脂肝素胶囊对高脂血症性脂肪肝大鼠肝细胞凋亡及相关基因蛋白表达的影响

目的;探讨脂肝泰胶囊治疗高脂血症性脂肪肝的作用机制。方法:采用高脂饮食喂饲大鼠看复制脂肪肝模型.以东宝肝泰为对服药,观察各组大鼠肝脏病理形态学变化,并运用流式细胞仪观察各组大鼠肝细胞凋亡及相关基因蛋白bcl-2和bax表达的变化。结果:HE染色镜下可见模型组大鼠肝脏中度以上脂肪变性,并有少量的肝细胞坏死;流式细胞术分析可见其细胞凋亡率为13.3％,bcl-2表达量降低,bax表达量增高。与模型组比较,各用药组肝脂变程度显著改善,肝细胞的凋亡率明显下降(P<O.05或P<0.01),bel-2基因表达量增高(P<0.05),bax基因表达量降低(P<O.05)。结论:脂肝泰胶囊能使bcl-2蛋白表达上调、bax蛋白表达下降,抑制细胞凋亡趋势,以达到抗脂肪肝作用。

非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素P450 1A1基因及表达变化的意义

目的研究非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素P4501A1基因和表达变化及其意义。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为两组,正常对照组8只,高脂饮食组2、4、8、12各8只,紫外分光光度计法检测P4501A1活性(7乙氧异恶唑0脱乙基酶,EROD);免疫组织化学和Westernblot方法测定肝细胞色素P4501A1表达变化,逆转录聚合酶链反应测定肝细胞色素P4501A1mRNA表达变化。结果脂肪肝2、4、8和12周EROD活性分别为325.07±59.68、345.25±49.28、468.95±55.28和548.68±43.25nmol·mg-1·min-1,与正常对照组260.42±35.32nmol·mg-1·min-1比较明显增高(P<0.01),肝细胞色素P4501A1基因及蛋白表达随着脂肪肝程度的加重明显增强。结论非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素P4501A1基因和表达变化与脂肪肝引起的肝脏损害程度密切相关。

环孢霉素A对大鼠心脏移植模型淋巴细胞分子表达与移植心脏病理学改变时相关系的影响

【目的】通过环孢素A(CsA)干预的异体异位心脏移植动物模型的研究,对移植术后淋巴细胞分子表达、心肌组织淋巴细胞浸润能力和移植心脏病理改变时相进行比较,探讨环孢素A对其影响。【方法】SD大鼠为移植心脏供体,Wistar大鼠为移植心脏受体。实验分为心脏移植对照组和环孢素A干预+心脏移植组实验组两组。在移植前及移植后24 h、3 d、7d、10 d和12 d时间点免疫荧光测定淋巴细胞在心肌组织中浸润能力、实时定量PCR检测淋巴细胞编码基因CD4、CD8和酪氨酸激酶P59 mRNA表达水平、心肌组织病理学检查判断排斥反应程度。【结果】①心脏移植后24 h内,外周血淋巴细胞基因的转录与表达为一过性降低;②心肌组织CD4+、CD8+淋巴细胞浸润和Ⅱ级排斥反应病理改变,主要出现于心脏移植后的d3～d7;③环孢素A不能有效抑制移植后3 d内心肌组织CD4+、CD8+淋巴细胞浸润程度的快速增加,但可明显降低移植后d3～d7的心肌组织CD4+淋巴细胞的浸润程度;④环孢素A不能完全阻断淋巴细胞P59基因的表达;⑤环孢素A不能有效抑制淋巴细胞CD4基因正调表达,但可抑制CD8基因的转录。【结论】环孢素A的移植排斥反应的抑制作用在大鼠移植后d3～d7。淋巴细胞基因表达、心肌组织淋巴细胞浸润与排斥反应病理改变有关。这将有助于同种移植病人环孢素A的临床应用。

