脂肪细胞分化过程中影响PAI1基因转录表达的Dex和C/EBPs顺式调控元件的分析( 英文)

在研究胰岛素 (Ins)、地塞米松 (Dex)和甲基异丁基黄嘌呤 (Mix)对脂肪细胞分化过程中PAI 1基因表达的影响基础上 ,为进一步探讨Ins、Dex调控PAI 1基因转录表达的调控机制 ,应用DNA重组技术 ,构建含萤光素酶 (luciferase)报告基因和PAI 1启动子不同长度片段的嵌合质粒 ,转染 3T3 L1前脂肪细胞并测定报告基因荧光素酶的活性 .结果表明 ,小鼠PAI 1基因起动子 - 6 90至 - 85 0碱基序列之间有一个Dex的正调控元件 .用计算机软件进行分析发现 :Dex顺式元件位于PAI 1启动子的 - 75 0至 - 770碱基序列 .其组成为 :5′GGTAACCTCTGTTCTCAT 3′ .同时还发现在PAI 1启动子的- 72 0至 - 74 0碱基序列中 ,存在一个C/EBPs的结合元件 5′CCAAT3′并用凝胶电泳迁移实验对这些元件进行了鉴定 .表明Dex正是通过激活转录因子 (糖皮质激素受体 ,GR)和C/EBPα一起与各自的顺式元件结合来促进PAI 1基因的表达 .