(P<0.05),流式细胞凋亡检测仪检测DNCPM组细胞凋亡率高于TGC-CM组和对照组(P<0.05)。结论作为大鼠脂肪干细胞向成牙本质样细胞方向分化的诱导液,TGC-CM可能更具优势。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 牙胚条件培养 牙本质非胶原蛋白 增殖 凋亡
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脂肪干细胞无细胞提取液的治疗用途:皮肤老化、创面愈合、瘢痕恢复乃至神经再生 被引量:12
9
作者 蔡原 邓呈亮 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第13期2097-2102,共6页
背景:脂肪干细胞无细胞提取液包括脂肪干细胞条件培养基、脂肪干细胞外泌体,因其不含细胞,易于携带、储存和运输,已成为当前最热门的治疗方法之一。目的:对脂肪干细胞无细胞提取液治疗用途的研究进展作一综述。方法:以“脂肪干细胞、基... 背景:脂肪干细胞无细胞提取液包括脂肪干细胞条件培养基、脂肪干细胞外泌体,因其不含细胞,易于携带、储存和运输,已成为当前最热门的治疗方法之一。目的:对脂肪干细胞无细胞提取液治疗用途的研究进展作一综述。方法:以“脂肪干细胞、基质细胞与条件培养基”“脂肪干细胞、基质细胞与外泌体”为中文检索词,“adipose stem cell,adipose stromal cell and conditioned medium”和“adipose stem cell,adipose stromal cell and exosomes”为英文检索词,由第一作者检索2005年1月至2020年3月CNKI、万方、PubMed数据库相关文章。排除重复性及缺乏原创性的文献,计算机初检得到123篇文献,最终保留62篇进行归纳总结。结果与结论:脂肪干细胞无细胞提取液在皮肤老化、创面愈合、瘢痕恢复、神经再生等多个领域具有广泛的治疗潜力,但具体作用机制尚不十分清楚,仍需进行更深入的相关研究。 展开更多
关键词 干细胞 脂肪干细胞 提取 条件培养 外泌体 治疗 综述
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类ES细胞持续培养的上清液对小鼠囊胚ICM团形成的影响 被引量:2
10
作者 高其双 程百炼 +5 位作者 龚余量 梁勤 宫时玉 艾春汉 杨永森 夏瑜 《上海畜牧兽医通讯》 2004年第5期13-13,12,共2页
关键词 类ES细胞 持续培养 上清 小鼠囊胚 ICM团 胚胎干细胞 动物
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鸡卵清提取液中大于3ku蛋白促细胞升高表达多能基因Oct-3/4和Nanog 被引量:1
11
作者 阮光萍 姚翔 +7 位作者 刘菊芬 舒帆 王金祥 何洁 杨建勇 赵晶 庞荣清 潘兴华 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第37期6029-6033,共5页
背景:将体细胞重编程为多能干细胞在生物医学研究领域有广泛的应用价值。目的:分析鸡卵清提取液中不同分子质量的蛋白促进293T细胞升高表达多能基因Oct-3/4和Nanog的作用。方法:分离鸡卵清提取液中大于3 ku和小于3 ku的成分,用于293T细... 背景:将体细胞重编程为多能干细胞在生物医学研究领域有广泛的应用价值。目的:分析鸡卵清提取液中不同分子质量的蛋白促进293T细胞升高表达多能基因Oct-3/4和Nanog的作用。方法:分离鸡卵清提取液中大于3 ku和小于3 ku的成分,用于293T细胞共培养。实验分为4组:每孔加入1×105个293T细胞,总体积500μL。对照组加入500μL培养基;另外3个孔分别加500μL鸡卵清提取液、鸡卵清大于3 ku的成分和小于3 ku的成分。采用定量PCR检测多能基因Nanog和Oct-3/4的相对表达量。结果与结论:用共培养法大于3 ku的成分有促细胞升高表达多能基因Oct-3/4和Nanog的作用,但小于3 ku的成分没有促细胞升高表达多能基因的作用。提示在鸡卵清提取液中促细胞升高表达多能基因的成分是大于3 ku的蛋白质。 展开更多
关键词 干细胞 培养 鸡卵提取 多能基因 大于3 ku的成分 293T细胞 细胞培养 国家自然科学基金
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血小板裂解液对人间充质干细胞生物学特性的影响
12
作者 吴迪 武晓云 吴岩 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第23期3723-3728,共6页