理气化痰祛瘀中药复方对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织NF-κB、IκBα表达的影响

目的:观察理气化痰祛瘀中药复方对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝大鼠肝组织NF-κB、IκB表达的影响。方法:以高脂饲料喂养大鼠造模。造模结束后,分别以不同剂量的理气化痰祛瘀中药和易善复灌胃治疗,模型组和正常组予等容量的蒸馏水灌胃,均连续8周。取肝组织HE染色观察大鼠肝脏脂肪变程度,免疫组化法检测肝组织中NF-κBp65、IκBα的表达。结果:模型组大鼠肝组织脂肪变程度较正常组明显升高(P<0.01);应用大、中、小剂量中药治疗后肝组织脂肪变程度较模型组明显下降(P<0.01)。模型组大鼠肝组织中NF-κBp65、IκBα的阳性表达明显高于正常组(P<0.01);应用大、中、小剂量中药治疗后大鼠肝组织中NF-κBp65表达较模型组明显降低(P<0.05)。结论:理气化痰祛瘀中药能明显改善高脂饮食诱导的大鼠肝组织脂肪变性,抑制大鼠肝组织NF-κBp65表达可能是其作用机制之一。

阿尔茨海默症转基因动物模型脑组织病理学及免疫组化研究

日的通过组织病理学和免疫组织化学方法，验证阿尔茨海默症转基因动物模型。方法取转基因小鼠脑组织，冠状切面中１／３部位，脱水、包埋，进行组织病理学观察，并对相关抗体进行免疫组织化学研究。结果免疫组化显示在大脑皮层、小脑及海马的神经细胞有Ａβ沉淀形成。ＡＰＰ转基因鼠早老素的阳性细胞数及表达量多于对照鼠。刚果红染色可见大脑皮层间有淀粉样物质形成。结论从病理学角度验证此模型的表型与人类病变的相似性，并证明早老素－１可加速淀粉样沉淀的形成，二者的作用是相互的。

降脂益肝冲剂对非酒精性脂肪肝大鼠凋亡调控基因的影响

目前在非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）的发病机制中，以“二次打击”学说得到普遍公认。然而随着对细胞凋亡的研究，不断有证据表明，在NAFLD中，肝细胞凋亡可能是单纯非酒精性脂肪肝发展为非酒精性脂肪性肝炎“二次打击”理论的关键步骤，也是该过程的重要标志．与炎症程度和纤维化进展相关。但是，有关中药对NAFLD肝细胞凋亡调控基因bcl-2和bax影响的报道较少。本研究旨在通过观察降脂益肝冲剂对NAFLD大鼠凋亡调控基因bcl-2和bax蛋白表达的影响，探讨其作用机制，为临床治疗NAFLD提供有效方药。

薏苡仁多糖对2型糖尿病大鼠主动脉内皮素1基因表达的影响

目的观察薏苡仁多糖对实验性糖尿病血管并发症大鼠主动脉内皮素1mRNA表达调控的影响。方法采用链脲佐菌素腹腔注射(75mg/kg)和高热量饲料喂养建立2型糖尿病并发动脉粥样硬化大鼠模型,应用RT-PCR半定量分析大鼠主动脉内皮素1mRNA的表达变化。结果模型组大鼠主动脉内皮素1mRNA表达量为0.72±0.10,明显高于正常组的0.39±0.01(P<0.01),经给药处理6个月后,与模型组的表达量比较,各给药组大鼠主动脉内皮素1mRNA有不同程度的下调(P<0.05),其中薏苡仁多糖注射组的表达量0.49±0.12与模型对照组比较有非常显著性差异(P<0.01)。结论糖尿病血管并发症的发生可能与内皮素1mRNA表达上调有关,薏苡仁多糖保护糖尿病血管内皮损伤可能与其下调内皮素1mRNA表达的作用相关。

