脂肪酸酰胺水解酶抑制剂抑制活性的神经网络预测模型

为研究脂肪酸酰胺水解酶(Fatty acid amide hydrolase,FAAH)抑制剂抑制活性(p Ki)定量构效关系(Quantitative structure-activity relationship,QSAR),计算了72种FAAH抑制剂的两类结构参数,一类是拓扑指数,另一类是量化参数.利用最佳变量子集回归的方法,建立了7个参数(e2,m3 2,m3,lg P,SAA,m59,e14)的QSAR模型,该模型经验证具有良好的稳健性和预测能力,以此7个参数为人工神经网络的输入层,设定7∶5∶1的网络结构,所建BP模型的相关系数为0.994.结果表明,拓扑指数联合量化参数能全面表征FAAH抑制剂的分子结构特征,其中e2,m3 2,m3,lg P,SAA,m59,e14与p Ki呈现良好的非线性关系,BP神经网络的预测结果优于多元线性回归方法所得的结果.

脂肪酸酰胺水解酶抑制剂URB597对人肝癌细胞MHCC97H生长和侵袭的抑制作用及机制研究

目的：观察脂肪酸酰胺水解酶抑制剂URB597对人肝癌高转移细胞MHCC97H细胞生长和侵袭性的抑制作用。方法：不同浓度URB597（1、5、10μmol/L）作用于MHCC97H细胞后不同时间,应用MTT法及流式细胞仪检测该种细胞生长活力及凋亡细胞数目的改变;应用Transwell实验检测该种细胞的运动能力及侵袭能力;应用蛋白质印迹法检测该种细胞内磷酸化Akt（p-Akt）和Akt表达量的变化。结果：上述3种浓度的URB597作用于该种细胞3-7d后,细胞活力明显降低,呈时间及剂量依赖性;10μmol/L URB597作用3-7d可显著增加凋亡细胞数目。URB597作用于细胞48h后,与对照组比较,5、10μmol/L URB597可显著抑制MHCC97H细胞侵袭能力（P〈0.01,P〈0.001）。3种浓度URB597作用于细胞24h后,5、10μmol/L URB597可显著下调细胞内p-Akt水平（P〈0.05,P〈0.01）。结论：URB597对体外生长的人肝癌细胞MHCC97H的生长和侵袭有明显抑制作用,该作用可能与其抑制磷酯酰肌醇-3激酶（PI3K）/Akt信号通路有关。

脂肪酸酰胺水解酶抑制剂URB597诱导人肝癌细胞MHCC97H凋亡的作用及其机制研究

目的:观察脂肪酸酰胺水解酶(fatty acid amide hydrolase,FAAH)抑制剂URB597诱导人肝癌高转移细胞MHCC97H凋亡的作用,并探讨其机制。方法:给予不同浓度(1、5、10μmol/L)URB597与MHCC97H孵育,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。采用蛋白质印迹技术检测凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)在细胞核中的水平,及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达水平。采用caspase 3试剂盒检测caspase 3的活性变化。结果:(1)不同浓度(1、5、10μmol/L)URB597作用细胞1、4、7d后,凋亡细胞数目明显增加,呈时间-剂量依赖性;(2)不同浓度URB597作用96h后细胞内caspase3活性明显升高,且细胞核中AIF水平显著增加;(3)10μmol/L URB597作用细胞96h后,与对照组相比,Bcl-2水平明显下调,Bax水平明显上调,Bcl-2/Bax比值显著下降。PI3K抑制剂LY294002亦可显著降低Bcl-2/Bax比值,但与10μmol/L URB597作用相比,对Bcl-2/Bax比值的影响程度较低。结论:URB597可通过促进人肝癌细胞凋亡抑制其增殖,该作用与其下调Bcl-2/Bax比值,影响线粒体通透性,诱导caspase依赖和非caspase依赖的细胞凋亡有关,且部分依赖于PI3K/Akt通路。