背景:血小板裂解液是自体或异体血小板富集物经裂解后获得的产物,不仅去除了残余的细胞结构,降低了免疫原性,而且保留了其中的多种生长因子,有研究表明它可替代传统培养基中的胎牛血清,对间充质干细胞进行体外扩增。目的:观察血小板裂... 背景:血小板裂解液是自体或异体血小板富集物经裂解后获得的产物,不仅去除了残余的细胞结构,降低了免疫原性,而且保留了其中的多种生长因子,有研究表明它可替代传统培养基中的胎牛血清,对间充质干细胞进行体外扩增。目的:观察血小板裂解液对人骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞生物学特性的影响,为临床细胞治疗及再生医学提供科学的实验数据。方法:采集新鲜血液,经冻融获取血小板裂解液;采集健康成人骨髓和脂肪组织,分别采用密度梯度离心法和Ⅰ型胶原酶消化法获得骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞;对血小板裂解液培养后的骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞的细胞形态、细胞表型、分化能力、增殖能力、集落形成能力和细胞因子分泌水平进行检测。结果与结论:应用血小板裂解液在体外成功地培养扩增了骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞,两种细胞的细胞形态、细胞表型、集落形成能力、细胞因子分泌水平、成软骨、成骨和成脂肪分化能力等生物学特性无明显差异。脂肪间充质干细胞的累积群倍数高于骨髓间充质干细胞(P<0.05),表明脂肪间充质干细胞具有更强的增殖能力,在体外血小板裂解液培养体系下更适宜进行大规模扩增。 展开更多
关键词 富血小板血浆 间质干细胞 骨髓 脂肪组织 细胞 培养 干细胞 培养 血小板裂解 骨髓间充质干细胞 脂肪间充质干细胞 细胞培养
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3种诱导法诱导CD73^+脂肪间充质干细胞成心肌细胞效果的比较
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作者 齐立杰 郭康 +1 位作者 李琼 郭志坤 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期339-344,共6页
目的从脂肪来源的间充质干细胞(ADMSCs)的混合细胞群中分离纯化出CD73阳性的细胞亚群,证明几种不同诱导法诱导CD73细胞的成心肌分化潜能。方法体外分离培养1~3月龄小鼠的ADMSCs,利用流式细胞仪从ADMSCs中分选出CD73+和CD73-两个细胞亚... 目的从脂肪来源的间充质干细胞(ADMSCs)的混合细胞群中分离纯化出CD73阳性的细胞亚群,证明几种不同诱导法诱导CD73细胞的成心肌分化潜能。方法体外分离培养1~3月龄小鼠的ADMSCs,利用流式细胞仪从ADMSCs中分选出CD73+和CD73-两个细胞亚群。分别培养两组细胞,利用5-氮杂胞苷(5-aza)、心肌组织裂解液和5-aza+心肌组织裂解液对两组分选出的细胞分别进行成心肌的诱导。利用免疫细胞化学技术检测3种诱导法的成心肌效果。结果未分选的ADMSCs可分化为成脂和成骨细胞,分选的CD73+细胞具备分化为心肌细胞的良好潜能。3种诱导法均能诱导CD73+ADMSCs向心肌方向分化,5-aza诱导CD73+ADMSCs分化为心肌细胞率为(22.99±6.72)%,心肌组织裂解液组心肌细胞率(14.12±5.42)%,5-aza+心肌组织裂解液组心肌细胞率(26.94±6.11)%。3种方法比较,5-aza+心肌组织裂解液的诱导效果最佳(P<0.05)。结论 CD73+比CD73-的ADMSCs更易于分化为心肌细胞。化学诱导因素和体外模拟心肌微环境,可高效诱导脂肪间充质干细胞分化为心肌细胞。 展开更多
关键词 CD73 5-氮杂胞苷 心肌组织裂解 脂肪源间充质干细胞 细胞培养 免疫荧光 小鼠
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干细胞分泌因子促进难愈性创面愈合的机制及应用前景 被引量:7
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作者 孙亚如 张美荣 高宏 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第6期1125-1128,共4页
背景:干细胞能够分泌多种伤口愈合相关因子。目的:总结并分析干细胞分泌的创面愈合相关因子治疗难愈性创面的可行性,及其可能的调控及修复机制。方法:应用计算机检索Google、Pubmed及万方数据库相关文献,英文检索词为"chronic woun... 背景:干细胞能够分泌多种伤口愈合相关因子。目的:总结并分析干细胞分泌的创面愈合相关因子治疗难愈性创面的可行性,及其可能的调控及修复机制。方法:应用计算机检索Google、Pubmed及万方数据库相关文献,英文检索词为"chronic wound,refractory wound,cutaneous,wound healing,wound repair,diabetic wound,stem cell-derived conditioned medium,cellular cytokine solution"。中文检索词为"创面修复,创伤修复"。选择论点论据可靠且分析全面的与干细胞分泌的促进伤口愈合因子密切相关的文章,排除内容重复文献,最终纳入34篇文献进行总结综述。结果与结论:多种干细胞培养上清液中富含创面愈合相关因子,可作为细胞因子制剂治疗难愈性创面。然而由于干细胞来源不同,体外培养条件不同,其因子分泌状况也有所差异,因此应用何种来源的干细胞分泌因子,如何在体外最大限度地刺激干细胞产生创面愈合相关因子以及其未来在临床应用中的使用时机、频次和剂量仍有待进一步探索。 展开更多