补肾健脾法对卵巢早衰小鼠抑制素B含量及基因表达的影响

【目的】观察补肾健脾法中药复方对卵巢早衰(POF)小鼠抑制素B(INHB)含量及基因表达的影响。【方法】选用雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组、中药预防组和中药治疗组。除正常对照组外,其他3组采用SD大鼠卵巢抗原与弗氏佐剂注射免疫法复制自身免疫性卵巢功能衰退小鼠模型。中药预防组于第1次免疫后开始灌服中药复方汤剂,连续17 d,中药治疗组于第3次免疫后开始灌服中药复方汤剂,连续5 d,剂量均为20 g.kg-1.d-1。采用酶联免疫吸附法检测各组血清INHB含量,逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组卵巢组织INHB mRNA表达水平,并观察各组小鼠卵巢病理改变。【结果】模型组小鼠血清INHB含量、卵巢组织INHB mRNA相对表达量均显著降低(P<0.05或P<0.01),光镜下未见明显生长或成熟卵泡;中药预防组血清INHB含量、卵巢组织INHB mRNA相对表达量均显著升高(P<0.05或P<0.01),卵泡数目略减少,无明显病理改变;中药治疗组卵巢组织INHB mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),而对血清INHB含量无影响(P>0.05),生长成熟卵泡减少,且卵巢组织出现病理改变。各组小鼠血清INHB含量与卵巢组织INHB mRNA表达变化呈相似趋势,且中药预防组作用优于中药治疗组。【结论】补肾健脾法中药复方治疗卵巢早衰的作用与其能增强卵巢组织INHB mRNA表达,升高INHB含量,改善卵巢的储备功能有关。

益气活血化痰汤对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织VEGF和ICAM-1基因表达的影响

【目的】观察益气活血化痰汤对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠黏膜血管内皮细胞生长因子(VEGF)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)基因表达的作用。【方法】采用三硝基苯磺酸(TNBS)法复制UC大鼠模型,将60只大鼠分为正常组,模型组,中药高、中、低剂量组(剂量分别为52、26、13 g·kg^(-1)·d^(-1))和美沙拉嗪组(剂量为0.5 g·kg^(-1)·d^(-1)),分别检测各组大鼠体质量、结肠黏膜病理变化,以及肠黏膜VEGF、ICAM-1基因表达水平。【结果】模型组体质量显著降低,结肠黏膜出现明显病理改变,VEGF和ICAM-1基因相对表达量均显著高于正常组(P<0.01)。中药各剂量组均可显著升高大鼠体质量,改善结肠黏膜病理变化,显著降低VEGF、ICAM-1表达水平(P<0.01),其中中药高剂量组作用更佳。【结论】益气活血化痰汤对VEGF和ICAM-1基因表达有下调作用,这可能是其治疗UC作用的机理之一。

睡眠剥夺引起大鼠海马神经元凋亡及相关基因表达的变化(英文)

背景:睡眠剥夺是否引起细胞变性,其信号传导是否与某些基因调控有关。目的:探讨睡眠剥夺引起的神经元凋亡与相关基因表达的变化。设计:随机对照实验研究。地点和材料:实验地点:郑州大学医学院生理学实验室。成年健康SD大鼠,雌雄不限,体质量(200±20)g,由河南省实验动物中心提供。干预:采用TUNEL染色观察了快眼动睡眠剥夺大鼠海马神经元形态学变化,应用原位杂交检测了快眼动睡眠剥夺大鼠海马bcl-2,baxmRNA表达。主要观察指标:睡眠剥夺大鼠海马神经元形态学变化;海马bcl-2和baxmRNA表达。结果:快眼动睡眠剥夺大鼠海马CA1,CA3区神经元阳性凋亡细胞数增多,异相睡眠剥夺组海马CA1～CA4区细胞凋亡率分别为(6.60±2.24)%,(1.69±0.45)%,(6.87±1.32)%,(1.74±0.98)%。CA1,CA3区细胞凋亡率和CA2,CA4区相比较差异有显著性意义(t=5.26～6.95,P<0.05)。bcl-2mRNA阳性信号表达积分值较强,四个区之间差异无显著性意义,baxmRNA表达增强犤CA1为(211.12±59.85);CA3为(205.56±56.99)犦与CA2和CA4区犤(123.42±22.80),(124.21±20.47)犦比较差异有显著性意义(t=3.20～4.36,P<0.05)。结论:睡眠剥夺可引起大鼠海马神经元凋亡,与凋亡相关的bcl-2,baxmRNA基因表达的变化可能涉及神经元的凋亡机制。