新型脂肪酰胺水解酶抑制剂的设计、合成和活性评价

目的设计合成新型的脂肪酰胺水解酶(FAAH)抑制剂,并对其活性进行评价。方法通过已有FAAH酶抑制剂的结构和活性构建药效团模型,对部分ZINC数据库粗筛;通过与FAAH酶分子对接,对粗筛所获得的小分子化合物的活性进行打分评价,确定拟合成目标化合物的母核结构(2-氧代苯并吡喃-7-酯);采用酰化、缩合反应,合成系列目标化合物;通过体外酶抑制活性实验检测其活性。结果化合物(±)-2-(2-苯氧基乙酰基氨基)-丙酸-2-氧代苯并吡喃-7-酯(2b)的IC50值为95.24μmol·L-1,(±)-1-(2-苯氧基-乙酰基)-吡咯烷-2-羧酸-2-氧代苯并吡喃-7-酯(2g)的IC50值为17.34μmol·L-1,具有较好的抑制FAAH酶活性的作用。结论活性化合物的结构与目前报道的脂肪酰胺水解酶抑制剂结构差异较大,有望成为新类型先导化合物。

缺失Kunitz胰蛋白酶抑制剂和脂肪氧化酶2的大豆新品种中黄31的选育

大豆新品种中黄31是中国农业科学院作物科学研究所利用缺失Kunitz胰蛋白酶抑制剂的高产、优质、抗花叶病毒病（SMV）的高代材料ti15176作母本。美国引进优良品种Century近等基因系、脂肪氧化酶缺失的优质材料Century-2．3作父本进行有性杂交，采用未变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Native—PAGE）技术及等电聚焦聚丙烯酰胺凝胶电泳（IEF—PAGE）技术，对杂种后代胰蛋白酶抑制剂（Ti）、脂肪氧化酶（Lox）进行缺失检测及多年辅助选择育成。

N-苯基取代的酰胺类SAHase抑制剂的合成及生物活性研究

目的设计合成一系列新型N-苯基取代的酰胺衍生物,测定其体外对S-腺苷同型半胱氨酸水解酶（SAHase）的抑制活性。方法以不同取代苯胺为起始原料,经过N-烷基化、水解、脱水环合,再分别与N-甲基异吲哚啉-2-胺或者N-甲基茚满-2-胺,以及各种胺的衍生物进行两次酰胺化反应得到目标化合物。采用荧光法考察目标化合物对SAHase的抑制活性,并探讨其初步构效关系。结果与结论共合成了25个未见文献报道的新化合物,其结构经^1H-NMR及MS谱确证。活性测试结果表明,其中,4个化合物（I1、I11、I12和I18）与阳性对照物3-脱氮腺苷的活性相当,具有显著抑制SAHase的活性。

可溶性环氧化物水解酶与疾病的相关性研究进展

细胞色素P450酶(CYP450)作用于长链多不饱和脂肪酸,通过环氧化双键形成环氧脂肪酸(EpFA)。经研究EpFA在扩张血管和调节炎症等方面发挥重要的生理作用。哺乳动物中的可溶性环氧化物水解酶(sEH)是α/β水解酶家族的一员,对EpFA具有高度选择性,能快速水解EpFA,从而增加罹患心血管疾病的风险性。在多种动物模型中应用sEH抑制剂或sEH基因敲除,证实了sEH在高血压、心肌肥厚等疾病中发挥重要的作用。sEH已被作为疾病治疗的新方法而进行研究,就sEH与疾病的相关性研究进展作一综述。

作用于酶的含哌嗪化合物研究进展

哌嗪环是药物结构修饰中常用的一类重要氮杂环,在以DNA拓扑异构酶、羊毛甾醇14α-去甲基化酶、(1,3)-β-D-葡聚糖合成酶、11β-羟基固醇脱氢酶1、葡萄糖激酶、β-分泌酶和脂肪酰胺水解酶等为靶点的化合物中引入哌嗪环,不仅可以增强药物疗效,改善药物的药代动力学性质,而且易被其他官能团修饰,构成多药理靶点的杂合体,呈现出广泛的生物活性,可用于治疗细菌感染、真菌感染、2型糖尿病、阿尔茨海默病以及疼痛等,具有很大的开发价值。本文综述了作用于酶的含哌嗪化合物在抗菌、抗真菌、抗糖尿病、治疗阿尔茨海默病与镇痛等方面的最新进展及其构效关系。