关键词 分泌因子 干细胞 培养上 难愈性创面 愈合
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糖尿病小鼠来源的骨髓间充质干细胞培养上清液诱发胰岛素抵抗的研究
15
作者 李包娟 周克春 +3 位作者 阿布都拉·米热合买提 祖丽胡马·热合曼 叶雨萌 张之 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第14期2033-2037,共5页
目的探究糖尿病小鼠来源的骨髓间充质干细胞及其旁分泌作用在诱发胰岛素抵抗(IR)中扮演的角色。方法建立小鼠糖尿病模型,提取并培养骨髓间充质干细胞(BMSC),收集培养上清液(M-BMSC-CS)。(1)细胞实验:将HepG2肝细胞分为正常低糖培养组[... 目的探究糖尿病小鼠来源的骨髓间充质干细胞及其旁分泌作用在诱发胰岛素抵抗(IR)中扮演的角色。方法建立小鼠糖尿病模型,提取并培养骨髓间充质干细胞(BMSC),收集培养上清液(M-BMSC-CS)。(1)细胞实验:将HepG2肝细胞分为正常低糖培养组[用低糖DMEM(5.55 mmol·L^(-1))进行培养]、M-BMSC-CS实验组(M-BMSC-CS 75μL)、高糖高脂对照组(给予25 mmol·L^(-1)高糖DMEM+0.25 mmol·L^(-1)棕榈酸)。(2)动物实验:小鼠分为正常小鼠组(腹腔注射等体积0.9%NaCl)和M-BMSC-CS-m组(M-BMSC-CS通过腹腔注射给予正常小鼠,注射剂量0.2 mL/10 g)。用葡萄糖氧化酶法检测葡萄糖摄取量,用免疫荧光法检测Glut2蛋白荧光强度,用蛋白质印迹法检测胰岛素信号通路蛋白表达;检测口服葡萄糖耐量(OGTT)和胰岛素耐量(ITT)。结果正常低糖培养组、M-BMSC-CS实验组和高糖高脂对照组的葡萄糖摄取量分别为(2.96±0.05)、(1.64±0.28)和(1.42±0.32)mmol·L^(-1),葡萄糖转运蛋白2(Glut2)荧光表达分别为53.21±2.70、30.95±3.39和34.96±7.60,磷酸化胰岛素受体底物1-ser307(p-IRS-1ser307)表达蛋白相对水平分别为0.46±0.21、1.09±0.24和0.91±0.16,磷酸化蛋白激酶(p-AKT)蛋白相对表达水平分别为0.94±0.05、0.59±0.06和0.53±0.05,Glut2蛋白表达水平分别为1.08±0.14、0.58±0.14和0.62±0.09;M-BMSC-CS实验组的上述指标与正常低糖培养组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。正常小鼠组和M-BMSC-CS-m组空腹血糖分别为(5.23±0.57)和(9.30±1.14)mmol·L^(-1),p-AKT蛋白相对表达水平分别为1.27±0.21和0.51±0.19,Glut2蛋白相对表达水平分别为1.17±0.17和0.79±0.09;M-BMSC-CS-m组的上述各指标与正常小鼠组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论糖尿病小鼠来源的BMSC培养上清液在体外引起正常HepG2肝细胞胰岛素抵抗,在体内诱发正常小鼠胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 糖尿病小鼠 骨髓间充质干细胞培养上 胰岛素抵抗 HepG2肝细胞 正常小鼠
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重组腺病毒介导血管内皮生长因子基因在骨髓间充质干细胞中的表达及其影响 被引量:2
16
作者 关思虞 曾秋棠 《华中医学杂志》 CAS 2005年第3期190-192,共3页