补气活血方对多因素损伤AD大鼠海马区β-APP及相关基因表达的影响

目的:探讨补气活血方对老年性痴呆的作用及作用机制。方法:采用腹腔注射D-半乳糖、氢溴酸东莨菪碱注射液(SCOP),胃饲AlCl3,喹啉酸(QA)海马区注射相结合的方法建立多因素损伤AD大鼠模型,采用免疫组化法观察大鼠海马区β-APP、COX-2、IκB-α及nNOS的变化。结果:补气活血方能明显降低AD模型大鼠海马区β-APP、COX-2、IκB-α表达,使nNOS表达升高。结论:补气活血方可能通过降低COX-2、NF-κB/IκB-α,增加模型大鼠海马区nNOS表达,影响β-APP生成,延缓神经元细胞的早期损伤和迟发性损伤,从而达到治疗AD作用。

柴平汤对非酒精性脂肪性肝病大鼠LXR-α表达影响的实验研究

目的:探讨柴平汤对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝X受体α(LXR-α)的影响。方法:选择雄性SD大鼠,用高脂饲料建立非酒精性脂肪性肝病模型,并用柴平汤干预治疗,观察各组大鼠肝脏病理变化,荧光定量RT-PCR检测各组大鼠肝组织LXR-α的基因表达。结果:柴平汤干预治疗组肝组织病理变化较模型组明显减轻;模型组大鼠肝组织LXR-αmRNA的表达明显高于正常对照组(P<0.01),治疗组肝组织LXR-αmRNA的表达明显降低(P<0.05)。结论:降低NAFLD大鼠肝组织的LXR-α基因表达可能是柴平汤治疗非酒精性脂肪性肝病的作用机制。

生化止血饮对药流后大鼠子宫内膜病理形态学变化及其PR、ER表达的影响

目的:探讨祛瘀生新代表方生化止血饮改善药流后出血的作用机制。方法:建立药流模型后分为缩宫素组,益母草组和生化止血饮组,采用免疫组化法检测各组大鼠给药前后大鼠子宫内膜(包括蜕膜)中孕激素受体(PR)、雌激素受体(ER)的变化。并光镜观察子宫内膜、蜕膜细胞变化。结果:生化止血饮可显著降低PR表达水平,增强ER表达水平,其疗效优于益母草组及缩宫素组。对蜕膜细胞具有促进其坏死作用。结论:生化止血饮对药流后出血具有明显止血作用,其作用机理与调节PR、EP表达水平有关。

哮喘大鼠气道上皮原癌基因c-Fos表达异常及喘敷灵巴布剂对其干预作用的研究

目的:探讨喘敷灵巴布剂对大鼠气道平滑肌上皮原癌基因c-Fos表达的影响。方法:选择雄性SD大鼠随机分组,应用卵蛋白腹腔注射及雾化吸入制作大鼠哮喘模型,应用免疫组化方法检测c-Fos蛋白的表达。结果:免疫组化显示造模组与正常组、中药组及地塞米松组c-Fos的蛋白表达比较,差异具有显著性(P<0·01);而各治疗组无差异。病理结果显示,中药组可减轻大鼠气道平滑肌的增生。结论:喘敷灵巴布剂可能通过下调原癌基因c-Fos表达来抑制大鼠气道平滑肌细胞增生。

丹酚酸A对实验性大鼠肝纤维化Ⅰ型胶原及其基因表达的影响(摘要)

目的:研究丹酚酸A（SA-A）的抗肝损伤、抗肝纤维化作用及其对Ⅰ型胶原基因表达的影响。方法:采用CCl4诱导大鼠肝损伤及肝纤维化,期间予SA-A灌胃治疗,另设秋水仙碱组、丹参组作对照,6周后进行肝组织病理学和Ⅰ型胶原免疫组化观察,肝组织羟脯氨酸（Hyp）、血清ALT、AST和白蛋白含量测定。