目的观察重组腺病毒介导血管内皮生长因子基因(AdVEGF165)转染后大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)中血管内皮生长因子的表达情况以及腺病毒载体对大鼠骨髓间充质干细胞的生长影响情况。方法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,用腺病毒载体转染BM... 目的观察重组腺病毒介导血管内皮生长因子基因(AdVEGF165)转染后大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)中血管内皮生长因子的表达情况以及腺病毒载体对大鼠骨髓间充质干细胞的生长影响情况。方法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,用腺病毒载体转染BMSCs。采用ELISA法检测血管内皮生长子因子(VEGF)的表达和分泌。转染后用胰酶消化传代培养,MTT法绘制细胞生长曲线。结果AdVEGF165转染组上清液中VEGF蛋白表达量极显著高于空白对照组(P<0.01)。且AdVEGF165转染BMSCs后,生长曲线与正常培养细胞无显著差异(P>0.05)。结论重组腺病毒载体能够在BMSCs中介导VEGF的表达,且对BMSCs生长无影响。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子基因 骨髓间充质干细胞 重组腺病毒介导 表达及 BMSCs ELISA法检测 腺病毒载体转染 细胞生长曲线 VEGF蛋白 生长影响 表达情况 体外培养 传代培养 胰酶消化 MTT法 培养细胞 大鼠 对照组 表达量 上清
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骨髓间充质干细胞在多发性骨髓瘤活动与缓解期具有不同的促血管生成能力 被引量:4
17
作者 李香丽 张小影 +1 位作者 臧立 王晓芳 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第37期5935-5941,共7页
背景:活动期和缓解期多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞的血管生成能力有无差异目前尚不清楚。目的:观察多发性骨髓瘤活动期及缓解期骨髓间充质干细胞促血管生成能力的差异。方法:抽取13例多发性骨髓瘤患者治疗前和4个周期治疗后的骨髓... 背景:活动期和缓解期多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞的血管生成能力有无差异目前尚不清楚。目的:观察多发性骨髓瘤活动期及缓解期骨髓间充质干细胞促血管生成能力的差异。方法:抽取13例多发性骨髓瘤患者治疗前和4个周期治疗后的骨髓,分离培养出骨髓间充质干细胞,采用ELISA方法测定骨髓间充质干细胞培养上清液中血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子的浓度;MTT检测骨髓间充质干细胞培养上清液对脐静脉内皮细胞增殖能力的影响;通过Transwell小室观察骨髓间充质干细胞培养上清液对脐静脉内皮细胞运动能力的影响;通过人工基底膜实验观察骨髓间充质干细胞体外促血管生成和成管能力。结果与结论:活动期多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞培养上清中血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子浓度明显高于缓解期(P<0.05);骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞上清对脐静脉内皮细胞增殖作用呈剂量依赖性,活动期明显强于缓解期(P<0.05);活动期骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞上清对脐静脉内皮细胞迁移作用明显高于缓解期(P<0.05);骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞体外具有明显成血管作用,活动期明显强于缓解期(P<0.05)。结果提示多发性骨髓瘤活动期骨髓间充质干细胞促血管生成能力明显大于缓解期。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓干细胞 多发性骨髓瘤 骨髓间充质干细胞 细胞培养上 细胞迁移 直接成管能力 血管生成能力 脐静脉内皮细胞 血管生成因子 活动期 缓解期 国家自然科学基金
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脂肪干细胞上清液培养雪旺细胞的实验研究 被引量:1
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作者 陈露露 沈尊理 +2 位作者 金羽青 刘璋寅 沈华 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第16期3018-3020,3028,共4页
目的:研究应用脂肪干细胞上清液培养新生小鼠雪旺细胞的可行性。方法:取新生(出生5-7天)C57BL/6小鼠的坐骨神经,采用0.2%的复合胶原酶NB4消化法分离获取细胞,然后应用雪旺细胞条件培养基(SCCM)和C57BL/6小鼠的脂肪干细胞上清液(ADSC-CM... 目的:研究应用脂肪干细胞上清液培养新生小鼠雪旺细胞的可行性。方法:取新生(出生5-7天)C57BL/6小鼠的坐骨神经,采用0.2%的复合胶原酶NB4消化法分离获取细胞,然后应用雪旺细胞条件培养基(SCCM)和C57BL/6小鼠的脂肪干细胞上清液(ADSC-CM)分别培养雪旺细胞。用0.2%复合胶原酶NB4差速分离纯化这两种方法培养的雪旺细胞,每48 h纯化1次,共进行2次纯化。应用P75免疫荧光染色方法鉴别两组P2代雪旺细胞并比较两组雪旺细胞的纯度和生长情况。结果:脂肪干细胞上清液培养的雪旺细胞纯化两次后,数量明显增多,其纯度与雪旺细胞条件培养基相比没有明显差异(P>0.05)。结论:脂肪干细胞上清液可以较好的培养雪旺细胞,可以作为一种新的廉价方便的培养基代替雪旺细胞条件培养基来培养许雪旺细胞。 展开更多
关键词 脂肪干细胞上清 雪旺细胞 细胞分离纯化 周围神经
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SD大鼠视网膜神经细胞培养上清液对胚胎干细胞体外分化的诱导作用 被引量:9
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作者 杨智宽 葛坚 +2 位作者 郭彦 王智崇 刘海泉 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 2002年第2期134-136,共3页
目的 探讨视网膜神经细胞培养的上清液对胚胎干细胞 (embryonic stem cells,ES)体外分化的诱导作用。 方法 收集 SD大鼠视网膜神经细胞培养上清液 ,抽滤后按 2∶ 3比例与 DMEM培养液混合 ,用该混合液进行 ES细胞的诱导分化 ,每天倒... 目的 探讨视网膜神经细胞培养的上清液对胚胎干细胞 (embryonic stem cells,ES)体外分化的诱导作用。 方法 收集 SD大鼠视网膜神经细胞培养上清液 ,抽滤后按 2∶ 3比例与 DMEM培养液混合 ,用该混合液进行 ES细胞的诱导分化 ,每天倒置相差显微镜观察 ES细胞的生长及分化情况 ,对诱导分化后的细胞进行神经丝蛋白 (nellcofilamentprotein,NFP)免疫组织化学检查。 结果 加入了视网膜神经细胞培养上清液的 ES细胞生长出类似神经细胞突起样结构 ,NFP免疫组织化学染色阳性。 结论  SD大鼠视网膜神经细胞培养的上清液具有诱导 ES细胞向神经细胞分化的作用。 展开更多
关键词 视网膜神经细胞培养上 胚胎干细胞 胚胎诱导 细胞分化 免疫组织化学 神经丝蛋白 定向诱导
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脂肪间充质干细胞上清液对小鼠皮肤创伤的作用及可能机制 被引量:4
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作者 王晓宇 郭家辰 刘勇 《解剖科学进展》 CAS 2015年第3期263-266,共4页
目的观察小鼠脂肪间充质干细胞(Adipose mesenchymal stem cells,ADSCs)上清液经尾静脉注射治疗小鼠皮肤创伤的效果并探讨其作用机制。方法无菌条件下分离培养正常小鼠的ADSCs取3-5代细胞通过免疫荧光法检测间充质干细胞相关的细胞表面... 目的观察小鼠脂肪间充质干细胞(Adipose mesenchymal stem cells,ADSCs)上清液经尾静脉注射治疗小鼠皮肤创伤的效果并探讨其作用机制。方法无菌条件下分离培养正常小鼠的ADSCs取3-5代细胞通过免疫荧光法检测间充质干细胞相关的细胞表面标记物CD34、CD45、CD90、CD105的表达。建立小鼠全皮层皮肤创伤模型并随机分为2组,注射生理盐水的对照组和注射上清液的实验组,分别于伤后7天,14天观察创面愈合情况。分离小鼠成纤维细胞(Fibroblast,Fb),将小鼠ADSCs上清液作用于Fb不同时间后,应用WST法和Transwell迁移实验检测Fb细胞增殖和迁移情况,应用real-time PCR和Western blot检测Fb中碱性成纤维细胞生长因子(basci fibroblast growth factor,b FGF)在转录和蛋白水平的表达。结果小鼠ADSCs表达CD90和CD105,不表达CD34和CD45。ADSCs上清液注射组于创伤后第7天,14天的伤口愈合率分别为(65%±3.4%),(95.6%±5.2%),均显著高于7天、14天生理盐水对照组的(55%±4.4%),(77.1%±3.1%)。ADSCs上清液作用于Fb后,能促进Fb的增殖和迁移以及上调生长因子b FGF在转录和蛋白水平的表达。结论小鼠ADSCs上清液促进小鼠皮肤创面愈合可能与上调b FGF表达相关。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 上清 皮肤创伤 小鼠
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