多烯磷脂酰胆碱对非酒精性脂肪肝大鼠脂肪组织肿瘤坏死因子α mRNA水平的影响

目的:以逆转录(RT)和实时定量聚合酶链式反应(Real-tim e qPCR)检测和分析药物对于非酒精性脂肪肝病(NAFLD)干预效果。方法:以高脂饲料饲养W istar大鼠12周,诱发NAFLD,然后转以基础饲料饲养,并对实验大鼠进行多烯磷脂酰胆碱干预与蒸馏水对照的实验,每组大鼠8只,为期4周。提取脂肪组织的总RNA,逆转录为cDNA,通过实时定量PCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA的相对水平,并以t-检验进行数据的统计分析。结果:干预组大鼠脂肪组织TNF-αmRNA的相对水平(0.269±0.047)高于对照组(0.125±0.015),两组间差异显著(t=3.094;P=0.009)。结论:多烯磷脂酰胆碱干预可显著增加NAFLD大鼠脂肪组织TNF-α基因的表达而不利于实验大鼠肝内的糖代谢过程。

复元愈肝胶囊对脂肪肝大鼠肝细胞凋亡的影响

目的:研究复元愈肝胶囊对脂肪肝大鼠的作用机理。方法:采用高脂饮食喂饲大鼠复制脂肪肝模型,同时用复元愈肝胶囊治疗,以东宝肝泰为对照药,观察各组动物的肝功能、血脂及肝组织学变化;运用流式细胞仪和免疫组化法检测大鼠肝细胞凋亡及Bc l-2、Bax蛋白表达。结果:与模型对照组相比,复元愈肝胶囊低、中、高剂量组能显著降低血脂,改善肝功能(P<0.01,P<0.05),明显优于东宝肝泰对照组(P<0.01,P<0.05)。模型对照组大鼠肝细胞凋亡程度明显高于各用药组及正常对照组(P<0.01);各用药组与模型对照组比较,肝细胞的凋亡率明显下降(P<0.05,P<0.01),Bc l-2基因蛋白表达量增高(P<0.05),Bax基因蛋白表达量降低(P<0.05)。结论:复元愈肝胶囊通过促进Bc l-2表达和抑制Bax表达,阻断脂肪肝大鼠肝细胞凋亡,而达到治疗脂肪肝的作用。

宣痹汤对实验性IgA肾病大鼠肾脏病理变化及TGF-β_1表达的影响

目的:观察宣痹汤对实验性IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)大鼠肾脏病理变化及肾组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达的影响。方法:采用BSA加SEB诱导建立IgAN大鼠模型,随机分成正常对照组、模型组、雷公藤多甙组、宣痹汤低剂量组、宣痹汤中剂量组、宣痹汤高剂量组,分别给予相应处理12周,光镜观察各组大鼠肾组织病理变化,用免疫组化和RT-PCR方法分别检测肾组织TGF-β1蛋白和基因的表达。结果:与模型组相比,各用药组肾小球轻度增大,系膜细胞和系膜基质增生的程度较模型组均减轻,系膜细胞数较模型组减少;宣痹汤能够有效抑制TGF-β1在肾组织的基因和蛋白表达(P<0.05)。结论:宣痹汤能改善大鼠肾脏病理损伤,下调TGF-β1在肾脏的表达可能是宣痹汤治疗IgA肾病的作用机制之一。

红花注射液对低O2高CO2大鼠肝组织HIF-1 α与TGF-β1基因表达的影响

目的 观察慢性低O2高CO2大鼠肝组织低氧诱导因子1 α(HIF-1 α)与转化生长因子β1(TGF-β,)基因表达的变化及红花注射液对其的影响.方法 将30只SD大鼠随机分为A组(正常组)、B组(慢性低O2高CO2肺动脉高压模型组)和C组(红花注射液干预组),并观察各组肝组织病理学改变,同时分别采用免疫组化技术和RT-PCR技术检测HIF-1α、TGF-β,在肝内的表达、定位及其mRNA的含量.结果 (1)光镜下B组大鼠肝组织脂肪变性明显,而C组则不明显;(2)B组大鼠肝组织HIF-1 α、TGF-β1及其mRNA表达水平均高于A组,而C组大鼠上述指标均低于B组,差异均有统计学意义(P<0.0).结论 慢性低O2高CO2肺动脉高压状态下大鼠肝组织HIF-1 α、TGF-β,及其mRNA表达量增加,而红花注射液可下调其肝组织HIF-1 α及TGF-β,基因的表达.